讨论一种放射免疫测定的标准曲线——T/B～[Ag]直线方程

放射免疫测定已发展成为临床化学、生物化学及其他许多学科的重要测试手段,关于放射免疫反应过程虽已有些描述,但所述反应过程的免疫化学含意还有待进一步阐明。在常规放射免疫测定中,人们可以发现取[Ag]对T/B作图时(Ag为外加的非标记抗原,T为标记抗原总脉冲数,B为被结合标记抗原的脉冲数),可以得到一条很好的直线,但对其内在联系却了解很少。本文试图探讨这一直线方程内各参数的内在联系,并对其应用进行了讨论。     

脑啡肽的放射免疫测定

1975年发现亮氨酸脑啡肽(LEK)和甲硫氨酸脑啡肽(MEK)。其测定以放射免疫(RIA)最佳。作者提议并合成了多聚赖氨酸琥珀酰脑啡肽免疫原,EK结合率81～90%,每2.3或3.2个赖氨酸残基连上一个EK。免疫3或6个月时获得抗EK血清(ALS或AMS),工作稀度可达1:5000,K_(eff)10~9升/克分子。试用改进的氯胺T标记法及DEAE-Sephadex A-25柱层析制备高比放射性~(125)I-EK免疫活性良好。双抗体法分离抗体结合的和游离的~(125)I-EK。竞争抑制曲线:灵敏度LEK～11微微克,MEK～130微微克;精密度1.8%及1.4%。β-内啡肽,八种肽类激素、吗啡、纳洛酮无明显干扰;交叉反应MEK对ALS为3.3%、LEK对AMS为<1%。脑组织用0.0N盐酸抽提,中和后,直接作RIA。本方法已通过多种方法学考验。正常大鼠脑中EK浓度以下丘脑为最高,尾核次之。本法是灵敏、可靠和特异的。     

脑啡肽的放射免疫测定

1975年发现亮氨酸脑啡肽(LEK)和甲硫氮酸脑啡肽(MEK)。其测定以放射免疫(RIA)最佳。作者提议并合成了多聚赖氨酸琥珀酰脑啡肽免疫原,EK 结合率81～90%,每2.3或3.2个赖氨酸残基连上一个EK。免疫3或6个月时获得抗EK 血清(ALS 或AMS),工作稀度可达1:5000,K_(eff)10~9升/克分子。试用改进的氯胺T 标记法及DEAE-Sephadex A-25柱层析制备高比放射性~(125)I-EK,免疫活性良好。双抗体法分离抗体结合的和游离的~(125)I-EK。竞争抑制曲线:灵敏度LEK～11微微克,MEK～130微微克;精密度1.8%及1.4%。β-内啡肽,八种肽类激素、吗啡、纳洛酮无明显干扰;交叉反应MEK 对ALS 为3.3%、LEK 对AMS 为<1%。脑组织用0.1N 盐酸抽提,中和后,直接作RIA。本方法已通过多种方法学考验。正常大鼠脑中EK 浓度以下丘脑为最高,尾核次之。本法是灵敏、可靠和特异的。     

生长抑素的放射免疫测定

生长抑素(Somatostatin,SST),又称生长激素释放抑制激素(Growth hormone rclease-inhibiting hormone),系1973年由Brazeau等从羊下丘脑分离并在同年由Rivier等人工合成的14肽。生长抑素主要分布于神经系统及消化系统,除其有抑制垂体前叶生长激素释放的功能外,尚有多种生理作用,在许多病理状态下均有明显变化。研究其     

太行山猕猴血浆胰岛素的放射免疫分析

猕猴是人类的近亲,其形态结构、生理机能及生化代谢等与人类相似,因而长期以来被广泛用于医学科学实验研究。太行山猕猴是我国北方分布的一种数量最多的猕猴,许多学者对其形态、生理、生殖和遗传等做了大量研究,但未见有关血浆胰岛素含量的报道。本文以放射免疫法测定了太行山猕猴胰岛素含量,并与人血浆胰岛素含量进行比较,以便有效地利用猕猴探讨糖尿病的发病机理。1　材料与方法(1)动物来源　用于实验的29只猕猴均产于我国太行山区河南省济源市和辉县市境内。捕获后入河南师大猕猴养殖场饲养,经检疫和健康检查均系健康者。其中雄14只,雌15…     

呋苄青霉素放射免疫测定

呋苄青霉素(BL-P1597)具有广谱抗菌活性,是治疗绿脓杆菌很有前途的药物,其测定方法用放射免疫学方法比用微生物学方法较好。作者用BSA为载体,EDC_1为连接剂,合成了BL-P1597-BSA免疫原。每个克分子BSA约接6个克分子BL-P1597。用背部皮内多点法免疫家兔,7～9个月获得了抗BL-P1597血清,最终工作浓度:~#5兔为1:1800、~#3_s兔为1:3600,亲和常数K分别为1.70×10~8M~(-1)、1.86×10~9M~(-1)。~3H-BL-P1597免疫原性良好。用微孔滤膜分离结合的与游离的标记物。竞争抑制曲线:灵敏度35毫微克,精密度4.80±1.82%,准确度7.37±1.40%。血清测定的变异系数:批内8.3～9.8%,批间11.46～14.75%。加入血清中的BL-P1597可定量回收(93～101%)。随待测含BL-P1597血清加入量的增加(40μl～60μl/管),测得的BL-P1597量呈线性增加。4种青霉素类化合物(青霉素G、青霉烷酸、氨苄青霉素、羧苄青霉素)均无明显的干扰。本方法通过多种方法学考核,证明是灵敏、特异和可靠的。     

呋苄青霉素放射免疫测定

呋苄青霉素(BL-P1597)具有广谱抗菌活性,是治疗绿脓杆菌很有前途的药物,其测定方法用放射免疫学方法比用微生物学方法较好。作者用BSA 为载体,EDC_1为连接剂,合成了BL-P1597-BSA 免疫原。每个克分子BSA 约接6个克分子BL-P1597。用背部皮内多点法免疫家兔,7～9个月获得了抗BL-P1597血清,最终工作浓度:~*5兔为1:1800、~*3_(?)兔为1:3600,亲和常数K 分别为1.70×10~8M~(-1)、1.86×10~9M~(-1)。~8H-BL-P1597免疫原性良好。用微孔滤膜分离结合的与游离的标记物。竞争抑制曲线:灵敏度35毫微克,精密度4.80±1.82%,准确度7.37 1.40%。血清测定的变异系数:批内8.3～9.8%,批间11.46～14.75%。加入血清中的BL-P1597可定量回收(93～101%)。随待测含BL-P1597血清加入量的增加(40μl～60μl/管),测得的BL-P1597量呈线性增加。4种青霉素类化合物(青霉素G、青霉烷酸、氨苄青霉素、羧苄青霉素)均无明显的干扰。本方法通过多种方法学考核,证明是灵敏、特异和可靠的。     

植物激素脱落酸的放射免疫测定

放射免疫分析是利用放射性同位素技术与免疫化学技术相结合的测定超微量物质的新技术,兼具同位素技术的高灵敏性、精确性和抗原抗体免疫反应的专一性。这一技术早已在蛋白质(酶)及动物激素的研究中应用,但是,用于各类植物内源激素的分析测定则在近年才开始,国内在这方面的应用还未见报道。我们在植物叶片脱落酸含量的测定过程中对这一技术进行了一些探索,现将获得的结果报告如下。     

LH-RH放射免疫测定及应用

促黄体生成素释放激素(LH-RH)是调控生殖机能的下丘脑多肽激素。它有促进性腺成熟,促进排卵、排精的功能,直接调节雌(女)性的动情周期和月经周期。近年来不少     

病毒疾病诊断中的放射免疫测定

<正>虽然首次放射免疫测定(RIA)本身及首次用于病毒颗粒的放射免疫测定是竞争型,而目前大多数的RIA用于检测病毒、病毒抗原和抗病毒成份的抗体是非竞争的试验。随着本文的进一步说明,这方面的一些道理会更加清楚。     

检测脂肪酸化胰岛素放射免疫分析方法的建立

目的:建立一种高灵敏度、高特异性、操作简单快捷的放射免疫分析法(RIA),用于检测比格犬血浆中的脂肪酸化胰岛素。方法:所用试剂盒主要以豚抗胰岛素抗体为主要特异性试剂,利用均相竞争抑制原理,采用平衡竞争法对比格犬血浆进行直接测定。在该系统中加入未标记的标准品或样品,则标记抗原和非标记抗原将竞争有限且定量的抗体结合位点。结果:建立了检测脂肪酸化胰岛素的RIA法并进行了确证,方法的线性范围为3.125~800μU/mL,最低检测限为3.125μU/mL,批内和批间精密度分别为4.5%~7.0%和3.9%~7.6%,冻融稳定性和稀释稳定性等良好。结论:方法学确证结果表明,本研究建立的脂肪酸化胰岛素RIA检测方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于脂肪酸化胰岛素在临床前药代动力学试验的检测。     

神经降压素的放射免疫测定

本工作通过戊二醛将神经降压素(NT)连接到甲状腺球蛋白(TG)分子上,免疫家兔,获得了具有较高滴度,良好亲和力和较好特异性的抗神经降压素血清。使用此抗血清建立放射免疫测定,检测大鼠垂体和部分脑区NT免疫活性物质含量,结果与国外文献相近。     

胃泌素放射免疫测定的几个关键问题

胃泌素(gastrin)是一种具有较重要生理功用的消化道激素。胃泌素放射免疫测定(RIA)对于消化系统生理和病理的研究及临床诊断都有重要的意义。胃泌素RIA是1968年由McGuigan首次建立的,目前已发展成为一项比较成熟与可     

关于比色测定中以吸光值的算术值查标准曲线的思考

在植物生理生化实验中 ,光学分析技术是分析测定生化物质的非常重要的实验技术。此种技术是根据生化物质本身或其参与某种化学反应后的生成物有吸收特定光波的特性 ,通过分光光度计(或比色计 )对该生化物质进行测定 ,亦即通常所说的比色测定。在这类实验中 ,普遍的做法是将标准     

大鼠血浆β—内啡肽放射免疫测定

β内啡肽(β Endorphin,β-EP)在脑内分布广泛,对神经、内分泌、体温、呼吸、心血管、疼痛及免疫等都有一定的调节作用。当前,β-EP 的研究已成为神经内分泌领域中最受人重视的课题之一。鉴于β-EP 有种属特异性问题,本工作旨在建立大鼠血浆β-EP 的放射免疫测定(RIA)。 β-EP 的抗血清制备及其放射免疫测定,参照祝元祥、张崇理的工作。 大鼠断头后,将躯干血(约4—5毫升)收入预冷的,加有EDTA Na_2 12毫克、杆菌肽 400微克的塑料指形管中,离心(4℃,2,000xg)15分钟,取血浆贮存于-40℃ 冰箱中待测。     

猪胰岛素晶体结构测定

1969～1974年间,我国科学工作者先后在分辨率4埃(1970)、2.5埃(1971)、1.8埃(1973)测定了猪胰岛素三方二锌晶体结构。这是我国第一个蛋白质晶体结构,也是当时亚洲地区第一个蛋白质晶体结构,国际上少     

兔血浆中肾素活性与血管紧张素Ⅱ的放射免疫测定

肾素(R)——血管紧张素(AT)系统不仅存在于人体,而且也存在于各种动物中。各种动物之间、动物与人之间血浆中不仅R、AT含量不等,而且AT原、AT酶、可能存在的激活或抑制因子等,在性质及浓度上也不相同。因而,对人血浆的测定方法照搬于动物血浆测定是不适当的。     

血清甲状腺素放射免疫测定及其临床初步应用

甲状腺素(T_4)和三碘甲状腺原氨酸(T_3)的放射免疫测定所得结果,对于诊断甲状腺功能以及估价治疗过程中病情的动态变化是一个重要指标。在疾病导致甲状腺功能改变时,T_4和T_3在血清中含量变化基本相似。只是诊断甲亢。T_3比T_4更灵敏。但是在某些特殊情况下,两者含量变化并不平行。如T_3型甲亢者,血清中T_3含量增高,而T_4正常。反之,轻度原发性甲减者,T_4含量可有降低,而T_3含量有时却显得正常。因此在临床诊断中。T_3的测定不