钉螺体内日本血吸虫尾蚴发育期的形态及其扫描电镜观察

本文通过活体标本、连续切片、全封标本及扫描电镜观察了大陆品系日本血吸虫Schistosomajaponicum子胞蚴体内尾蚴发育期的形态。日本血吸虫尾蚴发育分为五期,即胚细胞期、胚球期、尾蚴雏体期、成熟前期和成熟期。与曼氏血吸虫尾蚴发育进行比较,日本血吸虫尾蚴在胚球期无极化现象;尾蚴雏体期的尾芽形态多非圆球形,尾叉形成较早。钻腺及焰细胞均在此期发生,较曼氏血吸虫尾蚴早。除了上述头器、头腺、钻腺、焰细胞及消化器官进一步发育外,体内散在胚细胞结集为生殖始基,体表感觉乳突分化与体尾肌细胞的发育,尾蚴从成熟前期过渡到成熟期。 电镜首次原位观察尾蚴发育在子胞蚴育腔内的自然状态。尽管偶尔可见到胞蚴体壁与胚元之间某些结构联系,但大部份的胚元各自独立混杂在育腔之中。此外尚注意到尾蚴体棘发生在成熟前期,但其密度较成熟尾蚴小,而其大小却比成熟尾蚴的大。尾蚴头器上感觉乳突和围褶可能先于内部腺体细胞的分化。     

日本血吸虫尾蚴钻穿宿主皮肤的方式

本文报道了日本血吸虫尾蚴钻穿宿主皮肤的全过程和早期童虫在8种动物皮肤中动态分布的结果。阐明了血吸虫尾蚴钻穿宿主皮肤是依靠其体内头腺及/或钻腺分泌物的酶促作用、头器伸缩的探查作用及全身肌肉运动的机械作用而协同完成的。指出了尾蚴入侵皮肤界面和童虫在皮肤内移行常以倾斜角度前进,并非完全呈垂直方向或沿毛囊皮脂腺的通道。观察到童虫钻破皮肤血管壁进入血管腔的情景,这有力地提供了血吸虫童虫从皮肤进入血液循环系统的直接证据。     

日本血吸虫尾蚴头腺及钻腺的超微结构

通过电镜观察发现：日本血吸虫尾蚴的头腺为多导管的单细胞腺,由腺体部和若干突起状的短导管构成,其分泌小体呈圆形或卵圆形,平均大小为 ０． ２９ × ０． ２３μｍ,具有同心的环层膜状结构。前钻腺含有 Ａ、Ｂ两型分泌小体。 Ａ型分泌小体近似圆形,平均大小为 ０． ４６× ０． ３２μｍ,基质为电子致密的均 匀结构;Ｂ型分泌小体数量众多,略呈不规则的圆形,平均大小为１．０２×０．８２μｍ,基质为中等电子致 密并含十余个小圆形的电子透亮区。后钻腺含有椭圆形或长条状的分泌小体,平均大小为０．９７×０．６２μｍ,基质呈同质性,或伴有电子密度较深的圆形聚集物,或基质呈泡沫状。每根钻腺导管 的胞质外周具有许多沿导管长轴纵行的微管结构,在导管周围有纤维性网状构造包绕,起着对细长导管的支架作用。在导管束外周又有大量肌纤维包统而形成的鞘状结构,它对管内分泌小体的排出可能具有选择性控制作用。     

日本血吸虫尾蚴发育的超微结构观察：I.体被局部剖析

本文根据日本血吸虫尾蚴发育分期,除胚细胞（Ｓ１）已有报道（胡敏等,１９９１）外,对胚球期（Ｓ２）、尾蚴雏体期（Ｓ３）、成熟前期（Ｓ４）及成熟期（Ｓ５）在透射电镜对体被及其要素进行剖析。结果原（始）体被最早出现于Ｓ２,表性分布。随后（Ｓ３－Ｓ５）消失而为真正体被所取代。体被皱褶亦随高隆。基膜及体棘为名期基本结构。感觉乳突于Ｓ３、Ｓ４出现。到了Ｓ５渐趋复杂而完善并对其结构作了较精细的描述。糖膜直至成熟     

日本血吸虫尾蚴发育的超微结构观察：Ⅲ.肌肉

在超微结构水平对日本血吸虫发育期尾蚴的主要肌肉包括体壁、头器、腹吸盘和尾部等进行观察,首次证明发育期体壁肌层组织最早见于Ｓ２,在原始基膜（ＰＢＬ）下方有１￣２层类似纤丝胞质块,为早期肌细胞管状胞质延伸至原始基膜下的结构,Ｓ３这种现象更为明显;典型体壁外环肌与内纵肌在Ｓ４与Ｓ５已形成。腹吸盘早期原始肌细胞的分化见于Ｓ３,至Ｓ５强大的腹吸盘肌纤维已形成。文章首次提出内间质层在Ｓ３、Ｓ４的体部存在及Ｓ５     

日本血吸虫尾蚴发育的超微结构观察：Ⅱ.腺体

在透射电镜下观察不同发育期日本血吸虫尾蚴的腺体。结果：胚球期（Ｓ２）主要出现体细胞分裂与分化,首次证明分泌细胞及其小体在Ｓ２出现,雏体期（Ｓ３）见到前钻腺细胞体与钻腺管束及分泌小体。成熟前期（Ｓ４）钻腺分泌小体基质分Ａ／Ｂ为主两型,分别演变为成熟期（Ｓ）５的后／前钻腺分泌小体。头腺分泌小体亦在Ｓ４出现。从前钻腺体排至头器远端腺管的分泌小体,显眼透明球消失成为致密同质性小体,已为大家共识。而在后钻腺     

日本血吸虫尾蚴发育的超微结构观察:Ⅰ.体被局部剖析

本文根据日本血吸虫尾蚴发育分期,除胚细胞（ＳＩ）已有报道（胡敏等,１９９１）外,对胚球期（Ｓ２）、尾蚴雏体期（Ｓ３）、成熟前期（Ｓ４）及成熟期（Ｓ５）在透射电镜对体被及其要素（ｔｅｇｕｍｅｎｔａｌ ｅｌｅｍｅｎｔｓ）进行剖析。结果原（始）体被最早出现于Ｓ２,表性分布。随后（Ｓ３—Ｓ５）消失而为真正体被所取代。体被皱褶亦随高隆。基膜及体棘为各期基本结构。感觉乳突于Ｓ３、Ｓ４出现。到了Ｓ５渐趋复杂而完善并对其结构作了较精细的描述。糖膜直至成熟期（Ｓ５）才出现,为尾期成熟的标志。近期对糖膜组份有较深入的研究并对其生理功能进行讨论。     

日本血吸虫尾蚴人工方法转变的童虫超微结构的观察

本文报道日本血吸虫尾蚴经注射器推压和血清孵育两种人工方法转变的童虫与载体皮肤型童虫的透射及扫描电镜的观察结果。描述了三种童虫在转变后3小时至12小时其糖膜、外质膜、体被内包含体及腺体的超微结构的变化。     

日本血吸虫毛蚴对钉螺的钻穿及在螺体内的分布和移行

采自安徽省池的钉螺每粒感染５０只湖南株日本血吸虫毛后的组织学观察说明：毛蚴钻穿钉螺有从螺鳃部、头足总后有皮以及实质组织（外套膜、触角和阴茎）等三方面途径,其中以前二者尤为重要;毛蚴进入螺鳃丝后直接进入血液循环系统,从头足表皮进入的毛蚴,除了少数在钻穿部位附近滞留外,多数继续向头足部深层的肌肉和窦状组织间隙移行,以前头足窦、直肠和消化道外的组织间隙以及肾脏为主要的移行部位;从外套膜、触角、阴茎等部位     

异地钉螺杂交的后代对安徽的日本血吸虫的感受性

以安徽贵池县的日本血吸虫感染四川、福建、湖北、江西、江苏等省的钉螺在实验室繁殖的后代相互杂交产生的子_1、子_2和子_3代。结果表明,易被安徽的血吸虫感染的湖北、江西及江苏等省的钉螺杂交产生的子代也易被安徽的血吸虫感染。不易感或感受性弱的与易感染安徽的血吸虫的钉螺相互杂交产生的子代,有的仍不易感;有的可被感染,感染率有显著地提高,表明我国不同地区钉螺的感染率有地域差异。     

日本血吸虫DNA疫苗的优化策略

血吸虫病严重危害人类及家畜健康,发展疫苗是防治血吸虫感染的有效措施。传统疫苗的发展因成本高、免疫原性低及安全隐患而受到限制。发展DNA疫苗成为近年的研究重点。为提高DNA疫苗的免疫保护力,候选抗原的筛选、CpG序列的优化、基因佐剂的选用、多价疫苗的构建等被认为是日本血吸虫DNA疫苗的优化策略。     

猪肝脏日本血吸虫卵肉芽肿形态计量研究

本文采用生物体视学技术对实验性湖北白猪肝脏日本血吸虫卵肉芽肿及其各组分进行了形态计量研究。结果表明：以猪为实验动物模型和以生物体视学方法为实验技术手段进行日本血吸虫卵肉芽肿形态计量研究具有测量方便、运算简捷、可获得大量三维结构信息等特点。同时,也为血吸虫感染的病理学研究及抗血吸虫药物疗效考核提供了新的实验动物模型和评价手段     

黄牛与水牛感染日本血吸虫的比较研究

本文报告了15头黄牛和14头水牛感染日本血吸虫后的虫卵开放前期、虫体回收率、成虫体长及性腺发育状况、肝组织中虫卵肉芽肿大小和虫卵周围何博礼现象等比较结果,表明黄牛较水牛对日本血吸虫更为易感。根据耕牛在日本血吸虫病中的传播特点和流行病学意义以及人兽共患寄生虫病的概念,建议将这类动物终末宿主称为交替宿主(alternative host)以取代过去沿用和内涵狭溢的“贮存宿主或保虫宿主(reservoir host)”的名称。     

中国大陆五个地区日本血吸虫人工感染恒河猴的研究

本文报告了具有分布区代表性的中国大陆5地日本血吸虫人工感染恒河猴的实验结果。在相同宿主、相同感染度和相同感染期的条件下,恒河猴感染云南、广西两地日本血吸虫后的平均虫卵开放前期、两性虫体体长及性腺发育以及肝组织中单个虫卵引起增生期肉芽肿的平均体积与感染安徽、湖北、四川三地虫体的有所不同。这表明恒河猴宿主机体对感染前两地虫体的应答情况与对感染后三地的有异,并提示中国大陆境内日本血吸虫可能存在不同的品系。     

免疫血清及补体对体外培养日本血吸虫童虫的杀伤作用

本文报道抗体、补体、补体加抗体对机械转变日本血吸虫童虫的杀伤作用,并比较其杀伤效率。用光学显微镜及扫描电镜观察形态变化。结果显示杀伤率为补体加抗体>单纯补体>单纯抗体。除去补体血清中的B因子,杀伤率明显下降,说明补体C_3旁路途径参与杀伤童虫的作用。童虫孵育于含有补体及抗体的培养基中72h后,虫体头背部体棘零乱或消失,有些体被破损及脱皮。     

日本血吸虫卵黄培养细胞超微结构动态的研究

从超微结构水平研究日本血吸虫卵黄细胞培养的动态。在体外培养过程中,卵黄细胞对外界环境的改变比日本血吸虫的其它体细胞更加敏感。随着培养时间的延长,卵黄细胞发生不同程度的变性,成熟卵黄细胞比未成熟卵黄细胞发生变性。变性主要表现在核和胞质的电子密度降低;卵黄球相互融合,或卵黄球与膜之间的空隙逐步增大,最终卵黄球从中释放出来,变成裸露体;脂滴数目增多,体积增大;粗面内质网扩大和囊泡变,其上的核糖体脱颗粒等     

日本血吸虫中国大陆株肌动蛋白编码基因的克隆和 …

根据曼氏血吸虫肌动蛋白基因ＳｍＡｃｔ２设计一对引物,以日本血吸虫中国大陆株成虫ｍＲＮＡ为模板,用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增出一大小为１１３１ｂｐ的基因片段。测序后分析序列推断该片段为编码肌动蛋白基因的完整阅读框基因,与ＳｍＡｃｔ２碱基同源性为９２％。奖其克隆到表达载体ｐＥＴ２８ａ（＋）中,在大肠杆菌ＢＬ２１中获得了较高量的表达,融合表达产物分子量约为４７ｋＤ。利用日本血吸虫成虫粗抗原免疫大白兔所得抗血清对     

日本血吸虫新基因Sj-MA的克隆、表达及保护性免疫

为发现新基因 ,寻找日本血吸虫病新疫苗候选分子 ,采用Sj雄虫免疫血清筛选Sj成虫cDNA文库。经测序发现新基因Sj MA含有一个完整的阅读框 ,推测其由 2 4 9个氨基酸组成 ,编码分子量为 2 8.8kD的可溶性蛋白质 ,并带有多个能被磷酸化激活的位点 ,提示其可能为一重要的信息传递分子。将Sj MA的cDNA亚克隆至原核表达载体pGEX 5X ,获得Sj MA原核表达的重组体rSj MA/GST ,并在E .coli中高效表达为谷胱甘肽S 转移酶 (GST)融合蛋白 ,分子量为 5 4 .8kD ,Western印迹显示融合蛋白质能被抗雄虫和抗GST血清识别。融合蛋白质免疫小鼠可诱导 34.2 9%的减虫率 ,与对照组有显著性差异 (P <0 .0 0 1 )。表明新基因Sj MA表达的蛋白质能诱导小鼠的抗日本血吸虫的保护性免疫 ,提示其作为日本血吸虫疫苗候选分子的潜在价值