烟草愈伤组织继代培养与分化期间核酸代谢的比较研究

Changes in the contents of DNA and RNA, RNA species, the synthesis rates of DNA and RNA, and the activity of DNase and RNase were investigated in the callus of tobacco (Nicotiana tabacum L. cv. Willow Leaf) during subculture and differentiation. The contents of DNA and RNA were higher in differentiating callus than that in subcultured callus. After day 12, the contents of DNA and RNA in differentiating callus rose continuously while the contents of DNA and RNA in subcultured callus remained constant. Changes in RNA species and its relationship to total RNA level were also analyzed. At the stage of shoot primordium formation in differentiating callus, the activity of RNase increased markedly and the synthesis rate of RNA increased continuously; while the RNase activity and the synthesis rate of RNA in subcultured callus were much lower during the same period. During the period of shoot growth, the synthesis rate of DNA in differentiating callus was elevated compared to that in subcultured callus. The results above suggested that the metabolism of nucleic acids in differentiating callus was more active than that in subcultured callus.     

D-色氨酸对烟草花柄外植体花芽分化的影响(简报)(英文)

烟草(Nicotiana tabacum L.革新一号)花柄切段培养在加有不同浓度D-色氨酸(D-Trp)和6-BA(0.2mg/1)的MS培养基上,其花芽分化明显受到促进。这种促进效应只是在D-Trp和6-BA同时存在的情况下才能观察到,而且这种效应受到其它因素的制约,如:1.花柄成花梯度。在培养基相同的情况下,花柄不同部位的切段,其花芽分化率不同;2.光。在暗培养条件下,花柄切段主要形成愈伤组织,花芽分化率大大下降。D-Trp作为一种D型氨基酸,在6-BA存在时具有促进花芽分化的生物学效应,而且对照实验表明,D-Trp和L-Trp在促进花芽分化方面几乎没有区别,其作用机制值得深入研究。     

柳叶烟草愈伤组织分化期间抗氰呼吸的改变

继代培养的柳叶烟草愈伤组织有明显的抗氰呼吸。交替途径的相对贡献约占总呼吸的29—38%;但仍以细胞色素途径为主,约占总呼吸的44—51%。接种在分化培养基上的愈伤组织在发生组织分化和芽原基形成期间,交替途径运行量占总呼吸的41—47%,承担呼吸电子传递的主要部分;而细胞色素途径只占总呼吸的29—32%。交替途径运行程度的增高可能与烟草愈伤组织的分化有一定相关性。     

黄芩愈伤组织诱导研究(简报)

以黄芩带节茎段为外植体,在含6-BA1．0mg／L和NAA0．2mg／L的MS培养基上培养,可直接分化出芽,分化芽的茎段在相同培养基及培养条件下能够诱导形成愈伤组织。     

高压静电对烟草愈伤组织生长和根分化的效应

用场强 +1.0 KV/ cm高压静电 ( HV EF)处理烟草愈伤组织 30 min,处理组愈伤组织生长量达 10 .6 4g,比对照组高 8.0 % ,根分化率达 70 .6 % ,比对照组高 95%。超氧物歧化酶 ( SOD)活性、蛋白质含量分别为356 .3U/ g.FW、11.0 7m g/ g.FW,分别比对照增加 10 .5%、2 3.5%。过氧化物酶 ( POD)和吲哚乙酸 ( IAA)氧化酶活性处理组分别为 56 .3OD4 70 / min.g.FW、87.1μg/ g.h.FW,分别比对照下降 2 6 .1%、8.7%。结果表明 ,高压静电处理可促进烟草愈伤组织细胞生长和根的分化 ,这与 HV EF影响体内 SOD、POD和 IAA氧化酶活性以及蛋白质含量的变化相关。     

烟草愈伤组织继代培养与分化期间核酸代谢的比较研究

柳叶烟草愈伤组织在分化和芽原基形成期间,DNA 和RNA 含量均高于继代培养物;在芽原基形成后和幼芽生长期间(12天以后),DNA和RNA 含量持续上升,而同期继代培养物巳进入生长静止期,DNA 和RNA 含量基本不变或略有下降。根据RNA 电泳结果还进一步分析了两种愈伤组织培养物各RNA 组分变化与总RNA 含量变化的关系。分化培养物在芽原基形成时有明显升高的RNase 活性峰和持续上升的RNA 合成速率;而此时期继代培养物的RNase 活性及RNA 合成能力均较低;分化愈伤组织的DNA 合成速率在幼芽生长期间仍维持上升趋势,且显著高于同期继代愈伤组织的合成速率。这些结果表明,烟草愈伤组织分化培养物比继代培养物有更旺盛的核酸代谢能力。     

生长素极性运输抑制剂(TIBA)对烟草离体花柄花芽分化的影响

在只含6-BA(2mg/L)的MS培养基上,烟草花柄外植体形态学基端膨大,上着生再生花芽,而花柄中部大多都形成愈伤组织。添加IAA(2,10,20 mg/L)后,花柄基端膨大的现象依然存在,但再生花芽的分布并不限于基端,在花柄中部、顶端都可见再生花芽。花柄外植体中部愈伤组织的形成也随添加的IAA和IAA浓度升高而受到抑制。在上述培养基中添加生长素极性运输抑制剂TIBA后,无一花柄中部能形成愈伤组织,再生花芽的形态变化也很大,有具锥形花柄的花芽、喇叭叶和一些难于确定由何种器官衍生而来的喇叭状器官。这些异于正常形态的器官发生,显然与花柄外植体中生长素极性运输受抑制有关,本文对它们的形成机理作了一些推测。     

烟草茎薄层芽分化过程内源玉米赤霉烯酮含量的变化(简报)

自李季伦等首次发现越冬的冬小麦茎尖中存在玉米赤霉烯酮(zearalenone,以下简称ZEN)的类似物以后,大量的工作证实了高等植物可内源产生ZEN,并发现ZEN与植物的春化作用,光周期(短日)诱导以及花器官的分化、成熟乃至开花都密切相关。薄细胞层(Thin cell layers,以下简称TCL)具有外植体小和组成均匀,易于进行组织培养、对环     

烟草的不同器官薄层培养形成花芽的研究

烟草不同器官薄层离体培养形成花芽受植株生长发育时期的影响。植株处于营养生长时期,茎表皮薄层无花芽分化能力。随着植株营养生长转向生殖生长,在抽苔、现蕾、开花、结籽不同发育阶段,主茎上不同部位的茎表皮出现花芽的频率不同。植株现蕾时,只有接近顶端第一节的茎薄层出现花芽分化,随植株的发育,逐渐延伸到第四、五节。植株果实成熟时,主茎薄层分化花芽能力又复减弱。花芽分化的趋势却向花序分枝、花柄、果柄延伸,使??它们的薄层组织有分化花芽能力。此外,还观察到花序上小叶也可直接分化花芽。培养基内附加不同配比的植物激素对薄层花芽分化有促进作用。     

利用组织培养选择烟草耐盐愈伤组织变异体并分化出再生植株

烟草(品种革新一号)叶片为外植体,直接置入含0.5%NaCl的修改MS培养基中,诱发产生耐盐的愈伤组织。然后采取逐步提高NaCl浓度的措施,分别获得耐0.5%、1.0%、1.5%及2.0%NaCl细胞系。耐盐细胞系在无盐条件下,生长9—11代后仍保持其耐盐性。从各个耐盐细胞系均分别获得再生苗。耐2.0%NaCl的04—9细胞系共得到15株再生植株,叶片狭长、多锯齿、并具有较多的花茎,多数花粉粒畸形,经过人工授粉获得少量种子。04-9变异型再生植株水培于含有1.0—2.0%NaCl的Hogland溶液中生长85天,仍然存活。原始型愈伤组织的细胞呈不规则椭圆形,耐盐细胞系的细胞均近似圆形;耐盐浓度愈高则细胞愈小。耐盐细胞系愈伤组织的叶绿素含量随耐盐浓度增高而增加;渗透势则随耐盐水平提高而降低。耐2.0%NaCl细胞系04—9愈伤组织内脯氨酸含量高40.7倍,其再生植株叶片内的脯氨酸含量亦较原始型增加两倍。耐2.0%NaCl细胞系再生植株的幼年与成年叶片的过氧化物同工酶的酶谱与原始型均有显著差别。以上试验结果均说明耐2.0%NaCl细胞系04—9及其再生植株是一个耐盐变异体。     

烟草愈伤组织分化和芽原基形成期间呼吸代谢途径的改变

接种在继代培养基上的柳叶烟草愈伤组织,未观察到组织分化和芽原基形成。在分化培养基上生长的愈伤组织,接种后第6天可见拟分生组织和管胞分化,9—12天有芽原基形成,15—18天可观察到苗端结构。根据碘乙酸、Na_3PO_4和丙二酸抑制试验,以及3-磷酸甘油醛脱氢酶与琥珀酸脱氢酶活性测定结果,初步表明烟草愈伤组织呼吸中存在有EMP、HMP和TCAC代谢途径.在发生输导组织和芽原基分化的愈伤组织中(接种后第6—12天),HMP途径的运行程度较高;而芽原基的继续生长(培养12天以后),则与EMP途径的增加有关;分化培养基上生长的愈伤组织,始终较继代培养愈伤组织具有较高的FCAC活性水平。     

黄瓜子叶节离体培养物花分化Ca2+敏感期的研究

植物开花是一个非常复杂的过程,对其机理的研究有着重要的实践意义和理论意义。近百年来进行了广泛的生理生化研究,提出过多种假设。自90年代初成功分离了花器官分化和发育基因以来,使这一研究领域进入了分子水平。钙不仅是植物的矿质营养元素之一,而且Ca~(2+)作为植物的第二信使,参与细胞内多种生理生化活动。许多研究结果表明,Ca~(2+)在成花诱导、花芽形成和分化过程中起重要作用,我们自建立黄瓜子叶培养物离     

烟草类根瘤中ATPase的活性变化及分布特性

采用磷酸铅技术,对烟草类根瘤中ATPase的活性变化及分布特征进行了研究。分生细胞中没有磷酸铅颗粒,非含菌细胞的细胞质和细胞器中有少量的磷酸铅颗粒,但在年轻和成熟根瘤菌中却未见它们。相反,当非含菌细胞和根瘤菌开始衰老后,有大量的磷酸铅颗粒位于细胞的质膜和细胞壁上以及根瘤菌表面的内侧。随着它们进一步衰老,磷酸铅颗粒越来越多,广泛分布在细胞的液泡膜、质膜、细胞壁、胞间层、胞间隙及根瘤菌的表面、细胞质和拟核中。由于细胞的解体,磷酸铅颗粒明显减少,一般只位于质膜和由细胞器解体而来的膜泡状结构上。     

菊苣薄层培养花芽,营养芽分化中内源激素的动态变化

菊苣（Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ ｉｎｔｙｂｕｓＬ．）花梗薄层细胞培养于ＭＳ附加ＮＡＡ 和ＢＡ 或ＩＡＡ 和ＢＡ 的ＭＳ培养基上有花芽或营养芽分化． 花芽分化中内源ＩＡＡ、ＤＨＺ＋ ＤＨＺＲ、ｉＰＡ 含量明显增加,而Ｚ＋ ＺＲ变化不明显．营养芽分化中内源细胞分裂素含量增加明显,而ＩＡＡ 在培养前７ ｄ 含量下降,随后有所增加,在原基形成时含量达原初水平的２／３． 可见,花芽分化比营养芽分化所需内源ＩＡＡ／ＣＴＫ 比值要高     

不同激素浓度及光质对烟草叶片不定芽发生的效应

植物激素能调控形态发生已被人们所承认,光在植物形态发生中所起的作用也正在被人们所重视。本文简要报道不同激素浓度及光质对烟草叶片不定芽发生的效应。实验材料为普通烟草(Nicotiana tabacum.L.)试管苗,取7×8 mm的叶子,切去叶柄作为外植体,每瓶接3片,每组重复8瓶,取平均值。MS培养基附加BA和NAA,激素浓度配比(BA/NAA)分别为0/0,0.50/0.05,1.00/0.10,2.00/0.20,单位均为毫克/升(mg/1)。光源选择复旦大学电光源研究所特制的荧光灯附加滤光装置,应用先进的自动光谱辐射