分子标记技术的发展及应用

介绍了几种应用前景较广的分子标记,如基于DNA杂交技术的分子标记:限制性片段长度多态性(RFLP)和DNA可变串联重复数标记(VNRT);基于PCR技术的分子标记:随机扩增多态性 DNA(RAPD)、酶切扩增多态性(CAPS)、扩增片段长度多态性(AFLP)、微卫星DNA(SSR)和DNA单链构象多态性(SSCP);以及新兴的第3代分子标记,即基于DNA芯片技术的分子标记:单核苷酸多态性(SNP)等。分别阐述了它们的原理、方法步骤与优缺点、应用注意事项和适用范围,同时概述了它们在生物学研究中的应用和进展。     

《重组DNA产物》

该书分十一个部分:①重组DNA技术:分离、克隆及其基因表达;②从生长激素抑制素到人类胰岛素;③酵母;外源蛋白生产时的另一种微生物;④人干扰素的基本知识⑤对来自人干扰素重组DNA生物学特性的临床前景的估价;⑥由细菌产生的人α干扰     

龙胆紫希夫氏液显示DNA染色新方法

应用龙胆紫配制成Schiff(希夫氏)试剂,在微波辐射下进行Feulgen染色,结果使正常及良、恶性肿瘤组织细胞核内DNA着紫红色,并能应用真彩色图像仪进行DNA的定量分析.其方法操作简便,便于临床病理诊断应用.现介绍如下.标本的采集:活检手术切取的肿瘤组织100余例,经甲醛固定,石蜡包埋.切片,厚5μm.染液的配制:①8.3%盐酸水溶液(HCl8.3ml、蒸馏水 91.7ml);②龙胆紫(上海试剂站)希夫氏试剂的配制同PAS方法,以龙胆紫代替碱性品红;③亚硫酸氢盐溶液(10%偏重亚硫酸钠溶液5ml、1mol/L-HCl5ml、蒸馏水90ml).染色步骤;①切片脱蜡至水—蒸馏水;②8.3%盐酸水溶液水解切片1min(微波仪5档),蒸馏水洗;③     

生物工程技术讲座(一)

(一)微生物细胞融合技术一、细菌细胞融合1)枯草芽胞杆菌①制备原生质体;②原生质体的复原再生;③细胞融合;④细胞融合后融合体的遗传分析和选育;     

2003-2004年生物磁学研究和应用的新进展

本综述性论文开始写于 1 979年 ,其后每年撰写。每年撰写的内容包含 :①生物磁场 ;②磁场生物效应 ;③生物磁技术 ;④生物磁法研究 ;⑤生物磁应用     

DNA分析技术及其在植物研究中的应用

从DNA/DNA杂交、RFLP分析、DNA的限制酶图谱和核苷酸序列分析、PCR技术、DNA指纹技术、RAPD分析等六个方面详细描述DNA分析技术在植物学研究中的应用 ,并讨论了DNA分析技术与植物系统学的关系。     

RFLP作图在植物育种中的应用——老学科的新工具

育种学家通过传统的表型选择来改良植物品种。然而现在人们正在构建许多主要经济作物的限制性片段长度多态(RFLP)连锁图谱,这就为选择目标基因提供了更为直接的方法,因为与基因连锁的RFLP标记是易于检测的。植物育种中RFLP技术的出现,可望:①促进目标基因在品种间的转移,②转移近缘野生种的新基因到栽培品种中;③把复杂的多基因性状作为若干单个孟德尔因子组成的整体来分析;④建立性不相容的作物间的遗传学关系。将来,标记密集的RFLP图谱也可用于克隆产物未知的基因,如抗病基因、抗逆基因等。     

基于PCR-RFLP技术鉴定常见食源性致病菌

根据细菌核糖体基因16S rRNA保守端400 bp大小区段特征设计引物,应用聚合酶链式反应连接的限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法建立一种新型灵敏的食源性致病菌鉴定技术。首先用特异性引物对9属19种细菌基因进行PCR扩增,扩增产物应用7种限制性内切酶Eco52Ⅰ、HindⅢ、MboⅠ、MluⅠ、PstⅠ、SalⅠ和XbaⅠ进行消化酶切,再利用琼脂糖凝胶电泳分辨酶切DNA片段大小数目,分析不同种属细菌酶切产物态型,从而进行基因型鉴别,针对16S rRNA基因片段利用RFLP进行分析,结果表明:19种致病菌表现出10种特异性的RFLP图谱,可准确鉴定区分9属细菌,最低检测限可以达到1 pg/μL。这证明PCR-RFLP技术可用于常见食源性致病菌的快速鉴定。     

同济医科大学病理生理学教研室中澳友谊补体实验室简介

作为中澳教育合作项目之一的中澳友谊补体实验室是在原同济医科大学病理生理学教研室补体科研组的基础上建立的。1988年9月西澳大学及澳大利亚皇家第二医学中心的达金斯(R L Dawkins)教授应同济医科大学赵修竹教授的邀请访问了武汉,经过充分的协商,双方签署了象征中澳友谊的补体实验室成立的备忘录,不久即得到双方国家教育部门的批准。达金斯教授领导的澳国皇家第二医学中心内两个医院的临床免疫学实验室是国际上颇具声望的免疫遗传学研究中心之一,该室在下列方面进行过出色的工作:①HLA第一类与第二类血清学工作;②补体定型,包括C4、Bf、C2及C3;③DNA限制性片段长度多态现象(RFLP);包括Southern印迹及脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)等。因此该实验室不仅获得了     

DNA指纹技术新进展

DNA指纹技术从原理上可以分为两大类:即传统的以Southern杂交为基础的RFLP技术和以聚合酶链式反应(PCR)为基础的一系列分子标记技术。RFLP需要样品DNA的量较大,对微量被测样品无能为力。至于与PCR相结合的RAPD、AP-PCR和DAF等技术则由于引物相对较短,对实验条件非常敏感,每一轮实验都需要筛选最合适的反应体系,增加了实验周期和复杂度。近几年新出现的AFLP(Am-pilified Fragment Length Polymorphism)、LP-RAPD(Long Primer RAPD)和DALP(Direct     

书刊介绍

这本书是1979年4月26—28日在西德Spitzingsee举行的一次学术讨论会的论文集·由Elsevier North—Holland Biomedical出版,主编是R.N.Timmis(西德马克斯·普兰克分子遗传研究所)和A.Puhler(西德埃尔兰根大学)。本书分两大部分:一是综述性论文包括①、质体分类、不相容性分群(N.Datta);②、质体不相容性机制(K.N.Timmis);③、质体之间的分子相互关系(P.Broda);④、质体DNA复制(C.M.     

光合细菌最佳生长条件筛选

目的:优化光合细菌的最佳培养条件。方法:通过绘制不同的生长曲线研究不同培养基及不同培养条件等理化因素对2株光合细菌(类球红细菌1.2174、沼泽红假单胞菌1.2180)生长的影响。结果:①1.2174最佳条件:培养基(蒸馏水配制的液体富集培养基和固体ATYP);温度(35℃);pH值(8.0和9.0);接种量(培养基/种子液5:1和4:1)。②1.2180最佳条件:培养基(海水配制的ATYP和蒸馏水配制的液体富集培养基);温度(25℃和35℃);pH值(7.0和8.0);接种量(培养基/种子液2∶1和4∶1)③两株菌的光照、氧需求程度、菌群协同和振荡条件相同。结论:通过筛选,蒸馏水配制的液体富集培养基和固体ATYP培养基、35℃、1000lx、pH值8.0、培养基/种子液4∶1、微氧、有菌群协同、振荡可作为二者的通用培养条件。     

聚合酶链反应在研究DNA多态性中的应用

聚合酶链反应(Polymerase chain reaction PCR)是一种体外DNA扩增技术,自1985年Saiki等首次报道PCR方法以来,PCR技术迅速发展,并已广泛应用于生命科学各个方面。如基因克隆、遗传病的诊断、传染病的诊断、癌基因的检测等,由于PCR技术特异性强,扩增效率高、快速、录敏,且能克服限制性片段长度多态性(RFLP)的局限性,因此,它被有效地应用于研究DNA多态性。     

子宫内膜细菌L型感染与不孕症的关系

本文通过426例不孕症患者子宫内膜的病原学检查和免疫组织化学研究,发现①83.1%的患者有细菌L型感染;②主要表现为间质性子宫内膜炎(P<0.01);③内膜炎症和L型菌对精子的粘附和破坏作用可导致受孕率降低。     

HIV的DNA诊断

<正>以DNA诊断为题论述不同病原性因子的文章很难写,原因在于方法及其原理基本相同。但人免疫缺陷病毒(HIV,或艾滋病病毒)与其它病原体却稍有区别,即:①HIV属于逆转录病毒科;②HIV具有生物界的最高突变率;③病毒在体内的存在部位并非单一。 本稿在主要考虑上述数点的同时,也以最近我们研究室所进行的多聚酶链反应(PCR)为重点加以叙述。PCR虽然非常敏感,但必须在设适当对照后进行详细检查,否则会出现假阳性和假阴性事例。特别是在抗HIV抗体阳性,PCR阴性时,应考虑以下几种可能性:     

《酶学方法第121卷(免疫化学技术)第1部分(杂交瘤技术与单克隆抗体)》

该卷介绍杂交瘤技术与单克抗体。全书共收入81篇论文,分四部分:(一)杂交瘤的产生;①免疫接种和细胞融合(211篇);②杂交瘤的生长与克隆(17篇)。(二)单克隆抗体:③单克隆的筛选测走(17篇);④单克隆抗体的纯化和抗体染色体片段(10     

《遗传工程和生物工程学原典》

《遗传工程/生物工程学原典》(Genetic Engineering/Biotechnology Sourcebook)(1982),由美国122个政府机构和一些公益机构资助编篡发行的,成为叙述目前所有正在进行的遗传工程/生物工程学研究的一部原典。内容有:①重组DNA;②单克隆抗体;③质体;④激素;⑤合成干扰素;⑥癌症;⑦克隆;⑧基因转移。     

不同能源条件下中度嗜热嗜酸细菌多样性分析

采用黄铁矿、黄铜矿、硫酸亚铁和硫粉混合物作为主要能源物质在50°C条件下分别培养中度嗜热细菌混合物,研究其细菌多样性。提取细菌基因组总DNA,采用PCR结合限制性酶切片段多态性分析(RFLP)方法进行细菌16SrRNA基因的系统发育分析,比较不同能源条件下富集培养的混合细菌群落构成的差异。从3个培养物中共获得阳性克隆303个并进行RFLP分析,对29种不同酶切谱型的克隆插入序列进行测定和系统发育分析。大部分序列与已报道的浸矿微生物16SrRNA序列相似性较高(89.1%~99.7%),归属于硫化叶菌属的耐温氧化硫化杆菌(Sulfobacillus thermotolerans)和热氧化硫化杆菌(Sulfobacillus thermosulfidooxidans),嗜酸硫杆菌属的喜温硫杆菌(Acidithiobacillus caldus),钩端螺旋菌属的嗜铁钩端螺旋菌(Leptospirillumferriphilum)以及unculturedforest soil bacterium、uncultured proteobacterium。其中Acidithiobacillus caldus,Sulfobacillus thermotolerans,Leptospirillumferriphilum3种细菌为三类能源物质培养物中的优势细菌类群。L.ferriphilum在黄铁矿培养体系(53.8%)和硫酸亚铁和硫粉为能源的培养体系中(45.9%)中丰度最高;在以黄铜矿为能源物质的培养体系中,S.thermotolerans的比例大幅上升(70.1%)。关键词:中度嗜热细菌;生物多样性;生物浸矿;喜温硫杆菌(Acidithiobacillus caldus);耐温氧化硫化杆菌(Sulfobacillus thermotolerans);嗜铁钩端螺旋菌(Leptospirillumferriphilum)     

随机扩增多态性DNA原理及其在动物研究中的应用

RAPD(随机扩增多态性DNA)技术是一项应用日益广泛的遗传标记技术。与PCR和RFLP相比,该技术具有简便、快速、准确以及成本相对较低等特点,已成为众多分子标记技术中走向普及的先锋技术。阐述了RAPD的原理和方法,综述了RAPD目前在动物研究中的应用进展,并对RAPD技术应用前景作进一步阐述。     

科技论文的引言

<正>1内容应包括①提出所研究问题的性质和范围;②对有关重要的文献进行评述;③阐述研究方法以及选定这种特定方法的理由;④阐述研究的主要结果以及效益等。2注意事项①不要介绍人所共知的普通专业知识或教科书上的材料;②不要推导基本公式;③不要对论文妄加