根瘤菌纯培养乙炔还原的研究

证实了豇豆型根瘤菌Rhizobium sp.009菌株(为我国自己分离)的纯培养的固氮活力。根瘤菌纯培养固氮的诱导,最突出的一个问题,即重复性不好。我们以CS作固体诱导时的接种培养液及静止液体诱导两方法,分别解决了这两种诱导条件下重复性不好的困难,从而有可能就O_2和NH_2~ 对这一诱导活性的作用作进一步的观察和分析。在我们的固体诱导条件下009菌株的诱导活力高于32H1菌株,另外,在氧浓度稍高于最适诱导浓度且有过量铵存在时,无“铵抑制”效应的出现。     

马铃薯培养基中的根瘤菌自生固氮活性

以20％马铃薯提取液为主,加88毫克分子阿拉伯糖(或蔗糖、或葡糖酸盐)、2.5或25毫克分子琥珀酸钠以及0.7％琼脂,配成简易的马铃薯培养基。豇豆根瘤菌(Rhizobium sp·)330S、330V和32H1三个菌株,以及大豆根瘤菌(Rhizobium japonicum)C_8和B_(15)二个菌株纯培养在此培养基上,均具有自生固氮活性。 气相氧的浓度在0.75～2％时,根瘤菌的固氮活性最高。氧浓度超过10％时,活性显著被抑制。当根瘤菌的固氮酶活性已表达后,加入10％氧,2小时后活性就降低,44小时后随着气相氧浓度的下降,固氮活性又有所恢复。在加入不同碳源的马铃薯培养基中,根瘤菌固氮活性的水平因不同菌株而有差异。培养基中加入适当浓度的琥珀酸钠,根瘤菌固氮活性显著提高。培养基的pH在6.4～7.0范围内,豇豆根瘤菌的固氮活性较高,pH低于5.4或高于8.0时,都没有活性。预培养17天的豇豆根瘤菌仍有一定的固氮活性,但以5～7天的活性最高。分析马铃薯不同提取部分对根瘤菌生长和固氮活性的影响时,表明水溶部分比脂溶部分的效果好。     

固氮研究中乙炔还原定量测定方法的简易化

1966年发现了乙炔能代替分子氮作为生物固氮中的底物,且其还原与分子氮的还原平行相关。由于乙炔还原为乙烯能够用气相层析法测定,既灵敏、又快速,这个方法很快就得到了广泛的应用,在生物固氮研究中起了很大的作用。最近几年来,已陆续发表了多篇专门介绍测定方法的文章。但是,在实际操作时,用气相层析法定量测定乙炔的还原,还存在着不少不方便的地方。例如:以针筒移取微量气体样品时,容易造成较大的误差;又如在换算结果时,需要知道反应器皿的容     

分子氮影响下的蓝藻Anabaena7120乙炔还原

经分子氮预处理的蓝藻乙炔还原活性下降。分子氮对乙炔还原的抑制作用可因CO_2的加入而削弱,氮浓度增高时,CO_2的此种有益作用即消失。在5％ CO_2条件下:(1)光照强度大时,经分子氮预处理的蓝藻乙炔还原活性比未经处理的(氮气中)高些,弱光下则削弱,暗中削弱更大;(2)它受到光合抑制剂的抑制较大;(3)对CO_2和O_2的敏感度比未经氮预处理者小;(4)分子氢对其支持与来经氮预处理的相差甚微,但对其受O_2损伤时的保护作用则大些;(5)MSX对分子氮预处理的蓝藻乙炔还原也有明显的抑制,且比单加CO_2的大。     

蔗糖,GA与液体培养基对马铃薯块茎形成的影响

马铃薯是全球第四大粮食作物,粮菜兼用,有丰富的营养价值。马铃薯块茎是马铃薯最具经济价值的部分。马铃薯块茎形成的过程受多种调控途径的调控,其中最重要的是蔗糖途径和赤霉素(GA)途径。本实验设计蔗糖浓度,GA浓度和培养基类型3个因素的正交试验,通过对马铃薯的结薯时间,结薯数,马铃薯均重和大薯率的统计发现高浓度的蔗糖能够使马铃薯结薯提前,液体培养基能够增加马铃薯的薯重和大薯率。添加8%蔗糖和0.1 mg/L GA的液体MS培养基能够使马铃薯提前结薯并且得到的马铃薯数量多,薯重大。     

固氮酶催化乙炔还原的色谱测定

一般认为(15)~N_2同位素示踪技术是研究固氮作用最可靠的方法。Dilworth 1965年发现乙炔也是固氮微生物的一种底物,报道了巴氏梭菌粗提液能还原乙炔为乙烯。Hardy和Knight最先用氢火焰离子化气相色谱法测定了还原反应的产物。此后,这一方法便成了研究固氮活性的有效方法。由于气相色谱法较之(15)~N_2同位素示踪法具有简单、迅速,灵敏等优点,并能适应江河、湖泊、土壤测定的需要,得到了广泛的应用。 (一) 在固氮研究中,无论是土壤肥力调查,固氮资源开发以及对于固氮酶分子水平的结构与功能,底物反应动力学等的研究,都是一项工作量     

产生炭疽杆菌抗原的一种新的限定培养基

<正>炭疽杆菌的三组分毒素是由三种多肽成份组成的一种复合毒素或毒性物质:水肿因子(EF;因子I)、保护性抗原(PA;因子Ⅱ)和致死因子(LF;因子Ⅲ)。没有     

培养基中能量底物对猪胚胎发育的影响

旨在探讨丙酮酸和乳酸对猪(Susscrofa)胚胎早期发育的影响,将NCSU-23培养基中的5.56mmol/L葡萄糖替换为0.2mmol/L丙酮酸、5.7mmol/L乳酸,并将此培养基命名为mNCSU-23。根据实验设计,孤雌胚及核移植胚转移到mNCSU-23或NCSU-23中培养。激活第2天统计孤雌胚及核移植胚中的5～8细胞胚胎数。激活第6天统计孤雌胚及核移植胚囊胚形成率及囊胚细胞数。实验结果表明,mNCSU/NCSU处理组的5～8细胞胚胎数及囊胚数显著高于对照组(P0.05);单纯使用mNCSU培养猪胚胎时,囊胚率最低,发育结果最差(P0.05)。本研究证实,在体外培养前两天,用乳酸和丙酮酸代替培养基中的葡萄糖对胚胎发育有利。     

小麦叶肉原生质体在马铃薯简化培养基上的分裂

近年来,在小麦、水稻花药培养的研究中, 使用了马铃薯简化培养基,已取得很大成 效^[1-3]。我们在大麦、小麦叶肉原生质体培养的 研究中,为了寻找能促使其再生细胞进行连续 的细胞分裂,除了采用各种合成培养基外,也使 用了马铃薯培养基。本文简要报道小麦叶肉原 生质体在马铃薯简化培养基中能有规则地进行 有限的几次细胞分裂的结果     

粳稻花药培养马铃薯简化培养基的研究

为了适应我国水稻单倍体育种工作普遍开展的新形势,对常用合成培养基的成份及配制程序进行了简化的研究。试验中甩马铃薯水提液取代有关合成培养基的基本成份,取得了良好的结果。 1.诱导愈伤组织培养基:用浓度为20—50％的马铃薯水提液即可取代Miller培养基的全部成份。愈伤组织诱导率超过或接近对照,并具有较高的分化绿苗的能力。所取马铃薯的状态(经过贮藏与否,发芽与否)如何,不影响其作用结果。 2.分化培养基:马铃薯浓度以30％为宜,可取代MS培养基全部成份。马铃薯状态对绿苗分化诱导率有很大影响。以贮藏未发芽的效果为好。如果用贮藏发芽的马铃薯块,以挖去其芽和芽眼为宜。 3.绿苗培养基:可用10—20％马铃薯水提液代替White培养基的全部成分。所培养的小苗色绿健壮。     

大豆根瘤菌HH103菌株培养基的筛选与优化

以快生型大豆根瘤菌HH103菌株为供试菌株,采用单因素碳氮源利用试验和正交设计试验,确定最佳培养基及其配方。结果表明：该菌株在YMA中生长良好,最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为酵母膏,最佳培养基成分配方（g/L）：蔗糖11,酵母膏0.9,K2HPO4 0.5,MnSO4 0.005,CaCl2 0.1,KH2PO4 0.5,MgSO4 0.2,KNO30.77,（NH4）2HPO4 0.33,FeCl3 0.005,pH 7.2。     

接种根瘤菌对刺槐生长的影响

以刺槐根瘤菌接种于刺槐小苗的研究表明,接种刺槐的株高、地径、根瘤、生物量分别比对照平均增加１３．８、１４．７、３２．８、２４．８％,植株含Ｎ量比对照增加２０－４０％。液体根瘤菌剂及其与ＶＡ菌根孢子土双种接效果明显,其生物量分别增加约２０和４０％。     

土壤中影响根瘤菌存活的主要因素

近年来我国豆科植物接种根瘤菌的事业重新受到重视,特别是豆科种子接种丸衣化后,飞机大面积播种牧草取得良好效果。根瘤菌进入土壤后在土壤中能否存活,存活时间多长,是一个很重要的问题,这涉及根瘤     

马铃薯培养基对粳稻花培效应及其应用研究

在以往研究的基础上,近年来我们又对马铃薯培养基的研制和使用效果作了进一步探讨。其主要结果为:1、马铃薯提取液对花药诱导愈伤组织的效果:用20%马铃薯提取液分别取代 B 培养基的大量元素、有机成分与微量无索并以 B 培养基为对照,其结果分别为10.92%、9.50%和10.50%,相差不大。2、不同浓度提取液的马铃薯培养基的诱导效果:5%的     

酿酒酵母培养基中主要因素对海藻糖积累的影响

在对实验室保藏菌种Saccharomyces cerevisiae HY01优化前的摇瓶发酵观察的基础上,采用单因子与响应曲面相结合的实验设计方法研究了酿酒酵母培养基中的初始葡萄糖浓度、无机氮源硫酸铵浓度、酵母浸出粉浓度、碳源与无饥氮源的交互作用以及无机盐和微量元素浓度对海藻糖积累的影响。实验证明碳氮源交互作用明显,并得到了以上各因素的最优值,即初始葡萄糖浓度为20g／L,(NH4)2SO4浓度为4．5g／L,酵母浸出粉浓度为5g／L,微量元素溶液5．0ml／L;硫酸镁0．3g／L;磷酸氢二钠3．67g／L;磷酸二氢钾0．76g／L时,酿酒酵母中海藻糖的干重含量可以达到14．74％,比优化前海藻糖的干重含量12．24％提高了20．41％．     

MS培养基不同碳源和矮壮素浓度对马铃薯试管苗农艺性状的影响

选用马铃薯脱毒试管苗(大西洋,滇薯6号),MS培养基碳源(蔗糖,白砂糖)、MS培养基矮壮素浓度(0 mg·L~(-1)、100mg·L~(-1)、150mg·L~(-1)、200mg·L~(-1)、250mg·L~(-1)、300mg·L~(-1))进行3因素完全随机试验,观察处理后各试管苗生长的农艺性状。结果表明:以白砂糖作为碳源的MS培养基比以蔗糖作为碳源的MS培养基有利于大西洋和滇薯6号脱毒试管苗生长。矮壮素浓度为200mg·L~(-1)对马铃薯脱毒试管苗的壮苗效果较好。     

糊米汁对烟叶发酵过程中微生物的影响

研究了糊米汁对烟叶发酵过程中微生物种群及种群数量的变化,初步了解了糊米汁对烟叶微生物的影响。通过添加糊米汁的培养基对烟叶微生物进行液态培养和固态培养。结果表明:在糊米汁堆积式发酵与糊米汁培养基中,糊米汁对烟叶的好氧细菌、厌氧细菌都有非常明显的抑制作用,糊米汁用量越多,抑制作用越明显;但是在普通培养基中施加糊米汁,却对霉菌和酵母没有明显的抑制作用。糊米汁只在烟叶堆积式固态发酵过程中表现出抑制霉菌和酵母的作用,说明糊米汁抑制微生物生长的机制主要是它具有黏性,施加到烟叶中会使烟叶相互粘结,阻碍了O2的传递进而抑制了霉菌和酵母的生长。     

荸荠汁对果蝇生长发育的影响

在正常果蝇培养基上每日添加荸荠汁,显著提高果蝇繁殖率,加速幼虫发育,增加成虫体重和身长。