马铃薯晚疫病研究

马铃薯晚疫病是由疫霉(Phytophthora spp.)引起的严重的真菌病.马铃薯晚疫菌因导致马铃薯茎叶死亡和块茎腐烂而成为马铃薯疫灾中危害最大的病原菌,目前关于马铃薯晚疫病的研究方兴未艾.通过对马铃薯晚疫病的描述和菌的分离,分析了马铃薯的抗病机制以及基因工程方面研究进展,并提出建议,以便在育种方面参考.     

马铃薯致病疫霉研究进展

马铃薯致病疫霉(Phytophthora infestans)属卵菌纲(Oomycetes)霜霉目(Peronosporales)腐霉科(Pythiaceae)疫霉属(Phytophthora),是马铃薯和番茄晚疫病病原菌。由于晚疫病对马铃薯生产的毁灭性和严重性,对致病疫霉的研究一直是关注的重点。本文首先对病害引起的症状、发生特点及流行规律进行阐述,对有性生殖发生的遗传规律和多种交配型共存的大环境下病原菌群体结构变异特点进行归纳总结。随着2009年致病疫霉基因组测序的完成,本文比对了疫霉属目前已完成测序各个种的基因组学特点,介绍了致病疫霉在效应子克隆方面的研究进展及线粒体基因组研究现状,阐述了功能基因组学的两个重要技术:高密度遗传连锁图谱(high density linkage mapping)和全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS),及其在挖掘致病疫霉重要功能基因上的应用。本文有助于了解致病疫霉研究热点及后续突破方向,可为深入解析致病疫霉的功能基因及致病机制提供参考,对开发马铃薯晚疫病菌药物靶标及预测病害的大规模流行趋势也具有重要意...     

农业其它

880318促进出土的根际细菌〔专,英〕/K-loeppe,,,J .W.…了PCT patent Appl.WO 8700194。Pub.25 .01 .57。Appl.CA廷86217,filed 02。07 .85〔译自CBA,]987,(4),l了67〕 新的psyehotrophie根际细菌能用于促进农作物,尤其是在寒冷气候开始播种地区的出土。这样的菌标包括一种沙雷氏菌(Ser-rat‘a liguefaeiens)、恶臭假单胞菌(P:eud-。m。朋:夕utida)、荧尤假单胞菌(尸.fl如-reseen:)、产气肠杆菌(Enterobaerer aer-ogenes)以及印度[l十林克氏菌(Be‘jerinck-f a indiea)(杜允)880319通过黑蛋巢菌属、侧耳属和侧抱霉属使稻草富集灰分…     

抗生素和干扰素

320112头抱菌素生物合成酶和甚因在工业上的潜在应用:综述〔会,英〕/Ye五,W.八.…了八nn.八.Y。Aead。Sei犷1090,613一128~1连i〔译自DBA,1991,10(9),91一04938〕 内容如下:(a)工业用户内酞胺生物合成的一37一可能,(b)青霉素和头抱菌素生物合成的酶纯化 和基因克隆;(c)对ACV一环化酶类的科学上的 理解;(d)真菌扩展酶一叛化酶和细菌扩展酶(ex~ pandase)的功能说明,(e)声一内酸胺生物合成 在工业应用的最新进展。列表说明了:纯化的头抱菌素生物合成酶;由枝顶抱Ac”饥o丽“仍“无,梦-sogen。饥、链霉菌战re夕‘o哪梦cese艺a”、l落g仑,,s…     

致病疫霉RXLR效应蛋白相关研究进展

由致病疫霉(Phytophthora infestans(Mont.)de Bary)引起的晚疫病是马铃薯生产中最具毁灭性的病害。为了成功入侵和在寄主植物中繁衍,致病疫霉会向寄主细胞分泌一类RXLR效应蛋白以干扰植物免疫系统。自2005年克隆第一个晚疫病菌RXLR类无毒基因AVR3a以来,国内外学者从RXLR效应蛋白的结构、功能,以及与寄主靶标作用机理等多个方面展开了大量研究。随着高通量测序技术与效应子组学技术的发展,RXLR效应蛋白抑制植物免疫分子机制也取得了显著进展。RXLR效应蛋白的研究有助于揭示致病疫霉与马铃薯互作分子机制,并进一步为马铃薯抗病育种工作提供新思路。主要概述了致病疫霉RXLR效应蛋白的相关研究进展,重点介绍了致病疫霉AVR基因的克隆、定位、变异及功能等方面的最新进展,同时对未来值得关注的研究方向进行了探讨。     

美发现抗马铃薯晚疫病基因

Resource 2003年10卷9期4页报道：已知马铃薯晚疫病是由疫霉(Phytophthora spp．)引起的严重的真菌病。目前美国商业种植的全部马铃薯品种均高度易感马铃薯晚疫病。为了防治这种病害,最近美国威斯康星大学麦迪逊分校的植物病理学教授和美国农业部农业研究署的研究员John Helgeson及其同事已利用基因工程,将从墨西哥野生马铃薯(Solanum bulaocastanum)基因组中分离出来的抗马铃薯晚疫病的单基因,转移于栽培马铃薯。结果证实,这些转基因马铃薯可成功地抵抗多种疫霉的感染。     

环境保护及农业废物利用

920789采用筛选出的土维中固有细菌增进土镶中烃类的降解〔英〕/Veeehioli,G.I.…2 Environ.Poll-ut一1500,67(s),249~255〔译自DBA,1991,10(12),91一07216〕 采用土壤中分解烃类化合物细菌的混合菌群可促进石油化学废料的生物降解。混合培养物是从土壤中分离出来的。通过将1克土壤加到补充有烃类的无机培养基中可以得到富集的培养物。对混合培养物进行了鉴定,系假单胞菌(尸8e“‘。,口“a约FN了了5一5、假单胞菌FN775一i以及产碱菌(AI-caz‘ge,e。)FN775一2。将芳香烃贮存堆底的残留物与土壤(10%w/w)进行混合。经1个月后,在未接种和…     

福建省部分地区马铃薯致病疫霉群体遗传多样性分析

致病疫霉(Phytophthora infestans)引起的晚疫病是马铃薯的一种毁灭性病害。有效控制马铃薯晚疫病需要明确致病疫霉的群体遗传结构特征。采用8对SSR引物对采自福建省福州、长乐、漳州2010年分离的95株马铃薯致病疫霉进行遗传多样性分析。结果共检测出21个等位基因和26个基因型。三个地点致病疫霉菌群体间的平均遗传分化系数FST为0.22,在8个位点中有5个位点的等位基因频率分布差异显著。三个群体的观测纯合度小于期望纯合度,观测杂合度大于期望杂合度,以无性生殖为主。结果表明福建群体的遗传多样性高,群体间的存在较高的遗传分化度。     

烟草疫霉拮抗菌枯草芽孢杆菌21b菌株的分离鉴定及其生物学特性研究

【目的】为了控制烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)引起的烟草黑胫病对烟草生产造成的危害。【方法】采用稀释平板法从贵州省毕节地区烟草根际土壤中分离筛选拮抗烟草疫霉的细菌菌株,然后经形态观察、Biolog鉴定及16S rRNA基因序列分析,对分离菌株进行鉴定,同时测定抗菌谱,单因子变量分析、优化生长条件。【结果】共分离得到44株拮抗烟草疫霉的细菌菌株,其中菌株21b对烟草黑胫病菌菌丝生长的抑制率达78.33%,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。该菌株对烟草青枯病菌(Ralstonia solanacearum)、烟草灰霉病菌(Botrytis cinerea)、烟草赤星病菌(Alternaria alternate)和烟草炭疽病菌(Colletotrichum destructivum)均具有拮抗作用,抑菌圈大小分别为19.5、18.2、14.6和13.4 mm,最佳的发酵条件为:温度30°C、p H 7.0–8.0、装液量12%、盐浓度0.5%。【结论】分离筛选到一株对烟草寄生疫霉有较强拮抗活性的细菌菌株,为进一步开发烟草黑胫病的生防菌剂提供了菌种资源。     

组织与原生质体培养

924483链格抱原生质体释放和再生的最佳条件〔英〕/Car-y,J .W.…了Lett.Appl.Mierobiol一1992,14(3)一100一103〔译自DBA,1992,11 (11),92一06034〕 在含1.2M NaCI、MgCO‘或山梨醇的渗透介质(ZomM MgSO‘、iomM NaPO‘、pHS.s)中悬浮链格抱(AI￡e,:a,￡a alte,:a‘a)SRRC1109菌丝,以备生产原生质体。加入不同组合的水解酶后,将混合物在33℃下轻摇90分钟。从培养20小时的培养物中收集19湿菌丝,将之与Novozy-me234、Driselase和户葡糖普酸酶在1.2M KCI渗透介质中共同温育时结果最佳(4.56十/一。.33x10’原生质体/毫升)。优…     

生物防治因子

真菌寄生菌寡雄腐霉(p.oligandru爪)和土壤放射形土壤杆菌(A.radiob川e:)B6可保护甜菜苗期植株,免于固抱腔菌尸leo:-pora beta。、终极腐霉(P.ultfmum)及其它植物病原菌引起的甜菜黑根。将上述两种微生物同时用于种子处理,可以在不同的气候条件下提供更好的保护,这些气候条件影响它们在植株根际与病原菌的相互作用。在玻管试验中,土壤放射形杆菌抑制终极腐霉和尸.betae,不抑     

致病疫霉PiSAK1的生物学功能分析

【背景】致病疫霉是引起世界范围内马铃薯晚疫病的重要病原菌。Stress-activated protein kinases (SAPKs)是一类胁迫激活的mitogen-activated protein kinases (MAPKs),研究表明真菌SAPKs在调控细胞应答外界胁迫等方面有重要作用。致病疫霉中存在一个SAPK,即PiSAK1,其生物学功能并不明确。【目的】探究PiSAK1在致病疫霉生长发育、抵抗外界胁迫及侵染马铃薯过程中发挥的生物学功能。【方法】利用生物信息学手段分析PiSAK1的特性,通过RT-qPCR分析明确致病疫霉PiSAK1在不同发育阶段及侵染马铃薯不同时期的表达量,最后构建PiSAK1沉默、过表达菌株并测定其各项生物学表型。【结果】PiSAK1具有丝裂原活化蛋白激酶典型的Ser/Thr蛋白激酶催化结构域,并且与其他卵菌的SAPKs同属一个进化分支。致病疫霉PiSAK1分别在休止孢阶段、侵染马铃薯48 h时表达量最高,且0.3 mol/L NaCl及3 mmol/L H2O2胁迫刺激0.5 h后PiSAK1的表达量均显著升高。构建PiSAK1沉默、过表达菌株并测...     

致病疫霉在中国云南的马铃薯田间形成卵孢子*

由致病疫霉Phytophthora infestans (Mont.)de Bary引起的马铃薯和番茄晚疫病是世界性的作物病害,每年均造成巨大的经济损失和社会影响。致病疫霉是异宗配合的卵菌,有两个已知交配型A1和A2,两个相对交配型互作时可进行有性生殖产生卵孢子( Gallegly & Galindo,1958)。过去许多年一直认为致病疫霉在除墨西哥以外的国家中只存在A1交配型,通过产生孢子囊进行无性繁殖。近年来,由于致病疫霉新致病群体的产生以及全球范围的迁移和替代,A2交配型菌株先后在欧洲、美洲、亚洲和非洲的许多国家被发现。A1、A2两种交配型菌株的同时存在,增…     

链格孢霉醇和链格孢霉醇单甲醚产生菌株的筛选

本文对分离自小麦、马铃薯、番茄和茄子上链格孢霉属(Alternaria)2个种(链格孢和茄链格孢)的96个菌株,用枯草杆菌生长抑制试验筛选链格孢霉醇(AOH)和链格孢霉醇单甲醚(AME)的产生菌株,有48株产生毒性作用(占所测菌株的50％)。18株产强、中毒性菌用高效液相色谱分析,有13株产AOH和AME(占所测菌株的72.2％)。链格孢的产毒素菌株率比茄链格孢低。但产毒素含量却是前者明显高于后者。其中产AOH和AME的最高含量,链格孢菌株XA-8分别为280和5140mg/kg,而茄链格孢菌株SA-10分别为95.9和94.3mg/kg。     

生物固氮

920618首落根启菌detD甚因产物(DCTD)在活化detA签因表达时有三个功能区城〔会,英万Gu,B一1 sth Internatl.Cong.Nitrogen Fixation一1990,5。Abs。一E一08 鉴定T首蓓根瘤菌(R吞东名ob云移哪,e乙落乙o名云)dctA、dctB和dctD基因,并进行了序列分析。该基因与豌豆根瘤菌(R.乙e叮“饥‘,o‘a铲“爪)DCTD和其它需占’‘转录调节子同源,表明DCTD具有三个功能区域。构建不同缺失的R。,盯‘卜。“dctD,使其在存在不同报道基因时能在大肠杆菌和左.初叮‘l。“中表达,众而证明了存柑这些区域。DCTD中央区域足以活化dctA基因表达。DCT…     

哈茨木霉SKD-ZX-1的鉴定、发酵及其生防效果

哈茨木霉作为一类重要的生防菌,对蔬菜病害致病菌具有拮抗作用。为确定分离的哈茨木霉SKD-ZX-1的生防效果,利用气质联用技术对菌株的发酵液进行测定和分析,利用宏基因组测序方法分析该菌株对番茄根腐烂病土壤中的细菌菌群的影响,并且采用平板对峙培养法对该菌株与链格孢菌和茄链格孢菌进行了拮抗实验。结果显示,哈茨木霉SKD-ZX-1发酵液中有邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯等抑菌成分,并且其发酵液增大了土壤中细菌菌群的种类,与对照组相比,实验组肠杆菌属提高了46%,而假单胞菌属和梭菌属降低了5.28%和36.1%。该哈茨木霉对两种病原菌的抑制率均达到100%,拮抗系数达Ⅰ级。研究表明哈茨木霉SKD-ZX-1对链格孢菌和茄链格孢菌具有显著的抑制作用,其发酵液具有一定的抑菌效果。     

基因诱变、重组、克隆

920441Re几公bac‘e,‘。。saloo丽,a,u二DNA片段的克隆〔英〕/Etehegaray,J.P.…f FEMSMierobiol.Lett。一1991,79(i)一61~64〔译自DBA,1991,10(10),91一05433〕 构建了Ren畜baete于云拙仍召al仍on坛砚ar饥重组基因库,以分离用于检测大马哈鱼肾致病菌基因序列的探针DNA。消除与Sau 3A限制酶切的杀缝气单胞菌(Aeromo.as吕al仍0.‘e云‘a)ATCC33658、Ye,s玄介‘ar留e无er云ATCC29473、Y。了比劣:e八、小肠结肠炎耶尔一森氏菌(Y。e耐e,。-co乙“‘ca)、弗氏志贺氏菌(召h名gella fle劣:e-,云)、伤寒沙门氏菌(Ba乙mooe乙王a切尹而…     

ДВΥСТВОРЧАТЫЕ ΜОЛЛЮСНИ-МРΑССИЕЛЛЫ В УГЛЕНОСНЫХ ОТЛОЖЕНИЯХ КУЗБΑССΑOT]]OHEH HFIX H Y35ACCA

Po八M俨ass健e忍乙a Ragozin6曰刀yeTaHoB几eH B 1935 ro及y(JI.A.Paro3HH,一935,eTP.54)Ha MaTePHa几e,]IPOHcxo八习班eM“3a刀blkaeBcKo益no及cBHT曰HH水He6a几axoH-eKo益eB”T曰玲ro一BoeToqHo沂qaeTM KysHeuRoro 6aeee众Ha,oTKy八a nePBoHaqa几bHo6bl几H onHCaH曰: 1 .M.饥ag”艺for饥a Ragozin 2.M.犷乞d乞e锐Za Ragozin 3.M.910犷坛osa Ragozin 4 .M.oblonga Ragozin 5 .Mrass艺ella(?)sP· B To认水ePa6oTe Hs oT几。戚eHH益,oTHoe只坦“xe只kH山aHoBo一nPoMe袱y,o甘Ho益no八CBHTe,nPHBO及只T…     

六种疫霉菌体可溶性蛋白质和酯酶的聚丙烯酰胺凝胶平板电泳研究*

本文对槐生疫霉(Phytophthora robinicola)、掘氏疫霉(P.drechsleri)、樟疫霉(P.cinnamomi)、烟草疫霉(P.nicotianae)、棕榈疫霉(P.palmivora)及辣椒疫霉(P.capsici)等6种疫霉81株菌菌体可溶性蛋白质和酯酶进行了聚丙烯酰胺凝胶平板电泳研究。结果指出,种间蛋白质图谱差异明显,种内菌株间基本一致。就酯酶图谱来说,种内菌株间存在一定差异,但种间差异更为显著。因此,本试验进一步支持槐生疫霉新种的建立。同时表明,菌体可溶性蛋白质电泳图谱在疫霉种的鉴定和分类上具有重要意义,而酯酶电泳图谱在一定程度上也有助于疫霉种的研究。     

疫苗

890948培养条件对铜绿假单胞杆菌产生外毒素A的影响〔会,英〕/Blumentals,1.1.…厂1\ 110.N.丫’.八ead.Sei一1987,506一663一668〔译自DBA,1988,7(26),88一07947二 测定了影响铜绿假单胞杆菌(尸:eudo-,:o:。:。e::夕i。05。)(PA一103)产生外毒素入(一利‘可能的类毒素疫苗)1’肉因子。将细胞培养于含lmM人侄g十一升和1.l‘Mf,’。的限定培养基中直至达静止期为止。收集和水洗细JJIs后重忿于含o.11llMMg一丫肉些助倪培养甚中,]]l一l入jlnMMn;十和C。一J青外毒素产量比不加金属的降低50%。加25即MC扩语’使外毒素产量降低66%。s00lt…