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竹叶青蛇毒磷脂酶A2的分离纯化和性质研究 总被引:4,自引:0,他引:4
竹叶青蛇毒磷脂酶A_2的分离纯化和性质研究冯波,吴卫甲,钱嵘,王克夷,周元聪(中国科学院上海生物化学研究所,200031)关键词竹叶青蛇毒,磷脂酶A_2;血小板聚集磷脂酶A。在哺乳动物胰脏和蛇毒毒液中含量较丰富,其中蛇毒磷脂酶A。除能水解甘油磷脂的第二... 相似文献
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制备式等电聚焦测得湖南产五步蛇蛇毒磷脂酶A2为单一的吸收峰(OD280),等电点为5.32,证明了作者前报道的纯化的磷脂酶A2为纯品 相似文献
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尖吻蝮蛇酸性磷脂酶A2的纯化和初步晶体学 总被引:5,自引:0,他引:5
为进一步揭示影响血小板聚集活性的结构基础,纯化了江西尖吻蝮蛇(Agkistradun acutus)酸性磷脂酶A2。江西省吻蝮蛇蛇毒经CM-Sepharose离子交换柱层析,两步DEAE-Sepharose离子交换柱层析以及Mono)GFPL离子交换柱层析,得到了SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和等和集电泳均一的磷脂酶A2(PLA2),其分子量为16.5KD,等电点为4.3,经测定,该酶具有抑制ADP诱地 相似文献
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江浙蝮蛇蛇毒中性磷脂酶A2的结构模拟研究 总被引:1,自引:1,他引:0
从我国江浙蝮蛇蛇毒纯化出的中性磷脂酶A2(ATX)不仅具有酶催化活性,还具有突触前神经毒性。用图象模拟和能量极小化及分子动力学方法,根据美国西部菱斑响尾蛇(C.atrox)蛇毒PLA2的晶体结构构建了ATX二体和单体模型,它们的基本折叠与C.atroxPLA2是很相似的。能量计算表明,二体的总势能比单体相应能量的两倍低263.6kcal/mol;ATX二体模型中两亚基间的作用与C.atroxPLA 相似文献
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广东眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2的分离纯化及抗血小板聚集作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 研究眼镜王蛇毒中酸性磷酸脂酶A2对血小板的作用。方法 采用CM-Sephadesx C-25Sephadex G-75,DEAE-Sep「hadexA-25,Sephadex G-75多步柱层析法,聚丙烯酰胺产胶电泳,酸性磷脂酶A2酶活性测定;血小板聚集实验。累进要从粗中分离纯化出一酸性磷脂酶A2单体,分子量为14KD;等电点PI3.8;PLA2比值20μmol.mg^-1.min^-1;小 相似文献
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蝮蛇毒酸性磷脂酶A2高含钙量的晶体结构研究 总被引:4,自引:0,他引:4
钙离子是磷脂酶A2(PLA2)经必需的辅因子,以蝮蛇生磷脂酶A2为材料,在晶体生长过程中加入CaCl2培养了高含钙量的PLA2晶体,X射互衍鉴定该晶体与天然酶同晶。民集了1.6埃分辩率的同步辐射衍射数据,经晶这修正所得高含钙酶的结构与天然酶结构要近,但钙结合部位与C端肽段有细微判别与钙配位的七个氧原子所形成的五角双锥构型比天然酶的完美。钙离了对磷脂酶A2整个分子构象的影响较小,下离子的作用主要是通 相似文献
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蛇毒类凝血酶试验方法研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本文用蛇毒酶制剂和凝血酶对三种试验用稀释液和三种底物进行了凝固敏感性比较,然后选出最佳试验条件测定了8批蛇毒酶制品和三种蛇毒毒素。A、B、C三中稀释液以B液凝固敏感性最高。0.2%牛纤原、0.2%人纤原和绵羊血浆三种底物以0.2%牛纤原敏感性最好。在没有牛纤原的情况下也可考虑选用人纤原,但牛纤原来源容易、成本低、不含人类传染病原体,应为首选底物。 相似文献
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蛇毒中含有多种金属蛋白质,它们具有不同的生物学活性,如抗凝血因子(ACF)、糖苷水解酶(NADase)、纤溶组分(FP)及出血毒素等,它们的许多生物活性、荧光光谱和结构的性质等方面的研究已见报道[1].徐洵等[2]从皖南尖吻蝮蛇蛇毒中分离出3种出血毒... 相似文献
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使用不同稀释度的蛇毒毒素,等体积注射于大鼠背部皮下、皮内和小鼠背部皮下,18~24小时剥皮观察比较动物皮下出血程度,经统计学处理,小鼠背部皮下注射对检查出血毒最敏感。选用小鼠背部皮下注射0.2u蛇毒酶成品、半成品,18~24小时剥皮观察皮下瘀血或瘀斑,发现42批成品中88.1%未见皮下瘀血,24批半成品75%未见皮下瘀血。说明选用小鼠背部皮下注射0.2u蛇毒酶来限量检查出血毒的方法是可取的。 相似文献
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贵州产五步蛇蛇毒磷脂酶A2的抗凝血及抗血栓作用研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究贵州产五步蛇蛇毒磷脂酶A2的抗凝血及抗血栓作用。方法对大鼠静脉注射不同剂量的PLA2,测定大鼠的凝血时间、凝血酶原时间、抗凝效价和血栓抑制率。结果PLA2浓度达到1.0mg/kg以上,能显著延长大鼠凝血时间及凝血酶原时间,其抗凝效价相当于肝素钠的24.8%~31.5%。PLA2能显著抑制大鼠实验性动脉及静脉血栓的形成。结论贵州产五步蛇PLA2具有较强的抗凝血和抗血栓作用。 相似文献
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莽山烙铁头蛇毒液蛋白质组学研究(英文) 总被引:1,自引:0,他引:1
目的收集一条中国特有品种莽山烙铁头蛇的新鲜毒液,对其蛇毒蛋白作生化分析。方法先以电泳胶片法分析比较莽山烙铁头蛇毒与中国大陆及台湾、日本琉球各地其它品种的烙铁头蛇和各地其他品种的烙铁头蛇的粗蛇毒,在凝胶电泳中展现之异同。然后利用高效液相色谱法(HPLC)将莽山烙铁头蛇毒中的磷脂酶分离,再以质谱仪等鉴定,并与以往相同方法分析莽山烙铁头蛇所得到的磷脂酶分析结果比较。结果我们的研究证实了莽山烙铁头蛇毒含唯一主要的磷脂酶,其含量大约占蛇毒总重量的58%,与中国其他烙铁头蛇品种及日本琉球烙铁头蛇的蛇毒某些碱性磷脂酶之氨基酸序列及蛋白结构特别相似。此碱性磷脂酶主要毒性是水肿、局部炎症及肌肉坏死。结论莽山烙铁头蛇咬伤的临床表现为抗凝与出血,局部炎症坏死等特点,亦可由其蛇毒成分得到印证与解释。 相似文献
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《天然产物研究与开发》2021,(9)
正蛇毒可以伤人,也可以救人。它的主要毒性(活性)成分是蛋白质,根据作用部位及原理不同一般分为神经毒素、心脏毒素、凝血毒素、出血毒素等。研究人员分离和研究了多种毒蛇的毒液,目前基于蛇毒毒素也开发出了多种抗癌、镇痛、抗血栓的药物。受蛇毒凝血功能的启发,来自陆军军医大学西南医院联合加拿大曼尼托巴大学的研究团队将从巴西矛头蝮Bothrops atrox的毒液中提取的血凝酶(hemocoagulase,HC)引入明胶-甲基丙烯酸凝胶(Gel MA), 相似文献
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尖吻蝮蛇毒磷脂酶A2基因的克隆与序列分析 总被引:6,自引:3,他引:3
从尖吻蝮蛇毒腺中抽提总RNA,经RTPCR扩增磷脂酶A2的基因,以江浙蝮蛇的酸性磷脂酶A2基因为探针杂交筛选克隆,分离得到4种磷脂酶A2基因。经双向测序测定了这些磷脂酶A2同功酶基因的全序列,并由此推导出编码的氨基酸序列。运用计算机软件推算了它们的等电点,按照等电点和结构特征将它们分别命名为尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶A2I(A.aAPLA2I)、尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶A2II(A.aAPLA2II)、尖吻蝮蛇毒碱性磷脂酶A2(A.aBPLA2)和尖吻蝮蛇毒Lys49磷脂酶A2(A.aLys49PLA2)。其中A.aAPLA2I的1~10位氨基酸残基序列同以前分离得到的尖吻蝮蛇酸性磷脂酶A2已测定的1~10位氨基酸残基序列完全一致。A.aLys49PLA2基因则由于其推导出的49位氨基酸残基由Lys代替了Asp而区别于以前克隆到的磷脂酶A2基因。最后运用计算机软件比较了它们的同源性。这一组磷脂酶A2基因的克隆,将为进一步研究磷脂酶A2的结构与功能的关系提供更多的信息。 相似文献
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我们利用简并引物从江浙蝮蛇腺总RNA经RP-PCR扩增磷脂酶A2(简称PLA2)基因,并以碱性PLA2(B-PLA2)基因为探针,分离出了酸性PLA2(A-PLA2)和两个未见报道的特征结构类同的基因,分别命名为Asn^48-PAL2和BA-PAL2。双向测序测定了这组PLA2同工酶(除信号肽外)基因的全序列,并由此推导编码的氨基酸序列。其中A-PLA2基因编码的氨基酸序列与较早报道的由蛇毒中分离 相似文献
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哺乳动物细胞液磷脂酶A2 总被引:1,自引:0,他引:1
哺乳动物细胞液磷脂酶A_2杨在清,甘莉(华中农业大学,武汉430070)关键词细胞液磷脂酶A_2细胞液磷脂酶A2(cytosolicphospho-lipaseA2,cPLA2)是动物非胰腺磷脂酶A2的一种,存在于哺乳动物的细胞液中,在花生四烯酸的代谢... 相似文献
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磷脂酶A2的应用 总被引:4,自引:0,他引:4
磷脂酶A2 (phospholipaseA2 ,PLA2 ,EC 3 .1 .1 .4)即磷脂 2 酰基水解酶 ,是专一催化 3 Sn 磷酸甘油脂C 2位酯键的水解反应的酶 ,酶解产物为溶血磷脂和脂肪酸。PLA2 不仅在生物体内具有很重要的生理功能 ,而且具有很高的应用价值 ,可广泛地应用在科学研究、磷脂改性、油脂精练、饲料添加剂、医疗等诸多方面。1 .用PLA2 研究酶学、脂代谢和生物膜结构与功能PLA2 (尤其是外分泌型的PLA2 )的分子量较小 ,一般在 1 0~ 2 0kD之间 ,相对而言 ,结构较为简单。在蛇毒中 ,存在许多PLA2 的同工酶 ,它们之… 相似文献