柱胞鱼腥藻原生质球自发融合的研究

早在1976年,细菌就实现了原生质体融合杂交[1]。同样是原核生物,蓝藻原生质球融合及细胞杂交至今没有任何报道。究其原因,首先是由于蓝藻原生质球再生技术长期不过关、近年来,蓝藻原生质球再生虽有若干报道[2～4],但再生技术还不够成熟;另一方面,很早就通过电镜检查发现     

鱼腥藻SP.595液泡化原生质球诱导条件的研究

用浓度为0．15mol／L的KNO3、KCl、K2SO4、KH2PO4、K2HPO4、NaNO3、NaCl、Na2SO4、NaH2PO4、Na2HPO4、(NH4)2SO4、MgSO4、CaC12等单盐分别配合0．1％的溶菌酶处理鱼腥藻sp．595(Anabaenasp．595)。经4h,KH2PO4、K2SO4、Na2SO4、NaH2PO4、(NH4)2SO4、MgSO4、CaC12能诱导形成原生质球,但液泡化原生质球极少,而KNO3、NaNO3、NaC1诱导形成少量液泡化原生质球。用相近浓度的双盐,即KNO3和NaC1、KNO3和(NH4)2SO4、NaC1和(NH4)2SO4分别配合0．1％的溶菌酶处理,诱导效果亦不佳。用相近浓度的三盐NaC1、KNO3和(NH4)2SO4及五种盐NaC1、KNO3、(NH4)2SO4、Na2HPO4和KH2PO4分别配合0．1％的溶菌酶处理,诱导原生质球和液泡化原生质球的效果明显提高,液泡化原生质球比例达到66．90％—79．97％。     

KCl诱导柱胞鱼腥藻形成液泡

蓝藻营养细胞的亚显微结构,很早就已进行了深人的研究．人们知道,蓝藻细胞内含DNA微丝、内羹体、核糖体、气泡及贮藏颗粒等[1]．近年来,作者在蓝藻原生质球分离和培养［‘”］中注意到,有些无机盐对蓝藻细胞结构产生很大影响,并对受KO影响的住胞鱼腥藻细胞进行了亚显微结构检查,发现在KO影响下柱胞鱼腥藻细胞内形成液泡,这一发现在国内外尚属首次,为此简报如下．l材料和方法本试验使用住胞鱼腥藻（Anabaenarylindrica）,材料引自中国科学院水生生物研究所,培养条件参见文献［51。试验时,将材料培养于含0．lmoFLKO的液体培养…     

鱼腥藻Anabaena PCC7120原生质球和液泡的同步诱导

植物和真菌的液泡,都是通过原生质体途径被分离后才得以深入研究.要分离蓝藻液泡,首先要求制备蓝藻原生质体(球),而这一技术在蓝藻方面长期不过关.最近十年来,作者在这方面进行了不断的努力,先后在蓝藻原生质球制备1、培养再生和融合2等方面获得进展,这方面的研究导致了蓝藻液泡的重新发现3.所发现的液泡由无机盐诱导产生,经电镜检查为单位膜所包围,故确定为液泡.借助较为成功的原生质球制备技术,首先分离了无机盐诱导形成的液泡,在此基础上进一步发现和分离了非诱导液泡4,在分离非诱导液泡的试验过程中发现了原生质球和液泡的同步诱导作用.       

盐胁迫对柱胞鱼腥藻细胞结构和固氮作用的影响

在含ＫＣｌ的条件下培养,柱胞鱼腥藻细胞膨大,球形化,色素质靠向细胞一侧,另一侧变成无色透明区。电镜检查,无色透明区形成液泡。此种结构改变是可逆的,ＣａＣｌ２可抵消ＫＣｌ的这种作用。在含ＫＣｌ的无氮培养基中培养,柱胞鱼腥藻生长迟缓,细胞黄化,乙炔还原法测定固氮活性下降９５％。     

盐胁迫对柱胞鱼腥藻细胞结构和固氮作用的影响

在含KCl的条件下培养,柱胞鱼腥藻细胞膨大,球形化,色素质靠向细胞一侧,另一侧变成无色透明区。电镜检查,无色透明区形成液泡。此种结构改变是可逆的,CaCl2可抵消KCl的这种作用。在含KCl的无氮培养基中培养,柱胞鱼腥藻生长迟缓,细胞黄化,乙炔还原法测定固氮活性下降95％。     

鱼腥藻7120细胞液泡内含物的初步测定

对鱼腥藻7120细胞液泡内含物中4种水溶性的物质进行了测定,液泡中4种物质占整个细胞中4种物质的比例分别为：蛋白质：14．1％;还原糖：34．4％;核酸：28．5％;藻青蛋白12．1％。     

蓝藻原生质球研究的现状及存在问题

在原生质体(球)技术方面,蓝藻也许是一种最为困难的材料了。蓝藻原生质球的研究工作起步不算很晚,但进展不快。直到现在,作为一项可以用于遗传操作的基本技术还没有建立起来。这主要表现在,原生质球的再生问题没有解决;此外,在基本分离制备方面也存在不少问题。而对于植物、真菌、细菌、放线菌和绿藻,这些问题都早已     

固定化固氮鱼腥藻细胞的固氮放氢

以2％海藻酸钙包埋鱼腥藻细胞进行固定化培养,鱼腥藻的固氮、放氢和吸氢活性均明显提高。固定化培养的鱼腥藻生长速度减缓,较高固氮活性维持的时间增长,对氧和铵的敏感度降低。以2％GaCl_2固化5min制成的胶珠较为理想。     

蓝藻原生质球渗透稳定剂的研究

蓝藻原生质球渗透稳定剂的研究郭厚良,陈勇,金传荫（武汉大学生物系,４３００７２）（中国科学院水生生物研究所,武汉４３００７２）ＡＳＴＵＤＹＴＯＴＨＥＳＴＡＢＩＬＩＺＥＲＳＩＳＯＬＡＴＩＮＧＯＦＢＬＵＥ－ＧＲＥＥＮＡＬＧＡＬＳＰＨＥＲＯＰＬＡＳＴＳ￥Ｇ...     

蓝藻球形体的分离,培养及再生

在高渗溶液中,用0.05%溶菌酶和2—5mmol·1~(-1)EDTA 处理蓝藻柱孢鱼腥藻、多变鱼腥藻和组囊藻细胞。5—8h 后,70—90%的细胞转为对渗透压敏感的球形体(Spheroplast),又称原生质球。研究了藻的不同培养条件对球形体形成率的影响。测定了 EDTA 处理藻纽胞后外膜脂多糖的释放量。在高渗溶液中,藻细胞和经酶处理获得的球形体的光合放氧活性明显下降,固氮种类的固氮活性失去。饲养层法、固体混合法和含有0.5mg·1~(-1)BA 的液体悬滴培养的柱孢鱼腥藻的球形体,9天后出现再生藻落;在固体混合法培养中获得了组囊藻球形体的再生藻落。在第4天的悬滴培养物中,可以看到球形体发生第一次细胞分裂。再生藻细胞和酶处理物中残留细胞的抗溶菌酶特性有差异。     

不同无机盐对柱胞鱼腥藻同工酶的影响

盐胁迫对蓝藻的影响已有广泛的研究,人们围绕着渗透胁迫(osmoticstress),研究了高浓度盐影响蓝藻的生长、光合作用、呼吸作用、固氮作用、蛋白质和RNA的合成等〔1～4〕;但迄今为止,尚未见到有关盐胁迫下蓝藻同工酶变化情况的报道。无机盐对同工酶影响无论对于盐胁迫反应生理及机制的研究,还是对于蓝藻基因表达调控等都有重要的意义。为此,我们在研究了无机盐对蓝藻的细胞学效应、固氮酶活性的影响〔5～7〕等之后,就无机盐对蓝藻同工酶的影响进行了初步研究。1　材料与方法试验用的柱胞鱼腥藻(Anabaenacylindrica)是一种具异形胞的丝状固氮…     

柱孢鱼腥藻的藻蓝蛋白亚基和F_(678)色素蛋白

柱孢鱼腥藻的藻蓝蛋白包含有两个亚基。β亚基具有578nm吸收峰和600nm荧光发射峰,分子量19.80±0.40KD,可表明β亚基仅有一个载色团。α亚基具有578nm和630nm吸收峰及645nm的荧光发射峰,分子量17.35±0.38,α亚基可能有两个载色团。别藻蓝蛋白有635nm和650nm吸收蜂及664nm的荧光发射峰。具藻胆体的类囊体膜从高盐浓度缓冲液移至低盐浓度缓冲液时表现678nm荧光发射峰,可能柱孢鱼腥藻存在的F_(678)色素蛋白相当于GLazer(1975)的别藻蓝蛋白B。     

Regeneration of Spheroplasts in a N2-Fixed Filamentous Blue-Green Alga Anabaena cylindrica

Over 90% of cells of Anabaena cylindrica growing in the medium containing 0. 1 mol/L KC1 for 7～9 d transformed into spheroplasts or semispheroplasts which were either sensitive or not sensitive to hypotonic condition. After treating the materials with 0. 1% lysozyme at 28 ℃ for 3～4 h the transformed spheroplasts were almost 100% sensitive to the hypotonic condition. The spheroplasts then regenerated and divided through culture in the inorganic medium containing 0.15 mol/L CaCl2 with a rate over 25 %. The regeneration of different spheroplasts was not synchronous, the fastest division being after 3 d. Cell division was mainly equational but also irregular division or budding.     

LIGHT-INDUCED REDUCTION OF NITRATE, NITRITE AND HYDROXYLAMINE IN A BLUE-GREEN ALGA, ANABAENA CYLINDRICA

1. Reduction of nitrate, nitrite and hydroxylamine by intact cellsof Anabaena cylindrica was investigated with special referenceto the stimulating effect of light on these processes.
2. Itwas found that in light and under anaerobic condition thesecompounds are reduced to ammonia, with the production of extraoxygen. The stoichiometry of the reactions under these conditionscan be represented as follows: HNO₂+H₂O=NH₂+2O₂ HNO₂+H₂O=NH₂+1O₂ NH₂OH+H₂O=NH₂+O₂+H₂O
3. Reduction of nitrite and hydroxylaminewas markedly suppressedby CMU in the light but not in the dark.KCN inhibited reductionto the same extent both in the lightand in the dark. Reductionin the light was much less sensitiveto the uncoupling agent,DNP, than was that in the dark.
4. Atlow light intensities, CO_2– was suppressed by 20–30per cent by the simultaneous provision of nitrite, but the nitritereduction was not affected at all by CO₂. At high light intensities,reduction of nitrate and nitrite was considerably acceleratedby CO₂
5. On the basis of these findings, a possible mechanismfor thelight stimulation of the reactions in question was brieflydiscussed.

(Received August 22, 1962; )     

渗透稳定剂的互补效应及某些渗透稳定剂对蓝藻细胞壁的降解作用

由多种盐组成的复合渗透稳定剂用于分离蓝藻原生质球的效力与单一盐溶液相比较,其作用多数显示加强,但对原生质球稳定性的影响随盐类组合而异。若干种盐类,如酒石酸铵、硫酸铵和硫酸镁,对蓝藻细胞壁表现一定的降解作用,以酒石酸铵作用最强,可用于分离原生质球。此种原生质球透明度较差,但对低渗敏感