基于Photoshop 和计数软件精准计数平板上菌落的新方法

正"菌落总数"是农业、食品、医药卫生等行业进行质量检测的重要指标之一,目前常规的菌落计数方法是肉眼观察平皿逐个计数,需要花费较多的时间和精力[1-2]。本文推荐一种简便的平板菌落计数方法,经过使用和验证,与目测直接计数法相比,其计数结果更加准确,且效果明显优于菌落自动计数仪计数结果。现将方法介绍如下。     

Xs-800i分析仪血小板计数警示与手工法复查的相关性分析

目的:探讨运用Xs-800i分析仪进行血小板计数出现警示和提示性信息时,与手工法计数及显微镜观察血小板形态复核的相关性.方法:使用Xs-800i分析仪检测标本,对血小板计数有警示的标本,采用手工法进行血小板计数和显微镜观察,结合分析仪计数及直方图进行相关性分析.结果:仪器法血小板计数出现警示时,检测结果与手工法计数结果差异较大,显微镜可观察到红细胞碎片、血小板聚集、巨大血小板、小红细胞等.结论:运用Xs-800i分析仪进行血小板计数出现警示及提示性信息时,应采用手工法及涂片染色镜检对标本复检,综合手工计数与显微镜形态观察结果作为最终检查结果.     

膜过滤细胞直接计数新方法

介绍了两种膜过滤细胞直接计数新方法,即不透明滤膜的金相显微镜细胞直接计数法和透明滤膜的生物显微镜细胞直接计数法的基本原理、仪器设备、分析和计算方法,并且将此方法与荧光显微镜细菌计数、血球计数板等方法进行了比较。实际计数结果表明,两种膜过滤细胞直接计数法配合了独特的酸碱处理法以分散聚团细胞,用于非环境样品细胞浓度的测定具有快速准确简便的特点。此外,该方法基本不受细胞大小的影响,除了适用于体型较大的藻类、酵母菌的快速计数以外,还可以清晰地分辨诸如光合细菌这样体积较小的细菌。     

激光共聚焦显微镜在肿瘤免疫治疗检测中的应用

目的:通过激光共聚焦显微镜对肿瘤生物治疗后患者的外周血淋巴细胞进行亚群计数,为生物治疗后外周血淋巴细胞无法分群的肿瘤患者提供新的监测免疫功能状态的方法。方法:收集35例肿瘤生物治疗后患者的外周血标本,通过激光共聚焦显微镜和流式细胞仪两种方法分别对患者外周血淋巴细胞亚群进行分类计数。结果:流式细胞仪和激光共聚焦显微镜同时分类计数的患者外周血细胞标本30例,两种方法在检测CD3、CD3~+/CD4~+、CD3~+/CD8~+、CD3-/CD16~+56~+、CD3-/CD19~+细胞时均无统计学差异(P值0.05);5例流式细胞仪无法将患者外周血淋巴细胞分群的样本,通过激光共聚焦显微镜可以进行分类计数。结论:激光共聚焦显微镜亦可以用于外周血淋巴细胞的分类计数。     

使用血细胞计数板测定微生物数量实验的改进

血细胞计数板是微生物数量测定实验所使用的特制载玻片。通常做细菌、酵母菌等数量测定实验时,先是让学生在显微镜下找到血细胞计数板上的方格网及其计数室,认识计数室的构造,之后再进行加样、计数等实验步骤。然而在实验中发现,由于构成方格网的线条加工的非常细而浅,且无色透明。     

乳腺肿瘤AgNORs多参数定量分析的意义

核仁组织区相关蛋白（AgNORS）是一种与细胞增殖有关的物质,其观察手段一直是光镜下人工计数和目测分型为主,获得的信息量少,而且易受主观因素的影响。为改变此状况,我们尝试用图像分析仪对ag－NORS的数目、面积、灰度、光密度等4大类11种参数进行了定量分析,并就各参数变化的意义做了探讨。材料与方法1．临床病理资料：1995年4月一1996年1月山东医科大学附属医院手术切除的新鲜乳腺肿瘤组织60例。其中良性病变5例,乳腺癌55例。乳腺癌中Ⅰ级癌10例,Ⅱ级癌33例,Ⅲ级癌12例。2．AgNORS观察方法：2．1．目测分型根据1995年10月修…     

胸腹水内异形间皮细胞的鉴别方法研究

在胸腹水脱落细胞学检查中,细胞核直径测量、核浆比值测定以及核仁计数,这三种方法所得实验数据,有助于异形间皮细胞的鉴别。取新鲜胸腹水抗凝标本10ml,以每分钟2000转离心5分钟,将沉淀物制片4张。MGG复合染色(瑞氏染粉1克,姬姆萨染粉0.5克,加入500ml甲醇溶液,置37℃温箱内,每日振摇2～3次,一周后即可使用)待涂片自然干燥后,加上述染液染1分钟,再以等量pH6.8的磷酸盐缓冲液混合复染5～8分钟,核仁计数染3～5分钟,水洗。选择好的染色涂片于光学显微镜配接目测微计进行数据分析。核直径测量法:在涂片上选择适合部位测定细胞核直径,核最大直径与最小直径的平均值为该细胞核直径,每例随机测量50～100个细胞,求出     

新的酵母细胞自动计数仪

BioScience Technology 05／2005（增刊）10页报道：美国新不伦瑞克科学公司最近推出了一种可以在30秒内自动计数酵母细胞的新的仪器,从而结束了手工计数酵母细胞的历史。与原先可以自动计数哺乳动物细胞的核计数仪相似,这种新的可用于计数酵母细胞的YC-100型核计数仪,包含荧光显微镜、CCD照相机和整合影像分析软件,可快速而准确地对酵母细胞进行计数。它可以根据DNA在数秒钟内进行细胞计数,     

应用深度学习分割光学显微镜下的细胞图像

目的 为了在细胞培养过程中便捷地分析细胞的数目和形态.方法 本文将深度学习应用到细胞识别中,实现了一种可以通过普通光学显微镜拍照,并直接在培养皿中进行细胞识别计数的方法.结果 通过构建U-Net网络结构,并对贴壁细胞和悬浮细胞图像进行标记训练,来实现贴壁细胞和悬浮细胞的分割计数.同时,用该算法绘制细胞生长曲线以及计算抑...     

"采集和测算空气中的尘埃粒子"实验中的几处改进

1)课本上建议在载玻片上画边长为2 mm的小方格,将其放在显微镜下观察计数,这样尽管利用最小的目镜和最小的物镜,还是看不全一格,数出的尘埃粒子数量不准确,可能会出现重复计数或漏计数而数错,出现较大误差。笔者在实验中作了以下改正:将边长为2 mm2的方格改为1 mm的方格,在低倍显微镜下1 mm2的方格则可见一到两格,这样数出的尘埃粒子就不会出错了。     

生物图绘制法(续)

5.应用显微量尺绘图法——在显微镜的接目镜中,放入显微量尺——接目测微尺——可以测出视野中物象各部位的比例长度。若先在绘图纸上画成若干个等大的方格(或用方格纸),然后按照显微量尺的若干格度比作纸上的一个方格来进行描绘。这样,标本中各部分的大小形状,都可以按比例绘出。若果你们的实验室备有方格的显微量尺,工作更为便利。根据有些人的经验,绘图用方格纸,以每格7.5毫米大小的较为合用。因此,平时可按这尺度预先制备。6.应用幻灯绘图法——有关组织胚胎等切片以及其他各种显微镜标本,均可利用显微镜绘图幻灯将视     

不同种类魔芋的色素观察

为探索魔芋中色素的含量与分布,采用目测和显微镜对4个种类的魔芋进行观察研究。结果显示,红魔芋、黄魔芋中的色素最多,花魔芋次之,白魔芋最少。色素体呈环状,大小为10~25μm,主要分布在叶片的栅栏组织、海绵组织和薄壁细胞中。     

动物受精生物学的近代概念（一）精子运动的结构基础

大多数动物精子的尾巴是一根鞭毛,借助它的摆动进行游泳活动。虽然早在上个世纪就已经在普通的光学显微镜下发现精子的鞭毛运动,但对其运动形式及结构基础的认识却进展很慢,主要由于精子鞭毛摆动的频率很高,达到每秒钟60次,难以目测。另外,精子的鞭毛轴,即轴丝(axoneme)很纤细,其内部基本组成如微管(microtubule)的直径仅为25毫微米,远远超出光学显微镜的分辨范围,直至本世纪中     

应用双光子显微镜和流式细胞仪定性及定量确定小鼠巨噬细胞的吞噬功能

建立了流式细胞仪和双光子激光共聚焦荧光显微镜进行定性和定量检测小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的方法,并同传统光学显微镜细胞化学染色观察方法相比较,探讨其检测巨噬细胞吞噬效应的优越性。常规方法获取小鼠腹腔和脾脏巨噬细胞,制备巨噬细胞悬液。常规制备鸡红细胞,计数并调整活细胞数,用5-二醋酸羧基荧光素琥珀酸单胞菌酯(5-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)染色,与巨噬细胞共温育一定时间后,小鼠巨噬细胞特异性荧光抗体F4/80标记巨噬细胞。应用流式细胞仪检测巨噬细胞中CFSE阳性百分率来表示巨噬细胞吞噬率;应用双光子显微镜观察被吞噬的CFSE阳性鸡红细胞动态分布情况。同时,采用传统光学显微镜吉姆萨染色观察巨噬细胞吞噬百分率。结果显示,流式细胞仪结合双光子显微镜检测巨噬细胞吞噬率与传统的显微镜计数法比较,两者有明显的正相关性。双光子显微镜和流式细胞仪可以定性与定量检测巨噬细胞吞噬功能,该方法具有灵敏、快捷、重复性好以及准确率高的特点,是进行免疫学研究的可行方法。     

棉田牧草盲蝽三种种群密度调查方法的比较分析

【目的】寻求科学、准确、有效的棉田牧草盲蝽Lygus pratensis(Linnaeus)发生规律和种群密度的调查方法,为棉田牧草盲蝽的预测预报、防治提供理论依据和指导。【方法】采用整体目测法、局部目测法、扫网法3种方法调查了棉田牧草盲蝽的种群数量并进行比较分析。【结果】(1)对牧草盲蝽种群动态,扫网法相较于整体目测法和局部目测法成虫有两个发生高峰期且发生初期提前1周;整体目测法和局部目测法较扫网法若虫初发期和高峰期均提前1周左右,局部目测法和整体目测法若虫发生趋势基本一致。(2)不同调查方法牧草盲蝽种群密度存在显著性差异,整体目测法获得的若虫及成虫和若虫种群密度均显著高于扫网法和局部目测法;2015年扫网法和整体目测法间的成虫种群密度差异不显著,均显著高于局部目测法,2016年扫网法成虫种群密度显著高于整体目测法。【结论】扫网法能够准确反应牧草盲蝽成虫的发生情况,整体目测法则适合若虫的种群调查,建议实际调查中使用整体目测和扫网相结合的方法,能为该虫预测预报和防治提供准确的依据和指导。     

“探究模拟酸雨对丰年虾孵化率的影响”一节实验教学设计

在“探究酸雨对生物的影响”的实验中,将实验对象由植物调整为丰年虾（Artemia salina）,使学生认识到酸雨除了对植物有害,还对其他生物有危害。本实验设定了4个pH梯度来探究酸雨对丰年虾孵化的影响,实验结果采用笔式数码显微镜观察计数,启发学生用棉花纤维或碘液来限制丰年虾的运动以便于计数。本实验从实验对象、用具和方法 3个方面进行了创新。在课堂教学中,从了解实验背景、选取实验对象,到设计实验步骤及操作实验,都以问题导向为原则,凸显学生的主体地位,培养学生的生物学学科核心素养。     

海洋病毒荧光显微计数法的优化与应用

【目的】建立一种快速、稳定、可靠的海洋病毒计数方法。【方法】海水水样经福尔马林固定后,滤过孔径为0.02μm的Anodisc Al2O3膜。滤膜经SYBR Green I染色后,在相应波长的激发光下进行观察。借助荧光显微镜目镜网格尺,计数视野中的病毒颗粒,换算后获得样品中病毒的浓度。【结果】对具体实验方法进行了优化,可快速、稳定地对海水中的病毒计数。【结论】建立了一种适用于国内实验条件的、可靠的海洋病毒计数方法。     

一种微生物生长动态的研究仪器Biotran Ⅲ的用法

微生物生长动态的重要参数是细胞群体中细胞数目、形态和大小的变化。这些参数的测量虽很重要,但由于实验费时、费力,且有操作人员主观上的误差,从而影响了我国这方面研究工作的开展。最近由美国引入一批自动计数及求积的仪器——Biotran Ⅲ,是New Brunswich Scientific Co.Ine.生产的,该仪器能自动计数菌落,而且在与显微镜或其它图象放大仪联用时,     

沙眼衣原体的简便计数法

目前衣原体的计数,一般采用Reeve的方法,即用姬姆萨液将经过一定处理的衣原体染色,然后在显微镜暗视野下进行计数。该方法步骤较多,耗时长,且易受细胞碎片干扰。Salari利用荧光素染料Hoechst 33258(Bisbe-     

青海三种草原毛虫染色体的观察

采自青海省门源县、曲麻莱县、玉树县等高寒草甸草场的门源草原毛虫GynaephoramenyuanensischouetYan、曲麻莱草原毛虫G.gumalaiensischouetYan和青海草原毛虫G.ginghaiensisChouetYing在室内饲养至老熟,每种选取老熟雌幼虫则条,经处理在解剖镜下取出卵巢,并制片。每个毛虫种在光学显微镜下观察卵巢细胞（30×10）300个,并进行染色体计数与统计。在光学显微镜下,3种草原毛虫的染色体形态均很小,呈颗粒状,种之间形态差别不明显、因此计数、鉴定和区别实际是困难的。3种毛虫的染色体数目的变化范围均较大,其变化范围在9～107条之间…