特异性血清中白介素1β放射免疫分析的建立及初步应用

人工重组的白细胞介素１β（ＩＬ－１β）多次免疫兔和豚鼠,获取高效价的兔抗ＩＬ－１β抗体。用氯氨Ｔ法制备１２５Ｉ标记ＩＬ１β,经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２５纯化。该法测定范围０．０６-４ｎｇ／ｍ ｌ,批内和批间误差分别小于５％ 和１０％ 。正常人血清含量为０．２４±０．０８ｎｇ／ｍ ｌ（ｎ＝１３８）。人粒细胞系ＨＬ６０（１０６）细胞体外培养２４ 小时,不能检出上清液中ＩＬ－１β,钙离子载体Ａ２３１８７和磷脂酶Ａ２ 抑制Ｐ－ＢＰＢ也不能显著提高细胞释放ＩＬ－１β。另外,肝癌甲胎蛋白阳性患者血清中ＩＬ－１β水平同正常人没有显著差异。但是,雄性老龄大鼠血清ＩＬ－１β水平明显高于雌性老龄大鼠（Ｐ＜ ０．０１） 。     

白细胞介素对大鼠离体垂体前叶细胞增殖的影响

本工作采用大鼠垂体前叶（ＡＰ）细胞原代培养方法,以３ＨＴｄＲ掺入率反映细胞增殖水平,研究了ＩＬ１和ＩＬ６对ＡＰ细胞增殖的影响。结果表明：（１）ＩＬ１（１－１００ｎｇ／ｍｌ）促进雄性大鼠和雌性大鼠ＡＰ细胞的增殖。（２）低浓度的ＩＬ６（０．１ｎｇ／ｍｌ）抑制雄性大鼠的ＡＰ细胞的增殖,而较高浓度的ＩＬ６（１－１０ｎｇ／ｍｌ）则表现为刺激作用。（３）ＩＬ６（０．１－１０ｎｇ／ｍｌ）促进雌性大鼠ＡＰ细胞的增殖。上述结果说明ＩＬ１和ＩＬ６除直接调控ＡＰ细胞的分泌外,也参与调节ＡＰ细胞增殖活动。     

血小板生长因子（PDGF—BB）刺激体外培养兔肺动脉平滑肌细？…

应用细胞培养、＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ掺入方法,观察血小板生长因子ＢＢ对体外培养兔肺动脉平滑肌细胞ＤＮＡ和蛋白质合成的影响。结果表明：（１）当ＰＤＧＦ－ＢＢ浓度为１０ｎｇ／ｍｌ时,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入值已较对照组显著提高（６２６２．５±４１２．９ｖｓ８３３．５±１２４．０,Ｐ〈０．０５）;当ＰＤＧＦ－ＢＢ浓度为２０ｎｇ／ｍｌ时,＾３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ掺入值亦较对照线显著增高（１０２１２     

白细胞介素—1β对新生大鼠胰岛素分泌的作用及其机制分析

本实验采用分离培养的新生大鼠胰岛,观察了白细胞介素１β（ＩＬ－１β）和Ｎ＾Ｇ－甲基－Ｌ－精氨酸（ＮＭＭＡ,ＮＯ合成酶的竞争性阻断剂）对胰岛素分泌及对胰岛中ｃＧＭＰ水平和亚硝酸盐浓度的影响。结果如下：（１）ＩＬ－１β（５、１０、２０Ｕ／ｍｌ）能抑制基础的和由葡萄糖（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）刺激的胰岛素分泌。ＩＬ－１β对葡萄糖刺激的胰岛素分泌的抑制作用呈明显的量效关系,抑制率分别为５３．４％,６０．５％和７     

白细胞介素—1β对胰岛素分泌的抑制及睾酮的反转作用

离体培养新生大鼠胰岛细胞ＩＬ－１β（５－２０Ｕ／ｍｌ）处理２０ｈ后,可使胰岛细胞在高糖（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）刺激下的胰岛素释放量明显降低。对ＩＬ－１β处理后的胰岛给予睾酮（１０＾－１０ｍｏｌ／Ｌ）,则能反转ＩＬ－１β的抑制效应,并且睾酮不仅增加胰岛素分泌,而且还可促进胰岛细胞内胰岛素含量的增加。     

白细胞介素－1β对新生大鼠胰岛素分泌的作用及其机制分析

本实验采用分离培养的新生大鼠胰岛，观察了白细胞介素１β（ＩＬ－１β）和Ｎ￣Ｇ－甲基－Ｌ－精氨酸（ＮＭＭＡ，ＮＯ合成酶的竞争性阻断剂）对胰岛素分泌及对胰岛中ｃＧＭＰ水平和亚硝酸盐浓度的影响。结果如下：（１）ＩＬ－１β（５、１０、２０Ｕ／ｍｌ）能抑制基础的和由葡萄糖（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）刺激的胰岛素分泌。ＩＬ－１β对葡萄糖刺激的胰岛素分泌的抑制作用呈明显的量效关系，抑制率分别为５３．％，６０．５％和７０．７％。（２）ＮＭＭＡ（０．５ｍｍｏｌ／Ｌ）能阻断ＩＬ－１β对葡萄糖刺激的胰岛素分泌的抑制作用。（３）ＩＬ－１β能增加胰岛内ｃＧＭＰ水平和亚硝酸盐浓度，而ＮＭＭＡ能阻断这一效应。以上结果表明，ＩＬ－１β能抑制新生大鼠胰岛β细胞的功能，这一作用可能是通过ＮＯ实现的。     

胆囊收缩素对IL－1β损伤的胰岛β细胞功能的保护作用及其机制分析

本实验在分离培养的新生大鼠胰岛上,观察了胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）对白细胞介素－１β（ＩＬ—１β）损伤的胰岛β细胞功能的影响。并就其机制进行初步分析。结果表明：（１）ＩＬ—１β（５,１０,２０Ｕ／ｍｌ）能抑制葡萄糖（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）刺激的胰岛素分泌,其抑制作用具有量效关系,抑制率分别为５３．４％,６０．５％和７０．７％。（２）ＣＣＫ－８对ＩＬ－１损伤的胰岛β细胞的功能具有保护作用。预防性地给予ＣＣＫ－８（１０￣（－１０）,１０￣（－９）,１０￣（－８）,１０￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ）能防止ＩＬ－１β对葡萄糖刺激的胰岛素分泌的抑制作用。治疗性地给予ＣＣＫ－８也能恢复胰岛对葡萄糖刺激的胰岛素分泌的能力。（３）ＣＣＫ　Ａ型受体阻断剂Ｌ３６４７１８（１０ｎｍｏｌ／Ｌ）能阻断ＣＣＫ－８的保护作用,表明这一作用可能是通过ＣＣＫ受体实现的。（４）ＩＬ－１β抑制胰岛素分泌的同时,能升高胰岛组织内ｃＧＭＰ水平,而ＣＣＫ－８能阻止ＩＬ－１引起的ｃＧＭＰ水平的升高。     

玉米赤霉烯酮单克隆抗体酶联免疫测定方法的建立及初步应用

用ＺＥＮ－ＢＳＡ人工抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠,经融合,筛选和克隆化得到可稳定可泌抗ＺＥＮ单克隆抗体的杂交瘤细胞株ＺＥＮ－１Ｃ６。ＺＥＮ－１Ｃ６属ＩｇＧ１,纯化腹水抗体效价为１０＾－５,与５种衍生物的交叉反应系数为０．１６～１．２０％,用ＺＥＮ－１Ｃ６建立了检测食品（玉米,小麦,大米）中玉米赤霉烯酮的ＣＩＥＩＡ法。该法检测纯毒素的线性范围为５～１０００ｎｇ／ｍｌ,最低检出浓度为０．１ｎｇ／ｍｌ。平均回     

血小板生长因子(PDGF-BB)刺激体外培养兔肺动脉平滑肌细胞DNA和蛋白质合成

应用细胞培养、３Ｈ－ＴｄＲ和３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ掺入方法,观察血小板生长因子ＢＢ（Ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒＢＢ）对体外培养兔肺动脉平滑肌细胞ＤＮＡ和蛋白质合成的影响。结果表明：（１）当ＰＤＧＦ－ＢＢ浓度为１０ｎｇ／ｍｌ时,３Ｈ－ＴｄＲ掺入值已较对照组显著增高（６２６２．５±４１２．９ｖｓ８３３．５±１２４．０,Ｐ＜０．０５）;当ＰＤＧＦ－ＢＢ浓度为２０ｎｇ／ｍｌ时,３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ掺入值亦较对照线显著增高（１０２１２．８±６３８．３ｖｓ７３４０．３±１１９７．９,Ｐ＜０．０５）。（２）ＰＤＧＦ－ＢＢ浓度在５－２５ｎｇ／ｍｌ范围内,３Ｈ－ＴｄＲ,３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ掺入值与剂量直线相关（ｒＤＮＡ＝０．９７,ｒｐｒｏｔ＝０．９０Ｐ＜０．０５）。说明ＰＤＧＦ－ＢＢ刺激体外培养兔肺动脉平滑肌细胞ＤＮＡ和蛋白质合成。     

钙调神经磷酸酶依赖的信号通路参与血管紧张素Ⅱ刺激的心肌细胞肥大

本研究观察了钙调神经磷酸酶依赖的信号通路在血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌细胞肥大中的作用。在ＡｎｇⅡ刺激的大鼠心肌细胞肥大模型上,应用环孢素Ａ（ＣｓＡ）阻断ＣａＮ通路,观察心肌细胞＾３Ｈ－亮氨酸掺入,ＣａＮ,ＭＡＰＫ及ＰＫＣ活性的变化。结果表明,ＡｎｇⅡ（１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ）刺激大鼠心肌细胞＾３Ｈ－亮氨酸掺入较对照组增高４６％（Ｐ〈０．０１）,ＣｓＡ（０．５－５μｇ／ｍｌ）可以浓度依赖性方式抑制Ａｎ     

热性发热兔血浆脂多糖（LPS）浓度与生理反应的变化

在干球温度４２℃、湿球温度３５℃、相对湿度６０％条件下,测定了２４只热暴露兔［分为肛温维持４３℃（Ⅰ）组和肛温持续上升（Ⅱ）组］的心率、平均动脉压、呼吸频率、肛温及血浆ＬＰＳ浓度等指标。结果显示：（１）Ⅰ、Ⅱ组当Ｔｒ升达４３℃,热暴露时间分别为１００ｍｉｎ、６０ｍｉｎ时,血浆ＬＰＳ浓度分别为０．１９５ｎｇ／ｍｌ、０．１８０ｎｇ／ｍｌ,与实验前比,Ｐ＜０．０５。两组临死前,热暴露时间分别为２２０ｍｉｎ、１２０ｍｉｎ（Ⅱ组Ｔｒ４４．１５℃）时,其血浆ＬＰＳ浓度分别为０．２８５ｎｇ／ｍｌ、０．２４９ｎｇ／ｍｌ,Ｐ＜０．０１;（２）Ｔｒ４３℃和临死前两阶段ＬＰＳ的上升速率,Ⅰ组分别为０．０００６６ｎｇ／ｍｉｎ和０．０００６７ｎｇ／ｍｉｎ,Ⅱ组分别为０．０００８３ｎｇ／ｍｉｎ和０．００１１３ｎｇ／ｍｉｎ;（３）动物受热过程,Ｔｒ升至４３℃时,ＨＲ和ＭＡＰ达峰值水平,而呼吸频率则开始下降。本文结果提示,ＬＰＳ在中暑的病理生理学过程中可能是一个值得重视的因素     

胆囊收缩素对IL—1β损伤的胰岛β细胞功能的保护作用及其…

本实验在分离培养的新生在鼠胰岛上,观察了胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）对白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）损伤的胰β细胞功能的影响。并就其机制进行初步分析,结果表明：（１）ＩＬ－１β（５,１０,２０Ｕ／ｍｌ）能抑制葡萄糖（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）刺激的胰岛素分泌其抑制作用具有量效关系,抑制率分别为５３．４％,６０．５％和７０．７％。（２）ＣＣＫ－８对ＩＬ－１损伤的胰岛β细胞的功能具有保护作用。预防性地给予ＣＣＫ－     

白细胞介素－1β对胰岛素分泌的抑制及睾酮的反转作用

离体培养新生大鼠胰岛细胞用ＩＬ－１β（５—２０Ｕ／ｍｌ）处理２０ｈ后，可使胰岛细胞在高糖（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）刺激下的胰岛素释放量明显降低。对ＩＬ－１β处理后的胰岛给予睾酮（１０－１０ｍｏｌ／Ｌ），则能反转ＩＬ－１β的抑制效应，并且睾酮不仅增加胰岛素分泌，而且还可促进胰岛细胞内胰岛素含量的增加。     

乙型肝炎疫苗中游离抗原对免疫效果的影响

将按《生物制品规程》制备除氢氧化铝吸附方式不同外,其余所有过程均一致的疫苗各１０批,在ＨＢｓＡｇ含量相同前提下,于５００公升大罐内吸附制备的疫苗中游离抗原含量比在１０公升瓶内吸附制备的疫苗高４倍,两者均数分别为３０４．１ｎｇ／ｍｌ和７３．１ｎｇ／ｍｌ,吸附率分别为９７．９５％和９９．５１％;用ＲＰＨＡ测定游离抗原滴度前者也比后者高２倍;动物免疫效价（ＥＤ５０）高４７％。在上述吸附率范围内,游离抗原含量与ＥＤ５０呈正相关（ｒ＝０．７１７９Ｐ＜０．００１）。     

Beagle狗肾细胞及用于制备乙脑活疫苗的研究

Ｂｅａｇｌｅ乳狗（５－１０日龄）肾块用热消化法制成细胞批放液氮保存,检定合格后做下列试验：（１）复苏培养长满单层后更换维持液,其细胞能维持４天以上,克服了常规消化培养细胞维持时间短（３６小时）的缺陷。（２）传代１４－２株病毒时,１代病毒的滴度即达６．０４－６．２４ＬｏｇＰＦＵ／ｍｌ,１代后的各代（至１１代）病毒滴度无明显提高。（３）该细胞接种１４－２株病毒时不产生明显的破坏性病变（ＣＰＥ）,在收毒前采取冻溶１次比冻溶前的病毒滴度提高０．２７－０．５ＬｏｇＰＦＵ／ｍｌ。以ＢＤＫ细胞传１代的１４－２株病毒作生产毒种,收毒前冻溶１次等工艺法制备五批疫苗,全面检定结果均符合《乙脑活疫苗规程》的质量标准。其中病毒滴度为６．０９－６．２４ＬｏｇＰＦＵ／ｍｌ;免疫效价（ＩＤ５０＝ｍｌ）为１．９－４．０×１０－５,与相同滴度的原毒株１４－２ＰＨＫ苗对照无明显差异（ｔ＝０．９６８Ｐ＞０．０５）,表明其免疫原性与原毒株相似。     

体外乳酸菌素促双歧杆菌生长实验初步观察

目的 在体外观察乳酸菌素是否有促双歧杆菌生长的作用。方法 将浓度为１００ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌ的乳酸菌素液按三角形对等距离分别滴种在接种了双歧杆菌（１０＾６ＣＦ／ｍｌ）的ＢＨＩ培养基上,然后置３５℃厌氧箱培养２ｄ后观察细菌生长情况。结果 不同浓度的乳酸菌素液促进双歧杆菌生长能力不同。浓度为１００ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌ的乳酸菌素液促双歧杆菌生长的阳性率（％）分别为：９６．７、５６．７、１．０。经统计学秩和检验方法将３种浓度乳酸菌素液促双歧杆菌生长作用进行两两比较得知：１００ｍｇ／ｍｌ与１０ｍｇ／ｍｌ,１００ｍｇ／ｍｌ与１ｍｇ／ｍｌ之间Ｐ〈０．０１,１０ｍｇ／ｍｌ与１ｍｇ／ｍｌ比较Ｐ〈０．０５。结论 乳酸菌素有促进益生菌－－双歧杆生长的作用,而且与其浓度高低有极密切关系,高浓度的     

人绒毛膜促性腺激素β—亚基在中国仓鼠卵巢细胞中…

本文以哺乳动物细胞表达载体ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ为运载体,构建了受控于ＳＶ４０早期启动子β－ｈＣＧ基因的表达载体,转染ＣＨＯ－ｈｆｒ＾－细胞后,挑选ＣＨＯ（ｄｈｆｒ＾＋）细胞,结果表明β－ｈＣＧ不仅在细胞中表达,不分泌到培养液中,通过氨甲喋（ＭＴＸ）加压后,表达量逐渐提高,０．１μｍｏｌ／ＬＭＴＸ条件下培养液中β－ｈＣＧ最高表达量可达到１．５μｇ／１０＾６细胞．２４小时。经亲和层析获得纯的重组β－ｈＣ     

肿瘤坏死因子－α（TNF－α）及白细胞介素1β（IL1－β）对胶质增生的影响及机理

本文利用小鼠大脑机械损伤模型及体外培养的胶质细胞,采用同位素渗入法观察了细胞介素及其抗体对胶质细胞增生的影响。结果表明：体外培养时ＴＮＦ－α在浓度为１０～２００ｕ／ｍｌ培养液时均能促进胶质细胞增生（Ｐ＜０．０５）,ＩＬ１－β在浓度为５～２００ｕ／ｍｌ培养液时能促进胶质细胞增生,ＴＮＦ－α＋ＩＬ１－β其促进胶质细胞增生作用更强烈,ＴＮＦ－α抗体能完全阻断ＴＮＦ－α的促增生作用,部分阻断ＴＮＦ－α＋ＩＬ１－β的促增生作用。在体实验时,ＩＬ１－β及ＴＮＦ－α的作用与离体时相似,ＩＬ１－β及ＴＮＦ－α亦能促进胶质细胞增生,二者共同作用时促细胞增生作用更强。以上结果提示,外源性ＴＮＦ－α及ＩＬ１－β能促进中枢神经损伤后胶质细胞增生且具有协同作用。     

刺激大鼠视上核后电针“足三里”对蓝斑灌流液中去甲肾上腺素含量的影响

运用行为测痛结合蓝斑（ＬＣ）灌流液去甲肾上腺素（ＮＥ）的高压液相（ＨＰＬＣ）测定；观察 大鼠痛阈（ＰＴ）与ＬＣ灌流液中去甲肾上腺素含量变化间的相互关系，结果表明：（ｌ）视上核 （ＳＯＮ）内注射 １０μｍＬ－谷氨酸（Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｃａｃｉｄ， Ｌ－Ｇｌｕ）后 ３０分钟，大鼠ＰＴ较注射前增加１３３． ２± ２１．４％，此时ＬＣ 灌流液中ＮＥ含量从注射前的４３７．３±２０．４ｎｇ／ｍｌ降到２２９．２±１１．９ｎｇ／ｍｌ，注射 后６０分钟ＰＴ仍比注射前高８３．９±１４．７％，而灌流液中ＮＥ的含量为３２８．６±２８．０ｎｇ／ｍｌ，与人工 脑脊液（ＡＣＳＦ）对照组相比有非常明显的差别（Ｐ＜０．０５～０．００１）。（２） ＳＯＮ注射Ｌ－Ｇｌｕ后，电 针足三里３０分钟（Ｌ－ＧＩＵ＋ＥＡ组）增加到注射前的１８８．２±２３．９％，同ＡＣＳＦ电针组（ＡＣＳＦ＋ ＥＡ）的 ９４．９±７．１％相比有明显差异（Ｐ＜０．０１）。此时ＬＣ灌流液中ＮＥ的含量虽较注射前都明显 降低、分别为１３７．６±７．５ｎｇ／ｍｌ和 １５１，１±１１．５ｎｇ／ｍｌ，但两者相比无明显差异。停针后３０分钟Ｌ－ Ｇｌｕ＋ＥＡ组的ＰＴ仍比注射前高１３３．８±２７．９％，明显高于     

白介素-2促进RC-4B/C垂体瘤细胞系增殖

采用细胞培养方法,以＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率反映细胞增殖水平,研究了白介素－２（ＩＬ－２）对大鼠源的ＲＣ－４Ｂ／Ｃ垂体瘤细胞系增殖的影响,并初步分析了ＩＬ－２的作用机制。结果表明：⑴ＩＬ－２（１０－１０００Ｕ／ｍｌ）剂量依赖性地显著提高ＲＣ－４８／Ｃ细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率。⑵特异性酪氨酸蛋白激酶（ＰＴＫ）抑制剂ｔｙｒｐｈｏｓｔｉｎ（１μｍｏｌ／Ｌ）可明显降低ＲＣ－４Ｂ／Ｃ细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率,并