透明质酸的制备及应用研究进展

透明质酸(hyaluronic acid,HA)是一种高分子量的直链酸性粘多糖。由于其具有特殊的生理作用、独特的流变学性质和极强的持水保湿能力,在化妆品工业、医学研究、临床治疗等领域有着广泛的应用。概述了透明质酸的制备及其在化妆品、保健食品和医药方面的应用研究进展。     

透明质酸钠临床应用的新概念

透明质酸钠是透明质酸的钠盐形式。透明质酸(简称HA)是一种独特的线性均聚糖,由N-乙酰葡萄糖胺与葡萄糖醛酸二糖单位反应交替联接而成,尽管其结构十分简单,但生物学功能及临床应用范围都富有很深的内涵,正是由于HA临床用途的不断扩大,继而导致了许多新医学概念的出现。 早在70年代初,Balazs及其同事创立了HA眼科应用的新医学概念,即:粘弹性外科(viscosurgery),意在眼科手术中运用HA粘弹剂起     

碳化二亚胺对透明质酸进行化学修饰的研究

目的：用水溶性的碳化二亚胺(EDC)作为交联剂对透明质酸(HA)进行化学修饰,研究交联产物(HA-EDC)的物化性质和微观结构。方法：制备HA与EDC的交联产物,对该交联产物进行流变性和热学性能的研究,并对其进行红外光谱、拉曼光谱以及核磁共振的微观结构研究。结果：反应时间和交联剂添加量的不同可以改变交联反应的交联度。不同摩尔比的EDC和HA的交联产物有不同的溶胀性。光谱分析得到交联产物的N-酰脲的结构。结论：可以用碳化二亚胺来对透明质酸进行化学修饰,得到具有很强吸水性并且吸水性可以控制的交联产物,交联反应过程中,产物的结构从不稳定的O-异酰脲转变为稳定的N-酰脲。     

发酵透明质酸寡糖兽疫链球菌工程菌株的构建

透明质酸(HA)广泛应用于医学、化妆品、食品等领域。HA的生物活性取决于其分子量(M_w)。透明质酸寡糖由于具有重要的生理活性与特殊生理功能,在医药领域具有重要的应用前景。兽疫链球菌因其发酵周期短、生产强度较强的特点,在商业生产HA上具有广泛的应用。为了高效发酵合成透明质酸寡糖和解决发酵过程的溶氧问题,文中通过在兽疫链球菌WSH-24中过表达透明质酸合酶HasA以及优化表达水蛭来源的透明质酸酶LHAase。重组菌株摇瓶发酵24h,透明质酸寡糖积累至0.97g/L,比野生菌提高了182.0%。在3L发酵罐中发酵24 h,透明质酸寡糖生产强度为294.2 mg/(L·h),HA积累至7.06 g/L,比野生菌的罐上水平提高了112.4%。文中所构建的发酵合成透明质酸寡糖的兽疫链球菌重组菌株具有重要的应用前景。     

透明质酸在肿瘤治疗中的应用

透明质酸(hyaluronic acid,HA)是脊椎动物细胞间基质的重要组成成分,它是一种线性生物多聚糖,具有良好的生物相容性、生物可降解、无毒、无免疫原性等特点,在生物医药领域有广泛的应用。本文简要介绍透明质酸的结构特点及其靶向作用机制,综述近年来透明质酸作为药物载体和靶向因子在肿瘤治疗中的研究现状。     

生物医用透明质酸多糖的改性和功能化研究

透明质酸(HA)是一种天然聚阴离子粘多糖已广泛用于医药和其它领域。目前已开发出了许多具有新的生物活性和功能性的透明质酸交联产物和衍生物,特别是水凝胶医用材料。本文综述了近年来透明质酸物理和化学改性研究的进展,重点介绍了交联改性、酯化改性、接枝改性和复合改性,以及改性产物在医药、生物组织工程支架等方面的应用前景。     

透明质酸在间充质干细胞向软骨细胞分化中的应用

随着组织工程学的发展,利用间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)定向分化为软骨细胞,用于治疗骨性关节炎、关节创伤等因素造成的软骨缺损的研究方兴未艾。透明质酸(hyaluronic acid,HA) 是一种酸性多糖类生物大分子,亦是软骨基质的主要成分之一。由于其优良的生物相容性、可降解等特性,HA已成为优良的天然生物材料,其作为支架材料应用于软骨缺损修复已有一段历史。近年来又发现,HA除作为载体支架材料外,还可作为调节因子应用于MSCs向软骨细胞分化。以下将对近年来利用HA应用于MSCs向软骨细胞分化的研究进行总结,旨在为以MSCs为基础的组织工程化软骨的临床应用奠定基础。     

透明质酸制备的研究进展

透明质酸(Hyaluronic acid简称HA)是一种国际上公认的生物大分子保湿剂,用于眼科显微手术、关节炎治疗、高级化妆品等领域.目前,透明质酸的生产方法逐渐由动物组织提取法转向微生物发酵法.细菌发酵法生产透明质酸具有产量不受原料资源限制、成本低、产量高、有较高的相对分子量,分离纯化工艺简便,易于大规模生产等特点成为透明质酸生产的发展方向,应当进一步深入研究.综述了透明质酸的化学结构、理化性质、应用及生产方法等方面的研究现状,并预测了其以后发展趋势.     

浅议透明质酸的生产进展及应用情况

透明质酸是一种广泛分布于人与动物体内的一种大分子酸性粘多糖。从上个世纪30年代Mayer首次从动物眼玻璃体中提取得到HA之后,HA的生产和应用研究到目前为止已经有70多年的悠久历史,本文主要从其独特的制备方法及在各行各业越来越广泛的应用角度进行阐述对其研究的重要性。     

乳腺癌相关透明质酸变化对淋巴内皮细胞紧密连接分子ZO-1分布及细胞增殖的影响

该研究旨在探讨乳腺癌来源的透明质酸(hyaluronic acid,HA)分子大小变化对淋巴内皮细胞紧密连接分子ZO-1(zonula occludens-1)分布情况以及细胞增殖的影响。采用免疫组化实验检测8对良性乳腺疾病和乳腺癌患者组织HA的表达水平,利用酶联免疫吸附实验检测20对正常人与乳腺癌患者血清中透明质酸分解酶(hyaluronidase,Hyase)含量;通过免疫荧光法、荧光素钠渗透实验、MTT增殖实验和Western blot分别观察HA和寡分子透明质酸(oligosaccharides of Hyaluronic acid,o HA)作用淋巴内皮细胞后ZO-1分布、单层细胞渗透性、细胞增殖以及下游ROCK1/Rho A信号通路变化。结果表明,与良性乳腺疾病对照组比较,乳腺癌患者HA表达量明显增加(P0.01);与正常人相比,乳腺癌患者血清Hyase水平显著升高(P0.01),提示乳腺癌发生时,HA升高伴随其降解酶增多,HA代谢活性增加。HA增强细胞间ZO-1的连接,对ROCK1/Rho A蛋白表达水平无明显影响;相反,o HA促使淋巴内皮细胞ZO-1由胞膜向胞浆分布,导致细胞连接呈褶皱状,形成细胞间隙,淋巴管渗透性增加,上调ROCK1/Rho A蛋白表达水平,促进淋巴内皮细胞增殖(P0.01)。研究提示,o HA可能在乳腺癌淋巴管形态及增殖中发挥重要作用。     

在兽疫链球菌中表达vgb基因和HA合成基因提高透明质酸产量

透明质酸(HA)是一种在医药及化妆品领域具有广泛应用的天然粘多糖。兽疫链球菌(Streptococcuszooepidemicus)是工业上生产透明质酸的菌种之一。透明颤菌血红蛋白(VHb)具有增强细胞摄氧的作用。对生产透明质酸的兽疫链球菌进行了基因改造:将兽疫链球菌HA的合成基因hasABC以及合成透明颤菌血红蛋白的vgb基因(Vitreoscillahemoglobingene,vgb)分别或同时插入阳性菌表达质粒pEU308中,通过电转化导入兽疫链球菌中。通过一氧化碳(CO)差光谱检测到了VHb的表达。在摇瓶实验中,同时带有hasABC和vgb基因的重组菌比野生菌的透明质酸产量提高了30％。而在发酵罐中,带有这2个基因的重组菌的透明质酸产量达到了6．9g／L,高于重组菌5．5g／L的产量。实验结果表明,vgb基因的存在促进了细胞的生长,hasABC操纵子的过表达增强了透明质酸的合成。首次将VHb导入兽疫链球菌中,获得了表达,并证明其对菌体生长及透明质酸合成有促进作用。通过研究,VHb将可以在阳性菌中获得更广泛的应用。     

海豚链球菌诱变发酵法制备透明质酸及其在动物皮肤修复中的应用

透明质酸(HA)是一种非常重要的生物材料,是体内广泛存在的细胞外基质成分之一。为了获得产量、分子量及纯度较高的透明质酸,并研究透明质酸水凝胶在动物皮肤修复中的潜在作用。通过紫外诱变的方法对海豚链球菌进行诱变,并对此突变菌发酵后产物的蛋白含量及HA分子量进行了测定,通过CTAB法对发酵产物进行提纯,运用物理冻融法将透明质酸制成水凝胶后,用于兔背部全层皮肤修复的初探。结果表明通过诱变海豚链球菌产透明质酸的能力从(82.3±3.3)mg/L增加到(120±10.6)mg/L,增加了46.4%;产物经纯化后蛋白含量从(0.178±0.011)mg/L减少到(0.032±0.017)mg/L,减少了82.02%;所制得透明质酸的分子量约为3.0×105 Da;透明质酸水凝胶对兔全层皮肤缺损的修复有较明显的促进作用,能减轻炎症和伤口瘢痕的形成。     

透明质酸的生物合成及其代谢工程的研究进展

透明质酸(hyaluronic acid,HA)是广泛存在于生物体内的功能性糖胺高分子聚合物,在日化、医疗和食品领域应用前景广阔.随着基因工程与代谢工程等合成生物学技术的发展,人们对HA的生物合成过程和机理解析越发深入的同时,也伴随一些新的挑战来临.该综述从分子生物学角度总结了HA的关键合成酶基因及合成途径,对不同来源...     

可注射型透明质酸水凝胶的制备及性能研究

目的制备一系列新型的可注射型原位水凝胶,期望其运用于生物医学领域。方法采用两种不同链长的酰肼基单体(碳酰肼和己二酸二酰肼)分别修饰透明质酸(HA),并与四氯金酸(HAuCl4)混合,原位形成复合型水凝胶。用紫外可见光谱、核磁氢谱和傅里叶红外光谱分别对酰肼基改性的HA进行表征,同时对水凝胶的机械性能、微观形貌、溶胀行为和生物相容性进行研究。结果该系列水凝胶具有可注射性、互穿网络结构、一定的弹性模量、可调的溶胀能力及良好的生物相容性。结论酰肼基修饰的HA能和HAuCl4原位形成可注射型的水凝胶,该系列水凝胶具有良好的理化性能和生物相容性,在生物医学领域具有潜在的应用价值。     

可植入的生物合成新材料

美国约翰霍普金斯大学医学院用聚乙二醇（PEG）和透明质酸（HA）研制出一种新的生物合成材料。将其注入皮下,进行光照射激活光聚引发剂,使聚乙二醇分子形成固体水凝胶,并将透明质酸分子捕获在其间,用于修复损伤组织和重建功能。该材料尤其适用于面部整形,     

微生物发酵法生产透明质酸

透明质酸(Hyaluronic acid,以下简称HA)是一种高分子粘多糖,具有良好的亲水性、生物相容性和保湿功能,广泛应用于食品、化妆品和医药领域.透明质酸的传统生产方法是主要从动物组织中提取,用微生物发酵法生产透明质酸正逐步取代传统生产方法,其优点是原料易得、成本低、所产透明质酸有更高的产量和分子量等原因.     

透明质酸孵育树突状细胞对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：研究透明质酸对小鼠骨髓来源树突状细胞功能的影响以及回输后荷黑色素瘤小鼠脾淋巴细胞增殖、活化和细胞因子 的变化,进而探讨透明质酸诱导的树突状细胞增强荷瘤小鼠免疫功能的机制。方法：体外细胞因子联合诱导培养小鼠骨髓细胞获 得树突状细胞（DCs）,免疫磁珠分选纯化获得CD11c+树突状细胞,经不同浓度透明质酸（HA）刺激后,采用酶联免疫吸附法 （ELISA）检测培养上清液中细胞因子IL-12p70 含量。建立小鼠皮下B16 黑色素瘤模型,肿瘤局部皮下回输HA 孵育DC后检测 肿瘤大小,应用ConA 检测脾淋巴细胞增殖情况,应用MTT 法检测脾淋巴细胞杀伤活性,ELISA 法检测脾淋巴细胞分泌的 TNF-alpha和IFN-r的表达,以单纯DC回输、生理盐水注射以及正常小鼠（无瘤）组作为对照。结果：在10～100 ug/mL 范围内,HA 以剂量依赖的方式上调DCs 分泌IL-12p70。HA 孵育DC处理组肿瘤生长明显受到抑制;淋巴细胞增殖反应、杀伤活性和细胞因 子TNF-alpha和IFN-r的表达明显高于单纯DC 组和生理盐水组(P < 0.05)。结论：透明质酸可促进小鼠骨髓DC 的成熟;透明质酸孵 育的DC 通过增强荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫功能而抑制肿瘤的生长。     

H7N2禽流感病毒HA的分离纯化及其糖链谱研究

血凝素(HA)是位于流感病毒囊膜表面的一种Ⅰ型跨膜糖蛋白,是流感病毒结合宿主细胞表面受体,介导病毒入胞的关键分子,也是中和抗体以及疫苗研制的重要靶标.HA表面糖基化与病毒毒力、感染宿主范围等密切相关,且其表面糖链变化会影响其结构与功能.然而目前关于流感病毒HA糖基化的研究主要集中在其糖基化位点上,而对于HA上详细的糖链结构知之甚少.本文应用禽流感病毒特异识别的唾液酸糖链(SAα2-3Gal)受体,制备特异的糖链磁性微粒复合物,进而从H7N2禽流感病毒中分离纯化HA,并采用SDS-PAGE及质谱技术进行鉴定.确定提取物系HA后,进一步利用凝集素芯片联合质谱技术研究禽流感病毒H7N2的HA表面糖型,结果显示H7N2禽流感病毒HA表面主要含有岩藻糖、半乳糖、N-乙酰半乳糖胺、甘露糖、N-乙酰葡糖胺等糖链结构,共获得16个糖链结构较为准确的寡糖,这些糖链可能与HA生物学功能相关.本研究有助于揭示禽流感病毒感染宿主的糖链作用机制,有助于设计制备针对HA相关的糖链疫苗.     

透明质酸酶的研究进展

透明质酸酶是能降解透明质酸及部分糖胺聚糖的一类糖苷酶,可应用于医疗和美容等领域。透明质酸酶也可用于制备小分子糖胺寡糖,许多研究发现小分子糖胺寡糖具有比大分子糖胺聚糖更高的生物免疫活性。为便于研究人员对透明质酸酶进行进一步的基础研究及应用研究,本文介绍了透明质酸和透明质酸酶,梳理了透明质酸酶的分类、结构和催化机理,归纳总结了透明质酸酶的酶活力测定方法、重组表达、酶学性质和应用,展望了透明质酸酶的研究方向。     

N-乙酰葡萄糖胺对人皮肤成纤维细胞透明质酸合成的影响

目的:研究外源性N-乙酰葡萄糖胺(NAG)对人皮肤成纤维细胞(HSF)透明质酸(HA)合成的影响,探索其作为护肤品成分的可能性。方法:分别用MTT、ELISA、改良Schales法检测不同NAG浓度下HSF的增殖、HA合成和分泌、对NAG的吸收率,RT-PCR测定NAG对HSF细胞透明质酸合成酶(HAS)3种同工酶HAS1、HAS2和HAS3 mRNA的影响。结果:MTT和改良Schales法结果显示,随NAG浓度升高,HSF细胞的增殖受抑制程度增加,对NAG的吸收率降低;ELISA结果表明,HSF细胞HA的合成对NAG呈剂量依赖性促进,5mmol/L浓度最佳;RT-PCR结果显示,HAS3 mRNA的表达在NAG浓度为3mmol/L和5mmol/L出现上调。结论:NAG可促进HSF细胞HA的合成和分泌,可能机制是NAG作为原料或者通过上调HAS3 mRNA表达水平来增加HAS活性从而提高HA的合成,提示NAG作为护肤品成分的可能。