芯片实验室（微流芯片）技术

在最近十几年中 ,芯片实验室技术逐渐得到广泛的重视。与传统的检测手段相比 ,这一技术在检测速度、费用、样本 /试剂消耗、防止污染、效率和自动化程度等方面都具有明显的优势。现就基于微流通道的芯片实验室 (微流芯片 )及其在生物化学检测上的运用作一介绍     

蛋白质芯片

随着人类基因组计划 (ＨＧＰ)顺利实施 ,以生命活动的执行者———蛋白质为研究对象的蛋白质组学越来越显得重要[1] ,并构想和发展了快捷、高效、并行、高通量的蛋白质组检测新技术———蛋白质芯片技术。1.蛋白质芯片的基本构成蛋白质芯片是高通量、微型化和自动化的蛋白质分析技术。目前蛋白质芯片主要分两种[2 ] :一种类似于ＤＮＡ芯片 ,即在固相支持物表面高密度排列的探针蛋白点阵 ,可特异地捕获样品中的靶蛋白 ,然后通过检测器对靶蛋白进行定性或定量分析 (如图1)。另一种就是微型化的凝胶电泳板。在电场作用下 ,样品中的蛋白质通过芯…     

PCR 芯片及其应用研究进展

PCR芯片实质上就是固定有与研究对象有关的许多已知基因的引物阵列并可用于PCR检测的固相载体,其制作时最关键的是目的基因的引物设计。与基于杂交的芯片技术不同,PCR芯片技术是一种高通量的,准确、灵敏的定量检测基因表达的技术,它将待测基因的引物固定于固相载体上,通过简单的、经过优化的定量PCR体系和荧光定量PCR仪,实现待检样品中已知基因的扩增,用于定量检测待检样品中已知基因的表达情况。PCR芯片由于其操作简单、结果准确、数据产出快而多等特点,已应用于疾病发病机制、药物作用机理和细菌分型等研究领域,并将在生命科学研究领域得到更为广泛的应用。     

肝功能衰竭并发感染与肠道细菌易位

肝功能衰竭患者易并发内毒素血症、细菌及真菌感染。细菌学检查证实 80 %的急性肝功能衰竭患者有细菌感染 ,32 %的病人有真菌感染 ,肺、血液及尿路是其主要感染部位 ,且这些感染主要发生在急性肝功能衰竭的早期 (4天内 ) ,其中 6 0 %的病人死于细菌感染 [1 ] 。在慢性肝功能衰竭者 ,5 0 %的患者死于细菌感染。研究表明 ,肝功能衰竭并发感染的主要病原菌为革兰阴性肠道细菌 [2 ] 。肝功能衰竭者易并发感染的主要原因与其体液、细胞免疫防御功能受损有关。肝功能衰竭时 ,通常补体合成严重不足 ;多形核白细胞移动、吞噬及细胞内杀菌功能下降 ;…     

组织芯片

组织芯片技术已广泛应用于人类基因组研究、医学诊断和基础研究,尤其是在肿瘤基因筛选、肿瘤抗原筛选及寻找与肿瘤发生、发展及预后相关的标记物等方面显示了巨大的潜能.组织芯片作为芯片家族的新成员,具有高通量、大样本、省时快速等优点.综述了组织芯片的制作方法、应用、优缺点及其发展前景.     

自制组织芯片穿刺工具及芯片手工制作技巧

组织芯片（tissue chip TC）技术是将数十个乃至上千个的组织样本,整齐有序地排列在同一张载玻片上,而形成的微缩组织切片;又称组织微阵列（tissue microarray TMA）技术。组织芯片的制作方式主要有石蜡切片法和冷冻切片法,目前以石蜡切片法为常用。现在还有商品化的组织芯片制作仪,如美国（Tissue Arrayer,Beecher Instrument,USA）生产的,但这套产品价格昂贵。所以,手工制作技术更经济、实用,其方法的改进层出不穷。我们采用一次性穿刺针手工制做穿刺工具,用普通石蜡包埋样本,制做组织芯片,收到了满意的效果,现将制做主要程序和技巧介绍如下。     

真正走向基因检查时代，当务之急是取得人们的一致认同

在利用聚合酶链反应（PCR）法进行基因检查方面完全处于领先地位的罗氏公司。走向个性化（Tailor-made）医疗时代,DNA芯片诊断药的开发也正式开始。他呼吁,基因诊断的普及,建立人们的认同感是必不可少的。[编者按]     

妊娠期合并肝功能异常133例分析

目的分析妊娠期合并肝功能异常的病因构成及临床特征,提高对其临床表现的认识。方法收集133例妊娠期合并肝功能异常病例的临床资料,分析其临床特征、常见并发症对产程及胎儿的影响,并随访6个月后病情转归情况。结果 (1)妊娠相关并发症包括妊娠期合并肝内胆汁淤积症(29例),妊娠期急性脂肪肝(1例),妊娠剧吐(8例)和子痫前期肝功能损害(20例),除妊娠剧吐多出现在孕早期,其余均多发生于孕中晚期;非妊娠的因素包括急性病毒性肝炎(含重症肝炎)(41例),肝硬化(2例),药物性肝损害(1例),也多见于中晚孕期;还有一部分为原因不明(31例)。(2)妊娠合并肝功能异常的常见并发症包括胎儿宫内窘迫、早产、剖宫产、产后出血及围产儿死亡,其发生率与同期对照组比较,差异均有统计学意义。其中产后出血发生率比较,P0.05;其余并发症发生率比较,均P0.01。(3)6个月随访69例,其中妊娠相关肝功能异常好转率为81.5%(22/27),非妊娠相关肝功能异常好转率为20%(5/25),二者均有统计学意义(P0.01)。结论妊娠相关性肝病及妊娠合并病毒性肝炎是妊娠期肝功能异常的主要原因,正确认识并及时发现异常对降低母婴死亡率及改善预后具有重要意义。     

cDNA芯片的重复性研究

cDNA芯片正在成为基因表达研究的常用方法,用此法通过一次杂交即可获得大量基因的表达信息[1,2]。目前,一些专业的生物芯片公司已推出部分cDNA芯片产品供研究者应用,然而,由于价格昂贵及受到其他一些条件的限制,国内众多研究者很难对芯片结果进行多次杂交验证,因此cDNA芯片的重复性就成为他们关心的问题,本实验对cDNA芯片用于基因表达研究的重复性进行了研究。１材料与方法１．１探针和cDNA芯片的制作按文献[3]中的方法合成R15Hp35T细胞的探针10μl,以荧光素Cy5-dCTP进行标记。同时制作含有61个基因的cDNA芯片,共10片。…     

DNA芯片技术

ＤＮＡ芯片技术利用固定化在固体表面的高密度ＤＮＡ分子微点阵来进行生化分析。从生物体中提取的样品ＤＮＡ或ＲＮＡ作为靶分子,荧光或其它方法标记后,与微点阵上互补的探刈杂交,从而产生异源双链。因为在微点阵上,某一特定位置年的核苷酸序列是已知的,所以通过对微点阵每一位点的荧光强度进行检测,便可能样品进行定性及定量分析,检测技术包括激光共聚焦扫描和电耦合设备（ＣＣＤ）成像等等。ＤＮＡ芯片根据控针成分的不同大     

蛋白质芯片构建技术进展

蛋白质芯片是一项实现蛋白质高通量分析和检测的新型技术,在生命科学的各个领域具有重要的应用前景。但是由于蛋白质本身的敏感性质和芯片的独特结构,蛋白质芯片技术的发展面临许多难点,这些正是蛋白质芯片研究者需要共同讨论的问题。本文从芯片构造、探针的固定方法和检测方法三个方面对芯片的构造进行分析和讨论,并对其相关技术的进展进行综述。     

缩微芯片实验室

生物芯片技术是近年发展起来的新型实用技术 ,已成为高效、大规模获取相关生物信息的重要手段。所谓生物芯片就是缩小了的生物化学分析器 ,通过芯片上微加工获得的微米结构和生物化学处理结合 ,将成千上万个与生命相关的信息集成在一块厘米见方的氧化硅、玻璃或塑料等材质制成的芯片上。目前该技术的应用领域主要有基因表达谱分析、新基因发现、基因突变及多态性分析、基因组文库作图、疾病诊断、药物筛选、基因测序等。从 80年代初ＳＢＨ (ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｂｙｈｙ ｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ)概念的提出 ,到 90年代初以美国为主开始进行…     

毛细管电泳芯片及其应用

毛细管电泳芯片是近十年发展起来的一项新技术。与普通毛细管电泳相比,毛细管电泳芯片具有体积小、分离速度快、效果好、所用样品量少等优点。章介绍了毛细管电泳芯片的芯片结构及其应用等的研究进展。     

肝脏类器官芯片在生物医学中的研究进展

肝脏类器官芯片是一种基于三维培养并搭配微流控系统的特殊芯片。肝脏类器官可依托芯片技术,在体外构建出具有三维结构的人体肝脏生理微系统。该文概述了肝脏类器官芯片在生物医学领域的最新研究成果,归纳总结包括三维肝细胞芯片、肝血窦芯片和肝小叶芯片在内的不同类型的肝脏类器官芯片特点,分析肝脏类器官芯片领域发展面临的诸多机遇和挑战,展望了肝脏类器官芯片未来的发展方向。肝脏类器官芯片技术将为人类疾病和健康领域开创新的研究途径。     

蛋白质芯片技术进展

人类基因组测序工作的完成 ,引起人们对蛋白质组研究的热忱。蛋白质作为生命活动的执行者 ,种类繁多 ,结构复杂 ,并且其活性与空间结构密切相关 ,需要更为先进的技术去研究和探索。近来出现的蛋白质芯片以并行、高通量检测、分析和处理蛋白质样品 ,发展迅速 ,应用前景广泛。介绍蛋白质芯片的种类、蛋白质固定的表面化学以及不同的检测方法 ,简述蛋白质芯片在不同领域的应用 ,并讨论蛋白质芯片目前存在的问题。     

DNA芯片与应用

DNA芯片就是利用光导原位化学合成或液相合成自动化点样,将数以万计的寡核苷酸固定于固相支持物硅片、尼龙膜上,与荧光素或同位素标记的特检样本DNA/cDNA杂交,通过对杂交信号分析反映样本中的DNA序列信息。它广泛应用基因表达、DNA测序、基因分型、基因突变与多态性检测和遗传作图等生物医学研究领域。     

蛋白质芯片技术研究进展

蛋白质芯片是继基因芯片后的又一种用于生命科学研究的技术平台。目前这一技术已经被广泛应用到生命科学研究的多个领域,如蛋白质组学研究,新药的开发以及疾病的临床诊断等。就蛋白质芯片的基本原理、研究进展及应用状况做一介绍。     

鱼与芯片

Cajus Worthington在2007年十分确信地认为,阿拉斯加不会有什么先进的基因分型工作。作为阿拉斯加本地人,Gajus Worthington直到23岁都一只跟随他的父亲做一个职业渔民。     

蛋白质芯片技术

以前对蛋白质的研究集中在一次研究一种蛋白质 ,通常费时费力 ;而蛋白质芯片技术是研究蛋白质组的新技术 ,是高通量、微型化和自动化的蛋白质分析技术。它可以用来研究蛋白质的亚细胞定位和蛋白质与蛋白质之间的相互作用 ,以及对蛋白质的功能进行生物化学分析 ,将对蛋白质组研究及医学生物学的发展有很大的推动作用。较系统地介绍了蛋白质芯片的概念、制作及检测方法 ;同时也讨论了蛋白质芯片的两种功能形式、存在问题和应用前景。     

急性肝功能衰竭大鼠胃肠道细菌培养结果分析

目的用硫代乙酰胺诱导急性肝功能衰竭大鼠模型,作胃肠道细菌培养,同时测定门静脉内毒素水平,以探讨肠道菌群与内毒素血症的关系 .方法 SD大鼠40只,随机分成2组,正常对照组15只,肝衰竭组25只.肝衰竭硫代乙酰胺按300 mg/kg皮下注射(30 mg/ml配制),每天1次,连续2 d.对照组用生理盐水作对照 .两组同时实验,第3天剖腹作胃肠冲洗液细菌培养及门静脉内毒素测定.结果[ HT SS 两组大鼠门静脉内毒素水平分别为 正常对照组(29.33±18.50)ng/L;肝功能衰竭组(105.81±18.82)ng/L (较正常对照组明显升高P＜0.01).两组大鼠胃小肠细菌培养结果细菌总数正常对照组胃(1.69±0.85)(lg n/ml),空肠(2.12±0.54)(l g n/ml),回肠(3.04±0.58)(lg n/ml);肝功能衰竭组胃(2.94±0.98)(lg n/ml), 空肠(3.60±1.12)(lg n/ ml),回肠(4.88±1.56)(lg n/ml)(较正常对照组明显增多 P＜0.05).肠杆菌数正常对照组胃(0.83±0.59)(lg n/ml),空肠(1.13±0.9 8)(lg n /ml),回肠(2.13±1.44)(lg n/ml);肝功能衰竭组胃(2.48±1.06)(lg n/ml),空肠 (2. 79±0.35)(lg n/ml),回肠(4.4±0.61)(lg n/ml)(较正常对照组明显增多,其中胃、空肠P＜0.05,回肠P＜0.001).结论由硫代乙酰胺诱导的大鼠急性肝功能衰竭模型肠道细菌上移过度生长,细菌菌落总数及肠杆菌数明显增多, 门静脉内毒素水平明显增高,且肠道菌群紊乱与内毒素血症有密切关系.