蛋白的高尔基体定位

高尔基体既是蛋白质修饰、分选、水解加工的场所,又是分泌物质的转运站,每时每刻都有大量的蛋白进出高尔基体。在这种情况下,高尔基体仍能保持完整且高度有序的结构,表明高尔基体驻留蛋白有精确的定位信号,以保证它们定位于正确的区隔,而不会沿着分泌途径被运输出去。高尔基体内有几种不同类别的膜蛋白,包括糖基转移酶、周缘膜蛋白、病毒蛋白和受体等。研究显示,有多种定位信号和定位机制参与了蛋白的高尔基体定位。     

百合花粉与花粉管中类高尔基体58K蛋白

动物细胞中,高尔基体往往位于微管组织中心(MTOC)附近,它们的位置部分地被58K蛋白所决定.通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹方法,我们发现川百合花粉与花粉管内存在类高尔基体58K蛋白,其分子量与动物细胞内58K蛋白类似,约为60 ku.通过免疫荧光标记方法,在共焦激光扫描显微镜下观察发现,花粉与花粉管内类高尔基体58K蛋白主要存在于一些颗粒状的细胞器上.这些颗粒状细胞器的分布与植物细胞内高尔基体的分布是一致的.进而通过免疫金标和透射电镜观察发现,花粉与花粉管内类58K蛋白主要存在于高尔基体附近的囊泡膜上.     

高尔基体的结构与功能研究简介

真核细胞的高尔基体是分泌途径中最重要的细胞器,它既控制细胞内新蛋白质和脂类合成后的修饰、分选和运输到目的位置等重要过程,又参与细胞外物质进入细胞内的物质运输和信号转导过程。高尔基体结构和功能的分子机制研究是目前和今后相当长时间内细胞生物学领域的研究前沿。就高尔基体研究中发生的一些重大事件和目前存在的几个主要科学问题及其今后研究方向作一简单介绍。     

高尔基体的取材与染色及其制片

高尔基体显微切片在生物学制片中是一项重要技术,本文介绍了从取材到染色制作良好的高尔基体切片的过程。     

高尔基体基质蛋白GM130的生物学功能研究进展

GM130是第一个被报道的能够调控高尔基体结构维持的基质蛋白,其相关生物学功能研究已经积累了大量的成果,证实了GM130在细胞中涉及多种生物学功能,包括囊泡运输、糖基化修饰、微管发生、有丝分裂、细胞凋亡、自噬、细胞极性和定向迁移以及溶酶体功能维持等等.目前对GM130的生物学功能的研究多数是在细胞水平进行的,得到验证的...     

维持胚胎干细胞生物学特性的分子调控机制

胚胎干(embryonic stem,ES)细胞来源于植入前的胚胎.在体外培养条件下,可保持分化成机体各种类型细胞的能力,即全能性.因此,胚胎干细胞被广泛用作研究胚胎发生、发育的细胞模型,也是目前开展细胞移植性治疗研究的重要来源.揭示维持ES细胞自我更新和全能性的分子调控机制,是ES细胞基础研究和临床治疗基础研究的重要领域.目前研究发现,不同的信号通路、转录因子及其通过激活ES细胞特异性表达谱对维持ES细胞多能性、自我更新发挥关键作用。     

提高干细胞维持力的转录调节子

在整个生命过程当中,干细胞都通过自我更新的分裂过程一直维持存在。于细胞的这种自我更新、维持的能力会随着年龄的增长而不断减弱,造成这一现象的原因部分在于肿瘤抑制子p16Ink4a的表达增强。美国密歇根大学干细胞生物中心的科学家Nishino等人发现,在胚胎神经干细胞中,     

内质网和高尔基体的功能浅析

内质网和高尔基体都是膜构成的细胞器,二者在形态、化学组成上都有一定的相似性。其功能虽然有一定的联系,但也有很大的差别。许多中学生乃至大学生对二者功能上的区别与联系不甚明了。下面就分别加以论述。     

pten敲除小鼠中转录上调基因pdd87编码蛋白定位于高尔基体

为了明确pten敲除小鼠中转录上调基因pdd87编码蛋白在细胞中的定位,构建PDD87与绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白表达载体pEGFP-C1-padS7,利用Lipofectamine2000转染该载体于体外培养的NIH3T3细胞中,采用高尔基体特异探针BODIPY TR C5-Ceramide染色显示高尔基体,激光共聚焦显微镜下观察到PDD87-GFP融合蛋白定位于高尔基体,提示pdd87基因编码的蛋白定位于高尔基体。     

脐带血干细胞渗透特性实验研究

冷冻过程中水的输运直接影响生物材料低温保存的效果.对细胞渗透特性的测量将有助于低温保存方案的设计.本文采用渗透腔法,对脐带血干细胞的渗透性能或特性进行了实验研究.实验测得脐带血干细胞的不变体积比例为0.52土0.07,平均直径为9.9士1,0μm,25℃下对水的渗透系数为4.394×10-13m3/N.s,10℃下对水的渗透系数为1.256×10-13m3/N·s.根据Arrhemius关系式,得到渗透系数的活化能为58 6kJ/mol.文中将脐带血干细胞的这些性能数据与从其它文章得到的干细胞的类似性能数据进行了对比.     

人神经干细胞的体外生物学特性

本实验利用有丝分裂因子,体外诱导生成人神 经干细胞(NSCs),观察其生长特性并进行鉴定。取胎龄10-22周的大脑半球,分散细胞后种于添加表皮生长因子(EGF,20ng/ml)和/或碱性成纤维生长因子(bFGF,20ng/ml)的培养基中。利用免疫组织化学方法鉴定分化后的细胞类型。同时,进行细胞克隆分析、传代培养及端粒酶活性检测。结果显示:NSCs呈悬浮生长的干细胞球,其特异性抗原nestin阳性。NSCs具有增殖能力,可连续传代而不丢失其增殖和多分化潜能的干细胞特性。撤除EGF和bFGF的作用,细胞停止分裂,并分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。克隆分析显示NSCs生长呈密度依赖性。人NSCs表达较低的端粒酶水平,并随培养时间延长而下调。研究表明,利用有丝分裂因子,可在体外成功诱导生成人NSCs,其生长,分化受内外源因素的调节,相关的机制还有待阐明。     

醋酸铅对脐带间质干细胞生物学特性的影响

探讨醋酸铅对脐带间质干细胞生物学特性的影响。用细胞计数法测定脐带间质干细胞活性,流式细胞仪检测醋酸铅对脐带间质干细胞凋亡的影响,用ALP组织染色分析成骨诱导的变化,并用RT-PCR和定量PCR分析醋酸铅作用前后的细胞因子表达情况。结果显示：脐带间质干细胞活力随醋酸铅浓度的升高而受抑,60μmol/L的醋酸铅可引起脐带间质干细胞凋亡率增加;成骨诱导分化后ALP表达率下降,TPO、SCF和VEGF等细胞因子表达也有所下降。因此,醋酸铅可以抑制脐带间质干细胞的增殖、促进其凋亡并影响其多向分化潜能。     

肿瘤干细胞生物学特性及其干性维持机制的研究进展

肿瘤是威胁人类健康和社会发展最为严重的疾病之一,也是全球第二大常见疾病死因。最新统计数据显示,恶性肿瘤在发达国家已取代心血管疾病成为第一大疾病死因。肿瘤的耐药、转移和复发,仍然是临床治疗中亟需解决的难题。肿瘤干细胞(tumor stem cells, TSCs)是一类具有自我更新、分化潜能、高致瘤性和高耐药性等特征的细胞亚群,能够抵抗放化疗等非特异性治疗手段,在肿瘤发生、转移、耐药和复发中发挥关键作用。肿瘤干细胞标志物、干性维持机制、微环境和代谢重编程等领域已成为了研究热点,最新研究成果为肿瘤干细胞的鉴定和靶向治疗提供了新的靶标和策略。本文对肿瘤干细胞的表面标志物(CD133和CD44等)、自我更新和上皮细胞间充质转化(epithelial mesenchymal transition, EMT)信号通路(Wnt/β-catenin和Hedgehog等)、微环境特征、代谢重编程(糖酵解和氧化磷酸化等),及其在肿瘤的起始、发展、转移和耐药中的作用进行了综述。     

胚胎干细胞自我复制及亚全能分化特性维持的分子机制

微环境中的各种细胞因子与细胞内的多种转录因子通过一定的信号系统相互作用构成网络, 共同调控胚胎干细胞的自我复制. 本文对维持胚胎干细胞(embryonic stem cells, ESCs)亚全能分化特性的相关分子、信号通路以及它们的作用方式进行了综述, 探讨了胚胎干细胞自我复制及亚全能分化特性维持的分子机制.     

胚胎干细胞的生物学特性及体外诱导分化

来源于早期胚胎的胚胎干细胞 (ES)和胎儿生殖脊干细胞 (EG)可在未分化状态下长期增殖培养 ,并保持其多向分化潜能 .体外培养ES细胞的条件已趋于稳定 ,国内外建立了来自人和多种动物早期胚胎的ES细胞系 .某些细胞因子和化学物质等可定向诱导ES细胞分化为各种不同类型的组织细胞 .ES细胞在胚胎发育、细胞分化、转基因动物、移植治疗、药物开发等领域具有广阔的应用前景 .     

人羊膜来源干细胞的生物学特性及应用潜力

干细胞移植是一种有潜力的替代治疗方案,虽然大量实验模型研究已经证实了干细胞移植能够修复受损或退化的组织并恢复其功能,但是在实际治疗中仍面临诸多困难,如免疫排斥、伦理障碍以及致瘤性等。围产期干细胞可以解决干细胞治疗所面临的问题,被认为是潜在的可靠干细胞来源。与其他干细胞相比,人羊膜来源干细胞(human amniotic stem cells, hAMSCs)具有显著优势。动物实验发现,hAMSCs具有高分化潜能以及免疫调节活性,在妇科疾病、神经系统疾病、肾脏疾病、肺部疾病、皮肤疾病、糖尿病、癌症等多种疾病的治疗中表现出了巨大潜力。随着科学的进步以及临床的迫切需求,hAMSCs的临床应用也逐渐突破了传统治疗的局限性。综述hAMSCs生物学研究进展及应用潜力,以期为hAMSCs的实验研究和临床应用提供理论依据。     

猪骨髓基质干细胞低温生物学渗透特性的研究

以猪为材料利用细胞计数仪法研究了骨髓基质干细胞的渗透特性,包括细胞的等渗体积、低渗或高渗溶液中细胞的平衡体积及细胞的不可渗体积.结果表明,在等渗条件下,骨髓基质干细胞的平均体积为5248.4μm~3,相当直径d为21.6μm;细胞体积随溶液渗透压的变化规律符合Boyle van’t Hoff关系式,据此得到猪骨髓基质干细胞的不可渗体积V_b=0.36Vi,为1902.5μm~3.     

肿瘤干细胞的生物学特性及其研究进展

肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)是肿瘤组织中存在的一类干细胞,具有自我更新、无限增殖能力及致瘤性。大量研究显示,血液系统及实体瘤中均存在CSC。综述了CSC生物学特性的最新研究进展,包括寻找表面标记物、确定CSC微环境、分选与鉴定CSC、探索肿瘤细z胞和CSC之间的转化、研究CSC耐药性和耐药机制。利用肿瘤的这些生物学特性选择性杀伤肿瘤干细胞的靶分子疗法,为克服肿瘤耐药的复发与转移提供新的策略。CSC的研究为人们对肿瘤生物学特性的进一步认识提供了新的思路,并为肿瘤的临床治疗提供了新的希望。     

缺氧状态下绿豆(Phaseolus radiatus L.)根部细胞内高尔基体的形态变化(英文)

用铀—铅—铜浸染技术处理样品后,通过透射电子显微镜观察绿豆根部细胞内高尔基体。在缺氧3d,5d和5d后转入供氧条件3d后根部细胞的超微结构变化表明,缺氧3d高尔基体的内质网的液泡仍能生成分泌泡,这种分泌泡不能排出到细胞外,而滞留于细胞质中;缺氧5d的高尔基体则不能形成分泌泡,而分泌物积累于内质网的液泡,使内质网的液泡膨大。当缺氧条件解除3d后,高尔基体的形态和功能基本恢复到正常状态。Russell(1973)证明,培养液缺氧能阻碍植株根部生长。Mollenhauer和Morre(1980)观察到细胞壁和膜的增殖有赖于高尔基体形成的分泌泡。本试验表明:由于缺氧引起高尔基体分泌泡形成和转运受阻,看来可能是它阻碍植株根部生长的主要原因之一。