全血γ-干扰素释放试验在结核诊断中的应用价值

目的:评价全血γ-干扰素释放试验在结核病中的诊断价值。方法:将173例疑似结核病患者分为临床明确诊断肺结核63例(肺结核组)、肺外结核43例(肺外结核组)、排除结核67例(非结核组),观察各组γ-干扰素释放试验阳性率。结果:肺结核组、肺外结核组阳性率分别为85.7%(54/63)和88.4%(38/43),显著高于非结核组11.9%(8/67)(P0.01);诊断灵敏度为86.8%,特异度为88.1%。结论:全血γ-干扰素释放试验具有较高灵敏度和特异度,可用于肺结核及肺外结核的辅助诊断,适合临床推广使用。     

干扰素-γ释放试验在结核病诊断中的价值

<正>结核菌素皮肤试验(tuberculin skin test,TST)是用于检测潜伏结核感染(latent tuberculosis infection,LTBI)的传统方法.自从干扰素-γ释放试验(interferon-γrelease assay,IGRA)进入临床应用之后大有取代TST之势.IGRA是在体外检测T细胞经结核特异性抗原刺激之后产生和释放干扰素-γ能力的免疫学技术,藉此判断细胞介导的免疫反应.国际上广泛使用的IGRA有2种,即4澳大利亚产的Quanti FERON-TB Gold In-Tube(QFT-GIT)和英国产的T-SPOT.TB.目前在我国各地医院应用最为普遍     

γ-干扰素对治疗获得性免疫缺乏综合症也有希望

间白细胞素-2对治疗获得性免疫缺乏综合症(AIDS)的可能性已宣传得非常多。但是,现在康乃尔大学医学院Henry W. Murray的实验室研究表明,γ-干扰素也许能为AIDS病人重建免疫系统。AIDS病人免疫系统的破坏使他们不能抵御几乎所有的病毒和细菌感染。这种病人免疫系统的一个缺陷就是一些淋巴细胞(T-细胞)不能产生γ-干扰素。 Murray的实验显示由Genetech公司生产的实验室用γ-干扰素能激活巨噬细胞,     

脑脊液腺苷脱氨酶和干扰素-γ水平在结核性脑膜炎中的诊断价值

目的:探讨脑脊液腺苷脱氨酶和干扰素-γ水平在结核性脑膜炎中的诊断价值。方法:选取2012年6月-2014年6月期间于我院进行治疗的结核性脑膜炎患者50例作为研究组,同期健康体检者50例作为对照组1,50例非结核性脑膜炎者作为对照组2。检测脑脊液中腺苷脱氨酶和干扰素-γ水平,并进行比较。结果:研究组患者脑脊液中腺苷脱氨酶和干扰素-γ水平分别为(22.45±4.23)U/L和(36.45±13.56)ng/L;对照组1患者脑脊液中腺苷脱氨酶和干扰素-γ水平分别为(16.32±3.24)U/L和(12.78±2.67)ng/L,对照组2患者脑脊液中腺苷脱氨酶和干扰素-γ水平分别为(7.48±4.01)U/L和(13.25±2.89)ng/L,三组比较差异有统计学意义(P0.05),其中研究组患者脑脊液中腺苷脱氨酶和干扰素-γ水平显著高于对照组1和对照组2,两两比较差异均有统计学意义(均P0.05)。结论:脑脊液腺苷脱氨酶和干扰素-γ在结核性脑膜炎患者中具有诊断价值,值得推广应用。     

北极狐γ-干扰素cDNA的克隆、表达及活性测定

为研究狐γ-干扰素的生物学活性,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从北极狐外周血淋巴细胞中扩增出γ-干扰素(VuIFN-γ)cDNA.序列分析表明VuIFN-γcDNA全长501 bp,编码23个氨基酸的信号肽和144个氨基酸的成熟肽蛋白,与已发表的银黑狐和犬IFN-γ核苷酸序列同源性为99.8%和99.4%;氨基酸同源性均为100%.应用原核表达系统高效表达北极狐γ-干扰素成熟肽蛋白,SDS-PAGE和Western blotting分析表达的融合蛋白分子量约为19 kD,以不溶性的包涵体形式存在.重组蛋白经纯化和复性,在Vero和MDCK细胞上可明显抑制VSV病毒的复制,并测出北极狐重组γ-干扰素的活性单位分别为1.0×106 u/mg和1.56×105 u/mg,为进一步开发基因工程狐干扰素奠定基础.     

重组中国汉族人源γ-干扰素的纯化和鉴定

在E.coli中高表达的中国汉族人源γ-干扰素是以包涵体的形式存在的,包涵体经各种溶液洗涤后,用8 mol/L尿素裂解,裂解上清在8 mol/L尿素存在下,经离子交换柱层析和凝胶过滤两步纯化,得到纯度大于95%的γ-干扰素,稀释复性后,其比活为5.5×10⁵ U/mg. 激光解析电离质谱分析表明,中国汉族人源γ-干扰素的分子质量为17.32 ku,其N端序列与Gray等报道的γ-干扰素N端序列一致.中国汉族人源γ-干扰素的氨基酸组成分析结果也与其理论值相吻合.     

干扰素-γ研究进展

干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)是一种具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的细胞因子,主要由活化的T细胞和NK细胞产生。IFN-γ对机体免疫系统具有强大的调节作用,是机体发挥免疫功能、清除体内病原体不可缺少的成分。因此,IFN-γ在疾病的诊断、治疗和疫苗免疫效果检测等方面起着重大作用,是现代分子生物学、免疫学和临床医学研究的热点之一。对干扰素-γ产生、分子结构、生物学活性及作用机制等方面做以下简要综述。     

印度尼西亚源食蟹猴干扰素-γ基因的克隆和序列分析

目的获得印度尼西亚食蟹猴的干扰素-γ基因,为常用实验猕猴干扰素-γ的基因工程生产奠定基础。方法根据GenBank上公布的恒河猴干扰素-γ基因序列设计特异性引物,从印度尼西亚食蟹猴的外周血液中分离单核淋巴细胞,利用Trizol试剂,提取淋巴细胞的总RNA,通过RT-PCR的方法获得干扰素-γ基因片段,并对该片段进行克隆、鉴定和序列分析。结果扩增到一498bp的目的片段,经序列测定证实为印度尼西亚食蟹猴的干扰素-γ基因,与恒河猴、人及狒狒的干扰素-γ基因相比,同源性分别为100%、96%、99%。结论常用的两种实验猕猴食蟹猴与恒河猴的干扰素-γ基因完全相同。     

干扰素-γ对喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响

体外培养的人喉癌细胞系Hep-2细胞用10 ng/ml干扰素-γ处理不同时间后,利用细胞计数、细胞凋亡-DNA Ladder分析及半定量RT-PCR方法,探讨干扰素-γ对Hep-2细胞增殖及凋亡的影响并初步分析其作用分子机制。结果显示,与不处理对照细胞相比,干扰素-γ处理后第2天起Hep-2细胞增殖明显变慢;细胞凋亡分析显示,干扰素-γ处理后Hep-2细胞基因组DNA电泳图谱呈梯状分布;半定量RT-PCR分析显示,干扰素-γ处理诱导Hep-2细胞IFI16基因表达。结果表明,干扰素-γ抑制Hep-2细胞增殖诱导Hep-2细胞凋亡,其机制可能与干扰素-γ诱导IFI16基因表达有关。     

T SPOT TB技术用于结核的辅助诊断

近年来,我国结核病的发病率有上升趋势,临床上经常会遇到一些症状不典型的结核病和肺外结核病,而目前可用于诊断结核病的方法有限,同时又缺乏快速敏感的实验室技术,为结核病的早期诊断与治疗带来困难.酶联免疫斑点法(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)技术是一种新型的免疫酶技术,从单细胞水平检测分泌抗体细胞或分泌细胞因子细胞[1].由ELISPOT发展而来的T SPOT TB(结核感染T细胞斑点试验)技术用于检测结核感染后特异性T细胞分泌的γ干扰素(IFN-γ),并据此结果判断是否感染结核.