高滴度单克隆抗体杂交瘤细胞系获得途径的探讨

为探索获得能分泌较高价单克隆抗体杂交瘤细胞系的途径,比较了用不同免疫方法得到的小鼠脾细胞制备杂交瘤,对其产生有效瘤和高价抗体分泌瘤的影响。用不使小鼠致病的病毒(如NDV)或巳灭活的病毒作为抗原时,以较高浓度加佐剂、长间隔(30天)、多次免疫效果较好。用能使小鼠感染的病毒作为免疫原时,以活病毒的亚致死剂量感染小鼠,取其脾细胞制备杂交瘤,效果最理想。有效杂交瘤产率高,分泌高效价抗体的杂交瘤细胞系也多。探讨了从免疫方法着手,定向研制高价单克隆抗体杂交瘤细胞系的可行性。     

人源抗狂犬病毒单克隆抗体Fab段基因的获得和表达

运用噬菌体表面呈现（phage display）技术获得了人源抗狂犬病毒糖蛋白基因工程单克隆抗体Fab段基因及其表达。从狂犬病毒PM株Vero细胞疫苗免疫的人抗凝血中分离获得外周淋巴细胞,提取细胞总RNA,通过RTPCR方法,用一组人IgG Fab基因4特异性引物,从合成的cDNA中扩增了一组轻链和重链Fab段基因,将轻链和重链Fab段基因,将轻链和重链先后克隆入噬菌体载体pComb3,成功地建立了抗狂犬病毒抗原的方法,对此抗体库进行富积筛选表达,成功地获得了抗狂犬病毒的人源单抗Fab段基因及其在大肠杆菌中的有效表达,对其中一株单抗G10进行了较为系统的分析,发现它与一株鼠源中和性狂犬病毒糖蛋白特异性单抗存在竞争,证实该单抗能识别狂犬病毒糖蛋白,其序列资料分析表明,该单抗为一株新的抗狂犬病毒人源基因工程抗体。     

抗炭疽保护性抗原的单克隆抗体——Ⅰ.杂交瘤细胞株的获得

用炭疽保护性抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞NS-1融合,融合剂为PEG1000。用放射免疫方法筛选分泌特异抗体的杂交瘤细胞后,经有限稀释法及再克隆选择单克隆细胞,获4株能产生抗炭疽保护性抗原的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经染色体组型分析,证明是杂交细胞。体外连续培养8个月,仍能持续稳定地分泌抗体。其中,C17杂交细胞株,从它冰冻保存的第20代细胞复苏后,又传30多代,并接种在小鼠腹腔内增殖,仍能分泌特异性抗体。用正向间接血凝法测定其培养上清液及腹水,抗体滴度分别为1:256～512,1:4,096～6,144。     

《科学》：新技术首次获得高分辨率脑干功能图

美国科学家近日设计出了一种新的实验技术,能够对脑干（brainstem）区域进行高分辨率成像。脑干位于大脑最下部,脊髓顶端。它控制着维持呼吸、消化、心律、血压等必需的大脑功能,它同时还是许多脑化学物质的中转总部,一旦运转失调,就有可能导致上瘾、精神分裂症及帕金森症等精神疾病。有关专家认为此项技术为深入研究这一区域开启了方便之门。相关论文发表在2月29日的《科学》（Science）上。     

单克隆抗体

本文回顾了单克隆抗体的重要意义、单克隆抗体的特征,并与传统抗血清进行了比较。对国内外此项工作的进展和应用概要地叙述后,就国内开展这项工作提出了几点看法。     

单克隆抗体

本文回顾了单克隆抗体的重要意义、单克隆抗体的特征,并与传统抗血清进行了比较。对国内外此项工作的进展和应用概要地叙述后,就国内开展这项工作提出了几点看法。     

单克隆抗体

明尼苏达州Minnetonka的分子遗传学机构得到加拿大农业部的批准在加拿大出售单克隆抗体产品,Geneco199被设计用来预防能使新生小牛死亡的腹泻。     

人源中和性抗汉滩病毒单克隆抗体Fab段基因的获得和表达

运用噬菌体表面表达技术,获得人源和中性抗滩滩病毒汉滩型Ｇ１基因工程单克隆抗体Ｆａｂ段基因及其表达,并同时获得抗汉滩病毒核蛋白的Ｆａｂ抗体。从能综合征出血热疫区恢复期病人抗凝血中分离到的外周淋巴细胞中,提取了部细胞ＲＮＡ。通过ＲＴ－ＰＣＲ方法,用一组人ＩｇＧ Ｆａｂ基因特异性引物,从合成了ｃＤＮＡ中经ＰＣＲ扩增了一组轻链和重链Ｆａｂ段基因,将轻链和重链先后插入噬菌体载体ｐＣｏｍｂ３,ｄｎａｌｆ ｖｆ     

单克隆抗体研究进展

自Khler和Mistein创建杂交瘤技术以来,目前随着分子生物学技术的渗透,出现了各种特异的单克隆抗体,并得到广泛应用。本文着重介绍了人源单抗、基因工程单抗、双特异性单抗的基本原理,同时综述了杂交瘤技术的各个环节在近年来取得的一些进展,为研制高质量的单抗提供了更为简便而灵敏的手段。     

单克隆抗体概述

本文简单回顾了单克隆抗体技术产生的背景及发展和逐步完善的过程。从生化角度阐明选择核酸代谢旁路酶缺陷型的骨髓瘤细胞株和正常免疫脾细胞作为两个母本细胞融合成杂交细胞的原因,因为只有这样的细胞才能在HAT培养液中无限生长,也就是单克隆技术能取得成功的基本原理。比较了单克隆抗体和常规方法得到抗体的优越性,前者不仅可以较大量地得到高度纯化的针对某特定抗原决定簇的抗体,并能获得在通常情况下不易得到的抗弱抗原抗体,又是一个纯化某些物质的新的途径。本文又简述了单克隆抗体的生产程序,讨论了可能产生的技术问题;指出了杂交瘤的不稳定性和单克隆抗体不可能具有全部免疫球蛋白的生物活性的原因,例如有些单克隆抗体不结合补体,无细胞毒作用,无血凝作用或不与金黄色葡萄球菌蛋白A结合等。最后提出了单克隆抗体技术的应用方面,在产生大量高特异性的纯净抗体和为研究免疫反应的调节方面都有宽广的前途。     

浅谈单克隆抗体

简要介绍了抗体及单克隆抗体的概念,并阐述了单克隆抗体的制备原理,制备方法及主要应用领域。     

单克隆抗体技术

单克隆抗体对生化基础研究及临床上对各类疾病的探测和发现,都是很使人感兴趣的。本书是“生物化学和分子生物学实验室技术”丛书中的第13卷,专门介绍单克隆抗体技术,特别涉及啮齿类和人类杂交肿瘤的特征和产生方面。这些内容对分子生物学、遗传学、遗传工程、生物化学和临床医学等方面都是很有用的。全书共10章,它们是单     

单克隆抗体技术

二十世纪60年代以来,免疫学中出现的高灵敏度、高特异性放射免疫和酶联免疫技术,虽然在医学、病毒学、分子生物学等学科的发展中,起了巨大的推动作用,但由于动物天然抗体系统所特具的高度复杂性和异质性,不可能得到针对某一特定抗原决定簇的抗体。从分子水平上讲,抗体本身的纯度问题仍未解决,致使体液抗体的应用受到严重限制。     

医用单克隆抗体市场

在 Frost 和 Sullivan 公司一本204页的新的研究报告《美国医用单克隆抗体产品市场》中,对整个快速增长的单克隆抗体(MABs)产品市场以及单克隆抗体的发展进行了分析。关于 MAB 在癌症肿瘤的治疗方面,这个报告预言到1993年将有42亿美元的广阔市场。目前仍然仅用于实验的产品1987年估计销售1000万美元。因为估计美国食品药物管理局将许可更多的追加产品,所以该报告预计1988年将销售7.1亿美元,当有更多的产品通过许可时,1989年可上升到14亿美元,1990年达到21亿美元,呈加速上升。Froest 和 Sullivan 公司也看到了正在兴起的应用非抗癌 MAB 的广阔市场,如疟疾治疗     

单克隆抗体的纯化

 <正> 作者采用Bio-Rad公司的单克隆抗体(MoAb)纯化仪(MAPS-100),对两种不同亚类的MoAbs进行了分离纯化,其纯度及免疫学活性均较满意。     

人体单克隆抗体出世

单克隆抗体现已广泛应用于医学诊断,大有希望成为治疗药剂。目前,这种抗体是通过啮齿动物产生抗体的脾脏细胞,与此类动物的“永久性”癌细胞相互融合而生产出来的。美国国立卫生研究院的研究小组,从收集健康人体的一般白细胞入手,将这些细胞与用荧     

单克隆抗体的研究进展

单克隆抗体是一种由骨髓瘤细胞和带有抗体的B淋巴细胞结合形成的杂交瘤细胞,简称单抗。首先,本文对单克隆抗体的研究发展历程进行了分析和探讨,指出单克隆抗体的发展历程包括鼠源性单抗、嵌合抗体、人源化抗体以及人源性抗体这四大阶段,分别对其优缺点进行了说明;接下来,又对单克隆抗体在临床上的应用进行了说明,从疾病诊断方面及疾病的治疗两方面进行探讨。