Effets du chlorure de sodium sur la croissancein vitro,l'infectivité et l'efficience deRhizobium meliloti

Résumé La tolérance au chlorure de sodium de trois souches deRhizobium meliloti dont deux isolées de nodules de luzernes poussant en sols salins a été étudiée. Pour deux souches, la croissance est ralentie par 600 mmol/l de NaCl et inhibée par 750 mmol/l mais les bactéries restent vivantes. Une des souches isolées de sol salin se développe encore en présence de 750 mmol/l de NaCl. Avec 900 mmol/l de NaCl la croissance est inhibée et la viabilité altérée. Le sodium et le potassium intra-cellulaires ont été dosés. Les trois souches accumulent du K en présence de NaCl. La souche la plus tolérante au NaCl contient plus de Na et accumule moins de K que les autres souches. La germination des graines de deux luzernes (européenne et marocaine) est inhibée à partir de 0.5% et totale à 1.4% de NaCl pour la première, et à partir de 0.9% et totale à 2% de NaCl pour la seconde. Les trois souches deR. meliloti infectent de jeunes plantes de luzerne en présence de 1.5% de NaCl et les nodules formés contiennent des bactéroïdes d'aspect normal. Cependant les nodules restent blancs à partir de 1% de NaCl et les plantes sont moins développées. L'activité nitrogénasique mesurée sur ces plantes nodulées en présence de NaCl est ralentie à partir de 0.4% de NaCl, très faible avec 1% et totalement inhibée avec 1.5%. La plante-hôte et par suite l'activité fixatrice symbiotique semblent ainsi plus sensibles au NaCl que la bactérie elle-même.

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Effect of sodium chloride on in vitro growth, infectivity and effectiveness of Rhizobium meliloti

Summary The tolerance to sodium chloride shown by three strains ofRhizobium meliloti, two of them isolated from nodules of lucerne cultivated in a saline soil, was studied. The growth of two strains is slowed by NaCl at 600 mmol/l and inhibited at 750 mmol/l, but the bacteria remain visible. One of the strains isolated from saline soil grows in the presence of 750 mmol/l NaCl. With NaCl at 900 mmol/l the growth is inhibited and viability impaired. The intracellular concentrations of Na and K has been determined. All three strains accumulate K in the presence of NaCl. The most tolerant strain contains more Na and accumulates less K than the other two. The germination of seeds of two varieties of lucerne (European and Moroccan) is inhibited at 0.5% and suppressed completely at 1.5% NaCl for the first variety, and inhibited at 0.9% and suppressed at 2% NaCl for the second. In the presence of 1.5% NaCl the threeR. meliloti strains infect the young lucerne plants and the nodules formed certain morphologically normal bacteroids. With 1% NaCl, however, the nodules are colourless and the plants are less well developed. Nitrogenase activity measured on plants nodulated in the presence of NaCl is decreased at 0.4%, very weak at 1% and inhibited completely at 1.5% NaCl. Therefore, the host plant and the symbiotic nitrogen fixation process appear to be more sensitive to NaCl than are the bacteria themselves.

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Efecyo del cloruro sodico en el crecimiento in vitro, la infectividady la eficacia de Rhizobium meliloti

Resumen Se ha estudiado la tolerancia al cloruro sódico de très cepas deRhizobium meliloti, dos de ellas aisladas de nodulos de alfalfa cultivada en suelos salinos. La presencia de NaCl a concentración de 600 mmol/l disminuye la velocidad de crecimiento de dos de las cepas, quedando este totalmente inhibido en 700 mmol/1. La bacteria, permanece, sin embargo, viable. Una de las cepas aisladas del suelo salino crece incluso en presencia de 750 mmol/1 de NaCl y su crecimiento no se inhibe hasta llegar a una concentración de 900 mmol/l quedando noobstante disminuida la viabilidad de la bacteria. Se han determinado las concentraciones intracelulares de Na y K observandose que las tres cepas acumulan K en presencia de NaCl. La cepa m tolerante a la salinidad contiene más Na y acumula menos K que las otras dos. Se ha estudiado la germinación de dos variedades de semillas de alfalfa: europea y marroquí. La germinación de la variedad europea es inhibida parcialmente a 0.5% NaCl y completamente a 1.5%. En la variedad marroquí la inhibición parcial occure a 0.9% y la supresión de la germinación a 2% de NaCl. En presencia de 1.5% de NaCl las tres cepas deR. meliloti infectan las plantulas de alfalfa formando nódulos que contienen bacteroides morfologicamente normales. A pesar de ello in 1% de Na Cl los nódulos son incoloros y las plantas no se desarrollan tan bien. En plantas que han nodulado en presencia de NaCl la actividad nitrogenasa disminuye a 0.4%, es muy debil a 1% y esta inhibida totalmente a 1.5% de NaCl. De todo ello podemos concluir que la planta húesped y el proceso de fijación simbiótico de nitrógeno parecen ser más sensibles al cloruro sódico de lo que lo son las bacterias por sí mismas.

     

Extracellular enzymes of some black aspergilli in Singapore

Summary Ten strains ofAspergillus niger and one strain ofA. awamori showed proteolytic activity and amylolytic and cellulolytic activities were observed in all the strains except inA. niger isolated from rice grains.Aspergillus awamori was shown to be the best producer of amylolytic enzymes but poorest for cellulases. All the strains were shown to be good producers of proteolytic enzymes while the strain from rubber wood seemed to be the best cellulase-producing strain. Both single conidium and hyphal tip inoculation techniques gave similar results. Differences in the levels of extracellular enzymes produced by similar strains were also observed using the two different techniques.

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Enzimas extracelulares de algunos aspergillus negros de Singapur

Resumen Se han aislado diez cepas deAspergillus niger y una deA. awamori que presentan buena actividad proteolítica. Todas las cepas, excepto una deA. niger, aislado de granos de arroz, mostraron, además actividades amilolíticas y celulolíticas. Los mejores productores de enzimas celulolíticas y amilolíticos parecen ser, respectivamente, la cepa deA. niger aislada de madera de caucho yA. awamori. Aspergillus awamori es, sin embargo, el peor productor de celulasas. Se han usado dos técnicas de inoculación, a partir de una solo conidio o bien a partir de un trozo de hifa, obteniéndose resultados comparables. Utilizando estas mismas técnicas se han observado variaciones en las cantidades de enzimas excretados por cepas semejantes.

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Enzymes exo-cellulaires de certains aspergilli noirs isolés à Singapour

Résumé Dix souches d'Aspergillusniger et une d'A.awamori ont été étudiées. Toutes ces souches ont une activité protéolytique et toutes, sauf une souche d'A.niger isolée à partir de grains de riz, ont des activités amylolytiques et cellulolytiques. Il a été constaté qu'Aawamori est le meilleur producteur d'enzymes amylolytiques, mais le moins bon producteur de cellulases. Toutes les sourches sont bonnes productrices d'enzymes protéolytiques, et celle provenant d'un arbre à caoutchouc est la meilleure productrice de cellulase. Les techniques d'inoculation avec une conidie unique ou avec une extrémité d'hyphe donnent des résultats similaires. Les différences de niveau des enzymes exo-cellulaires produits par des souches similaires ont également été observées avec ces deux techniques différentes.

     

Incidence and enterotoxigenicity of enterotoxigenic (Escherichia coli) from uncooked meat sausages

Summary The incidence of enteropathogenicEscherichia coli was higher (33 to 50%) in uncooked chicken sausages than in pork sausages (10 to 43%). The toxigenic isolates in general were of O5 and O89 sero types ofE. coli. The amount of toxin produced varied in raw and boiled sausages as tested by ileal loop and rabbit skin permeability tests. The toxin production was invariably higher at 28°C or 37°C in raw and boiled sausages than at 45°C.

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Resumen La incidencia de cepas enteropatógenas deEscherichia coli fue mayor (33 a 50%) en salsichas de pollo crudas que salsichas de cerdo. Los aislados toxinogénicos pertenecían en su mayoría a los serotipos O5 y O89 deE. coli. La variación en la cantidad de toxina producida entre salsichas crudas y hervidas se midió mediante pruebas de permeabilidad en asa ileal y piel de conejo. La producción de toxinas, tanto en salsichas crudas como hervidas, era mayor a 28°C o a 37°C que a 45°C.

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Résumé L'incidence de souches entéropathogènes d'Escherichia coli était plus élevée (33 à 50%) dans les saucisses de poulet cru que dans les saucisses de porc cru (10 à 43%). Les souches toxigènes d'E. coli isolées étaient en général de type sérologique O5 ou O89. Les tests du loop iléal et de la perméabilité de la peau de lapin ont démontré que la quantité de toxine produite variait dans les saucisses crues et bouillies. La production de toxine était invariablement plus élevée à 28 ou à 37°C qu'à 45°C tant dans les saucisses crues que dans les saucisses bouillies.

     

Cassava starch fermentation pattern ofRhizopus oligosporus

Summary Rhizopus oligosporus UQM 145F was grown on cassava starch medium without a preliminary treatment of starch. The fermentation pattern ofR. oligosporus is shown to be influenced significantly by the medium composition, pH of the growth culture and the size of the spore inoculum. By varying the carbon, nitrogen and mineral salt concentrations, it was found that either glucose accumulated due to excess hydrolysis of starch or single cell protein production became dominant. In the case of the carbon source, increases in the concentration of starch led to higher biomass values, but lower rates of protein production. These observations led to a new formulated medium, resulting in an 82.9% cassava starch utilization and a true protein yield of 5.32 g/100 g initial substrate. The response ofR. oligosporus to inorganic compounds such as (NH₄)₂SO₄, urea, NaCl and MgSO₄ indicates an interesting fermentation control system.

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Resumen Rhizopus oligosporus UQM 145F se hizo crecer en un medio a base de almidón de casava sin que hubiera pasado por un tratamiento previo con almidón. Se demostró que el patrón de fermentación seguido porRh.oligosporus estaba significativamente influenciado por: la composición del medio, su pH y el tamaño del inóculo. Al variar las concentraciones de carbono, nitrógeno y sales minerales se observó que predominaba la acumulación de glucosa o bien la producción de proteínas unicelulares. Un incremento en la fuente de carbono aumentó la biomasa pero disminuyó el ritmo de producción de proteínas. Estas observaciones permitieron elaborar un nuevo medio de cultivo que resultó en la utilización del 82.9% del almidón de casava con un rendimiento en proteínas de 5.32 g/100 g de sustrato inicial. La respuesta deRh. oligosporus a compuestos inorgánicos como sulfato amónico, urea, cloruro sódico y sulfato magnésico indican la existencia de un sistema de control de la fermentación muy interesante.

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Résumé On a fait croîtreRhizopus oligosporus UQM 145 F sur un milieu à base d'amidon de manioc sans traitement préalable de l'amidon. Le profil de fermentation parR. oligosporus apparaît être influencé de manière significative par la composition du milieu, le pH de la culture en croissance et la taille de l'inoculum de spores. En variant les concentrations en carbone, en azote et en sels minéraux, on remarque la prédominance tantôt de la protéine unicellulaire, tantôt de l'accumulation de glucose. Un accroissement en concentration conduit à des valeurs plus élevées de la biomasse mais en une moindre production de protéines. Ces observations ont abouti à une nouvelle formulation du milieu avec pour résultat une utilisation à 82.9% de l'amidon de manioc et un rendement vrai en protéines de 5.32 g/100 g de substrat initial. La réponse deR. oligosporus aux composés inorganiques comme le sulfate d'ammonium, l'uréi, le chlorure de sodium et le sulfate de magnésium sont indicateurs d'un système très intéressant de contrôle de la fermentation.

     

Identification of some lactic acid bacteria from two Zimbabwean fermented milk products

Ten predominant lactic acid bacterial isolates from traditionally fermented milk and four isolates from an industrially fermented milk, Lacto, together with 14 reference strains ofLactobacillus and three ofLactococcus were examined for 32 characteristics. Data were analysed using the simple matching coefficient and clustering was by unweighted pair group average linkage. All the isolated from traditionally fermented milk belonged to the genusLactobacillus. Seven isolates could be identified as belonging toL. helveticus, L. plantarum, L. delbrueckii subsp.lactis, L. casei subsp.casei andL. casel subsp.pseudoplantarum. Three of the isolates could only be identified as either betabacteria or streptobacteria. The four isolates from Lacto were identified asLactococcus lactis. However, they could not be identified to subspecies level.

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Résumé On a examiné 32 caractéristiques de 10 souches de bactéries lactiques isolées de fait fermenté de manière traditionnelle, et de 4 souches isolées d'un lait fermenté industriel, le Lacto, ainsi que 14 souches de référence deLactobacillus et trols deLactococcus. Les données ont été analysées en utilisant le coefficient d'apparienient simple et le groupement par lien moyen de groupe pair non balancé. Toutes les souches isolées du lait fermenté de manfère traditionnelle appartiennent au genteLactobacillus. Sept souches ont pu étre identifiées comme appartenant àL. helveticus, L. plantarum, L. delbruckii subsp.lactis, L. casei subsp.casei etL. casei subsp.pseudoplantarum. Trois de ces souches n'ont pu être identifiées soit comme bétabactéries soit comme streptobactéries. Les quatres souches isolées de Lacto ont été identifiées commeLactococcus lactis. Celles-ci n'ont toutefois pas pu être identifiées jusqu'au stade de sous-espèce.

     

Sur les ferments protéolytiques duVibrio cholerae et duVibrio El Tor

Conclusions On peut conclure, en résumé, que l'hémodigestion et la liquéfaction de la gélatine sont des manifestations de 2 ferments.Au surplus, les comportements du pouvoir de scission de la gélatine et du pouvoir hémodigestif furent comparés chez 4 souches deV. El Tor cultivées sur gélose et conservées sur un milieu renfermant du blanc d'oeuf. A cette occasion on a eu recours au viscosimètre de Ostwald.Il fut observé que, chez les souches deV. El Tor cultivées sur gélose, la scission de la gélatine et l'hémodigestion furent plus intenses que chez des souches conservées sur milieu à l'oeuf. En cutre, chez ces dernières, le pouvoir hémodigestif avait entièrement disparu.     

Considérations sur l'ubiquité duTrichophyton terrestre—Durié & Frey 1957—saprophyte du sol. Son inoculabilité

Résumé Les auteurs ont isolé 11 souches deTrichophyton terrestre—Durie &Frey 1957. Une de ces souches a été isolée d'un échantillon de terre qui leur avait été envoyé de Hanoi (Vietnam). Les 10 autres souches ont été isolées en Roumanie, à savoir 4 à Bucarest et 6 en province. Ces 10 souches ont été isolées des portions très limitées de terrain et—9 fois même—chacune d'un seul échantillon de terre, minutieusement exploré par le procédé deVanbreuseghem (mise en contact de la terre avec les cheveux). Les terrains, d'où l'on avait prélevé les échantillons de terre, ont été des jardins, des terrains rocheux, marécageux, steppes, abris pour le bois etc. LeTrichophyton terrestre a été trouvé toutes les fois qu'il a été cherché, sans aucune exception. Selon les auteurs, certains perfectionnements apportés au procédé deVanbreuseghem ont contribué largement à la réussite constante de cet isolement. Ils sont parvenus à provoquer, à la souris blanche, avec l'une des 11 souches mentionnées, une mycose expérimentale qui a envahi l'épiderme ainsi que les poils. La trichophytine produite par ces souches a été tout aussi active que la trichophytine produite par leTrichophyton mentagrophytes, et, en même temps, tout aussi spécifique. Les auteurs arrivent à la conclusion que leTrichophyton terrestre est probablement ubiquitaire dans le sol et qu'il n'est pas dépourvu de pouvoir pathogène. Au contraire, il est en voie d'adaptation à la vie parasitaire et peut être inclus dans le groupe des dermatophytes.

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Summary UsingVanbreuseghem's procedure (baiting moistened soil samples with filaments of hair), the authors were able to isolate 11 strains ofTrichophyton terrestre—Durie &Frey 1957. One of them has been recovered from a sample of soil sent from Hanoi (Vietnam), whereas the other strains have been recovered from different Rumanian soil samples. Four strains have been recovered from Bucarest and the other six ones from the province. Each strain has been isolated from a very small piece of ground and even, except for one strain, it was not necessary to control more than one sample of soil for each of them. The Rumanian soil samples were collected from gardens, rocky and marshy grounds, waste-lands, woodsheds and so on.Trichophyton terrestre has been recovered everywhere it was looked for, without any exception. The authors believe that the constantly positive results of their investigations concerning the presence ofTrichophyton terrestre in the soil, may be partially explained by some improvements they added toVanbreuseghem's method. The inoculation in white mice, guinea pigs and men were positive only in one case, a white mouse, in which the causative fungus has been found also in the hair. From the cultures of the isolated strains, the authors obtained a trichophytin, as active as the trichophytin produced byTrichophyton mentagrophytes, and not less specific. They conclude thatTrichophyton terrestre, as saprophyte of the soil, is probably an ubiquitous (cosmopolitan) mold and, moreover, it is not completely without pathogenity. On the contrary, it is on the way to become a parasite and, therefore, it may be included in the group of dermatophytes.

     

Glucoamylase production byAspergillus awamori on rice flour medium and partial characterization of the enzyme

Summary Aspergillus awamori ATCC 22342 was selected from 12 strainsof Aspergillus spp.and Rhizopus spp. as the best producer of amylase. Optimal growth conditions for the enzyme production in shake flasks were provided by: a medium containing 60 g/1 rice flour, 0.075% (w/v) NaNO₂ and 0.075% (v/v) corn-steep liquor, a temperature of 30° C and initial pH value of 6.5. The enzyme was characterized as a glucoamylase with a molecular weight of 49,000. Maximum enzyme activity occurred at 45 C and pH 5.8. The enzyme was stable at 40° C and lost 70 and 90% of activity when heated for 30 min at 50 and 60°C, respectively. Thermal inactivation was slowed in the presence of starch. Michaelis-Menten constants for soluble starch and dextrin were estimated as 12.5 and 33.3 mg/ml, respectively. This enzyme may be used for the production of glucose-rich syrups from rice starch.

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Producción de glucoamilasa por Aspergillus awamori en harina de arroz y caracterización parcial del enzima

Resumen Aspergillus awamori ATCC 22342 se seleccionó entre 12 cepas deAspergillus spp. y deRhizopus spp. como el mejor productor de amilasa. La condiciones óptimas de crecimiento para la producción del enzima en frascos de agitación fueron las siguientes: un medio con la composicion siguiente: 60 g/1 de harina de arroz, 0.075% (m/v) NaNO₂ y 0.075% (v/v) de extracto de maíz (corn steep liquor); una temperatura de 30°C y un pH inicial de 6.5. El enzima fue caracterizado como una glucoamilasa de peso molecular 49,000. La máxima actividad enzimática se obtuvo a 45°C con un pH de 5.8. El enzima era estable a 40 C pero perdió un 70 y un 90% de su actividad cuando se calentó durante 30 min a 50 y 60° C respectivamente. La inactivación térmica fue más lenta en presencia de almidón. Las constantes de Michaelis-Menten para almidón soluble y para dextrina se estimaron como 12.5 y 33.3 mg/ml respectivamente. Este enzima puede utilizarse para la producción de jarabes ricos en glucosa a partir de almidón de arroz.

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Production de glucoamylase par Aspergillus awamori cultivé sur milieu à la farine de riz et caractérisation partielle de l'enzyme

Résumé Aspergillus awamori ATCC 22342 a été sélectionné parmi 12 souches d'Aspergillus spp. et deRhizopus spp. comme étant le meilleur producteur d'amylase. Les conditions optimales de croissance pour la production d'enzyme en fioles agitées sont: un milieu contenant 60 g/1 de farine de riz, 0.075% (w/v) de NaNO₂ et 0.075% (v/v) de liqueur de corn steep, une température de 30° C et un pH initial de 6.5. L'enzyme a été caractérisé comme étant une glucoamylase de poids moléculaire 49,000. L'activité maximum de l'enzyme se situe à 45°C et pH 5.8. L'enzyme est stable à 40°C et perd 70 et 90% de son activité par chauffage pendant 30 min à 50 et à 60°C, respectivement. L'inactivation thermique est ralentie en présence d'amidon. Les constantes de Michaelis-Menten pour l'amidon soluble et pour la dextrine ont été éstimées, respectivement, à 12.5 et 33.3 mg/ml. Cet enzyme peut être utilisé pour la production de sirops riches en glucose à partir d'amidon de riz.

     

Effect of moisture and salt stress on selectedRhizobium phaseoli strains

Summary Studies in Rossmoyne silt loam by the plate count (PC) and fluorescent antibody (FA) techniques showed that flooding had no detrimental effects on survival and N₂-fixing capacity ofR. phaseoli strains. Short-term flooding apparently stimulated the activity of the bacteria, as indicated by the increase in nodulation and yield ofPhaseolus vulgaris. The strains also differed in their ability to survive desiccation, and a decline in the population of all strains occurred at moisture tensions greater than 15 bars. The inhibitory concentrations of salts to growth ofR. phaseoli in solution were 0.3% for Na and K chlorides and 1.0% for Ca and Mg chlorides. The effects of Na and K sulphates were similar to the Na and K chlorides at 0.3% except for strain C-05 which was inhibited by 0.1% Na sulphate. Comparative growth averaged over all strains grown with 0.1% salts showed that the degree of inhibition was the same for both chloride and sulphate salts but that Na salts showed the greatest, and Mg salts the least, inhibition. It was concluded that some strains ofR. phaseoli can survive soil flooding, desiccation, and salt stress in large enough numbers to initiate nodule formation in some soils.

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Resumen Estudios realizados en Rossmoyne, en suelos de tipo limoso, ricos en materia orgánica han mostrado mediante técnicas de conteo en placa (PC) y de anticuerpos fluorescentes (FA) que la inundación de campos no iba en detrimento de la supervivencia y de la capacidad de fijación de N₂ de algunas cepas deR. phaseoli. La actividad de las bacterias parece verse estimulada por inundaciones de corta duración según se deduce del incremento en la nodulación y en la cosecha dePhaseolus vulgaris. Las distintas cepas mostraron diferencias en su habilidad para sobrevivir a la sequía, observándose una disminución en la población de todas las cepas a tensiones superiores a 15 bars. Las sales en disolución inhibieron el crecimiento deR. phaseoli a las concentraciones siguientes: 0.3% para los cloruros de Na y K, y 0.1% para los cloruros de Ca y Mg. Los efectos de los sulfatos de Na y K a una concentración de 0.3% fueron similares a los observados para los cloruros, excepto para el caso de la cepa C-05 que fue inhibida por 0.1% de sulfato de Na. El crecimiento medio, comparativo, de todas las cepas en un medio con un 0.1% de sales mostró que cloruros y sulfatos tenían un mismo grado de inhibición y que las sales de Na tenían el mayor efecto inhibidor, teniendo las de Mg el menor.

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Résumé Des études effectuées sur la terre limoneuse de Rossmoyne par les techniques de numération sur gélose (PC) et d'anticorps fluorescents (FA) ont montré que l'inondation n'a pas d'effet défavorable sur la survie et la capacité à fixer l'azote de certaines souches deR. phaseoli. Une brève inondation du sol parait stimuler l'activité des bactéries, comme l'indique le fait que la nodulation et le rendement dePhaseolus vulgaris sont accrus. L'aptitude des souches à survivre à la dessication est variable. D'autre part, les populations de toutes les souches diminuent lorsque la tension d'humidité dépasse 15 bars. Les concentrations salines inhibant la croissance deR. phaseoli en milieu liquide sont de 0,3% pour le chlorure de Na et de K, et de 0,1% pour le chlorure de Ca et de Mg. Les sulfates de Na et de K sont, comme les chlorures, inhibiteurs à la concentration de 0,3%, sauf dans le cas de la souche C-05 qui est inhibée par 0,1% de sulfate de Na. A la concentration de 0,1%, les chlorures et les sulfates exercent le même degré d'inhibition sur toutes les souches, mais les sels de Na sont plus inhibiteurs que ceux de Mg. En conclusion, certaines souches deR. phaseoli peuvent survivre à l'inondation, à la dessication et à l'action des sels en nombres suffisants pour initier la formation de nodules.

     

Isolation and characterization of variants ofRhizobium leguminosarum bvphaseoli

Summary Seven spontaneous variants ofR. leguminosarum byphaseoli were isolated from three stock cultures by their diversity in colony morphology. Five variants had small opaque or translucent colonies and two variants, large gummy colonies. There were marked differences between strains, but not between variants of the same strain, in the utilization of carbon sources. The large gummy colony variants were more tolerant to streptomycin and novobiocin and less effective or ineffective in N₂ fixation than the variants of small non-gummy colonies; they were also of higher competitive ability than the other variants from the same strain. At least for one strain, competitiveness seemed less subject to variation.

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Resumen A partir de cultivos de referencia, y debido a la diversidad morfológico de sus colonias, se aislaron siete variantes espontaneas deR. leguminosarum bvphaseoli. Cinco de las variantes presentaron colonias pequeñas, opacas o traslucidas. Las colonias de las otras dos variantes eran grandes y de aspecto gomoso. En la utilización de fuentes de carbono se observaron diferencias marcadas entre distintas cepas pero no entre variantes de la misma cepa. Las colonias grandes y de aspecto gomoso eran más tolerantes a la estreptomicina y a la novobiocina, menos eficaces que las variantes de colonias pequeñas en cuanto a la fijación de N₂, y mostraron además una mayor habilidad competitiva frente a las otras variantes de la misma cepa. Al menos en una de las cepas la competitividad estaba menos sujeta a variaciones.

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Résumé Sept variants spontanés deR. leguminosarum bvphaseoli ont été isolés à partir de trois cultures stock sur la base de la diversité de la morphologie de leurs colonies. Cinq variants se présentaient en colonies petites, opaques à translucides, trandis que deux variants se présentaient en grandes colonies visqueuses. Il y avait des différences marquées entre souches mais pas entre variants de la même souche, quant à l'utilisation de sources carbonées. Les variants se présentant en grandes colonies visqueuses étaient plus tolérants à la streptomycine et à la novobiocine et moins efficaces voire inefficaces pour la fixation de l'N₂, que les variants des petites colonies non visqueuses; elles présentaient aussi une capacité de compétition plus élevée que les autres variants de la même souche. Au moins pour une souche, la capacité de compétition semblait moins sujette à variation.

     

A catalogue of some ecuadorean fermented beverages,with notes on their microflora

Summary A catalogue of indigenous fermented beverages produced by different ethnic groups in Ecuador has been compiled and the microflora of selected examples examined. A diversity of fermentation substrates was encountered depending on the climatic zone. The fermentations are typicallyLactobacillus spp.—yeast fermentations except for one which includes a mould fermentation by a mixed starter ofMoniha sitophila, Rhizopus stolonifer and aFusarium sp. A discussion is made of the role of these beverages in the human ecology of certain regions.

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Resumen Se ha confeccionado un catálogo de bebidas indígenas ecuatorianas producidas por distintos grupos étnicos, examinándose la microflora de algunos ejemplos seleccionados. Las fermentaciones son generalmente del tipoLactobacillus sp.—levaduras, excepto en un caso que incluye una fermentación fúngica iniciada de forma mixta porM. sitophila, R. stolonifer y unFusarium sp. Se discute el papel de estas bebidas en la ecologia humana de ciertas regiones.

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Résumé Un catalogue des boissons fermentées indigènes produites par divers groupes ethniques de l'Equateur a été compilé et les micro-flores des exemples sélectionnés ont été éxaminés. Les substrats de fermentation varient d'une région climatique à l'autre. Les fermentations sont généralement du typeLactobacillus sp — levures, sauf dans un cas qui comporte une fermentation par des moisissures, avec un mélange initial deMoniha sitophila, Rhizopus stolonifer et une espèce deFusarium. Le rôle de ces boissons dans l'écologie humaine de certaines régions est discuté.

     

Rhizobium biomass production in batch and continuous culture with a malt-sprouts medium

Summary The growth of nine strains of four different species ofRhizobium (R. leguminosarum, R. meliloti, R. phaseoli andR. japonicum) was studied with media containing malt sprouts extract (MSE), in place of yeast extract (YE), as source of nitrogen and growth factors. The results obtained in batch cultures indicated that all the strains grew well in MSE medium. In the case of fast-growing strains the biomass increased with increase in the concentration of MSE in the medium, but with the slow-growing strains, likeR. japonicum, growth was inhibited completely by using a concentration of MSE (containing 3.75% w/v of solids) of 40% v/v. With all the strains the concentration of cells attained was greater than 5×10⁹ cells/ml, which clearly indicates that MSE is a suitable component of media, and one which can be used instead of YE. The results of continuous culture experiments showed that a high productivity of cells (15.3×10⁸ cells/ml/h) could be obtained using MSE medium.

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Producción de Rhizobium en cultivos batch y continuo sobre medio conteniendo extracto de raiz de malta

Resumen Se estudió el crecimiento de nueve cepas de cuatro especies diferentes deRhizobium (R. leguminosarum, R. meliloti, R. phaseoli y R. japonicum) en medios de cultivo conteniendo extracto de raíz de malta (ERM), en reemplazo de extracto de levaduras (EL), como fuente de nitrógeno y factores de crecimiento. Los resultados obtenidos en cultivos en batch indicaron que todas las cepas crecieron bien en los medios con ERM. En el caso de las cepas de crecimiento rápido la biomasa se incrementó con la concentración de ERM en el medio de cultivo, pero con las cepas de crecimiento lento(R. japonicum) el desarrollo celular se inhibió completamente para concentraciones de ERM (conteniendo 3,75% p/v de sólidos) de 40% v/v. Con todas las cepas empleadas la concentración celular alcanzada fue superior a 5×10⁹ cél/ml, lo que indica claramente que el ERM es un adecuado componente para los medios de cultivo que puede reemplazar al EL. Los resultados de los experimentos realizados en sistema continuo mostraron que se puede alcanzar una alta productividad (15,3×10⁸ cél/ml/h) utilizando un medio de cultivo suplementado con ERM.

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Production de Rhizobium en culture discontinue et continue sur milieu à base de germes de malt

Résumé La croissance de neuf souches appartenant à quatre éspèces différentes deRhizobium (R. leguminosarum, R. meliloti, R. phaseoli etR. japonicum) a été étudiée avec des milieux contenant, comme source d'azote et de facteurs de croissance, un extrait de germes de malt (MSE) au lieu d'extrait de levure (YE). Les résultats obtenus en culture discontinue (batch) montrent que toutes les souches poussent bien en milieu MSE. Dans la cas des souches à croissance rapide, la biomasse augmente proportionnellement à la concentration de MSE dans le milieu. Par contre, pour les souches à croissance lente, commeR. japonicum, la croissance est complètement inhibée lorsque la concentration en MSE (contenant 3.75% w/v de solides) atteint 40% (v/v). Avec toutes les souches, on obtient une concentration en cellules supérieure à 5×10⁹/ml, ce qui indique clairement que le MSE convient bien et peut être utilisé à la place de YE. Les expériences réalisées en culture continue montrent qu'on peut obtenir avec le milieu MSE une productivité en cellules très élevée (15.3×10⁸ cellules/ml/h.).

     

Sur les brettanomyces isolés de raisins et de vins

Résumé Les auteurs ont étudié comparativement des souches de Brettanomyces isolées de vins de diverses origines et dans diverses circonstances. En plus des tests habituels de classification, portant surtout sur les caractères morphologiques et sur la fermentation et l'assimilation des différents sucres, il a été procédé notamment aux mesures des intensités respiratoire et fermentatives, à l'établissement des bilans analytiques des produits secondaires formés, à l'étude des besoins en facteurs de croissance.Ces Brettanomyces provenant de vins appartiennent à deux espèces nouvelles, différentes des espèces isolées de la bière. Les auteurs proposent de les nommer Brettanomyces vini et Brettanomyces schanderlii.     

Nitrogen fixation in bambara groundnut,Voandzeia subterranea (L.) Thouars

Summary To improve biological nitrogen fixation in bambara groundut (Voandzeia subterranea (L.) Thouars), the relative effectiveness of 24 cultivars was studied in the field at two experimental stations selected for their different ecological conditions. Thirty oneRhizobium strains were isolated and 12 cultivars were screened during this study. Both indigenous and introduced NiftalRhizobium strains were used during a second study on host cultivars xRhizobium strains interactions. Nodulation index and shoot dry weight were used to assess the efficiency. The widest effectiveness spectrum was observed with the indigenous strain MAO 113 and the introduced strain TAL 22.

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Resumen Afín de mejorar la fijación biológica de nitrógeno en el cacahuete de Bambara (Voandzeia subterranea (L.) Thouars), se realizó un estudio de su efectividad relativa en campo en dos estaciones experimentales seleccionadas por sus distintas condiciones ecológicas. Durante este estudio se aislaron treintaiuna cepas deRhizobium y se probaron doce cultivares del huésped. En un segundo ensayo se estudiaron las interacciones huésped xcepa deRhizobium para lo cual se utilizaron cepas deRhizobium Niftal tanto indígenas como introducidas. La eficiencia se valoró determinado el índice de nodulación y el peso seco de la parte aerea. El espectro más amplio de eficacia se observó con la cepa indígena MAO 113 y la introducida TAL 22.

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Résumé Dans le but d'améliorer la fixation biologique d'azote dans la noix de Bambara (Voandzeia subterranea (L.) Thouars), l'efficacité relative de 24 cultivars a été étudiée sur le terrain dans deux stations expérimentales choisies pour leurs conditions écologiques différentes. Trente-etune souches deRhizobium ont été isolées et 12 cultivars ont été testés au cours de cette étude. Tant les souches indigènes deRhizobium que celles Niftal introduites ont été utilisées au cours d'une deuxième étude sur les interractions entre les souches deRhizobium et les cultivarshôtes. L'indice de nodulation et le poids sec de la pousse ont été utilisés pour l'établissement de l'efficience. Le spectre d'efficience le plus large a été observé avec la souche indigène MAO 113 et la souche introduite TAL 22.

     

Interaction ofPhaseolus vulgaris with thermotolerant isolates ofRhizobium leguminosarum biovarphaseoli from Kenyan soils

Summary Thermotolerant strains ofRhizobium leguminosarum biovarphaseoli were isolated from nodules ofPhaseolus vulgaris grown in Kenyan soils, where high soil temperatures often exceed 40°C during sunny days. The isolates varied in their maximum growth laboratory temperature with two strains, 17 and 29B, able to grow at 42°C on yeast extract/mannitol agar media and at 40°C in liquid medium. These strains also survived better in moist clay soil at 38°C and 42°C and on seeds at room temperature but did not grow as well as several of the other strains at low pH. The thermotolerant strains nodulated three bean cultivars in a rooting medium that attained a daily maximum temperature of 36°C to 40°C but they varied in effectiveness according to the cultivar used.

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Interaction dePhaseolus vulgaris avec des isolats thermo-tolérants deRhizobium leguminosarum biovarPhaseoli de sols du Kenya

Résumé On a isolé des souches thermo-tolérantes deRhizobium leguminosarum biovarphaseoli de nodules dePhaseolus vulgaris developpés dans des sols du Kenya où la température haute du sol dépasse souvent 40°C, les jours ensoleillés. Les températures de croissance maximum au laboratoire varient d'un isolat à l'autre, avec deux souches, 17 et 29B, capables de croître à 42°C sur milieu gélosé à l'extrait de levure et au mannitol et à 40°C sur milieu liquide. Ces souches survivent également mieux en sol argileux humide respectivement à 38 et à 42°C, et sur semences à température ambiante mais ne croissent pas aussi bien que plusieurs autres souches à pH bas. Les souches thermo-tolérantes ont nodulé trois cultivars de fèves en milieux propices à la germination qui atteignaient une température diurne maximum de 36 à 40°C mais elles varient en efficacité selon le cultivar utilisé.

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This work was carried out at University of Nairobi under NairobiRhizobium MIRCEN, P.O. Box 30197, Nairobi, Kenya.     

Identification of inoculant strains and naturalized populations ofRhizobium leguminosarum bvtrifolii using complementary methodologies

Introduced clovers (Trifolium repens andTrifolium subterraneum) fall to persist more than two years in Uruguayan improved pastures. Three strains of naturalizedRhizobium leguminosarum bvtrifolii, isolated from persistent clover pastures inoculated several years ago, and two commercial inoculant strains have been identified. Serological techniques (enzyme-linked immunosorbent assay—ELISA) and total cell protein pattern have been selected as sensitive and reliable methods for strain identification. Indirect ELISA was suitable for detecting rhizobia in cultures or in nodules. Two of the naturalized strains had distinct protein profiles but they could not be differentiated by the immunological method with a polyclonal antibody.

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Résumé Des trèfies (Trifolium repens etTrifolium subterraneum) introduits dans des pâturages améliorés d'Uruguay, n'ont pu s'y maintenir plus de deux années. On a identifié 3 souches naturalisées deRhizobium leguminoserum bvtrifolii de pâturages aux trèfies persistants, inoculés il y a plusleurs années, ainsi que 2 souches d'inoculation industrielles. Des techniques sérologiques (ELISA: enzyme-linked immunosorbent assay) et l'histogramme des protéines cellulaires totales ont été sélectionnées comme méthodes sensibles et fiables pour l'identification des souches. Le test ELISA indirect est vaiable pour détecter les rhizobia en culture ou dans les nodules. Deux des souches naturalisées avaient leur propre profil protéique mais elles n'ont pu être différenclées par la méthode immunologique utilisant un anticorps polyclonal.

     

Screening for extracellular enzymes of fungi from manufacturing wastes

Summary Three different types of manufacturing waste, dried soybean meal after oil extraction, sesame seed meal after oil extraction, and brewery spent grain from beer production, were plated for fungi with malt extract agar and potato-dextrose agar. Brewery spent grain gave the highest fungal counts and sesame seed meal the least. The more abundant fungi were:Absidia sp.,Aspergillus flavus andAsp. ochraceus in soybean meal;Asp. flavus, Rhizopus oryzae and yeast in sesame seed meal, andAsp. restrictus and yeast in brewery spent grain. Nine fungal isolates were screened for extracellular amylase, protease, cellulase and lipase activity.Aspergillus flavus andFusarium oxysporum were good producers of these enzymes, butAbsidia sp.,Aspergillus ochraceus and the yeasts showed a limited range of enzyme activities.Aspergillus restrictus, an osmophilic fungus, had no activity for the four enzymes.

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Resumen En placas de agar de patata y dextrosa (PDA) y de extracto de malta se sembraron tres tipos de residuos industriales: pulpa de soja, una vez realizada la extracción de aceite, pulpa de semillas de sésamo, después del mismo proceso, y residuos de cereales de fábrica de cerveza. El mayor número de hongos se obtuvo a partir de los residuos de cereales y el menor a partir de la pulpa de semillas de sésamo. Los hongos más abundantes fueron:Absidia sp.,Aspergillus flavus yAsp. ochraceus en pulpa de soja,Asp. flavus, Rhizopus oryzae y levaduras en pulpa de semillas de sésamo, y,Asp. restrictus y levaduras en residuos de fábrica de cerveza. Se estudiaron las actividades extracelulares de amilasa, proteasa, celulasa y lipasa.Aspergillus flavus y Fusarium oxysporum eran buenos productores de estos enzimas, sin embargo,Absidia sp.,Asp. ochraceus y las levaduras mostraron una limitada variedad de actividades enzimáticas.Aspergillus restrictus, hongo de tipo osmofílico, no mostró actividad para niguno de los cuatro enzimas estudiados.

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Résumé Les champignons présents dans trois sortes de déchets industriels (tourteaux délipidés de soja et de sésame, et graines résiduelles de brasserie) ont été cultivés sur milieux gélosés à l'extrait de malt et à la dextrose de pomme de terre. Les graines résiduelles de brasserie ont donné les numérations de champignons les plus élevées, et le tourteau de sésame les plus faibles. Les champignons les plus abondants sont: dans le tourteau de soja,Absidia sp.,Aspergillus flavus etAsp. ochraceus; dans le tourteau de sésame,Asp. flavus, Rhizopus oryzae et la levure; et dans les graines résiduelles de brasserie,Asp. restrictus. Neuf souches de champignons ont été isolées et examinées en ce qui concerne la production extracellulaire des activités amylase, protéase, cellulase et lipase.Aspergillus flavus etFusarium oxysporum sont de bons producteurs de ces enzymes. Par contre,Absidia sp.,Aspergillus ochraceus et les levures ont des activités enzymatiques faibles. Le champignon osmophileAspergillus restrictus ne produit aucun des quatres enzymes.

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Paper presented at the VII International Conference on the Global Impacts of Applied Microbiology, Helsinki, 12–18 August 1985     

Isolement et sélection de souches d'actinomycètes productrices de substances antifongiques de structure non-polyénique

Résumé Dans le but d'étudier des souches d'actinomycètes productrices de substances antifongiques de structure non-polyénique, 13, échantillons de sol prélevés dans le sud de la France ont été examinés. L'utilisation de milieux sélectifs a permis d'isoler 486 souches d'actinomycètes qui ont été testées vis-à-vis de quatre espèces de champignons et de levures: 18% des souches isolées sont actives sur au moins l'une des espèces utilisées. Parmi celles-ci 14 souches, productrices de substances de structure non-polyénique, ont été sélectionnées après étude des spectres d'absorption en UV des surnageants de culture, des extraits butanoliques de ces surnageants ou des extraits méthanoliques de mycélium. L'utilisation d'un test bactérien de toxicité à court terme (SOS Chromotest) a permis de montrer que 10 souches sur 14 présentent aussi une activité génotoxique.

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Summary In order to study actinomycete strains producing non-polyenic antifungal substances 13 soil samples were collected in S. France. By using selective media 486 strains of actinomycetes were isolated and tested on four species of moulds and yeasts: 18% of the isolated strains were active against one or more of the test organisms. From these isolates 14 producers of non-polyenic antifungal substances were selected by means of u.v. absorption spectra of culture supernatant fractions, butanol extracts of these fractions, or methanol extracts of mycelium. A rapid bacterial toxicity assay (SOS Chromotest) demonstrated that 10 of the 14 selected strains had genotoxic activity.

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Resumen Para el estudio de cepas de actinomicetes productores de sustancias antifúngicas no poliénicas, se recogieron 13 muestras de suelo en el S. de Francia. Utilizando medios selectivos se aislaron 486 cepas de actinomicetes que se ensayaron frente a cuatro especies de mohos y levaduras: 18% de las cepas aisladas mostraron actividad frente a uno o más de los organismos utilizados en el test. De estas cepas se seleccionaron 14 que eran productoras de sustancias antifúngicas no poliénicas mediante el espectro de absorción al U.V. de las fracciones sobrenadantes del cultivo, de extractos butanólicos de dichas fracciones o de extractos metanólicos del micelio. Un ensayo rápido de toxicidad bacteriana (SOS Chromotest) mostró que de las 14 cepas seleccionadas lo tenían actividad genotóxica.

     

Susceptibility of gypsy moth larvae toLymantria spp. nuclear-and cytoplasmic-polyhedrosis viruses

SevenLymantria spp. viruses from widely separated sources were used in a screening test for virulence. Laboratory data show thatLymantria dispar L. cytoplasmic-polyhedrosis virus of Japan, and the nuclear-polyhedrosis virus of Connecticut (U.S.A.) are more virulent than other five viruses when tested on the larvae of the gypsy moth. The nuclear-and cytoplasmic-polyhedrosis viruses ofLymantria fumida Btl. were also infectious forL. dispar larvae.

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Résumé On a comparé au laboratoire la virulence de 7 souches différentes de virus des polyédroses nucléaire et cytoplasmique isolées deLymantria spp. Les essais effectués par contamination de la nourriture montrent que les chenilles deLymantria dispar L. sont sensibles à tous les virus employés. Les données permettent d’établir que la souche américaine de virus de la polyédrose nucléaire et la souche japonaise de virus cytoplasmique deL. dispar sont les plus virulentes.

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Presented at the 1st meeting of the “Working Group onLymantria dispar, O. I. L. B.”, Tempio Pausania, Italy, October 16–17, 1969.     

Étude de quelques bacilles homolactiques isolés de vins

Résumé Les auteurs ont étudié 750 bactéries lactiques isolées de vins, en utilisant les tests et le système de classification de Rogosa et Sharpe. Parmi ce grand nombre de souches vingt-trois appartiennent au groupe des bacilles homolactiques et font l'objet du présent travail. Elles se répartissent de la façon suivante: 9 souches de Lactobacillus plantarum, 2 souches de Lactobacillus casei var. casei, 4 souches de Lactobacillus casei var. alactosus et 8 souches de Streptobacterium non classées, différentes des espèces précédentes.Les auteurs discutent la valcur de cette classification, lorsqu'on se place au point de vue technologique. Ils montrent qu'elle s'applique mal aux bactéries lactiques isolées de milieux fermentés acides comme le vin. Elle a peu d'intérêt pratique, car elle ne permet pas de repérer une souche et de prévoir par sa position systématique les constituants du vin que cette souche est susceptible de métaboliser.

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A study of some homofermentative lactic acid bacteria isolated from wines

Summary The authors have studied 750 strains of lactic acid bacteria isolated from wines. In this study the test and classification of Rogosa and Sharpe were used. Of the strains mentioned 23 belonged to the homolactie bacteria, including 9 strains of Lactobacillus plantarum, 2 strains of Lactobacillus casei var. casei, 4 strains of Lactobacillus casei var. alactosus, and 8 strains of a non-identified Streptobacterium species.The authors discuss the value of the classification mentioned from the point of view of wine technology. They conclude that it cannot be applied in the case of lactic acid bacteria isolated from acid fermentation products such as wine. It is only of little practical interest because it does not render the identification of the strains possible, nor does it permit a prediction of the wine constituents which the strains concerned are able to metabolize.