儿科住院患者流感、副流感嗜血杆菌的检测与药物敏感试验

目的探索儿科住院患者流感、副流感嗜血杆菌的检出与药敏谱,为临床选择最合适的治疗药物。方法用流感嗜血杆菌选择性培养基培养分离流感、副流感嗜血杆菌,用“卫星现象”确定流感、副流感嗜血杆菌的菌株;用自配的巧克力板测定药物敏感性,用Nitroeefin纸片测定流感、副流感嗜血杆菌的β-内酰胺酶。结果儿科住院患者流感、副流感嗜血杆菌检出率总的达68．3％;3、4代头孢霉素、氨曲南、环丙沙星对流感、副流感嗜血杆菌敏感率在90％以上;四环素、阿齐霉素敏感率在60％～75％;它们对菌株的敏感性与产和不产β-内酰胺酶无关。产β-内酰胺酶菌株用酶抑制剂复合物（AMS）有很好的活性,对氨苄西林的耐药率达65．2％。     

海口市流感嗜血杆菌流行病学及耐药性研究

目的:研究海口市呼吸系统疾病患儿流感嗜血杆菌流行病学及耐药性情况,为疾病的预防和治疗提供参考。方法:收集2006-2010年海口市各医院(海南医学院附属医院、海南省人民医院、海口市人民医院、海南省农垦总医院)临床送检的咽拭子、鼻咽分泌物、痰、脑脊液等标本486例,然后分离鉴定流感嗜血杆菌;采用Etest法测定对分离到的95株流感嗜血杆菌进行抗生素药敏试验检测。结果:流感嗜血杆菌总检出率19.55%,其检出情况在不同地区和不同民族之间存在差异,考虑其原因可能和社会经济条件有关,流感嗜血杆菌对常用抗生素的体外药敏结果依次为:左氧氟沙星、头孢曲松>阿莫西林/克拉维酸、阿奇霉素>氯霉素>头孢克洛>阿莫西林>氨苄西林>磺胺甲基异噁唑。结论:海口流感嗜血杆菌由于全年气温较高,其发病率无明显季节性,细菌检出率在不同地区及不同民族之间存在差别。对左氧氟沙星、头孢曲松、阿莫西林/克拉维酸、阿奇霉素、氯霉素的耐药率低,其可作为临床治疗流感嗜血杆菌感染的首选药物,而对氨苄西林和磺胺甲基异噁唑的耐药率较高,其作为临床治疗流感嗜血杆菌首选药物的传统地位受到了严重挑战。     

侵袭性和非侵袭性肺炎链球菌耐药率的比较分析

目的研究侵袭性和非侵袭性肺炎链球菌的耐药谱的差异,指导合理应用抗生素及感染管理。方法回顾性统计分析2009至2011年来天台县人民医院就诊患者分离肺炎链球菌的标本来源及耐药性,比较侵袭性和非侵袭性肺炎链球菌耐药率之间的差异。结果共分离出肺炎链球菌642株,痰液中分离出584株,非痰液中分离出58株,其中血液中分离出32株,脑脊液中分离出20株,其他分离出6株,所有肺炎链球菌对万古霉素和利奈唑胺均敏感,对青霉素、红霉素、克林霉素、四环素及复方新诺明耐药严重,对左氧氟沙星、氯霉素比较敏感;侵袭性分离株对青霉素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、四环素及氯霉素的耐药率显著高于非侵袭性肺炎链球菌。结论该院分离的肺炎链球菌主要来自痰液标本,耐青霉素肺炎链球菌的检出率高,大环内酯类耐药严重,存在一定比例的侵袭性感染,非侵袭菌株与侵袭性菌株耐药谱之间存在一定差异,临床治疗应该区别对待,系统的监测细菌耐药性,合理选择抗菌药物。     

医院感染主要病原菌分布及耐药性分析

目的:分析我院一年来主要病原菌分布及耐药性结果,为临床经验性治疗提供依据。方法:选取2013年9月—2014年9月我院住院患者送检的标本6983份,标本采集主要有痰液、尿液、咽拭子、分泌物、血液、粪便等,采用全自动分析仪鉴定菌种,药敏采用纸片扩散法或自动化仪器法。结果:6983份标本中以痰液标本为主,占52.6%;送检标本中共分离病原菌1065株,其中排在前五位的病原菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、阴沟肠杆菌。革兰氏阴性杆菌主要以肠杆科细菌为主,对碳青霉烯类抗生素耐药率很低,其他抗菌药物呈现不同程度的耐药,但肺炎克雷伯菌对大多数抗生素都敏感;铜绿假单胞菌耐药率也较低,金黄色葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺的耐药率均为0,而对其他抗菌药物呈现不同程度的耐药。结论:我院感染病原菌以肠杆科细菌为主,其次为铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、除肺炎克雷伯菌对大多数抗生素都敏感,其他病原菌对多数抗菌药物呈现不同程度的耐药,因此了解不同细菌对不同抗菌药物的耐药性合理应用抗生素,以减少耐药菌的产生。     

性病后慢性前列腺炎的病原菌及其耐药性研究

目的:探讨本地区性病后慢性前列腺炎的病原菌分布及其对抗生素的耐药性状况.方法:对131例性病后慢性前列腺炎患者的前列腺液细菌培养和药物敏感试验结果进行统计分析.结果:131例性病后慢性前列腺炎患者的前列腺液细菌培养阳性率为86.3%,从113例阳性标本中共分离培养出14种117株细菌,其中以凝固酶阴性表皮葡萄球菌最为常见(45.2%),其构成比显著高于其他病原菌,药物敏感试验结果显示前列腺液分离菌对临床常用的多种抗生素耐药,而对万古霉素、丁胺卡那霉素、呋喃唑酮、多粘菌素B等耐药率相对较低.结论:凝固酶阴性表皮葡萄球菌是性病后慢性前列腺炎的主要病原菌,病原菌检查和药敏试验对临床诊断和治疗性病后慢性前列腺炎具有重要作用.     

近12年下呼吸道感染病原菌变迁及耐药性分析

目的:了解1996-2007年湘雅医院呼吸科下呼吸道感染住院患者病原茵变迁及耐药性情况.方法:对呼吸病房下呼吸道感染住院患者痰菌(或支纤镜吸取分泌物)培养阳性标本结果进行回顾性统计分析.结果:分离出细菌2966株,其中革兰阴性杆菌占86.9%,病原菌主要为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、副流感嗜血杆菌、大肠埃希菌和流感嗜血杆菌;革兰阳性球菌占13.1%,主要病原菌为金葡菌和肺炎链球菌.近四年革兰阴性杆菌有所增加,而革兰阳性球菌有所减少.革兰阴性杆菌中,副流感嗜血杆菌和流感嗜血杆菌的比例明显升高;革兰阳性球菌中,金黄色葡萄球茵比例降低、肺炎链球菌比例升高.药敏试验结果提示主要革兰阴性杆菌对美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星均较敏感.铜绿假单胞菌还对头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南敏感性高,对头孢曲松、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻肟耐药率增高.鲍曼不动杆菌对氨苄西林/舒巴坦敏感性较好,但耐药率有增高趋势,对头孢噻肟、头孢他啶、环丙沙星耐药率明显增高.肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对头孢哌酮、头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、氨苄西林/舒巴坦耐药率增高;但二者对头孢他啶仍然保持相对敏感,耐药率为25.3%和27.6%.嗜血杆菌属中,流感嗜血杆菌与副流感嗜血杆菌的敏感抗生素谱相似,均对强力霉素、壮观霉素、头孢类抗生素耐药性低,而对喹诺酮类和青霉素敏感性差.主要革兰阳性球菌对阿奇霉素、克林霉素、红霉素及青霉素耐药率均较高;二者对红霉素耐药率明显增高.其中金葡菌对万古霉素均敏感,对左氟沙星、苯唑青霉素、头孢唑啉、美洛培南、强力霉素耐药率均明显增高.肺炎链球菌还对美洛培南、左氟沙星耐药率低,耐药率无明显增高.结论:近年下呼吸道感染病原菌以革兰阴性杆菌为主;主要病原菌对大部分抗菌药物的耐药率有逐渐增高的趋势,临床应合理应用抗菌药,以延缓细菌耐药性的产生.     

95例肺炎患儿的痰培养和药敏分析

本文对９５例肺炎患儿的痰培养结果进行分析,共分离细菌５５株,阳性率５７．８９％,真菌９株,阳性率９．４７％,其中流感嗜血杆菌３２株,阳性率３２．６８％,提示肺炎链球菌１２株,阳性率１２．６３％,显示流感嗜血杆菌和肺炎链球菌在小儿肺炎致病菌中占有重要地位。药敏分析：流感嗜血杆菌对去甲万古霉素、环丙沙星、舒普深、泰能的敏感率达１００％,青霉素敏感率为９３．７５％,肺炎链球菌对青霉素的敏感率仅为５８．３３％,提示肺炎链球菌对青霉素的耐药问题不容忽视。本文分出真菌９株,国内尚未见有关报道。     

阴沟肠杆菌感染的临床分布及耐药性变迁

目的:分析阴沟肠杆菌感染的临床分布及耐药性变迁,为临床合理用药提供指导。方法:采用临床微生物指南中的常规方法对医院各类标本进行分离培养,对医院近3年阴沟肠杆菌感染的临床分布及耐药性变迁情况进行总结分析。结果:2009年12月~2011年12月,从临床标本中共分离出165株阴沟肠杆菌,菌株的主要来源为痰液、尿液和其他分泌物,分别占50.3%、32.7%和27%;临床药物敏感试验结果显示,阴沟肠杆菌对头孢菌素类、青霉素类、氯霉素和氨基糖苷类的抗菌药物呈现较高的耐药率,对亚胺培南、头孢吡肟比较敏感,而头孢西丁、氨苄西林及头孢唑林对阴沟肠杆菌无效。结论:阴沟肠杆菌主要导致呼吸道和尿路感染,是一种对多种抗菌素耐药的高耐药性细菌,临床医生应结合临床药敏结果合理地选用抗菌药物,以减少耐药菌株的产生和蔓延。     

利用DGGE评价不同培养基回收番茄根际细菌类群的能力

用营养肉汤、YG、根系分泌物、土壤浸渍液4种培养基从番茄根际分离培养细菌,并结合变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术,对4种培养基回收番茄根际细菌种群的能力进行了比较研究。结果表明,不同培养基和培养温度,回收到的细菌种群有一定差异;低营养浓度的YG培养基在较低的培养温度20℃下进行较长时间的培养,比高营养浓度营养肉汤培养基产生更多、更具代表性的细菌;以根系分泌物为基础的培养基从番茄根际回收到的优势菌群最多。该研究初步建立了用DGGE技术对不同培养基回收分离细菌种群能力进行评价的方法。     

b型流感嗜血杆菌培养及细菌溶解产物制备工艺研究

目的研究b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza type b,Hib)培养条件及细菌溶解产物制备工艺。方法比较Hib在传统培养基和改良培养基的生长情况,优化改良培养基在生物反应器中对Hib培养条件(p H值、温度、溶解氧等),研究最佳菌体细胞破碎方法及细菌溶解产物纯化制备工艺。结果改良培养基可代替传统培养基用于Hib的生产培养,且Hib在p H7.4、温度为36℃、溶解氧为25%的改良培养基中,生长迅速,菌体产量最高。高压匀浆破碎法的破碎效果明显优于超声波破碎法,破碎效果达到98%以上,纯化后的细菌溶解产物的多糖含量、总氮含量、蛋白质含量、核酸含量及细菌内毒素含量均符合《中华人民共和国药典》(三部)2010版中b型流感嗜血杆菌结合疫苗的质量标准。结论初步建立了b型流感嗜血杆菌培养及细菌溶解产物制备工艺。     

副流感嗜血杆菌致老年患者获得性肺炎的分离状况与耐药性分析

目的分析本院老年人获得性肺炎患者副流感嗜血杆菌的分离率与耐药特征,以便有效指导临床合理用药。方法用哥伦比亚巧克力平板培养基分离副流感嗜血杆菌,嗜血杆菌鉴定卡(NH卡)确认鉴定菌株,纸片琼脂扩散法(K-B)做药敏试验,并采用头孢硝噻吩纸片法检测β-内酰胺酶。结果共分离出副流感嗜血杆菌87株,分离率为15.2%(87/572);β-内酰胺酶阳性率为36.8%(32/87);药敏试验表明β-内酰胺酶阳性株与阴性株对氨苄西林、头孢噻肟、四环素、利福平、克拉霉素、复方新诺明、氨曲南、氯霉素的耐药率差异有统计学意义(P0.05),多数抗菌药物对该菌仍保持良好的抗菌活性。结论本院老年人获得性肺炎患者副流感嗜血杆菌感染率比较高,产β-内酰胺酶阳性率高,大多数抗菌药物对该菌仍保持良好的抗菌活性,临床应重视副流感嗜血杆菌感染并依据药敏试验结果合理选用抗菌药物。     

用洁霉素及庆大霉素制备难辨梭状芽孢杆菌的分离培养基

由伪膜性结肠炎及抗生素性腹泻患者粪便中分离病原难辨梭状芽孢杆菌,国际上普遍采用CCFA培养基。但由于其中所用选择抑制剂国内尚不生产,故需花费外汇进口。我们在实验研究的基础上,以庆大霉素及洁霉素代替环丝氨酸及甲氧噻吩头孢霉素,并以国产试剂代替进口培养基基础。经多次试验获较满意结果。比较研究表明,分离的细菌多是芽孢,有利于进一步鉴定,而且价格只及进口培养基的十四分之一。     

老年慢性支气管炎急性加重期105例痰需氧菌培养及药敏结果分析

目的分析慢性支气管炎急性加重期病原菌的类型、分布以及药物敏感性试验的情况。方法收集2004年1月至2007年12月我所住院的慢性支气管炎急性加重期患者共送检168例次痰标本进行培养和药物敏感试验。结果从痰液中共检出156株需氧菌,其中革兰阴性菌93株（59．62％）,革兰阳性菌41株（26．28％）,真菌22株（14．1％）;在革兰阴性菌中,以克雷伯菌属为主,占总分离率的21．15％（33／156）,其次是铜绿假单胞菌,分离出24株（15．38％）;革兰阳性菌则以金黄色葡萄球菌及肺炎链球菌居多。感染以革兰阴性杆菌为主,对11种临床常用的抗生素敏感率较高的是亚胺培南,其次是氨基糖苷类。结论本试验可提高对慢性支气管炎的临床诊断,根据其病原学特点合理使用抗菌药物。     

猪源致病性金黄色葡萄球菌的分离鉴定及其耐药性分析

目的鉴定引起猪渗出性皮炎的病原,并分析猪源致病性金黄色葡萄球菌的耐药性,为临床用药提供依据。方法采集患渗出性皮炎的仔猪标本进行细菌分离培养,联合应用形态学检查、生理生化试验和PCR方法鉴定分离菌株,并进行致病性和药物敏感性试验。结果先后从病猪标本中分离鉴定获得PSA1、PSA2、PSA3和PSA4四株金黄色葡萄球菌,其中PSA1和PSA3分离株的致病性较强。药敏试验结果显示PSA1、PSA2和PSA3分离株为MRSA菌株,PSA4分离株为MSSA菌株。MRSA菌株对14种抗菌药物均呈现不同程度的耐药,尤其是对青霉素、链霉素、四环素、强力霉素、环丙沙星和氧氟沙星等6种抗菌药物的耐药率达100%。所有分离株对万古霉素与替考拉宁均敏感。结论合肥地区猪渗出性表皮炎的病原为金黄色葡萄球菌。猪源致病性金黄色葡萄球菌合肥分离株具有多重耐药性,治疗猪渗出性皮炎应建立在体外药敏试验的基础上,有针对性选择抗菌药物。     

利用改良培养基探究西太平洋海水可培养细菌多样性

【目的】西太平洋复杂的海洋生态环境孕育了其独特的生物群落,蕴含着种类丰富的海洋微生物资源。本研究基于分离培养技术探究了西太平洋海域不同水深细菌的多样性,并尝试通过改良培养基提高海洋细菌可培养性。【方法】采用改良的2216E固体培养基(IMA)、R2A固体培养基(R2A)、MBM固体培养基(MBM)、TCBS固体培养基(TCBS)和改良的2216E液体富集培养基(IMB) 5种不同培养基进行微生物培养,通过菌株分离纯化、16SrRNA基因序列鉴定,分析西太平洋表层至6000m水深可培养细菌的多样性以及不同培养基在分离培养异养细菌方面的优势。【结果】本研究共获得1293株异养细菌,分属于4门7纲14目26科52属119种,其中变形菌门(Proteobacteria)为主导类群。纲水平上,γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)、α-变形菌纲(Alphaproteobacteria)和放线菌纲(Actinobacteria_c)为优势菌群。5种培养基所获得的最优势门都为变形菌门,最优势纲都为γ-变形菌纲,除TCBS培养基优势目是弧菌目(Vibrionales...     

934株自血培养分离致病菌的病原学分析

目的了解中山大学附属第一医院2002年到2005年自血培养标本中分离的致病细菌的耐药状况和菌群分布特征。方法采用全自动血培养仪进行培养,血培养报阳后转种血平板,用VITEK-60鉴定所分离致病菌,药敏试验用K-B法。结果4年间血培养共分离出934株病原细菌,其中大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌,是该院引起血液感染的主要致病细菌。药物敏感试验显示革兰阴性杆菌对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的敏感性最高,而革兰阳性球菌对万古霉素及替考拉宁的敏感性最高。结论血液感染患者的死亡率较高,应重视导致血液感染致病菌的病原学研究,以利于疾病的治疗。     

慢性阻塞性肺病稳定期的下呼吸道细菌定植研究

目的 研究慢性阻塞性肺病(COPD)患者是否存在下呼吸道细菌定植,其对气道炎症的影响以及与急性加重之间的关系。方法 人选诊断明确的COPD稳定期患者,对其痰液及支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细菌学定量、定性分析,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)对痰液白细胞介素6(IL-6)、IL-8,以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平检测。结果 46例中、重度COPD患者中,在稳定期和急性加重期,痰标本菌落计数＞10~6 CFU／ml分别为32．6％(15／46)和45．65％(21／46),BALF菌落计数＞10~3 CFU／ml则分别为44．4％(4／9)和54．5％(6／11),其中流感嗜血杆菌占首位,急性加重期菌落数显著高于稳定期,存在细菌定植的患者痰液中IL-6及TNFα的浓度显著高于无细菌定植的患者,细菌定植和IL-8呈显著正相关(P＜0．05)。结论 部分COPD稳定期患者存在细菌定植,细菌定植的患者可能通过菌落数量的增加和促使气道炎症反应而导致急性加重频繁。     

光合细菌最佳生长条件筛选

目的:优化光合细菌的最佳培养条件。方法:通过绘制不同的生长曲线研究不同培养基及不同培养条件等理化因素对2株光合细菌(类球红细菌1.2174、沼泽红假单胞菌1.2180)生长的影响。结果:①1.2174最佳条件:培养基(蒸馏水配制的液体富集培养基和固体ATYP);温度(35℃);pH值(8.0和9.0);接种量(培养基/种子液5:1和4:1)。②1.2180最佳条件:培养基(海水配制的ATYP和蒸馏水配制的液体富集培养基);温度(25℃和35℃);pH值(7.0和8.0);接种量(培养基/种子液2∶1和4∶1)③两株菌的光照、氧需求程度、菌群协同和振荡条件相同。结论:通过筛选,蒸馏水配制的液体富集培养基和固体ATYP培养基、35℃、1000lx、pH值8.0、培养基/种子液4∶1、微氧、有菌群协同、振荡可作为二者的通用培养条件。     

玉米细菌性枯萎病选择性培养基——黑色素培养基

鉴于我国没有玉米细菌性枯萎病,这个选择性培养基是为从进口玉米中直接分离该病原细菌而设计的。与其它选择性培养基比较,黑色素培养基的平板效率较高,菌落的特异性显著,容易判断。很多腐生细菌和其它病原细菌以及真菌,在这种培养基上不生长或生长受到严重抑制或仅有部分生长。     

患病大鲵中弗氏柠檬酸杆菌的分离与鉴定

【目的】确定导致大鲵(Andrias davidianus)细菌性感染死亡的病原。【方法】从大鲵肝脏中分离细菌,通过Biolog微生物自动鉴定系统及分子生物学方法对纯培养的细菌进行鉴定,再用大鲵和鲫鱼分别进行人工感染试验,以确定分离菌的致病性,同时对分离到的病原菌进行药物敏感试验。【结果】从患病大鲵肝脏中分离到一株致病菌JZ01,经人工感染健康大鲵,可复制与自然发病相同的症状,且从人工感染病鲵体内再次分离到相同的病原菌。该致病菌对健康鲫鱼也有致病性。经Biolog微生物自动鉴定系统的鉴定,以及进一步的16S rDNA基因序列和系统发育分析都表明,此致病菌为弗氏柠檬酸杆菌。药物敏感性试验表明,该菌株对氨曲南、头孢三嗪、先锋噻肟等9种药物高度敏感。【结论】弗氏柠檬酸杆菌是大鲵的一种致病菌。本文在国内外首次报道了该菌对大鲵具有致病性。