双佐剂包被的破伤风类毒素马匹免疫试验

为提高破伤风免疫马匹的血浆抗体效价,应用不同佐剂配制TT抗原,进行马匹超免疫比较研究;采用FIA和植物油双佐剂包被与单佐剂包被的TT抗原,注射马匹进行超免疫,比较三组血浆的效价;结果显示,双佐剂抗原较单佐剂的免疫效果好,但可能对马匹刺激较强,有待调整注射剂量和免疫程序。     

肉毒A、B、E、F型抗毒素血浆的试生产与检定

按照《中国生物制品规程》(2000版)的规定,在肉毒A、B、E、F型抗毒素血浆试生产前,制定了肉毒A、B、E、F型类毒素马匹免疫计划及相应抗毒素血浆效价测定方法,免疫结果显示：肉毒A、B、E、F型类毒素免疫马匹成功率分别为75%、75%、60%、100%。     

免疫抑制对EIAV弱毒疫苗免疫马体内疫苗弱毒株载量的影响

为了研究马传染性贫血弱毒疫苗EIAVFDDV在体内的生物学特性,特别是在免疫马血浆中低拷贝存在状态的形成原因,使用连续给予地塞米松的方法,对EIAVFDDV免疫马匹进行了免疫功能抑制．连续给药10天后,以植物血凝素（PHA）作为刺激原的淋巴细胞非特异性增殖实验表明,实验马匹的免疫系统功能受到了明显抑制．使用实时RT-PCR对免疫抑制前后实验马匹体内EIAVFDDV的载量进行了定量检测．结果显示,EIAVFDDV免疫马匹体内的病毒载量在2匹马中未见升高,1匹马体内略有增高,但仍处于EIAVFDDV在免疫马匹体内载量的正常范围．作为对照,强毒株隐性携带马的病毒载量提高了约25000倍,并出现了典型的临床症状．实验结果提示,致弱后病毒特有的生物学特性,而非免疫压力,是EIAV疫苗株在宿主血浆中低拷贝存在的主要原因．同时,在免疫系统功能受抑制状态下,疫苗株在免疫马体内仍然表现出了相对稳定的低拷贝复制状态,进一步显示了EIAVFDDV在应用中的安全性．     

抗绿脓杆菌外毒素 A 血浆的研制

试验制备了抗绿脓杆菌外毒素－Ａ血浆,使用马匹免疫抗原为精制ＰＡ－１０３菌株的外毒素－Ａ。抗血浆效价第一程采血达到了２０８８单位／ｍｌ,第三程采血达到５１８６单位／ｍｌ。     

马传染性贫血病毒弱毒疫苗株与亲本强毒株的体内病毒载量与诱导保护性免疫关系的研究

慢病毒免疫应答的载量阈值学说认为病毒载量决定了机体对病毒反应的类型。为了探讨马传染性贫血病毒(EIAV)血浆病毒载量与马体免疫保护的相关性,本研究利用Real-time RT-PCR方法对EIAV弱毒疫苗株(EIA-VDLV125)免疫马和EIAV强毒株(EIAVLN40)非致死剂量接种马血浆中病毒载量进行了动态比较。结果显示两组马在监测过程中皆可检测到相似水平的病毒载量(103～105copies/mL),且两者之间差异不显著(P0.05)。以上毒株接种23周后,对马匹进行了强毒株(EIAVLN40)的致死剂量攻毒,根据攻毒后典型马传贫急性发病与否确定接种保护率。结果显示,疫苗组的保护率为67%而非致死剂量强毒组的保护率为0。以上结果提示,病毒血浆载量不是决定EIAV弱毒疫苗诱导免疫保护能力的主要或单一因素。     

不同来源血浆对静注人免疫球蛋白中抗-HBs、白喉抗体效价的影响

调查分析不同来源原料血浆对静注免疫球蛋白(IVIG)制品内的抗-HBs、白喉抗体效价的影响。选择6个单采血浆站,对其提供的血浆为原料制备的IVIG所含的抗-HBs抗体、白喉抗体效价进行了测定。检测结果显示,用A、B、C、D、E、F编号的6个相应血浆站采集的血浆为原料制备成IVIG其抗-HBs抗体(IU/g)效价分别为33.77、103.95、70.94、132.45、78.84、58.28;白喉抗体平均效价分别为5.17、7.36、4.26、7.67、10.14、9.24。6个单采血浆站间的IVIG制品中白喉抗体效价无明显差异,但抗-HBs效价却存有显著差异。     

新型佐剂在破伤风抗毒素血浆生产中的应用研究

应用两种新型佐剂(Montan inde ISA 50V和Montan inde ISA 206)分别乳化精制破伤风类毒素制备成油乳抗原,免疫豚鼠三程,并与弗氏不完全佐剂(FIA)进行对比;在弗氏不完全佐剂免疫马匹到第7程后,改换新型佐剂抗原免疫三程(第8、9、10程)。采用小鼠中和试验测定血清效价。结果表明,两种新型佐剂使用安全,稳定性良好,且操作方便;使用Montan inde ISA 50V免疫豚鼠与马匹的免疫效果均有明显优势,Montan inde ISA 206次之,FIA效果相对较差。表明新型佐剂Montan inde ISA 50V的应用前景良好。     

马抗SARS-CoV免疫球蛋白制备的研究

用纯化灭活的SARS—CoV抗原免疫马匹,采集血浆加入S／D灭活／去除病毒,用硫酸铵盐析沉淀提取抗SARS—CoV IgG,再经胃酶切、柱超滤等工艺制备马抗SARS-CoV免疫球蛋白。研制的马抗SARS—CoV免疫球蛋白制品中和抗体效价达1：6400以上、F(ab’）2纯度在90％以上。建立了高效、稳定、效果好的马抗SARS—CoV免疫球蛋白生产工艺,为SARS的治疗和预防提供了可靠的保证,也为传统抗血清的更新换代提供了技术平台。     

马匹接受蝮蛇抗原免疫最终死亡的统计报告

本文对1984年免疫马中,十六匹致死只接受蝮蛇抗原免疫的马进行了统计分析。结果认为最终因血栓死亡的马和因肝破裂死亡的马一样达到30％左右,比其它各类疾病死亡的总和20％还高,从而提出三个探讨点,蝮蛇毒中是否含有可造成血栓的新成份?是甲醛对类凝血酶的破坏作用造成了马匹的血栓吗?是抗体的产生导致了马匹的血栓吗?     

一种提高破伤风类毒素马匹免疫成功率的方法

采用抗原加倍方法用于成率率低于705群的巴匹免疫,结果显示,进一步免疫成功的马匹明显多于常规免疫（P＜0．05）,免疫效价和死亡率无明显变化（P＞0．05）。     

疟疾患者丙型肝炎病毒感染原因的血清学研究

本文报道了９７例疟疾患者丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染的原因。发现疟疾患者抗－ＨＣＶ阳性率为７１．１３％,其中有单采血浆还输血细胞（下称单采浆）献血史者为８９．７１％,有受血史者为６４．２９％,既无单采浆史又无受血史者无一例抗－ＨＣＶ阳性。有单采浆史的疟疾患者与同村非疟疾的单采浆献血者相比,抗－ＨＣＶ阳性率无显著不同,且二者均显著高于同村既无单采浆史又无受血史的非疟疾人群。在无单采浆史和受血史人群中,疟疾病例和非病例抗－ＨＣＶ阳性率很低。说明有单采浆史的疟疾病例ＨＣＶ感染与单采浆有关,有受血史的疟疾病例ＨＣＶ感染与受血有关。对当地单采浆血站进行调查,发现在采血、分离血浆和血细胞还输过程中存在血液交叉污染,这是导致有单采浆史的疟疾病例ＨＣＶ感染的主要原因。     

用马匹制备炭疽沉淀素诊断血清的试验小结

本文报告了用炭疽死菌抗原免疫马匹制备炭疽沉淀素血清的试验情况:证明静脉注射水剂抗原和皮下或肌肉注射油剂抗原,在超免疫达第四针免疫时(即自免疫开始第27天后)就可获得在3—5分钟出现环状沉淀反应的诊断血清。     

四川地区2013—2014年供血浆人群HBsAg、抗-HCV和抗-HIV检测结果分析

目的分析四川地区2013—2014年供血浆人群的血液检测HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV阳性率与年龄和性别的相关性,为制定从低危供血浆人群中招募策略及安全供血提供依据。方法收集2013年1月至2014年12月四川地区10家单采血浆公司采集的111 816名供血浆者年龄、性别资料及血浆样品HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV确证检测结果,比较分析不同年龄、性别的供浆人群的病毒指标阳性率差异。结果 2013年和2014年总体阳性率分别为0.58%和0.52%,抗-HIV阳性率由2013年的0.02%下降到2014年的0.01%;2013年和2014年总体阳性率随年龄增加呈递减的趋势;HBs Ag不合格率随年龄增加而降低,抗-HCV不合格率在41~55岁年龄段高于18~40岁年龄段,抗-HIV不合格率在18~40岁年龄段高于41~55岁年龄段;女性供血浆者总体阳性率为0.43%,男性为0.77%,女性低于男性;女性HBs Ag、抗-HIV阳性率分别为0.35%和0.01%,低于男性的0.67%和0.03%。结论女性、较年长的供血浆者为供浆低危人群,应该作为重点招募稳定供献血浆的对象,同时应进一步提高献浆前问询技巧,增强对高危人群的评估辨别能力,从而更有效的减少不必要的血浆报废,保证血浆采集安全性,促进采浆事业科学可持续发展。     

肺癌患者血浆外泌体蛋白质组分析

目的:探究肺癌患者与肺部良性结节病人血浆外泌体中蛋白质组的差异。方法:收集肺癌与肺部良性结节病人的术前血浆,随机选取肺腺癌病人血浆15例、肺鳞癌病人血浆10例作为实验组,肺部良性结节病人血浆5例作为对照组,采用超速离心法分离得到外泌体,定量质谱鉴定分析肺癌病人与肺部良性结节病人血浆外泌体蛋白质表达的差异性,SDS-PAGE和蛋白质免疫印迹法检验提取到的蛋白质。结果:共检测到血浆外泌体蛋白质253个,并初步确定其中18个在肺癌病人血浆外泌体中表达上调,8个在肺癌病人血浆外泌体中表达下调,免疫印迹法验证了上调蛋白质中的补体蛋白C4a。结论:鉴定出26个外泌体差异表达蛋白质,为肺癌早期诊断提供了新的候选分子。     

消化道肿瘤根治术后早期血浆白蛋白降低与多种因素相关

为探讨消化道肿瘤根治术后早期血浆白蛋白降低的相关因素,本研究选取自2013年11月至2017年6月我院收治的消化道肿瘤根治术患者共80例,依照消化道肿瘤根治术后的早期血浆白蛋白是否降低分为观察组(n=21例)和对照组(n=59例)。其中,对照组术后早期血浆白蛋白未降低,观察组术后早期血浆白蛋白降低,记录统计两组临床资料,检测血浆ABL、PA、BUN和细胞因子浓度水平;采用羟乙基淀粉法检测观察组和对照组血浆容积并进行单因素相关分析和多因素Logistic回归分析。单因素结果显示:消化道肿瘤根治术后早期血浆白蛋白水平与性别、年龄、TNF-α、IL-1β水平差异无统计学意义(p0.05);消化道肿瘤根治术后早期血浆白蛋白水平与手术时间、血浆ALB、PA、BUN和血浆容积水平关系密切(p0.05);Logistic回归分析显示:消化道肿瘤根治术后早期血浆白蛋白水平与手术时间、血浆ALB、PA、BUN和血浆容积水平关系密切(p0.05)。由此推测,消化道肿瘤根治术后早期血浆白蛋白降低影响因素相对较多,应采取有效的措施进行干预,提高手术成功率。     

利用胎儿核酸进行产前诊断的研究进展

本文分别介绍了孕妇血浆中胎儿DNA和RNA的特性以及近年采利用胎儿DNA和胎儿RNA进行产前基因诊断技术的研究进展,并且着重介绍了其中三种产前基因诊断技术:多重连结探针扩增法(MLPA)、单碱基延伸-质谱分析(SABER-MS)和SNP-RNA等位基因比率法。综述了利用胎儿核酸进行产前诊断技术在临床上的应用。     

乙型脑炎灭活疫苗马匹免疫抗体反应

1970年在流行性乙型脑炎(简称乙脑)半流行地区,用乙脑减毒疫苗免疫马匹的试验中,曾以当年北京生物制品研究所发出的乙脑灭活疫苗,免疫在乙脑半流行地区出生1—2年抗体阴性的马幼驹若干匹。在2月25日与3月5日两天每匹幼驹颈部皮下各注射疫苗20毫升。     

冷适应大鼠脑垂体、下丘脑、脾淋巴细胞和血浆β-内啡肽及其mRNA的变化

本文采用β-内啡肽(β-EP)mRNA打点杂交,反相高效液相色谱和放免测定研究了冷适应SD雄性大鼠垂体、下丘脑、淋巴细胞(LC)和血浆β-EP及其mRNA的变化,结果为:(1)冷暴一周时垂体β-EP mRNA明显增加,从而激活细胞免疫功能。(2)免疫中枢下丘脑和LC β-EP mRNA在冷适应建立(冷暴二周)时增加。(3)血浆β-EP从冷暴二周起持续增加,增强细胞免疫功能。虽然LC和血浆β-EP产物增加,但是垂体β-EP mRNA量从冷暴二周起恢复到对照组水平,很可能是通过LC-垂体-下丘脑轴,信息反馈到中枢神经系统造成的。     

传代人淋巴细胞免疫猪的免疫效果初探

目的用传代人淋巴细胞替代人T淋巴细胞进行猪的免疫,用于试制抗人T细胞猪免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte porcine immunoglobulin,P-ATG)免疫猪血浆,并评价其免疫效果。方法大量培养传代人淋巴细胞至免疫所需浓度及数量,采用常规猪免疫程序进行2次基础免疫及1次加强免疫,获得免疫猪血浆,用E玫瑰花环形成抑制试验和淋巴细胞毒试验进行效价检测。结果 3批免疫猪血浆的E玫瑰花环形成抑制试验结果均达到1∶1 000(花环形成率均小于对照组平均花环形成率的75%),淋巴细胞毒试验结果均达到1∶500(淋巴细胞死亡率均大于20%),效价均达到《中华人民共和国药典》2015版(三部)中生产用免疫猪血浆的效价标准。结论传代人淋巴细胞可作为人T淋巴细胞的替代免疫原进行猪的免疫,获得了效价合格的免疫猪血浆,用于P-ATG的制备。     

F型肉毒毒素的制备及类毒素免疫原性初探

将F型肉毒梭菌经适宜条件产毒培养后,以硫酸铵盐析和酸沉两种不同工艺制备的F型肉毒毒素,用分段脱毒法脱毒制备类毒素,分别免疫豚鼠、马匹后测定免疫血清抗体效价。结果显示,两种工艺制备的毒素其类毒素都具有较好的免疫原性。