粪菌移植治疗艰难梭菌感染的研究进展

艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)是院内抗生素相关性腹泻的最重要因素之一,其主要临床表现包括血便、腹泻、中毒性巨结肠、伪膜性肠炎等。近年来,CDI发病率、复发率、死亡率和治疗费用均明显增加,但其各种治疗方法均有局限性,尤其是抗生素治疗复发性艰难梭菌感染已面临许多棘手问题。目前证实肠道菌群失调和CDI感染关系密切,肠道菌群紊乱后导致艰难梭菌过度繁殖并释放毒素,可导致艰难梭菌感染。粪菌移植作为重建肠道菌群的重要方式,已成为复发性、难治性艰难梭菌感染最有效的治疗方式之一,不良反应极少。本文就国内外粪菌移植治疗艰难梭菌感染的研究进展作一综述。     

艰难梭菌相关性腹泻的治疗进展及对我国的启示

艰难梭菌相关性腹泻（Clostridium difficile associated diarrhea,CDAD）是艰难梭菌感染（Clostridium difficile Infection,CDI）引起的一种机体严重疾病。随着艰难梭菌感染率的增加及高毒力株027／NAP1／BI的出现,导致该病在全球特别是北美、及欧洲等地区爆发性流行,对于该病的控制引起全球研究者的高度重视。本文就其治疗进展进行综述,并结合我国实际分析该病防治中存在的问题并提出建议。     

艰难梭菌实验室快速鉴定方法检验效能的比较

目的评价3种艰难梭菌实验室鉴定方法的快速性及准确性。方法 2013年6月至2013年11月,收集136名ICU患者共248份标本进行24 h、48 h厌氧培养,并进行鉴定,同时对大便标本提取DNA进行tcd B毒素基因检测。以48 h培养结果为参考标准,评价24小时培养法和PCR扩增tcd B基因法鉴定艰难梭菌的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果 136名ICU发生腹泻的患者中,11名患者共有12份标本48 h培养为艰难梭菌阳性,艰难梭菌感染率为8.09%(11/136),标本阳性率为4.84%(12/248)。24小时培养法及PCR扩增tcd B基因法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为75.00%、100%、100%、98.74%和83.33%、99.15%、83.33%、99.15%。结论提取大便DNA tcd B毒素基因是最快速、灵敏度和特异度均较高的方法;48小时培养法时间相对较长,但稳定可靠,并可以保留菌株进行后续试验;24小时培养法,时间短、简便但会漏诊某些阳性病例。     

酪酸梭菌对艰难梭菌感染的防治研究

目的:观察酪酸梭菌对艰难梭菌感染的防治效果.方法:用艰难梭菌产毒株人工感染BALB/C小鼠,感染前后分别用酪酸梭菌进行预防与治疗,并检测盲肠内容物细胞毒性和进行肠黏膜病理观察.结果:酪酸梭菌不能预防艰难梭菌的感染,但在艰难梭菌感染后则能明显降低艰难梭菌的产毒力和盲肠黏膜的病理损伤.结论:酪酸梭菌对小鼠艰难梭菌感染有明显的治疗作用.     

具有临床代表性的艰难梭菌感染小鼠稳定模型的构建

目的构建临床代表性好、稳定性佳的艰难梭菌感染小鼠模型,为艰难梭菌感染相关疾病提供研究工具。方法选择C57BL/6、BALB/c、昆明小鼠,经抗生素诱导后,分别予以不同浓度(108 CFU/mL~10~(10) CFU/mL)的临床分离菌株混悬液灌胃,观察不同品系小鼠不同时间点腹泻、全身情况及结肠组织病理学变化。结果灌菌后,BALB/c小鼠10~(10) CFU/mL浓度组全部出现腹泻,死亡率为16.7%;其他实验组小鼠腹泻程度差异较大或仅部分出现轻度腹泻。腹泻小鼠表现为稀烂便甚至水样便和湿尾现象,体重减轻,肠道病理显示结肠黏膜充血水肿伴炎性细胞浸润。结论经5种抗生素灌胃9d+克林霉素腹腔注射诱导,10~(10) CFU/mL艰难梭菌活菌混悬液灌胃后构建的BALB/c小鼠艰难梭菌感染模型最稳定。     

兰州地区腹泻患者艰难梭菌的感染状况调查

目的调查兰州地区腹泻患者中艰难梭菌的流行特点,揭示国内艰难梭菌感染的现况。方法通过细胞毒检测试验和酶联免疫吸附试验对206份临床粪便样品进行毒素检测。结果 206份粪便滤液经细胞毒检测有26份样品使非洲绿猴肾细胞（vero细胞）圆缩化,确认含有艰难梭菌毒素;经酶联免疫吸附试验有28份为阳性,其中23份与细胞毒检测结果一致,与细胞毒试验的符合率为88.5%。结论兰州地区住院腹泻患者中艰难梭菌感染率约为12.62%。     

艰难梭菌基因编辑技术研究进展

艰难梭菌Clostridioesdifficile是一种革兰氏阳性、产芽孢、专性厌氧细菌,是医院相关性腹泻的主要病原体。近年来,随着强毒株的出现(如核糖体027型),其流行性与致死率逐年上升,因此对艰难梭菌生理、生化特征及致病机制的研究受到广泛重视。艰难梭菌生理、生化特征及致病机制研究又以建立其稳定、高效的基因编辑方法为必要前提。借助基因编辑工具,研究者可以扰动艰难梭菌核心生物学过程,在分子水平研究其分子致病机制。如Clos Tron技术在艰难梭菌毒素A (Toxin A)和毒素B (Toxin B)与其致病力关系的研究中起到了关键作用。文中以时间为主线综述了艰难梭菌基因编辑技术的发展历程和最新进展,并对艰难梭菌基因编辑技术未来的研究方向进行展望。     

艰难梭菌引起假膜性结肠炎及腹泻的实验室诊断方法

<正>最近十余年内,对艰难梭状芽孢杆菌引起的,死亡率很高(高达22—44%)的假膜性结肠炎和抗菌缔合性腹泻,进行了广泛的实验室诊断研究。这些旨在改进细菌学方法的研究,包括培养基和其他条件(病原体的生物学特性)的深入研究,以及粪便中毒素的检验和与特异性血清反应中培养液的检验。 艰难梭状芽孢杆菌本身是孢子形成的革兰氏阳性杆菌,生成集合体外毒素(肠毒素-毒素A和细胞毒素-毒素B)。其生长温度为25—45℃,最佳温度为30℃。在5—20℃条件下,艰难梭状芽孢杆菌在粪便中能生存4到10昼夜。营养细胞在氧气作用下,可继续生存15分钟;有浓厚的培养基时,在由     

艰难梭菌研究现状

艰难梭菌(Clostridium difficile,CD)是产芽胞革兰阳性厌氧菌,产毒素艰难梭菌可导致艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)。产毒素艰难梭菌已被公认是抗菌药物相关性腹泻最常见的病原体,也是发达国家最常见的导致住院患者腹泻感染的原因之一。高毒力菌株导致全世界范围内CDI的发病率和死亡率增加。如何快速而准确地检测CD一直是备受关注的问题,国内外多推荐两步法和三步法进行检测。艰难梭菌治疗的一线用药是甲硝唑、万古霉素以及非达霉素,应用粪便微生物移植(faecal microbiota transplantation,FMT)也可作为治疗轻度或严重复发CDI(recurrence Clostridium difficile infection,rCDI)的可选方法。艰难梭菌的芽胞能抵抗不良环境,但抗菌药物的使用,医院环境的复杂性和医务工作者的手等因素会导致艰难梭菌易于传播,因此医疗机构应加强艰难梭菌的预防。本文主要对艰难梭菌的流行病学、致病机制、检测及治疗进行综述。     

艰难梭菌粘附的研究进展

艰难梭菌粘附的研究进展厦门大学生物系厦门３６１００５王隽,苏文金“艰难梭菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）是重要的肠道致病厌氧菌。它是抗生素疗法所引起的伪膜性结肠炎的致病菌,并且是引起抗生素相关的腹泻的最主要病原菌之一,同时还与一些非抗生...     

住院腹泻患者艰难梭菌快速检测结果分析

目的 了解住院腹泻患者艰难梭菌带菌情况,为抗生素相关腹泻患者的诊断和治疗提供参考。方法 收集2015年9月至2016年8月住院腹泻患者粪便标本163份,用艰难梭菌快速检测试剂盒检测艰难梭菌。结果 艰难梭菌检出总阳性率为20.86%（34/163）,其中春季16.67%、夏季15.79%、秋季17.86%、冬季27.87%,经比较差异无统计学意义（2=2.943,P＞0.05）;成人粪便标本阳性率为22.52%（25/111）,儿童粪便标本阳性率为17.31%（9/52）,差异无统计学意义（2=0.583,P＞0.05）;男性粪便标本阳性率为21.69%（18/83）,女性粪便标本阳性率为20.0%（16/80）,差异无统计学意义（2=0.202,P＞0.05）;艰难梭菌阳性患者抗菌药物平均使用天数为12.74 d,阴性患者为8.21 d,差异有统计学意义（t=－7.81,P＜0.01）。结论 住院腹泻患者艰难梭菌阳性率高低与抗菌药物使用时间长短有关。     

艰难梭菌感染与大肠癌及大肠腺瘤的相关性分析

目的 分析艰难梭菌感染与大肠癌及大肠腺瘤的相关性,为临床预防及治疗肠道肿瘤提供新思路。方法 收集2016年1月至2017年6月于甘肃省人民医院就诊的134例大肠癌患者、52例大肠腺瘤患者及100例健康对照者的粪便标本及临床资料,对粪便标本进行细胞毒性试验检测,分析大肠癌及大肠腺瘤与艰难梭菌感染的相关性。同时分析艰难梭菌感染与大肠癌临床特征及部分样本免疫组化（Her-2、P53、CDX2、CD56及Ki-67）结果的相关性。结果 （1）结直肠癌组检出13例艰难梭菌感染者（9.70%）,大肠腺瘤组检出2例艰难梭菌感染者（3.85%）,对照组未检出艰难梭菌感染者。结直肠癌组艰难梭菌感染率明显高于大肠腺瘤组及对照组（2=11.0953,P0.05）。（3）CDX2的表达与艰难梭菌感染具有相关性,CDX2阴性结直肠癌患者艰难梭菌感染率明显高于CDX2阳性患者（20.8% vs 2.8%,2=8.5224,P0.05）。结论 艰难梭菌感染与大肠癌的发生具有相关性,特别是与大肠癌病理分期及CDX2表达存在相关性。艰难梭菌感染与大肠腺瘤之间无显著相关性。     

The cell wall proteins of Clostridium difficile

Abstract The proteins which can be released by 6 M urea treatment from the cell walls of Clostridium difficile represent the major cell surface proteins. In the 5 strains examined there are one to three of these major proteins. They appear to be strain-specific antigens being detected in immunoblots only with homologous antiserum. A common cell-surface protein of M _r 73 kDa has been identified as a minor component of the urea extract.     

新鲜粪菌移植在治疗艰难梭菌感染性腹泻方面的疗效及安全性的Meta 分析

目的 应用循证研究方法评价新鲜粪菌移植在治疗艰难梭菌感染相关性腹泻方面的效果及安全性。 方法 计算机检索中国生物医学文献数据库、中国学术期刊全文数据库、万方数据库、 PubMed、Embase、Web of Science、The Cochrane Library数据库,搜集关于新鲜粪菌移植治疗艰难梭菌感染的随机对照实验,检索时限均为建库至2019年7月30日。由2名研究者按照纳入和排除标准进行文献筛选、数据提取和质量评价,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。 结果 最终纳入7个RCT,共543名患者。Meta分析结果显示:新鲜FMT比传统方法在治疗CDI引起的腹泻方面更有效(OR=6.70,95%CI:1.64～27.43,P=0.040),敏感性分析显示:此结果敏感性较低,结果较为稳定可信。多次输注方式比起单次输注在治愈率方面更显优势(OR=-0.09,95%CI:0.04～3.13,P结论 新鲜粪菌移植能明显提高艰难梭菌感染性腹泻的治愈率,且在不同输注方式方面,多次输注更能提高治愈率,且不良反应较少,与FTM无直接关系,有一定的临床推广价值。     

难辨梭菌性肠炎与肠菌群失调的关系

本文对11例难辨梭菌性肠炎(CDEC)患者的粪便进行10种肠道菌的定量分析,并与20例其他原因腹泻病人和22例健康成人的肠菌比较。结果表明CDEC病人的粪中大肠杆菌和双歧杆菌明显低于两对照组,其他菌类与对照组无明显差别,提示大肠杆菌和双歧杆菌的减少在CDEC发病中起重要作用。此外,我们对CDEC病人发病前所用抗生素作了统计分析,结果发现:使用较多的有庆大霉素、氨苄青霉素和先锋霉素     

Characterization of immunogenic p230 as the toxin A of Clostridium difficile

Abstract For the identification of toxin A of Clostridium difficile , a 2-dimensional gel system was used. In its first dimension, samples were separated in the absence of reducing and dissociating agents, conditions which maintained the activity of the enterotoxin. This was followed by reduction and dissociation in the second dimension where a 230 kDa polypeptide was electroeluted. Rabbits were immunized with polyacrylamide gel slices containing entrapped native toxin A and the denatured 230 kDa protein. As revealed by immunoblotting, neutralizing antisera derived from native protein samples recognized the native toxin, the denatured 230 kDa protein and another polypeptide of about M _r 35 000. Using both types of antisera as probes the pI of the enterotoxin was about 5.9. Preliminary evidence suggests that the enterotoxin is a multimeric protein of 230 kDa and 35 kDa subunits.     

Production of an enterotoxin different from toxin A by Clostridium difficile

Abstract Clostridium difficile has been demonstrated to produce at least two toxins: an enterotoxin (toxin A) which elicits haemorrhagoc fluid accumulation in the rabbit ileal loop (RIL) test and a potent cytotoxin (toxin B). We report the isolation of an enterotoxic factor inducing a positive response in the RIL test without haemorrhage. This factor was separated by ion-exchange chromatography and its molecular weight, as estimated by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, was about 45 000.     

Diarrea asociada a Clostridium difficile en el anciano: nuevas perspectivas

Infection due to Clostridium difficile is currently the main cause of hospital acquired gastrointestinal disease. Its prevalence in the elderly population is higher due to there being many associated risk factors in this age group, such as comorbidity, frequent exposure to the healthcare or residential home setting, immunosenescence, greater consumption of antibiotics, and antiacids. The diagnostic techniques have notably improved in the last few years, which could also account for an increase in its diagnosis. The new expert consensus recommendations propose stratifying the clinical situation of the patient in order to choose the treatment option. Therapeutic options have recently been included in the new Clinical Guidelines, such as flidaxomicin or fecal transplants, with encouraging results, particularly for the control of frequent recurrences.