真菌诱导物在滇紫草细胞培养中对紫草色素形成的影响

在滇紫草细胞悬浮培养中,真菌诱导物可抑制细胞生长,促进紫草色素的合成。将培养６ｄ的曲霉菌丝体的粗提物以６００μｇ碳水化合物／５０ｍｌ培养液的浓度加入到处于指数生长初期的滇紫草细胞悬浮培养物中,诱导物促进紫草色素合成的作用最大,紫草色素含量为对照的两倍。经高压锅处理２０ｍｉｎ到２ｈ不影响诱导物的活性。真菌诱导物还影响了紫草色素各衍生物的相对含量。     

真菌诱导物在滇紫草细胞培养中对紫草色素形成的影响

在滇紫草细胞悬浮培养中,真菌诱导物可抑制细胞生长,促进草色素的合成,将培养６ｄ的曲霉菌丝体的粗提物以６００μｇ碳水化合物／５０ｍｌ培养液的浓度加入到处于指数生长初期的滇紫草细胞悬浮培养物中,诱导物促进紫草色素合成的作用最大,紫草色素含量为对照的两倍,经高压锅处理２０ｍｉｎ到２ｈ不影响诱导物的活性,真菌诱导物还影响了紫草色素各衍生物的相对含量。     

生产培养基中寡糖素对滇紫草愈伤组织培养的影响

黑节草寡糖素C-7和C-8,人参寡糖素G-7和G-8分别加入到培养基中,均能影响滇紫草愈伤组织中色素的合成。C-7、C-8、G-7和G-8加入到培养基中,促进紫草色素合成的最适浓度分别为1.5ppm、2.5ppm、2.5ppm和2.5ppm,色素浓度分别为21.39mg/gDW、22.68mg/gDW、29.46mg/gDW和36.73mg/gDW,均明显地高于对照(16.73mg/gDW)。并对寡糖素的作用机理进行了讨论。     

几种酶活抑制剂对红曲霉色素合成的影响

红曲色素是天然安全的色素和防腐剂,根据代谢数据库选择了6种代谢途径关键酶的抑制剂,在基本培养基中考察这些抑制剂对红曲霉生长和合成色素的影响。甲羟戊酸合成途径的抑制剂邻氨基苯甲酸和3,4-二羟苯甲酸对红曲霉生长和色素生物合成都没有影响;莽草酸途径关键酶氨基苯甲酸合成酶的抑制剂三甲胺不抑制红曲霉的生长和色素的合成。在不影响红曲霉生长的浓度范围内,聚酮途径中β-酮酯酰-ACP合成酶的专性抑制剂碘乙酰胺(0.5mmol/L)抑制红曲色素合成程度达64.7%,非专性抑制剂咪唑(1mmol/L)抑制幅度达60%,聚酮途径硫酯酶的抑制剂2,4-二硝基氟苯(0.5mmol/L)强烈抑制红曲霉合成色素的活性,抑制程度达91.5%。相关酶活抑制的试验数据显示红曲霉可能经过聚酮途径合成红曲色素。     

米曲霉中的紫草色素诱导物对滇紫草细胞代谢的影响

在滇紫草细胞培养第８天时加入来源于米曲霉的紫草色素诱导物,１２ｈ后滇紫草细胞中紫草色素含量增加,其衍生物之一的乙酰紫草素的相对含量增加,胞内可溶蛋白合成量上升,细胞对碳源消耗增多,而细胞生长受到抑制。处理１２ｈ后,培养液电导率下降,ｐＨ上升,Ｋ＋外泄和Ｎａ＋大量内流,表明离子跨膜运输发生改变。     

米曲霉中的紫草色素诱导物对滇紫草细胞代谢的影响

在滇紫草细胞培养第８天时加入来源于米曲霉的紫草色素诱导物,１２ｈ后滇紫草细胞中紫草色素含量增加,其衍生物之一的乙酰紫草素的相对含量增加,胞内可溶蛋白合成量上升,细胞对碳源消耗增多,而细胞生长受到抑制。处理１２ｈ后,培养液电导率下降,ｐＨ上升,Ｋ＾＋外泄和Ｎａ＾＋大量内流,表明离子跨膜运输发生改变。     

Zn~(2+)对PTP开放和细胞色素c释放的浓度依赖性双向调节

研究Zn2+对Ca2+介导线粒体通透过渡孔道(PTP)开放和线粒体细胞色素c释放的影响,及其与线粒体膜电位(ΔΨm)和Ca2+介导的线粒体Ca2+释放(mCICR)之间的关系.提取大鼠肝线粒体,通过紫外分光光度仪检测不同浓度Zn2+作用下Ca2+介导的PTP开放状态;采用荧光分光光度仪测定不同浓度Zn2+作用下线粒体膜电位的变化;采用双波长双光束紫外分光光度仪检测不同浓度Zn2+作用下测试体系内Ca2+浓度的变化,以反映线粒体Ca2+的转运情况(即mCICR);通过免疫印迹法检测不同浓度Zn2+作用下Ca2+介导的线粒体细胞色素c的释放.高浓度Zn2+完全抑制Ca2+介导的PTP开放和细胞色素c释放.一定浓度的Zn2+部分抑制Ca2+介导的PTP开放和细胞色素c释放.适当浓度Zn2+自身介导PTP开放和细胞色素c释放.低浓度Zn2+加速Ca2+介导PTP开放和Ca2+释放;高浓度和一定浓度Zn2+分别完全或部分破坏ΔΨm;高浓度Zn2+完全抑制mCICR.当抑制mCICR时,Ca2+和Zn2+对PTP开放和细胞色素c释放的作用完全抑制.结果表明,Zn2+以浓度依赖方式双向调节PTP开放和细胞色素c释放.Zn2+的作用可能与Zn2+破坏ΔΨm和影响mCICR相关.     

藻类活性物质对紫草细胞生长和色素形成的影响

本文研究了螺旋藻、栅列藻和织线藻的水提物对新疆紫草和硬紫草细胞生长和色素形成的作用。结果表明不同种类的藻的提取物对不同紫草细胞作用呈现差异。在生长阶段,对新疆紫草,上述3种藻的低浓度提取物促进生长但作用不大,高浓度的螺旋藻和栅列藻提取物强烈抑制生长;对硬紫草,各种藻提取液的所有浓度处理均有促生长作用。在色素形成阶段,连续用高浓度织线藻提取物处理可以加速新疆紫草色素形成,同时提高色素含量。低浓度的织线藻提取液处理能提高硬紫草色素含量。栅列藻的水提物对两种紫草的色素形成均起抑制作用。螺旋藻水提物的适当浓度可加速两种紫草的色素形成。B_5培养基中加高浓度织线藻水提物,可抑制新疆紫草生长阶段的色素形成。     

激发子诱发的小麦叶肉细胞原生质体[Ca2+]cyt升高主要源于胞外钙离子内流

以小麦叶肉细胞原生质体-激发子互作为研究体系,借助共聚焦激光扫描显微镜观察结合药物学试验,对激发子刺激后不同抗叶锈性小麦品种原生质体[Ca2+]cyt的动态变化和[Ca2+]cyt升高的钙来源进行了研究。结果表明:抗叶锈小麦品种‘洛夫林10’的原生质体在激发子处理后,[Ca2+]cyt明显升高,随后有所下降,但在试验检测时间范围内仍保持较高浓度水平;而感病品种‘郑州5389’经激发子处理后,[Ca2+]cyt只发生轻微的波动。使用质膜钙通道抑制剂抑制胞外钙离子流入胞内,再经激发子处理,原生质体[Ca2+]cyt虽也有升高,但升高幅度大大降低。这一结果表明,激发子刺激诱发的[Ca2+]cyt升高主要源于胞外钙离子内流。     

米根霉诱导因子对紫草细胞培养中紫草宁色素分泌的影响

在紫草细胞培养中,加入采根霉粗提物可显著提高紫草宁色素产量,并可加快胞内色素分泌到培养液中的速率和数量。在细胞培养的第6天加入米根霉诱导因子时,其促进紫草宁色素分泌的作用最大,培养液中紫草宁色素含量是对照的2．24倍。此外,同时加入正十六烷和米根霉诱导因子对紫草宁色素的分泌具有协同作用。     

激发子诱发的小麦叶肉细胞原生质体[Ca2+]cyt升高主要源于胞外钙离子内流

以小麦叶肉细胞原生质体-激发子互作为研究体系,借助共聚焦激光扫描显微镜观察结合药物学试验,对激发子刺激后不同抗叶锈性小麦品种原生质体[Ca2+]cyt的动态变化和[Ca2+]cyt升高的钙来源进行了研究。结果表明：抗叶锈小麦品种‘洛夫林10’的原生质体在激发子处理后,[Ca2+]cyt明显升高,随后有所下降,但在试验检测时间范围内仍保持较高浓度水平;而感病品种‘郑州5389’经激发子处理后,[Ca2+]cyt只发生轻微的波动。使用质膜钙通道抑制剂抑制胞外钙离子流入胞内,再经激发子处理,原生质体[Ca2+]cyt虽也有升高,但升高幅度大大降低。这一结果表明,激发子刺激诱发的[Ca2+]cyt升高主要源于胞外钙离子内流。     

多糖对滇紫草培养细胞的影响

黑节草多糖、火棘果果胶和琼脂加入到培养基中,均能促进滇紫草细胞合成紫草素。黑节草多糖促进紫草素合成的最适浓度为0.05—0.1％,大于最适浓度紫草素合成逐渐受到抑制。三种黑节草多糖单体中以多糖Ⅱ最为有效,紫草素产量为90.07mg/l。加入火棘果果胶和琼脂均对紫草素合成呈现促进作用。最后对多糖的作用机理以及多糖与寡糖的关系进行了讨论。     

滇紫草培养细胞中色素合成的代谢调节

培养基中分别加入浓度为10^-5mol／L的铜离子,滇紫草愈伤组织中色素含量提高了5．5倍,悬浮细胞中色素含量提高8．1倍。细胞培养第21天,加入浓度为10^-5mol／L的L-Phe,色素的合成量最大。浓度为10^-6mol／L的抗坏血酸,能明显地促进培养细胞中色素的合成。     

促进紫草色素合成的米曲霉诱导子的纯化和活性鉴定

米曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒｙｚａｅ）诱导子来源于该真菌的菌丝体部分。诱导子粗提物通过ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕ－ｌｏｓｅ、Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ、Ｂｉｏ－Ｇｅｌｐ－４、７３２ 柱层析,得到既不吸附于阴离子交换纤维素又不吸附于阳离子交换树脂、分子量约为１２００～２２００ Ｄ、糖含量为粗提物６．７％ 的组分ＦⅠｂ２－Ｈ,与粗提物相比它的诱导子相对活性提高了１２０ 倍。诱导子粗提物中还含有低浓度不影响滇紫草（Ｏｎｏｓｍ ａ ｐａｎｉｃｕｌａｔｕｍ ）细胞合成紫草色素、而高浓度抑制紫草色素合成的核酸类组分ＦⅡ,核苷酸、氨基酸类组分ＦⅠｂ２－Ｎａ 及强烈抑制紫草色素合成的多糖类组分ＦⅠａ。ＦⅠａ可诱导细胞合成对照中没有的一种黄色素,是另一类代谢产物的诱导子     

硬紫草细胞培养色素形成的动力学研究

紫草为我国传统中药,最早收录于《神农本草经》,根部入药。其有效成分为紫红色的萘醌类衍生物的复合物(紫草色素)。它具有抗菌、消炎、抗肿瘤等作用,是具有药用价值的天然色素,在医药、印染、化妆品及食品工业上有广泛的应用前景。借助细胞培养技术生产紫草色素,是开发紫草资源的新途径。1983年日本已将硬紫草细胞培养工业化生产,1984年便有紫草色素产品投放市场。本文测定了硬紫草细胞培养色素形成过程中细胞生长、产物(色素)形     

米根霉诱导因子对紫草细胞培养中紫草宁色素分泌的影响

在紫草细胞培养中,加入米根霉粗提物可显著提高紫草宁色素产量,并可加快胞内色素分泌到培养液中的速率和数量。在细胞培养的第６天加入米根霉诱导因子时其促进紫草宁色素分泌的作用最大,培养液中紫草宁色素含量对照的２．２４倍。此外,同时加入正十六烷和米根霉诱导因子对紫草宁色素的分泌具有协同作用。     

红光对红曲霉生长及次级代谢产物的影响

光照作为重要的环境因子之一,对包括真菌在内的多种生物的生长及生理过程起着重要作用.研究发现,红色单色光对平板培养的红曲霉(Monascus M10)菌落形态有明显的影响;在液态发酵时,红光在发酵初期可促进红曲霉的生长并促进其提前进入色素合成期,但对其生物量无明显影响;红光培养与黑暗培养对照相比,其发酵液、菌丝及单位菌丝中产生的色素都有明显提高,并在一定程度上降低了桔霉素的产量.     

寡糖素对滇紫草愈伤组织色素合成的影响

从黑节草、红花和人参中提取的寡糖素对滇紫草愈伤组织的色素合成均能起促进作用,当它们单独使用时,分别找到了它们作用于愈伤组织以生产色素的最适浓度.本研究对将来采用组织培养方法进一步工业化生产紫草素提供了依据。     

病原激发子对番茄阴离子过氧化物酶表达与反应性氧迸发的诱导

采用Nortnern印迹法和鲁米诺化学发光法分析抗性的、近等位基因的敏感番茄细胞株阴离子过氧化物酶基因的转录和细胞反应性氧变化,发现病原真菌的激发子和外源H2O2均能促进抗性番茄细胞中阴离子过氧化物酶转录。激发子还能刺激抗性细胞中反应性氧水平暂时急剧升高。敏感番茄细胞对激发子或H2O2没有响应。Ca2 和磷脂酶C的抑制剂硫酸新霉素分别促进和抑制激发子诱导下抗性细胞反应性氧增加。     

Ca2+及其信号转导途径与长时程增强的关系

Ca2 作为信号转导过程中的第二信使,参与机体的各种反应,尤其在神经突触可塑性方面,突触前后Ca2 浓度的变化发挥了重要的信息传递作用.Ca2 在长时程增强(long-term potentiation,LTP)过程中也发挥重要作用.它不仅是LTP产生的触发器,而且能通过激活下游的蛋白激酶、磷酸化ERK,以及活化即刻早期基因(IEGs)等促进基因转录和蛋白质合成,最终参与LTP的维持.