小黑杨花粉植株过氧化物酶同工酶分析

1989年冬笔者对已自行加倍的80株小黑杨花粉植株的休眠芽进行了过氧化物酶同工酶分析,发现株间有差异,酶谱可截然分成两类。第一类酶谱与小黑杨原株(花药培养供体)不同,在B带区多了一条带纹即B_2带,此类约占78％。第二类酶谱与小黑杨原株完全相同,此类约占22％。无论株间形态分离还是过氧化物酶同工酶酶谱差异都充分说明这些小黑杨单倍体植株来源于花粉,它们是重组花粉在植株水平上的表现。实验还证明,小黑杨花粉植株休眠芽的过氧化物酶同工酶酶谱是稳定的,可用来鉴定小黑杨花粉植株的无性系,相信用同工酶鉴定杨树无性系会对林业生产起重要作用。     

玉米过氧化物酶同工酶Px、位点和醋酶同工酶Est3位点的遗传基础研究

同工酶是基因表达后的产物,是分子水平 上的表型〔幻。和个体水平上的表型一样,通过 同工酶在世代间的表现,就可以分析其遗传基 础。对同工酶的遗传基础的深人分析,有助于 了解基因与酶之间的关系及酶与个体水平上表 型的关系。这些关系的阐明,是当代分子生物 学的重要课题,并且对同工酶在实践中的应用 也具有重要的意义。国外对植物同工酶生化遗 传学研究的报道很多〔‘一,。,,国内黄炳权等〔31对水 稻醋酶同工酶的遗传基础进行了研究,程家胜 等〔叼对苹果过氧化物酶同工酶也作过遗传分 析。但是,不同的植物,不同的酶系统,甚至同一 种酶的不同同工酶带的遗传基础是不同的。本 文试图用经典遗传学与分子生物学手段相结合 的方法,对玉米幼苗的过氧化物酶同工酶和醋 酶同工酶进行遗传分析,以期探明这些同工酶 带的遗传基础。     

鸢尾体细胞无性系的建立与变异

本文以德鸢尾,马蔺、拟鸢尾和鸢等几种宿根鸢尾为试验材料,通过花器培养建立了体细胞无性系,在多次继代培养过程中,研究了离体培养对鸢尾体细胞无性系变异的影响,并运用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术分析了试管苗叶片的过氧化物酶同工酶。结果表明离体培养已经改变了鸢尾的遗传基础,但在形态特征、生态习性及观赏性状等方面未发生明显的表型变异。     

根瘤菌属几种同工酶的研究

本文对根瘤菌属12株不同根瘤菌的过氧化物酶,谷氨酸草酰乙酸转氨酶及酯酶同工酶进行了测定,结果发现:所有菌株的过氧化物酶和谷氨酸草酰乙酸转氨酶均呈阴性。酯酶同工酶酶带数在快生型和慢生型根瘤菌之间存在明显的区别,在YMA培养基上,快生型根瘤菌仅有1—2条,迁移率在0.71—0.98之间变化;而慢生型根瘤菌却有4—6条酶带,迁移率在0.15—0.98之间变化,同一菌株在不同碳源上酯酶同工酶酶带数也发生显著变化。     

杉木不同无性系过氧化物酶同工酶的研究

本文对杉木（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｉａｌａｎｃｅｌｏａｔａ（Ｌａｍｂ．）Ｈｏｏｋ．）不同无性系及其不同株龄的叶和不同发育时期的雄球花进行了过氧化物酶同工酶检测。结果表明：杉木４１４号无性系叶和雄球花的过氧化物酶同工酶酶谱与其它无性系都具明显差异;同－无性系叶与雄球花的过氧化物酶同工酶酶谱存在显著差异;不同发育时期的雄球花的过氧化物酶同工酶存在顺序表达。作者认为：过氧化物酶同工酶作为种内分类的鉴定性状较为合适,而科、属、种的分类依据则应更侧重于形态特征。根据杉木４１４号无性系的过氧化物酶同工酶的特异性及其短叶、叶端钝圆和多雄花等特点,可以把它定为杉科杉属杉木物种的一个变型：多雄花杉木。     

过氧化物酶同工酶应用于甜瓜杂交种真实性与纯度检测研究

本研究利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了甜瓜(Cucumis melo.L)84—3等六个杂交种及其双亲的苗期过氧化物酶同工酶谱变化,按生长顺序在苗期进行了四次取样,每次取样均取全株。分析结果表明:甜瓜苗期生一片真叶时酶谱丰富,为取样最佳时期,同一组合中,F_1的过氧化物酶同工酶谱与亲本的过氧化物酶同工酶谱是有差异的,存在“杂种酶带”和“互补酶带”,利用过氧化物酶同工酶谱技术对甜瓜84-3等六个组合进行纯度检测结果与田间纯度检测结果相比符合率为99.1％。     

杨树花药培养筛选耐盐变异体的研究

以杨树花药为外植体诱导单倍体愈伤组织,进行耐氯化钠和碱性盐（模仿天然盐碱土成份配成的几种盐的混合物）变异体的筛选。结果表明,不同的杨树品种对这两种选择剂的耐性是不同的,分化态愈伤组织比脱分化态愈伤组织显示更强的抗性,不同的花氏愈伤组织无性系间在抗盐能力上也存在差异,对再生植株的叶子和愈伤组织进行过氧化物同工酶分析,发现耐盐变异体与对照的酶谱是有差异的,前者比后者在相同带区常常多出一条谱带。     

甘蔗组织培养中2,4-D对过氧化物酶同工酶的影响

在甘蔗组培育苗中,过氧化物酶同工酶活性与胚性细胞团的分化程度有关。其中的Bo酶带与分化状态密切相关,是分化成苗的必要条件之一。细胞分裂素诱导Bo酶带的出现。2,4-D抑制细胞分裂素对Bo酶带的诱导,使Bo酶带消失,并且改变了过氧化物酶同工酶的组成与活性,抑制分化成苗,促进胚性细胞团的旺盛成长。     

玉米叶绿体同工酶的研究

本文报告玉米叶绿体两种同工酶图式的研究结果:(1)过氧化物酶同工酶显示7—12条酶带,细胞色素氧化酶有7—11条酶带;(2)叶绿体与上清液中,同一品系两种同工酶图式一致;(3)杂种F_1中第4和第5条互补酶带表现稳定。可能与光合性能的改善有关。     

野生稻的遗传学研究——Ⅱ、普通野生稻过氧化物酶同工酶的多态性研究

本文利用电泳方法,研究了普通野生稻,尤其是中国和印度普通野生稻的过氧化物酶同工酶的多态性,结果表明: 1).普通野生稻中,过氧化物酶同工酶能分离出24条酶带,各酶带的出现频率不同,其中第3、5、6、9、10、11、19、20、21和22号酶带出现频率超过50%,又以第3、20和22三条酶带出现频率最高,这10条带可以做为普通野生稻过氧化物酶同工酶的基本酶谱,而第3、20和22三条带可能是其原始酶带。2).中国和印度的普通野生稻过氧化物酶同工酶有一定差异,但在墓本酶谱和原始酶带的表现上是一致的。因此,尽管普通野生稻过氧化物酶同工酶具有高度的分子多态性,但仍能反映种的分子特征。本文还讨论了过氧化物酶同工酶与普通野生稻的演化,和我国栽培稻的起源及其在进化学研究中的价值。     

转TaLEA基因小黑杨无性系生长性状变异研究

以6年生的10个转TaLEA基因和1个非转基因小黑杨无性系为材料,对其生长量、干形、叶片性状、皮孔性状等15个指标进行测定分析。方差分析与遗传参数计算结果表明：11个小黑杨无性系间各性状达极显著差异水平（P＜0.01）,各指标表型变异系数处于1.92%~39.98%,遗传变异系数与表型变异系数接近,重复力处于0.621~0.987,表明基因的转入对无性系各性状的生长有一定的影响,但这种影响主要由遗传因素控制。表型相关分析结果表明转基因小黑杨生长量与干形性状、叶片性状、皮孔性状均呈不同程度的相关性,表明多指标共同作用,控制植株生长发育;利用综合评定法,当入选率为10%,初步选出XL-1和XL-9等2个优良无性系,2个无性系的树高、胸径分别比CK高16.55%和15.38%,比平均值高13.38%和19.46%,遗传增益分别为12.18%和17.42%。本研究为转基因杨树的良种选育提供重要的理论依据。     

用5种同工酶分析云南芋种质资源的遗传多样性

用5种同工酶(酯酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶、多酚氧化酶、细胞色素氧化酶)分析云南48份芋材料遗传多样性,并将5种同工酶的酶带检测结果进行聚类分析.结果表明:48份材料的5种同工酶的酶带数分别在11～19条之间,除超氧化物歧化酶仅有3种酶谱类型外,其余4种同工酶的酶谱数均超过检测试材的半数.将聚类结果与试材的植物学性状相比较,发现以来源、用途、生态位和叶柄、叶心颜色等能对聚类结果进行初步分类,并给予合理解释.因此从试材的植物学性状观察、野生和半野生种的存在以及蛋白质表达水平的同工酶分析结果来看,云南省的芋种质资源呈现丰富的遗传多样性.这为芋遗传变异的进一步深入研究以及对正面临巨大威胁的云南芋资源进行原生境保存的可能性提供了依据.     

吲哚丁酸处理桉树插条后过氧化物酶活性和同工酶变化与插条生根的关系

尾叶桉MLA无性系（简称MLA）为难生根植物,属叶桉U6无性系（简称6）和刚果12号桉W5无性系（简称W5）为相对易生根植物。MLA的插条中的过氧化物酶（POD）活性较U6、W5的高。用吲哚丁酸（IBA）处理桉树的插条后,在扦插生根的不同阶段,插条内的POD活性呈现规律性的变化。蛋白质含量呈上升趋势。POD同工酶谱带也随生根的进程出现增多的现象。本文讨论了过氧化物酶与桉树插条生根的关系。     

棉花感染枯萎病后过氧化物酶同工酶的变化

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳研究了棉花不同品种接种枯萎菌(Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum)后过氧化物酶同工酶的变化。接种后,感病品种(4个)比抗病品种(8个)的过氧化物酶同工酶的活性强,酶带数增多1—2条。这种变化与植株外部表现的症状相一致,即病情越重,酶带数越多。因此,感病植株的同工酶变化可以看作植株内部的“生化症状”。海岛棉、陆地棉和中棉之间,过氧化物酶同工酶存在着明显的差异。高度感染枯萎病的海岛棉同工酶最多(8条),其次为陆地棉的感病品种(7条),再次为陆地棉的抗病品种(6条),不感染枯萎病的中棉同工酶最少(4条)。由于抗病品种与感病品种过氧化物酶对枯萎菌侵染所作出的反应不同,因此,可以利用接种后感病品种比抗病品种产生新的酶带较多的特点,作为筛选棉花抗枯萎病品种的一种技术。     

荞麦属种质资源发芽种子过氧化物酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳对荞麦属9个种(含大粒组8个和小粒组1个)32个收集系栽培及野生荞麦种子的过氧化物酶同工酶进行了研究。结果表明:过氧化物酶同工酶酶带23条,不同物种的酶带数4到8条。其中,甜荞有7条带,而苦荞为4条。酶带分析及聚类分析表明:大粒组荞麦种的谱带与F.gracilipes等小粒组荞麦种间差异极大,甜荞和苦荞酶带分别与F.megaspartanium和F.pilus相似,并分别与F.megas-partanium和F.pilus聚类最近,支持F.megaspartanium和F.pilus可能分别是甜荞和苦荞祖先种的假说。     

豌豆组织培养中器官的分化生长过氧化物酶同工酶及核酸含量的变化

在豌豆的离体组织中比较研究了培养基中不同浓度的氮源、蔗糖和细胞激动素(BA)对于培养组织的生长、过氧化物酶同工酶及核酸含量的影响。试验结果表明,培养基中上述因素的变化对外植体芽苗的分化生长有明显影响。在氮源(总氮量、NO_3~-和NH_4~ 的不同比例)、蔗糖浓度和激素水平都适宜时最有利于培养组织的细胞生长与分化。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离培养组织过氧化物酶同工酶的结果表明,过氧化物酶同工酶带数与外植体的生长速度有密切关系,亦即外植体的过氧化物酶同工酶带与外植体的生长速度呈正相关趋势。核酸含量的变化得到了相应结果。     

萘乙酸处理桉树插条后过氧化物酶活性及其同工酶变化与插条生根的关系研究

尾叶桉MLA无性系(简称MLA)为难生根植物,尾叶桉U₆无性系(简称U₆)和刚果12号桉W₅无性系(简称W₅)为相对易生根植物。MLA的插条内的过氧化物酶(POD)活性较U₆、W₅的高。用萘乙酸(NAA)处理桉树的插条后,在扦插生根的不同阶段,插条内的POD活性呈现规律性的变化。POD同工酶谱带也随生根的进程出现增多现象。本文讨论了过氧化物酶与桉树插条生根的关系。     

杨树杂种无性系生长与光合生理遗传变异研究

以美洲黑杨与大青杨的27个杂种无性系1年生盆栽扦插苗为材料,以美洲黑杨无性系I-69为对照,对其生长性状、扦插成活率以及主要光合生理指标进行遗传变异分析,并利用分析结果对杂种无性系进行初步选择.结果表明:(1)27个杂种无性系间苗期生长性状及光合生理等12个性状指标差异极显著,无性系重复力均在0.7以上,最高达0.987,均受强遗传控制.(2)结合生长性状分析不同无性系的净光合速率,发现具有较高净光合速率的无性系,同样具有较大生长量和较高成活率.(3)经主成分分析和聚类分析,初选出7个生长快、成活率较高、光合作用能力较强的无性系(编号依次为135、141、153、155、165、177和193),7个无性系苗高超对照10%~33%,地径超对照11%~24%,成活率超对照30%~48%,净光合速率超对照7%~29%,且干形优美,适应性强,可作为进一步选育的材料.     

欧李叶片过氧化物酶同工酶与叶果矿质元素含量变化的关系

以同一生境条件下113份燕山山脉野生欧李为试材,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,研究欧李叶片过氧化物酶(POD)同工酶与叶果中6种矿质元素的含量变化及其相关关系,为在酶水平上揭示欧李矿质营养代谢遗传差异提供理论参考。结果表明,欧李叶片过氧化物酶同工酶划分为7种酶谱类型,其中Rf 0.126和Rf 0.716酶带为共有的特征带,不同酶谱类型中单株个体间的相同酶带酶量大小以及叶果中的矿质元素含量存在明显差异,变异程度较大;相关分析结果显示,不同酶谱类型中相关酶带酶量大小与叶果中矿质元素含量变化存在显著或极显著的相关关系,表明欧李叶片过氧化物酶同工酶酶量大小变化在一定程度上反映矿质营养代谢的遗传差异和多样性。     

苹果属皱叶矮生型株系及其亲本和后代实生苗的过氧化物酶同工酶特性研究

以母本平邑甜茶1株、父本扎矮山定子1株、皱叶矮生型株系(F1)6株及其自然授粉后代实生苗(F2)15株为试材,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究叶片过氧化物酶同工酶谱的异同。结果表明:皱叶矮生型株系叶片的过氧化物酶同工酶酶谱共有10条酶带,R f值范围0.18~0.90,各植株间的酶带数量基本一致,只有强弱不同,与平邑甜茶酶谱的差异也很小。在皱叶矮生型株系的后代实生苗叶片中,除15 a单株有16条酶带外,其他实生苗的过氧化物酶同工酶酶谱约有10条酶带,但株间差异明显,R f值范围0.18~0.84。不同树龄平邑甜茶叶片的酶谱一致性较好。