抑癌基因MTUS1在结直肠癌的表达与其淋巴结转移呈负相关

微管相关肿瘤抑制基因1(MTUS1)是一个新的肿瘤抑制基因,编码血管紧张素II AT受体结合蛋白（ATIPs）. MTUS1基因表达下调可促进肿瘤细胞增殖,但MTUS1基因表达在结直肠癌转移中的作用尚不知晓.本文以接受根治性手术、经病理检查证实的50例结直肠癌患者新鲜癌组织、癌旁组织和远癌组织为材料,探索MTUS1基因表达与结直肠癌淋巴结转移的关系. 荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹揭示,有淋巴结转移的结直肠癌患者的癌及癌旁组织MTUS1 基因表达的mRNA及蛋白质水平明显低于无淋巴结转移的患者. MTUS1 蛋白质在淋巴结转移的结直肠癌患者的癌及癌旁组织表达下调,并进一步得到免疫组织化学的验证.实验结果提示,MTUS1的表达量与肿瘤的侵润深度有明显的负相关性.结合临床资料,推断抑癌基因MTUS1在肿瘤的发生、发展及淋巴转移中发挥重要作用.     

骨桥蛋白在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的:研究骨桥蛋白OPN在胰腺癌中的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法:采用RT-PCR和免疫组织化学方法分别检测50例胰腺癌手术切除标本和20例癌旁正常胰腺组织中OPNmRNA及其蛋白水平的表达。结果:胰腺癌组织中OPNmRNA高表达率为90%(45/50)明显高于其在癌旁正常胰腺组织中的表达15%(3/20),差异有统计学意义(P<0.01);OPN蛋白的阳性率为86.0%(43/50),明显高于癌旁正常胰腺组织中的表达30%(6/20),差异有统计学意义(P<0.01);OPN在胰腺癌组织中表达与其淋巴结转移明显相关(P<0.05)。结论:OPN在胰腺癌中的过表达对胰腺癌的生长、浸润及转移起重要作用。     

LncRNA SNHG4在结直肠癌中的表达及对细胞奥沙利铂耐药性的影响

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)SNHG4在结直肠癌(CRC)中的表达以及对细胞奥沙利铂耐药性的影响。方法:采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测24例CRC组织及其邻近癌旁组织中LncRNA SNHG4的表达水平,并用费希尔精确检验(Fisher's exact test)分析LncRNA SNHG4表达水平与CRC患者临床病理特征相关性。体外培养HCT116细胞,将HCT116细胞分为sh-SNHG4组(敲减组)、sh-NC组(阴性对照组),qRT-PCR法检测各组HCT116细胞中LncRNA SNHG4表达水平,CCK8法检测两组细胞经梯度浓度(1.0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L)奥沙利铂(L-OHP)处理24小时后细胞增殖能力变化情况。EdU和免疫荧光(Immunofluorescence,IF)实验检测两组细胞经10μmol/L的L-OHP处理24小时后,细胞增殖能力以及核DNA损伤情况。结果:CRC癌组织中LncRNA SNHG4相对表达水平与癌旁组织相比明显升高(P<0.05),其表达水平与CRC患者淋巴结转移、TNM分期、脉管侵犯显著相关(P<0.05)。与sh-NC组相比,sh-SNHG4组在梯度浓度的L-OHP处理下,相对细胞活性下降更加明显(P<0.05)。在10μmol/L的L-OHP处理条件下,sh-SNHG4组相比sh-NC组,细胞增殖能力减弱(P<0.05),核DNA损伤情况更严重(P<0.05)。结论:LncRNA SNHG4在CRC组织中高表达,敲减LncRNA SNHG4可以减弱HCT116细胞对L-OHP耐药性。     

直肠癌组织中PTEN和Notch1的表达及其与临床病理参数的关系

目的:探究直肠癌组织中PTEN和Notch1的表达及其与临床病理参数的关系。方法:收集2014年1月~2015年4月,我院肿瘤外科确诊48例直肠癌病理组织标本与20例直肠癌患者癌旁正常组织标本为研究对象,应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(S-P法)分析PTEN和Notch1蛋白在直肠癌病理组织和正常组织中的表达情况。结果:PTEN和Notch1主要表达于直肠癌组织细胞质中,呈现棕黄色;Notch1在直肠癌病理组织中表达率显著高于正常组织(P0.05);PTEN在正常组织表达率显著高于在直肠癌组织(P0.05);Notch1在淋巴转移、中底分化及分期为C期患者病理组织中表达率较高(P0.05);PTEN在无淋巴转移、中底分化程度及A+B期患者病理组织表达率较高(P0.05);相关性分析显示,Notch1和PTEN在直肠癌病理组织中表达呈现负相关关系(r=-0.534,P=0.000)。结论:Notch1和PTEN表达失调在直肠癌的发生、发展和淋巴结转移中有重要作用;PTEN表达可能对直肠癌的发生、发展具有抑制作用,Notch1表达可能对直肠癌的发生、发展具有促进作用。     

CCNB2在结直肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨细胞周期蛋白B2(Cyclin B2,CCNB2)在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法:选择45对结直肠癌组织及癌旁正常结直肠组织样本,分别采用实时定量PCR(qRT-PCR)方法和免疫组织化学技术检测CCNB2的mRNA和蛋白表达,并进一步分析CCNB2的表达与结直肠癌临床病理特征之间的关系。结果:结直肠癌组织中CCNB2 mRNA的表达显著高于癌旁正常结直肠组织,差异有统计学意义(P0.001),且CCNB2的mRNA表达与结直肠癌的肿瘤大小、浸润深度及TNM分期显著相关(P0.05),与年龄、性别、肿瘤位置、分化程度、脉管神经浸润、淋巴结转移和远处转移均无关(P0.05)。45例结直肠癌标本中39例表达(+~+++),6例表达(-)。CCNB2蛋白主要表达于结直肠癌细胞质中,少量见于细胞核。结直肠癌组织中CCNB2蛋白的阳性表达率为86.7%,显著高于癌旁正常结直肠组织,并与患者的性别、年龄、分化程度和肿瘤转移均无显著相关性(P0.05),但与肿瘤分期、浸润程度均显著相关(P0.05)。结论:CCNB2在结直肠癌中呈异常高表达,且与结直肠癌的发生发展相关,有望作为结直肠癌的诊断和预后预测参考指标。     

Matrix metalloproteinase 2 promotes cell growth and invasion in colorectal cancer

Colorectal cancer (CRC) is the third leading cause of cancer-related death in the western world. In this study, we evaluated the expression of matrix metalloproteinase 2 gene (MMP2) in CRC and analyzed its correlation with clinicopathological features. We found that the expression of MMP2 was significantly higher in CRC tissues than in the colorectal tissues. In addition, high levels of MMP2 protein were positively correlated with the status of tumor size, lymph node metastasis, distant metastasis, Dukes' stage, and tumor invasion. Moreover, patients with higher MMP2 levels had markedly shorter overall survivals than those with low MMP2 levels. Multivariate analysis results suggested that the level of MMP2 expression is an independent prognostic indicator for the survival of patients with CRC. Silencing MMP2 expression in CRC cell lines with lentiviral-mediated shRNA markedly suppressed cell proliferation, colony formation, and invasion. Furthermore, we observed that vascular endothelial growth factor (VEGF) and membrane type 1 (MT1)-MMP protein levels were decreased in MMP2-down-regulated colorectal cells. Therefore, our study demonstrated that MMP2 is an important factor related to carcinogenesis and metastasis of CRC, and MMP2 promotes CRC cell growth and invasion by up-regulating VEGF and MT1-MMP expression, which makes this pathway a potential target for cancer treatment.     

波形蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探究波形蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与肺癌浸润转移的相关性。方法:收集2012年6月-2014年6月我院手术切除的NSCLC癌组织标本150例及癌旁正常组织(距肿瘤5 cm)79例,提取两组的RNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测波形蛋白m RNA表达水平,免疫组化法检测波形蛋白的蛋白表达,分析波形蛋白表达水平与淋巴结转移、TNM分期的相关性。结果:波形蛋白m RNA在NSCLC癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织(P0.05)。NSCLC癌组织中波形蛋白m RNA表达水平的上调与淋巴结转移及TNM分期(P0.05)相关。结论:波形蛋白在NSCLC患者中表达异常升高,与NSCLC的发生和浸润转移密切相关。     

RhoGDI2 在结直肠癌组织中的表达及其与临床侵袭转移的关系

目的:研究鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子2(Rho GDI2)在结直肠癌(CRC)组织中的表达及其与临床侵袭转移的关系。方法:收集本院于2015年1月至2015年12月收治的80例CRC患者手术切除的原发灶组织和正常癌旁组织。采用免疫组化法检测各组织标本中Rho GDI2的表达情况,并分析其表达量与临床病理特征的相关性。结果:(1)Rho GDI2主要表达于CRC癌细胞胞浆中,在肿瘤原发灶和正常癌旁组织中的阳性表达率分别为26.25%和0.00%,差异具有统计学意义(P0.05);(2)肿瘤原发灶中Rho GDI2的阳性表达率与患者的性别、年龄、肿瘤位置、大小、数量、组织学分级、原发灶分期、血管浸润、神经浸润间均不存在相关关系(P0.05),而与淋巴结转移及远端转移有关(P0.05)。结论:Rho GDI2在CRC肿瘤原发灶中呈阳性表达,且其高表达可促进CRC的侵袭转移,可作为CRC治疗的作用靶点。     

Proteomic profiling of proteins associated with lymph node metastasis in colorectal cancer

Lymph node metastasis (LNM) is associated with poor prognosis in colorectal cancer (CRC). The presence or absence of lymph node metastases is a strong independent prognostic factor for CRC survival. Investigation of proteins associated with the process of lymph node metastasis (LNM) is crucial for understanding of the molecular mechanisms underlying the LNM process and for predicting the CRC prognosis. In the present study, proteins from CRC tissues and adjacent normal mucosa (NMC) were examined using two‐dimensional gel electrophoresis coupled with MALDI‐TOF‐MS. The expression levels of Ferritin Heavy Chain (FHC) were decreased in LNM CRC as compared to those in non‐LNM CRC, while the expression of Cathepsin D and Ubiquitin C‐terminal hydrolase‐L1 (UCH‐L1) were increased in LNM CRC. The results were confirmed by Western blotting and immunohistochemical staining. Furthermore, in vitro cell invasion assay showed that the overexpression of UCH‐L1 through gene transfection increased the invasive ability of HCT8 cells, suggesting that UCH‐L1 is not only a biomarker for LNM in CRC, but also a functional protein that may play a significant role in cell migration. The proteins identified in the present study should further our understanding of the LNM process of CRC and may become useful markers for diagnosis and targets for therapeutic interventions. J. Cell. Biochem. 110: 1512–1519, 2010. © 2010 Wiley‐Liss, Inc.     

乙醛脱氢酶1和肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体在膀胱癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨乙醛脱氢酶1(ALDH-1)和肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)在膀胱癌组织中的表达及其临床意义。方法:选取2015年3月到2018年1月在河北北方学院附属第一医院进行治疗的膀胱癌患者70例,收集其手术切除的癌组织和癌旁正常组织,采用免疫组化法检测癌组织和癌旁正常组织中ALDH-1、TRAIL表达情况,分析ALDH-1、TRAIL的表达与膀胱癌患者的临床病理特征的关系及癌组织中ALDH-1、TRAIL表达的相关性。结果:癌组织中的ALDH-1的阳性表达率高于癌旁正常组织,TRAIL的阳性表达率低于癌旁正常组织(P0.05)。膀胱癌患者的ALDH-1阳性表达率与年龄、性别、分化程度、肿瘤数量无关(P0.05),临床分期为T2-T3期、有淋巴结转移的膀胱癌患者ALDH-1阳性表达率高于临床分期为Ta-T1期、无淋巴结转移的膀胱癌患者(P0.05)。膀胱癌患者的TRAIL阳性表达率与年龄、性别、临床分期、淋巴结转移、肿瘤数量无关(P0.05),高分化的膀胱癌患者TRAIL阳性表达率高于中低分化的膀胱癌患者(P0.05)。Pearson相关性分析显示,癌组织中ALDH-1、TRAIL表达无明显的相关性(P0.05)。结论:膀胱癌组织中ALDH-1的表达偏高且与临床分期和淋巴结转移有关,TRAIL的表达偏低且与分化程度有关,但ALDH-1和TRAIL之间无相关性,需进一步探讨与研究。     

The extra domain A of fibronectin increases VEGF-C expression in colorectal carcinoma involving the PI3K/AKT signaling pathway

The extra domain A (EDA)-containing fibronectin (EDA-FN), an alternatively spliced form of the extracellular matrix protein fibronectin, is predominantly expressed in various malignancies but not in normal tissues. In the present study, we investigated the potential pro-lymphangiogenesis effects of extra domain A (EDA)-mediated vascular endothelial growth factor-C (VEGF-C) secretion in colorectal carcinoma (CRC). We detected the expressions of EDA and VEGF-C in 52 human colorectal tumor tissues and their surrounding mucosae by immunohistochemical analysis, and further tested the correlation between the expressions of these two proteins in aforementioned CRC tissues. Both EDA and VEGF-C were abundantly expressed in the specimens of human CRC tissues. And VEGF-C was associated with increased expression of EDA in human CRC according to linear regression analysis. Besides, EDA expression was significantly correlated with lymph node metastasis, tumor differentiation and clinical stage by clinicopathological analysis of tissue microarrays containing tumor tissues of 115 CRC patients. Then, human CRC cell SW480 was transfected with lentivectors to elicit expression of shRNA against EDA (shRNA-EDA), and SW620 was transfected with a lentiviral vector to overexpress EDA (pGC-FU-EDA), respectively. We confirmed that VEGF-C was upregulated in EDA-overexpressed cells, and downregulated in shRNA-EDA cells. Moreover, a PI3K-dependent signaling pathway was found to be involved in EDA-mediated VEGF-C secretion. The in vivo result demonstrated that EDA could promote tumor growth and tumor-induced lymphangiogenesis in mouse xenograft models. Our findings provide evidence that EDA could play a role in tumor-induced lymphangiogenesis via upregulating autocrine secretion of VEGF-C in colorectal cancer, which is associated with the PI3K/Akt-dependent pathway.     

膀胱癌组织CALD1 mRNA表达水平与临床病理特征和预后的关系分析

摘要 目的：探究膀胱癌组织钙调蛋白结合蛋白（CALD1）信使RNA（mRNA）表达水平与临床病理特征和预后的关系。方法：选取2015年7月-2017年7月于我院收治并确诊的111例膀胱癌患者为研究对象,收集癌组织及癌旁正常组织,采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测CALD1 mRNA在膀胱癌组织与癌旁正常组织中的表达差异,分析CALD1 mRNA相对表达量与临床病理特征的关系。对患者进行5年随访,分析CALD1 mRNA相对表达量与预后的关系。结果：CALD1 mRNA在膀胱癌组织的相对表达量显著高于癌旁正常组织（P<0.05）;CALD1mRNA相对表达量与膀胱癌患者组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关（P<0.05）;111例患者出院后随访5年,4例失访,107例患者获得随访,CALD1低表达组和高表达组的5年总生存率分别为72.34%（34/47）、50.00%（30/60）（P＜0.05）,CALD1低表达组5年总生存率高于高表达组;Cox比例风险回归模型分析显示,组织低分化程度、TNM高分期、淋巴结转移、CALD1mRNA高表达是影响膀胱癌患者预后的危险因素（P<0.05）。结论：CALD1在膀胱癌组织中呈高表达,CALD1mRNA相对表达量与患者组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移及预后相关。     

凋亡抑制基因livin与survivin在乳腺癌中的表达差异

目的探讨凋亡抑制基因livin在乳腺癌发生、发展中的作用及其与survivin基因的表达和乳腺癌生物学行为之间的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测44例乳腺癌组织、40例癌旁正常组织及4个乳腺癌细胞系中livinmRNA和survivin mRNA的表达,并用免疫组化(IHC)EnVision法检测上述组织和细胞中livin和survivin蛋白的表达。结果livin mRNA和survivin mRNA在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为72.7%(32/44)和61.4%(27/44),在癌旁正常组织中的阳性率分别为7.50%(3/40)和5.00%(2/40),二者在癌组织中的表达均显著高于在正常组织中的表达(P<0.01)。livin和survivin蛋白表达情况与mRNA结果相似(P<0.01)。livin和survivin在乳腺癌组织中的表达无显著相关性(P>0.05)。4个乳腺癌细胞系中均有survivin mRNA和蛋白的表达,而MCF-7及MDA-MB-435细胞系中呈阴性表达。survivin基因在伴有淋巴结转移的乳腺癌组织中的表达明显高于无淋巴结转移的乳腺癌组织(P=0.0047),livin在雌激素受体(ER)阴性或者Her2/neu阳性表达的乳腺癌中的阳性率有升高的趋势,但并无显著性差异(P>0.05)。结论livin和survivin基因在人乳腺癌组织中表达上调,提示其可能在乳腺癌发生、发展中起重要促进作用,sur-vivin和淋巴结转移的密切关系表明它的高表达可能反映患者较差的预后。livin和survivin基因一样可能成为乳腺癌治疗中的一个靶基因。     

结直肠癌组织ANP32A、Ataxin-3、FHL1的表达及其与肝转移的关系研究

摘要 目的：探讨结直肠癌组织中酸性核磷蛋白32A（ANP32A）、Ataxin-3及4个半LIM结构域蛋白1（FHL1）的表达及其与肝转移的关系。方法：对120例结直肠癌患者癌组织和癌旁组织中ANP32A、Ataxin-3及FHL1蛋白水平进行检测,分析其阳性表达率。其中44例发生肝转移作为肝转移组,76例无肝转移作为无肝转移组,比较两组癌组织中ANP32A、Ataxin-3及FHL1蛋白阳性表达率,分析结直肠癌肝转移的影响因素,分析ANP32A、Ataxin-3、FHL1蛋白之间的相关性。结果：结直肠癌患者癌组织中ANP32A蛋白阳性表达率高于癌旁组织,Ataxin-3、FHL1蛋白阳性表达率低于癌旁组织（P<0.05）。经单因素分析显示肝转移组患者癌组织中ANP32A蛋白阳性表达率显著高于无肝转移组,Ataxin-3、FHL1蛋白阳性表达率显著低于无肝转移组（P<0.05）,肝转移组患者原发癌中低分化、原发癌浸润深度T3~T4、原发癌有淋巴结转移者构成比显著高于无肝转移组（P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示,ANP32A蛋白阳性表达、原发癌中低分化、原发癌浸润深度T3~T4、原发癌有淋巴结转移是结直肠癌肝转移的危险因素（P<0.05）,Ataxin-3、FHL1蛋白阳性表达是结直肠癌肝转移的保护因素（P<0.05）。Spearman相关分析显示,结直肠癌患者癌组织中ANP32A阳性表达率与Ataxin-3、FHL1阳性表达率呈负相关（P<0.05）,Ataxin-3蛋白阳性表达率与FHL1蛋白阳性表达率呈正相关（P<0.05）。结论：ANP32A蛋白高表达,Ataxin-3、FHL1蛋白低表达与结直肠癌发生及肝转移有密切关系,且以上指标间具有一定相关性。结直肠癌肝转移受多种因素影响,临床诊治中可根据相关因素为患者制定针对性治疗方案。     

Comparison of protein expression profiles of different stages of lymph nodes metastasis in breast cancer

Breast cancer is the most common cancer among women worldwide. Breast cancer metastasis primarily happens through lymphatic system, where the extent of lymph node metastasis is the major factor influencing staging, prognosis and therapeutic decision of the disease. We aimed to study the protein expression changes in different N (regional lymph nodes) stages of breast cancer. Protein expression profiles of breast cancerous and adjacent normal tissues were mapped by proteomics approach that comprises of two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2D-PAGE) and tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) analysis. Calreticulin and tropomyosin alpha 3 chains were the common up-regulated proteins in N0, N1 and N2 stages of breast cancer. Potential biomarker for each N stage was HSP 70 for N0, 80 k protein H precursor and PDI for N1 stage while 78 kDa glucose-regulated protein was found useful for N2 stage. In addition, significant up-regulation of PDI A3 was detected only in the metastasized breast cancer. The up-regulation expression of these proteins in cancerous tissues can potentially use as indicators for diagnosis, treatment and prognosis of different N stages of breast cancer.     

microRNA-221在胃癌中的表达及临床意义

目的:研究microRNA-221及E-cadherin在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:选取哈尔滨医科大学附属四院2014年-2016年收治的的胃癌患者50例,分别取胃癌及癌旁正常组织作为研究组及对照组。分别应用实时荧光定量PCR及免疫组织化学方法检测其中microRNA-221及E-cadherin的表达。结果:micro RNA-221在胃癌组织中的表达较正常组织显著增高(P0.05),E-cadherin在胃癌组织中的阳性表达率较正常组织显著降低。胃癌组织中microRNA-221的表达与患者的TNM分期、淋巴结转移及远处转移具有显著相关性(P0.05),E-cadherin的表达与患者淋巴结转移及远处转移具有显著相关性(P0.05)。胃癌患者中E-cadherin阴性表达者microRNA-221的相对表达量明显高于E-cadherin阳性表达者(P0.05)。结论:microRNA-221在胃癌组织中呈高表达,E-cadherin在胃癌组织中呈低表达,二者在胃癌组织中的表达呈负相关。microRNA-221可能通过影响上皮细胞间充质转化影响胃癌的浸润与转移。