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相似文献
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1.
923289限定培并基培并杂交瘤:替代血清及其它优点〔法〕/Bosehetti,E.…了Ann。Pharm。Fr一1901,遵9(4)。一198一205〔译自DBA,1992,11(5),92 02825〕 用3种杂交瘤细胞系ATCC HB4、ATCcHB72和ATCC HB8o检验有血清和无血清培养基培养细胞的功效。介绍了这3种细胞系的性成步骤。将市售的IMDM培养基(含7%胎牛血清)与Imoeell培养基(含抗生素)作比较。采用Faleon箱和细胞培养器,细胞密度为3000。个/ml。HB72和HB80在有血清培养基中生长更好,而HB4则在无血清培养基中生长更好。事实上,HB4的MAb生产变化不明显,而另外2细胞系还略…  相似文献   

2.
生物防治     
924473从摇瓶到发酵镶:大规模昆虫细胞培养的挑战〔会,英〕/Belisle,B.W.…f In Vitro一1992,25(s),Pt.2。一43A〔译自DBA,1092,11 (11),92一06235〕 棒状病毒作为生防因子,要满足市场要求,还需克服成本高的问题。采用经调整的市售无血清培养基,研究了在5个鳞翅目细胞系中小规模、大规模生产胞外及包含体LdMNPV(舞毒蛾核多角体病毒)和AcMNPv(首稿银纹夜蛾核多角体病毒)。采用AeMNPV和草地夜蛾(S,o己。尹tera fr。夕玄-尹”己a) Sfg细胞作为模型系统,培养细胞,规模为100ml~401。细胞密度和存活率达到相当于所报道的含血清培养基的…  相似文献   

3.
疫苗     
922901在杂种病毒辐粒表面表达口蹄痊病毒外宪蛋白抗原决定签单体或二聚体的修饰的活的感染性牛.炎病拜度苗〔英〕/K it,5.…f Areh.virol一i。。1,120(i~2)。一i~17〔译自DBA,1992,11(s), 92一01373〕 将化学合成的编码牛生长激素信号肤序列和口蹄疫病毒(FMDV)VPI抗原决定基序列单体或二聚体擂入到感染性牛鼻炎(IRV)主要糖蛋白g皿基因中,构建了修饰的减活的牛感染性鼻炎杂种病毒疫苗。外源DNA序列擂入到IRVg皿编码序列的N一末端上,并受IRV 9111启动子控制。由含单体和二聚体FMDV抗原决定基序列插入的杂种病毒分别选择编码IRVg…  相似文献   

4.
923477钙、铁和pH对微生物矿化有机化合物的磷酸有效性的影响〔英〕/Robertson,B.K.…了Appl.Environ.Mierobiol一1992,55(i)一38~41〔译自DBA,1992,11(5),92一02972〕 研究了pH、Fe和Ca对假单胞菌(尸se“d。哪-o几as sP.)B和棒杆菌(Co,军忍ebaete,云“二sP.)42生物降解对一硝基苯酚、苯酚和葡萄糖时需磷量的影响。葡萄糖矿化迅速,假单胞菌在含5和10mM磷酸盐的溶液中延伸生长,但其降解的速度和程度以及生长情况均低于在含0.2mM磷酸盐的培养基上的状况。在含对一硝基苯酚或苯酚培养基及纯磷酸盐溶液上的棒杆菌情况相同。在铁浓度高的…  相似文献   

5.
基因库构建     
922884直接偏选含YAC克隆的cosmid文库〔英〕/Bax“-ndale,5.…/Nueleio Aeids Res一i。。1,1。 (25)一6651〔译自DBA,1992,11(4),92-01865〕 介绍了直接筛选含人类人造染色体(HAC)的cosmid基因文库的方法。从48XXXX人类细胞系的酵母人造染色体(YAC)基因文库中分离出重叠YAC克隆〔YGAS(41okb)和YGAio(4‘okb)〕,置于亨廷顿舞蹈病基因4 p16。3候选区内在紫外光下(36Onm)从凝胶上的酵母染色体带中切下HAC带。用(a一‘ZP)一dGTP和一dATP对D NA进行随机引物标记。通过与人切变胎盘DNA预杂交,从探针和经流式分拣的人第4染色…  相似文献   

6.
疫苗     
920931生物技术在研制动物皮苗中的应用〔英〕/Redm。-nd,M J.…了Genet。Eng.Bioteehnol。-1991,11(1)一14一21〔译自DBA,1991,10 (15),91一08572〕 本文综述了应用生物技术生产动物疫苗。讨论的题目有:工程疫苗(即经修饰的减毒重组活疫苗或重组的载体活疫苗如痘苗病毒载体或鼠伤寒沙门菌载体),亚单位重组疫苗(原核系统如大肠杆菌表达的蛋白)、和真核系统(如酿酒酵母菌表达的乙型肝炎病毒、CHO细胞表达的单纯疙疹病毒、携带首落银纹夜蛾核型多角体病毒载体的草地夜蛾昆虫细胞表达的流感病毒或人轮状病毒)表达的蛋白;合成肤疫苗;疫苗配…  相似文献   

7.
生物防治     
922993苏云金杆菌蜡螟亚种新型d一内毒素基因Crylg的核曹酸序列〔英〕/Smuleviteh,5.V.…了FEBSLett一1991,293(i一2)一25一25〔译自DBA,1992,11(4),92一01452」 采用亲和纯化的抗CryIG纯蛋白单特异血清进行筛选,从噬菌体卜pSLS基因文库中分离出B.t.gll一67的杀虫晶体蛋白CryIG的基因即crylg基因。对3种呈免疫反应的克隆进行限制性作图。含全长crylg基因的质粒pOC10经Xbal切除后删去噬菌体部分。所得质粒pOK10作图后,将其Kpnl一Xbal插入子(含有全长基因及两翼序列)克隆到pUC18内,产生pKP7。如此即可在大肠杆菌中经lac启动子调…  相似文献   

8.
目的建立无血清培养基培养Vero细胞制备发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)的工艺。方法分别采用含10%牛血清的MEM(10%MEM培养基)和无血清M2培养基(SF-M2培养基)在方瓶中培养Vero细胞制备SFTSV,比较无血清与含血清培养基培养Vero细胞制备SFTSV在病毒滴度及病毒繁殖曲线之间的差异。在生物反应器里用无血清培养的方式进行工艺放大,收获病毒原液并进行检定。结果无血清培养的Vero细胞能够满足SFTSV培养需求,与含血清细胞培养相比,单位细胞病毒产量没有降低,达到30~60个活病毒/细胞。可以实现在生物反应器的工艺放大,病毒高峰时病毒滴度均在7.0lg PFU/m L以上。结论无血清细胞培养可以应用于SFTSV的培养,有利于降低疫苗生产过程中的纯化难度,提高疫苗安全性。  相似文献   

9.
疫苗     
923619乙型肝炎表面抗原在乳酸克会维醉母中的克隆和表达〔英〕/Martinez,E.…2 Bioteehnol.Lett一1092,14(2)。一53~56〔译自DBA,1992,11 (7),92一03754〕 为了用乳酸克鲁维酵母生产乙肝病毒表面抗原,构建了含lac4基因启动子(来自质粒BSLAC4)、表面抗原基因(来自质粒pHBI)、LAC4终止区及其后的URA3基因(来自酿酒酵母)和LAC4基因的3‘非编码区(来自质粒pJAAS12)的质粒pDLHZ。用含表达盒区的pDLHZ转化乳酸克鲁维酵母VDI,转化子于1%酵母粉、2%蛋白膝和2%葡萄糖的培界基中进行摇瓶培养(21摇瓶装40001培养基,于50℃、25orPm培养…  相似文献   

10.
,石石泞‘汤.刁,,口.r..“924339杆状病毒至组体在受纳和非受纳昆虫细饱中的签娜表达〔会,英〕/Melntosh,A.H.…2 In vitro一1992,25(3),Pt .2一soA〔译自DBA,1992,11(11),92一06032〕 用携带在p10和多角体启动子控制下的声一半乳糖昔酶和荧光素酶基因的首蓓银纹夜蛾多核壳体核多角体病毒(Ac一Gal一Lu。)测定了报道基因在受纳和非受纳昆虫细胞中的表达。所用鳞翅目昆虫细胞系为粉纹夜蛾(Tn一CLI)、草地贪夜蛾(少-LB一Sf21)等6种,还用了鞘翅目棉铃象的细胞系(AGE)。将细胞与Ae一Gal一Lul以ioMOI的量一同在28℃下保温72小时,然后…  相似文献   

11.
920814蟀传染的脑炎病毒cONA克隆片段的分子杂交〔英〕/Pogodina,V。V。…/Aeta Virol一1901,35(i)一71~80〔_译自DBA,1991,10 (15),91一08440〕 以重组D NA质粒做探针,在潜伏期、急病期和持续感染叙利亚仓鼠时检测脾传染的脑炎(TB-E)病毒RNA。通过克隆TBE病毒RNA(大于染色体RNA的50%)的非交叠的RNA拷贝构建探针。构建T质粒pBR一TBEVi、pBR一TBEV7、pBR-TBEVio和pBR一TBEVis,“ZP放射标记后用于dot一blot杂交。在感染后的最初三周内,脑中直接的病毒分离率和RNA检测率为100%,病毒滴度在1.9,至10.5.LDs0/口1范围内,…  相似文献   

12.
生物防治     
931345苏云全杆菌哥斯德变种的分批培并〔英〕/Bihari,’V。…1 J.Microb.Bioteehnol一1092,6(2)一。2~99〔译自DBA,i,。含,11(20);‘,2一11翁7〕 在分批进料系统中研究了苏云金杆菌K钟“-协打变种(Btk)菌株HD一L的培养条件。实验步骤有分批发酵和浓缩营养液的进料。营养进料率  相似文献   

13.
921338盆组组缅生长激紊的大规模一提纯和再折扭〔英〕/Sugimoto,5.…了Agrie Biol.Chem。一1991,55(6)一1635~1637[译自DBA,1991,10(15),91一10383〕 在Manton Gaulin均化器中搅匀含有细鳗重组生长激素(rEST)的大肠杆菌细胞折射体。在s000rPm下离心匀浆(40min),用IM蔗糖洗涤片状沉淀物,然后用4%TritonX一100、20 mM磷酸缓冲液和1 mM EDTA(P H7.2)使之溶解,从而产生折射体。用6M盐酸服、50 mM Tris-HCI和0.005%吐温50(pHs.0),于4℃下搅拌2小时,溶解折射体,然后经离心(80oorpm、40m她)回收之。为使rEST分子再折叠,用10皿MTris…  相似文献   

14.
疫苗     
924009异源基因在牛分枝杆菌BCG中的表达:抗HIV一1Nef蛋白细饱反应的诱导〔英〕/Winter,N.…了Geue一1991,109(i)一47~54〔译自DBA,1992,11(8),92一04359〕 为了用牛分枝杆菌菌株BCG作保护性抗原载体,将编码Nef蛋白的H工V一病毒一1基因克隆于大肠杆菌一分枝杆菌穿梭载体(质粒pRR3)几中并导人BCG。质粒pRR3含一个在分枝杆菌中复制和保留必需的质粒pALSOo。片段、转座子Tn 903卡那霉素抗性基因和大肠杆菌复制原。n“f_基因在含白色链霉菌(St,epto哪歹ees albos)groES/groELi操纵子的启动子和合成核糖体结合位点的DNA表达框架(…  相似文献   

15.
疫苗     
924368产生黄热病毒prM和E蛋白的重组牛痘病毒防治致死的黄热脑炎〔英〕/pineus,5.…了Virology一1992,157(i)一290一297〔译自DBA,1992,11(11),92一06158〕 为了在HeLa细胞培养物中表达17D黄热病毒 (YFV一17D)开读框不同部分,构建了四种重组牛痘病毒(vP766:表达C、prM、E、NSI、和NSZA,vPs6g:表达prM和E;vP729:表达E、NSI、NSZA和NSZB;vP725:表达NSI和NSZA)。表达PrM和E的vP869在小鼠中诱导高效价的中和抗体和血凝抑制抗体,保护水平与YFV一17D疫苗病毒免疫的保护水平相同。表达E和NSI、C prM、E、NSI或仅NSI的…  相似文献   

16.
基因工程     
890690制备棒状病毒表达载体的方法〔专,英〕/Smith,G.E.…/US Patent US4745051.Pub。17.05.88.ApPI.US498s5a,filed 27.05.83〔译自CBA,1955, (8),3152〕 酶切棒状病毒DNA,产生一个含多角体蛋白启动子以及充足的两翼序列(以利于同源重组)的棒状DNA。将此片段插人到一种克隆载体中,并将一外源基因置子该启动子的下游,形成重组穿梭载体。(主璋瑜)890691链霉菌分泌载体仁专,英〕/USPatent US 4745056,.Pob.17.05.38,Appl.US 66384母,f呈lod 23一0.84〔译自CBA,1988,(8),3153〕 能在链霉菌(s考呷户加呷馏。中产生所需蛋白的DN…  相似文献   

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922142微生物生产的鱼生长激紊〔英〕/Kimura,A。厂Critieal Rev.Bioteehnol一19仑1,11(2)113~127〔译自DBA,1991,10(23),91-13460](李思经)922143借助于皿组杆状病澎使两种类型的子实体促性腺激素“亚基在昆虫细胞中表达〔英〕/Huang,C.J一尹Proe.Natl。Aead.Sei.U.S.A一1991,85(17)一7486~7490〔译自DBA,lggx,10(23),91一13连61〕(李思经)922144里氏木霉中凝乳酶一胰岛素融合物的分泌〔会,英〕/Lawler,5.E.一/Bioehem.Soe.Trans一1991,19(3)一2455〔译自DBA,1991,20 (23),91一13462〕(李思经)922145通过酿酒醉母分泌寡聚物V刻…  相似文献   

18.
疫苗     
甲型流感病毒低温适应重组疫苗株基因组中ts缺损的定位〔英」/MeaveQ。、。E…IAeta Virol一1984,28(3)一204~21〔译自DBA,1984,3(1了),84一08111〕852424一卯一,本文研究了亲代流感病毒基因组中以及低温适应株A/Leningrad/134/17/57或A/Leningrad/134/47/57与甲型流感病毒流行株H]Nl和H3NZ的重组病毒基因组中的温度敏感(ts)表型及ts突变的定位。流行株HINI和H3NZ具有ts表型,并在i或2个基因中含有ts突变。在40℃克隆纯化3次后,ts表型丢失。具有不同ts表型的2个低温适应株,在编码非糖蛋白的3个基因(A/Lenin-grad/134八7/57于25oC…  相似文献   

19.
疫苗     
881180感染性重组病毒,含有所述猫白血病病毒疫苗及其生产方法〔专,英〕/Nunbe-rg,J .H.…1 European Patent Appl.EP 0216564.Pub.01 .04 .87.Appl.US.774040,filed 09.09.86〔译自CBA,1957, (6),2576〕 含有一个嵌合猫白血病病毒(FeLV)外壳基因的感染性重组病毒可用作猫白血病疫苗。用病毒DNA和一个插人性载体转染易感的哺乳动物细胞来制备病毒。该载体带有由在细胞内具活性的启动子、翻译起始密码子和为FeLV病毒外壳蛋白编码的一个DNA片段组成的嵌合基因。编码蛋白的DNA受控干启动子。用这种感染性重组病毒和一个衍生载体或…  相似文献   

20.
Vero细胞是世界卫生组织和我国生物制品规程认可的疫苗生产细胞系。随着对疫苗质量和安全性要求的不断提高,用无血清培养基取代含血清培养基培养Vero细胞已成为病毒疫苗生产的一个重要发展趋势。Vero细胞无血清培养的技术关键是研发或选择能支持细胞以贴附培养方式生长的无血清培养基。微载体培养是贴附依赖性细胞系规模化培养和病毒疫苗生产的有效技术途径。我们对Vero细胞无血清培养基的研发、Vero细胞无血清培养及病毒疫苗生产工艺做了讨论,对该领域存在的问题和发展策略进行了展望。  相似文献   

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