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利用固定化黑曲霉单宁酶制备没食子酸的研究 总被引:10,自引:0,他引:10
用海藻酸钙载体包埋单宁酶,制备出转化五倍子单宁成没食子酸能力较好的固定化酶。研究了固定化条件和固定化单宁酶的部分性质,结果表明:最佳固定化条件为海藻酸钠90mg包埋单宁酶546u(3mL,182u/Ml),在1%~2%CaCl2中作硬化处理;固定化单宁酶的最适温度为45℃,在10~50℃范围内稳定;其最适Ph值为6.5,在Ph5~7之间基本稳定;在此基础上,进行了没食子酸实验室克量级酶法制备实验,3次实验没食子酸产品的平均产率达到61%。和目前所用工业生产没食子酸的硫酸水解法相当,具有潜在的工业开发价值。 相似文献
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黑曲霉固态发酵生产单宁酶的条件优化 总被引:1,自引:0,他引:1
研究采用响应面法优化黑曲霉固态发酵生产单宁酶的培养条件。应用Plackett—Burman试验筛选出重要影响因子:五倍子粉含量、(NH4)2SO4浓度以及接种孢子量,最陡爬坡试验逼近最大响应区域。应用Box.Behnken响应面试验对重要影响因子进一步优化。得到最佳培养条件:每250mL三角瓶中装入1.0g五倍子粉、4.4g稻壳和0.5g麸皮、液固比(mL/g)2:1且营养盐溶液组成为(NH4)2s0421g/L、MgSO4·7H2O1g/L、NaCl1g/L,培养基pH自然,接种5.7×10^7个孢子后在30℃温度下培养4d。在此条件下,单宁酶产量从40U/g提高到114U/g,3次重复验证性试验平均值为115U/g,验证了模型的可靠性。 相似文献
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单宁酶基因在黑曲霉ST31中的克隆与表达 总被引:5,自引:0,他引:5
利用PCR扩增得到米曲霉(Aspergillusoryzae)单宁酶(tannase)基因的编码序列,经DNA测序证实单宁酶基因已成功克隆,然后将其连接到黑曲霉的表达载体ANED2-SP2上构建单宁酶基因表达载体。将构建好的单宁酶基因表达载体通过原生质转化法导入黑曲霉菌株ST31中进行表达研究。结果表明重组菌株的单宁酶活力最高为104.02U/ml发酵液,比原始出发菌株米曲霉提高2~3倍。研究构建了黑曲霉的高效转化体系,提高了黑曲霉表达系统的应用水平,为其它新酶的研究提供有价值的参考。 相似文献
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黑曲霉单宁酶高活性菌株的诱变选育* 总被引:15,自引:0,他引:15
以黑曲霉(Aspergillus nhiger)No.13为出发菌株,经紫外线诱变处理,获得一株制备原生质体的起始菌,该菌株单宁酶活性比No.13提高55%,并对其制备原生质体的条件进行了研究,在优化方案基础上,紫外诱变原生质体,诱变株经筛选,最后得到一株具有稳定遗传性的单宁酶高活性菌株,在摇瓶培养基中进行生物转化实验,连续传代10次,结果显示发酵液中没食子酸浓度始 维持在22.8-23.9mg/ 相似文献
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利用黑曲霉单宁酶酶法制取没食子酸的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
利用已有的 10株高单宁酶活性的菌株为起始菌 ,经活化分离选择 ,借助Ⅱ级发酵培养程序、生物转化、结合TLC分析进行筛选实验。最后选出具有高单宁酶活性的 1号和 5 0号菌株 ,开展了没食子酸 (GA)克量级生物转化法制备实验 ,结果表明 ,本酶法工艺是可行的 ,在发酵液中GA的浓度分别达到2 0 .6mg/ml和 2 1 3mg/ml,产品产率 (以从五倍子提取的单宁酸计 )达到 41 2 %和 42 6 % ,具有潜在的工业开发价值 相似文献
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脂肪酶产生菌的筛选及一株黑曲霉产脂肪酶最适条件研究 总被引:10,自引:0,他引:10
通过固体平板筛选,从520株真菌中分离得到194株产脂肪酶菌。再选择其中透明圈较大的43株菌进行液体复筛,得到产酶活力最高的一株菌为黑曲霉L_1。最后,确定了此菌的最适产酶条件为:橄榄油作碳源,酵母膏作氮源,pH5.8,28℃培养4天。 相似文献
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单宁酶的固定化及其在酯型儿茶素水解反应中的应用 总被引:18,自引:0,他引:18
采用自制的壳聚糖为载体对单宁酶(TA)固定化,TA与壳聚糖配比1:2.5,30℃固定2h,活力回收达23.6% ̄33.1%;偶联效率为84.9% ̄88.0%。固定化单宁酶(ITA)的表观Km值(以没食子酸丙酯为底物)为22.2×10^-6mol/L,TA的Km值(以没食子酸丙酯为底物)为10×10^-6mol/L,TA和ITA的最适反应温度分别为40℃和50℃;60℃处理15min,残存活性分别为 相似文献
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茶叶中富含单宁化合物。从分离自黑茶的真菌菌株中,筛选高产单宁酶的菌株;进而分离纯化单宁酶,分析单宁酶对茶汤的转溶效果。从不同产地的3个黑茶样品中,共分离获得44个真菌分离物;经初步鉴定,这些真菌分离物以曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)和散囊菌属(Eurotium)的真菌居多。以单宁酸为底物的鉴别培养基初筛表明,其中26个真菌分离物在鉴别平板上产生透明圈,显示单宁水解酶活性;通过固体发酵复筛,筛选到1株产单宁酶活性较高的菌株,初步鉴定为青霉属(Penicillium)菌株,命名为青霉MP-24菌株。青霉MP-24可以以茶叶、茶梗和麸皮等农副产品作为原料固体发酵产生单宁酶。以麸皮为原料的发酵产物经过硫酸铵分级沉淀、DEAE阴离子交换层析和葡聚糖G-150凝胶层析等分离纯化步骤,得到分子量为70 kDa的单一蛋白质条带,单宁酶活力达到603.68 U/mg。纯化获得的单宁酶对茶汤有良好的转溶效果。研究结果表明,在黑茶相关微生物中含有丰富的产单宁酶菌株,是工业酶制剂的重要资源。 相似文献
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实验测定了海南2个主要余甘子品种的Vc、多酚、多糖、SOD等功能性成分,以及使用DPPH法进行了自由基清除能力测定。通过正交实验分析得出余甘子果实内多酚物质的最佳提取溶剂和最佳提取工艺。 相似文献
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葡萄糖苷转移酶生产菌种的筛选 总被引:8,自引:0,他引:8
用甲基葡萄糖及麦芽糖为底物,对50多株黑曲霉α-葡萄糖苷酶活性作了测定,结果表明各菌株对这二类底物之水解能力并不一致,甲基葡萄糖水解活性高的,其麦芽糖水解能力未必也高。通过TLC测定这些菌株生成异麦芽低聚糖之能力,结果表明甲基葡萄糖和麦芽糖为底物的水解能力并不能正常反映转苷反应的能力。酶活力高的,生成异麦芽低聚糖的能力未必比活性低的为强,造成上述结果的原因,或许是胞外酶中存在着仅有水解作用的α-葡 相似文献
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本文从植物曼陀(Datura arborea)中分离得到77株内生真菌。对它们分别进行菌株发酵,发酵产物经乙醇浸提,采用TLC和生物碱显色方法,观察到菌株Ym311977、Ym312023呈生物碱阳性反应。结合HPLC分析结果,表明该生物碱并非曼陀罗植物中的主要生物碱成份。经鉴定,Ym311977属镰孢菌属(Fusarium sp.),Ym312023属毛壳菌属(Chaetomium sp.)。 相似文献