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相似文献
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1.
应用免疫组织化学SP方法,检测了肌源性调节蛋白MyoDl和肌球蛋白m yosin 在38例横纹肌肉瘤(RMS) 中的表达。结果显示MyoDl阳性表达主要定位于RMS瘤细胞的胞核中; m yosin 的阳性表达定位于RMS瘤细胞的胞浆中, 二者的表达阳性率分别为65.8% 和55.3% 。在RMS不同病理分型中MyoDl和m yosin 的阳性表达均无显著性差异。但RMS分化程度低,MyoDl阳性表达增强,m yosin 阳性表达下降。Myo-Dl在Ⅲ级(低分化) 中的表达阳性率显著高于Ⅰ级(高分化)、Ⅱ级(中等分化) 中的表达阳性率(P< 0.05,P< 0.05)。m yosin 在Ⅰ级中的阳性率显著高Ⅲ级中的表达阳性率(P< 0.05)。本文认为, MyoDl表达增高、m yosin 表达下降,不仅是RMS生物学行为的重要特征,也为改进低分化RMS的病理诊断和RMS早期诊断提供了有益的思路。  相似文献   

2.
沙门菌CWDMs氨基酸代谢的检测   总被引:3,自引:0,他引:3  
易旭  王和 《中国微生态学杂志》2000,12(3):142-143,145
采用氨基氨利用生长试验和谷丙转氨酶(GPT)、谷草转酶(GOT)、乳酸脱氨酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、α-闳丁酸脱氢酶(α-HBD)、γ-谷志肽酶(γ-GT),酸性磷酸酶(ACP)定性与定量分析法,检测伤CWDMs变异的特点及其机制,探讨CWDMs变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。结果表明,沙门菌CWDMs变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。结果表明,沙门菌CWDMs在仅含蛋氨酸或脯氨  相似文献   

3.
芦荟凝集素的分离、纯化和部分性质的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
新鲜芦荟叶(Aloe vera L.var.chinensis(Haw.)Berger)于室温用低浓度NaCl溶液提取。离心和透析后,经N-乙酰氨基葡萄糖0Sepharose 4B亲和层析,分离纯化出芦荟凝集素(ACL)。用SephadexG-100测表观分子量为35KD,SDS-PAGE出现两条色带;染色 ;宽带和较浅的罕带。亚基分子量分别为15KD和20KD。能专一性凝集兔血细胞和人血红细胞  相似文献   

4.
应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对比研究了纯系615鼠和L615可移植性淋巴细胞型白血病鼠胸腺和脾脏淋巴细胞的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶同工酶(ECl.1.1.49,D-葡萄糖-6-磷酸:NADP氧化还原酶,G6PD)和乳酸脱氢酶同工酶(ECl.1.1.27,L-乳酸:NAD氧化还原酶,LDH)。并应用定量细胞化学法对LDH和6PD全酶活性进行了测定。结果:在L615白血病鼠胸腺淋巴细胞中(白血病细胞占40%),G6PD同工酶谱显示异常,全酶活性明显增高、LDH同工酶谱及全酶活性未发生明显变化。L615白血病鼠脾脏淋巴细胞中(白血病细胞占84%),G6PD和LDH同工酶谱均显示异常,同时全酶活性也明显增强。提示:G6PD对白血病细胞的恶性增殖和浸润似乎更为敏感。  相似文献   

5.
动脉平滑肌细胞(SMC)是动脉粥样硬化(AS)斑块中的主要细胞,它的增殖在AS形成过程中极其重要。脂蛋白和氧化修饰型脂蛋白对SMC增殖的影响以及SMC增殖与原癌基因异常表达的关系是当前AS发病机制研究的热点之一。我们在建立人主动脉SMC体外培养方法的基础上,观察了LDL,VLDL及HDL和相应的氧化修饰型脂蛋白对培养人SMCfos,myc,erb-B原癌基因转录表达的影响。结果表明:①HDL对SMCfos,myc基因表达无影响;②LDL和VLDL有使这些基因表达增加的趋势,但与对照比较差异不显著(P>0.05);③OX-VLDL,OX-VLDL和OX-HDL有使SMCfos,myc基因表达显著增强的作用(P<0.01),且其作用较相应的天然脂蛋白大(P<0.01).上述结果说明:LDL,VLDL,OX-LDL,OX-VLDL和0X-HDL的致AS作用可能与刺激SMCfos和myc癌基因表达增加有关。  相似文献   

6.
动脉平滑肌细胞(SMC)的增殖在动脉粥样硬化(AS)的形成过程中极其重要。我们在建立人主动脉SMC体外培养方法的基础上,观察了LDL,VLDL及HDL和相应的氧化修饰型脂蛋白对培养人SMCsis,jun,H-ras原癌基因及Rb抗癌基因转录表达的影响。结果表明:(1)HDL对SMCsis,jun,ras基因表达无影响;(2)LDL和VLDL有使这些基因表达增加的趋势;(3)ox-LDL,ox-VLDL和ox-HDL具有使SMCsis,jun,和ras基因表达显著增强的作用(P<0.01),且其作用较相应的天然脂蛋白大(P<0.01);(4)天然和氧化修饰型脂蛋白对Rb基因表达均无影响。据上述结果推测:LDL,VLDL,ox-LDL,ox-VLDL和ox-HDL的致AS作用可能与刺激SMCsis,jun和ras原癌基因表达增加有关。  相似文献   

7.
空间群为P21的A1-(L-丙氨酸)胰岛素晶胞内,一个不对称单位含有一个六聚体,应用差值Fourier技术,立体化学制最小二来技术和X—PLOR程序并辅以电子密度图的人工拟合,解析了分辨率AI—(L-丙氨酸)胰岛素(Al-L-AlaⅠ)的晶体结构。最终R因子为20.6%,与标准键长与键角的均方根偏差分别为和4.19°,从电子密度图与模型的拟合来看,六聚体中每条A链的Al位置替换的L—Ala清晰可见,每条B链N端B1—B8伏段都为α螺旋构象,形成了B1—B19的连续α螺旋段。  相似文献   

8.
动脉平滑肌细胞(sm ooth m uscle cell,SMC)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块中的主要细胞,它的增殖在AS形成过程中极其重要.利用体外培养的人主动脉SMC,观察了天然高密度脂蛋白(native high density lipoprotein,N-HDL)及氧化修饰HDL(oxidized HDL,OX-HDL)对培养人主动脉SMC cyclin D1(细胞周期蛋白D1)基因转录表达的影响.结果表明:(1)N-HDL对SMCcyclin D1基因表达无影响(P> 0.05);(2)OX-HDL使SMCcyclin D1基因表达显著增强(P<0.01),其表达量随时间(2、12、24 h)延长而增加.上述结果表明,OX-HDL的致AS作用可能与其刺激SMCcyclin D1基因表达增加有关.  相似文献   

9.
空间群为P21的A1-(L-丙氨酸)胰岛素晶胞内,一个不对称单位含有一个六聚体,应用差值Fourier技术,立体化学制最小二来技术和X—PLOR程序并辅以电子密度图的人工拟合,解析了分辨率AI—(L-丙氨酸)胰岛素(Al-L-AlaⅠ)的晶体结构。最终R因子为20.6%,与标准键长与键角的均方根偏差分别为和4.19°,从电子密度图与模型的拟合来看,六聚体中每条A链的Al位置替换的L—Ala清晰可见,每条B链N端B1—B8伏段都为α螺旋构象,形成了B1—B19的连续α螺旋段。  相似文献   

10.
氧化修饰使HDL促动脉平滑肌细胞胆固醇流出减少   总被引:6,自引:0,他引:6  
为了研究氧化修饰对高密度脂蛋白(HDL)转运细胞胆固醇地^3H-胆固醇负荷的培养人动脉平滑肌细胞(SMC)分别与天然HDL及Cu^2+akg HOCl氧化修饰的HDL在37℃温育不同时间后,分别测定细胞^3H-胆固醇清除率。结果发现,温育24h后,经Cu^2+或HOLl氧修饰后的HDL其细胞胆因醇清除率分别较天然HDL下降了30.0%和43.1%(p〈0.01)。结果还发现,Cu^2+或HOCl氧  相似文献   

11.
盐度和CO2倍增环境下碱蓬幼苗呼吸酶活性的变化   总被引:3,自引:0,他引:3  
研究了生长在正常大气CO2和CO2倍增环境中的盐生植物碱蓬(Suaedasalsa)幼苗呼吸酶活性对KCl和NaCl的反应.结果表明,在CO2倍增(700μl·L-1)和正常大气CO2(350μl·L-1)下,300mmol·L-1KCl和NaCl均能抑制琥珀酸脱氢酶(SDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)活性,而异柠檬酸脱氢酶(IDH)活性为NaCl抑制、KCl促进;NaCl和KCl明显抑制细胞色素氧化酶(CO)和光呼吸中乙醇酸氧化酶(GO)、羟基丙酮酸还原酶(HPR)活性;并指出在KCl胁迫下,CO2使三羧酸循环(TCAC)的运行变慢,NaCl胁迫下使其加快,TCAC运行限速步骤与MDH无关,CO为盐对呼吸代谢影响的重要位点.另外,K+、Na+对蛋白表达的影响有差异,CO2可使盐胁迫下的碱蓬幼苗蛋白表达降低.  相似文献   

12.
体外培养大鼠星形细胞的缺糖缺氧性损伤及药物的保护   总被引:4,自引:1,他引:3  
本实验用大鼠星形细胞体外培养模型,观察了细胞在不同条件下乳酸脱氨酶(LDH)的漏出。发现当去掉葡萄糖后,细胞缺氧5和7h后LDH漏出明显增加,5b为59.7±25.3U/mg蛋白(对照组24.7±16.3,P<0.05),7h为68.3±89U/mg蛋白(对照组39.9±212,P<0.01)。用3-氧-甲基-[1- ̄3H]-D-葡萄糖摄取法测量细胞体积,结果显示缺糖缺氧5h后细胞明显肿胀,从对照组的4.1±1.2增加到8.1±3.2μl/mg蛋白(P<0.01)。丹参有效成分764-3在0.5至50μmol/L时能减少缺糖缺氧细胞LDH漏出;在50μmol/L时能减小缺糖缺氧细胞的体积。谷氨酸受体拮抗剂DNQX(6,7-dinitroquinoxaline-2,3dione)50μmol/L能减轻星形细胞肿胀和LDH漏出。  相似文献   

13.
FD耐热逆转录酶的部分酶学性质研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
FD耐热逆转录酶(FD-TRT)来自一株栖热杆菌菌株.通过RT-PCR方法,论文对FD-TRT的部分酶学性质进行了研究.FD耐热逆转录酶能耐受95℃的高温,最适反应温度在65~75℃左右,这时RNA的高级结构能解开,可以提高逆转录反应的效率;同时引物和RNA模板识别的专一性强,可大大提高逆转录的特异性.实验表明FD-TRT逆转录反应的最适条件为:25mmol/LTris-HCl(pH8.8,15mmol/L(NH4)2SO4,100μg/ml明胶,500μmol/LdNTPs,25pmol逆转录引物,1mmol/LMnCl2,2UFD耐热逆转录酶,反应在65~70℃下进行.在上述条件下,用RT-PCR可检出少于5pg外周血总RNA中特异的α珠蛋白mRNA.  相似文献   

14.
为建立鸭乙型肝炎病毒LJ-76的转染细胞系,将LJ-76病毒DNA插入到pUC19的EcoRⅠ位点上,分离得到含有双拷贝LJ-76DNA的重组质粒.通过磷酸钙沉淀方法,将经CsCl等密度离心纯化的LJ-76DNA双体导入到人肝癌细胞BEL7402中.收集转染细胞的培养液进行蔗糖密度梯度离心,所得沉淀经检测发现含有LJ-76DNA并具有特异性DHBV内源性DNA多聚酶活性;对上述样品通过DotEIA检测DHBV核心抗原及表面抗原结果为阳性.Southernblot分析表明转染细胞内存在病毒DNA复制中间体cccDNA、ssDNA和rcDNA,而cccDNA被认为是复制活动较为活跃的标志.电镜观察转染细胞的上清发现有病毒颗粒的存在.  相似文献   

15.
禾本科植物的起源,进化及分布   总被引:6,自引:0,他引:6  
禾本科植物的起源、进化及分布韩建国樊奋成李枫(中国农业大学草地研究所,北京100094)ORIGIN,EVOLUTIONANDDISTRIBUTIONOFTHEGRAMINEAEHanJian-guoFanFen-chengLiFeng(Grassl...  相似文献   

16.
联合固氮细菌粪产碱菌(Alcaligenesfaecalis)A1501菌体经超声破碎后,无细胞粗提液以PEG-6000分级沉淀,丙酮沉淀,再经蓝琼脂糖(BlueSepharoseCL-68)亲和层析分离、纯化。获得的纯谷氨酰胺合成酶(GS)在SDS-PAGE和4-30%梯度PAGE上均呈均一的一条带。GS亚基及整酶分子量分别为55kD和645kD,亚基由456个氨基酸残基组成。GS的Km值,在以Glu为氮源的介质中培养时分别为20mmol/L(Glu),50mmol/L(ATP)和45mmol/L(NH~+_4);在以NH~+_4为氮源的介质中培养时则分别为70mmol/L(Glu),49mmol/L(ATP)和80mmol/L(NH~+_4),表明NH~+_4培养下形成高度腺苷化的GS对Glu及NH~+_4的亲和力有所下降。  相似文献   

17.
氧化修饰HDL刺激培养人主动脉平滑肌细胞增殖   总被引:2,自引:0,他引:2  
平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)增殖在动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成中起着重要作用。氧化修饰HDL(oxidixed HDL,OX-HDL)可刺激^3H-TdR掺入培养人动脉SMC的DNA,促进SMC增殖。以四甲工偶氮唑盐9MTT)法直接观察OX-HDL对培养人动脉SMC增殖细胞数的影响。结果显示,天然HDL(native HDL N-HDL)对  相似文献   

18.
P物质对大鼠DRG神经元胞体膜的作用   总被引:17,自引:1,他引:17  
本文在大鼠DRG神经元标本上应用细胞内记录,以确定SP对DRG细胞的膜反应及其可能的离子机制。实验所测DRG细胞静息膜电位为-58.9±8.2mV(X±SE,n=81)。传导速度:A_(α/β)细胞为20.4±4.8m/s(X±SE),范围14.1-28.7m/s(47/60);Aδ及C类细胞为9.8±5.2m/s,范围1.2-13.7m/s(13/60)。浴槽滴加SP(10 ̄(-7)-3×10 ̄(-4)mol/L)在大多数细胞可引起明显的膜去极化反应(56/60)。少数细胞对SP无反应(4/60)。在SP去极化期间膜电导值有所增加,从平均值2.72×10 ̄(-8)mho增加24.6%(n=3)。所测逆转电位值在+40-+50mV之间(n=3)。浊流平衡液(BSS)中NaCl以氯化胆碱置代,或用含TTX(10 ̄(-5)mol/L)的BSS灌流,可使SP-去极化幅值大大减小但不能完全消除。而高(20mmol/L)和低(0mmol/L)Ca ̄(2+)的BSS灌流时,使SP-去极化幅值相应的增加和降低。用含10 ̄(-4)mol/LCd ̄(2+)及10 ̄(-2)mol/LTEA的BSS灌流,均使SP-去极化明显减小。  相似文献   

19.
番茄叶片胞外β-N-乙酰氨基己糖苷酶的部分性质研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
用从系统感染TMV(tobacco m osaic virus)的番茄叶胞外蛋白提取液中纯化的β-N-乙酰氨基己糖苷酶为材料,研究了该酶的部分性质。以p-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-β-D-GlcNAc)或p-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷(pNP-β-D-GalNAc)为底物,该酶的最适pH在4.8—5.0 之间,最适温度在44—47℃之间。对酶的热稳定性研究表明,温度对酶的热变性作用表现为两相变性曲线,Km 值分别为0.36 m m ol/L (pNP-β-D-GlcNAc为底物)和0.67 m m ol/L (pNP-β-D-GalNAc 为底物),N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)和N-乙酰氨基半乳糖(GalNAc)是酶活性的竞争性抑制剂,Ag+ 和Hg2+ 是酶活性的强抑制剂,金属离子Fe2+ 、Fe3+ 和Cu2+ 也抑制酶活性。  相似文献   

20.
游离细胞法与固定化细胞法生产L-丙氨酸的比较   总被引:1,自引:0,他引:1  
游离细胞法与固定化细胞法生产L-丙氨酸的比较徐虹王雪根范伟平欧阳平凯(南京化工大学生物工程与科学系,南京210009)摘要利用假单胞菌的L-天冬氨酸-β-脱羧酶从L-天冬氨酸生产L-丙氨酸,具体方法有两种,一种为游离细胞法,另一种为固定化细胞法。本文...  相似文献   

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