西洋参和人参的可溶蛋白电泳鉴别

西洋参 (ＰａｎａｘｑｕｉｎｑｕｅｌｉｕｍＬ .)又称花旗参、美国人参 ,原产美国和加拿大 ,在我国的保健品市场占有很大的销售份额 ,西洋参在我国虽已引种成功 ,但主要还靠国外进口 ,价格昂贵 ,因此很多保健品利用价格相对低廉的人参 (Ｐ .ｇｉｎｇｓｅｎｇＣ .Ａ .Ｍｅｙ)伪充西洋参。近年来国内有许多学者利用多种手段对西洋参和人参进行鉴别 ,但由于西洋参和人参的性状、成分极其相似 ,现有的方法难以将二者完全区分开来 ,因此 ,有必要寻求新的快速灵敏的鉴别方法。蛋白质电泳方法早已广泛应用于医学、农学和微生物学 ,目前也逐步运用于…     

利用醇溶蛋白和同工酶鉴别小麦亲本三系及杂种种子的研究

用改良的酸性电泳方法对L型杂种小麦及亲本三系的种子醇溶蛋白进行了研究,结果表明,用醇溶蛋白的酸性电泳可鉴别出杂种与父本及常规种之间的差异,而不能鉴别出不育系及相应保持系之间的明显差异。用酯酶,过氧化物酶,ATP酶的同工酶对供试材料幼苗做进一步检测,发现只有ATP酶同工酶能将L型不育系及相应保持系鉴别出来,单用同工酶法或醇溶蛋白电泳法都不能将L型杂种及亲本三系完全区分开。     

植物油的荧光光谱法研究

荧光光谱技术具有灵敏度高,选择性好等优点。植物油中含有各种荧光成分,对食用油中菜籽油、玉米油、芝麻油、葵花仁油、花生油的同步荧光光谱和三维荧光光图谱进行了分析研究,结果表明：利用同步荧光光谱和三维荧光图谱的特征,可以区分植物油的品种,可用于植物油的鉴别和质量监控,该法提供了一种油定性分析的方法,同时也扩展了荧光法在食用油鉴别中的应用。     

别藻蓝蛋白的聚集态研究

为了研究鱼腥藻PCC7120（Anabaena sp．PCC7120）中别藻蓝蛋白（APC）α和β亚基（α-APC和β-APC）中藻蓝胆素（PCB）与脱辅基蛋白的生物合成,并在蓝藻体外对这两种色素蛋白PCB—ApcA和PCB-ApcB合成时聚集过程进行分析,通过多种组合的质粒在大肠杆菌体内共同表达进行重组。色素蛋白的吸收和荧光光谱以及Zn电泳表明,在大肠杆菌体内同时得到色素蛋白PCB—ApcA和PCB—ApcB,并且体内重组色素蛋白的细胞荧光光谱显示,色素蛋白以三聚体的形式存在,而破碎细胞后所得上清液所显示的光谱特征为单聚体的特征。     

菠菜和水稻细胞色素b-559的分离纯化及其光谱性质研究

采用一种快速简捷的方法从菠菜(Spinacia oleracea L.)和水稻(Oryza sativa L.)中分离纯化了光系统Ⅱ反应中心内的细胞色素b-559,并且研究了其低温可见光区荧光光谱、室温紫外区荧光光谱、吸收光谱以及电泳特性.该方法的主要特点:1.以放氧核心复合物为起始材料以避免其他细胞色素的干扰;2.选用DEAE-Sephacel为层析介质,用等度洗脱除去杂蛋白和叶绿素;3.用同一介质不同条件去除过量的去垢剂.从两种植物中分离纯化的Cyt b-559具有相似的吸收光谱,在非变性电泳中有相同的泳动特征.用修订的适用于分析小蛋白的Tricine-SDS-PAGE证明,从两种植物中分离得到的Cyt b-559都是由两个多肽亚基组成,它们的表观分子量分别为9 kD和4 kD.低温荧光光谱的结果表明,Crt b-559的荧光激发峰位为413nm和439 nm,荧光发射峰位在563 nm和668 nm,首次证明Cyt b-559可以发出荧光并将电子传递给叶绿素.首次通过Cyt b-559的紫外荧光光谱证明Trp残基位于该蛋白的疏水跨膜区内.     

不同方法测定聚乙二醇化天花粉蛋白的修饰度

目的:建立测定PEG化天花粉蛋白修饰度的方法.方法:利用电泳法初步确定PEG-TCS的分子量、用质谱法进行验证;通过TNBS法和荧光胺法测定其修饰度.结果:从质谱法和电泳法可知PEG-TCS的理论修饰度为9.0909%,TNBS法测得的修饰度为9.8613%%,荧光胺法所测得值为8.5955%.TNBS法测定结果尽管偏大,但是操作简单,不需要专门的仪器;荧光胺法需要荧光分光光度计,且丙酮易挥发.结论:TNBS法可作为测定PEG-TCS修饰度的方法.     

大蒜有丝分裂不同时期蛋白质的变化

将细胞的显微分离、微量蛋白电泳和超敏感银染有机结合起来,对显微分离的大蒜根端分生组织间期、前期、中期、后期和末期各１００个细胞进行了蛋白电泳。发现在不同时期,含量较高的蛋白谱带有７条,其中４５ｋＤ和６５ｋＤ的蛋白在间期、前期、中期、后期和末期呈周期性变化     

威灵仙及其伪品升麻须根的鉴别

目的：对中药威灵仙饮片及其伪品升麻须根进行鉴别。方法：运用性状鉴别、显微鉴别及紫外分光光度法对二者进行鉴定学研究。结果：威灵仙饮片与升麻须根在断面性状、显微特征以及紫外吸收方面均存在显著区别。结论：升麻须根不能作为威灵仙饮片正品在市场上销售使用，在实际工作中坚决不能将二者混用。     

一步柱层析纯化螺旋藻藻蓝蛋白

采用硫酸铵盐析结合疏水层析技术分离纯化螺旋藻中的藻蓝蛋白.试验结果表明,在磷酸盐缓冲体系下藻蓝蛋白粗提液经1.25 mol/L硫酸铵盐析处理后离心脱气,只需采用一步Macro-Prep Methyl 疏水层析,藻蓝蛋白的纯度（A620/A280）可提高到4.017,回收率为19.38%.特征吸收峰和荧光光谱证实纯化后的产物符合藻蓝蛋白的性质,Native-PAGE电泳只出现单一染色带,表明纯化得到的藻蓝蛋白是均一的;SDS-PAGE电泳出现分子量为15.4 kDa、17.3 kDa的2条染色带,分别为藻蓝蛋白的α亚基与β亚基.     

条斑紫菜藻胆蛋白提纯方法优化探索

采用溶胀法与组织捣碎法相结合的紫菜叶状体细胞破碎方法.研究了不同物液比、缓冲液浸泡时间和硫酸氨盐析次数对藻胆蛋白纯度和产率的影响,对比了各种羟基磷灰石的层析效果,并对所得藻红蛋白和藻蓝蛋白做了吸收光谱、荧光发射光谱和SDS-PAGE鉴定.结果表明,在物液比为1:5,浸泡时间为36h时,紫菜综合破碎效果最佳;经过4次硫酸氨盐析后,藻红蛋白和藻蓝蛋白的纯度最高,分别达到1.71和0.98,采用Siegelman的方法制备的羟基磷灰石一次层析所得藻红蛋白和藻蓝蛋白的纯度最高,分别达到4.73和4.42,产率分别为0.144%和0.042%,且光谱和电泳鉴定结果均达到商品化要求.     

破壁灵芝孢子粉的质量探讨

研究和探讨破壁灵芝孢子粉的质量标准,利用性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别和主要成分含量测定的方法,初步掌握破壁孢子粉质量特性。薄层色谱鉴别可见清晰荧光斑点,其醇溶液加入硫酸后可见棕色环。总灰分测定显示:采自岫岩灵芝孢子粉和山东一等孢子粉灰分较低,山东三等孢子粉灰分含量较高。不同来源的样品总三萜类含量各不相同,高者达2.24%,低者1.26%。综合各项检测结果,初步确定了破壁灵芝孢子粉质量评价指标,方法稳定,可操作性强。     

藏药独一味的微性状与显微鉴别研究

采用体视显微镜对藏药独一味的根、茎、叶和果实微性状进行观察，利用生物显微镜观察切片组织构造及粉末显微鉴别特征，扫描电镜进一步观察叶片表面结构特征。藏药独一味药材的微性状特征包括根、茎、叶、果实，而茎粗短，果实细小且易脱落，地上部分鉴定特征主要为叶片和果序，叶片表皮细胞中可见气孔、非腺毛和腺鳞等。地上部分粉末鉴定特征包括非腺毛、叶肉细胞、气孔和纤维等，根的鉴别特征包括针晶和导管等。本研究通过对独一味药材不同部位微性状和显微进行系统研究，归纳了独一味药材性状和显微的鉴别要点，可以为独一味药材鉴别提供参考依据。     

唇腺炎性病变组织的共聚焦显微拉曼光谱特征研究

目的:研究唇腺炎性病变组织的拉曼光谱指纹特征,为拉曼光谱技术临床鉴别诊断唇腺炎性病变提供理论基础。方法:收集舍格伦综合征病变唇腺30例、唇腺急性炎症组织18例及正常唇腺组织30例,应用激光共聚焦显微拉曼光谱仪对唇腺组织进行拉曼光谱检测。应用主成分分析法(Principal component analysis,PCA)及判别函数(Discrimination function analysis,DFA)对光谱数据进行分析,研究唇腺组织光谱指纹诊断价值。结果:唇腺炎症组织与正常组织光谱间存在光谱指纹差异,这些差异代表了某些蛋白、核酸及脂类物质等生物大分子发生改变。PCA-DFA分析发现这些差异性拉曼光谱具有鉴别诊断价值,可以区分不同唇腺组织,总体诊断准确率达91.8%,经交互验证后准确率为89.4%。结论:不同唇腺炎症组织及正常组织间拉曼光谱存在差异,不仅揭示生物大分子改变,还具有临床鉴别诊断价值。拉曼光谱技术在唇腺炎性病变组织鉴别诊断具有巨大应用潜力。     

优化培养基增加层理鞭枝藻藻胆蛋白产量

藻胆蛋白(phycobiliprotein)是蓝藻和红藻藻胆体的组成部分,是光合作用集光复合体的组成部分,一般由α和β亚基构成,每个亚基含1～4个辅基色素,从而使藻胆蛋白具有特定的光谱吸收性质。根据这些吸收光谱性质,可以将藻胆蛋白分为:别藻蓝蛋白(APC)、藻蓝蛋白(PC)和藻红蛋白(PE)等,在某些缺乏PE而有异形胞的蓝藻中存在充当PE天线捕光功能的藻红蓝蛋白(PEC)〔1〕。藻胆蛋白可用于天然食用色素、化妆品色素和制药行业,还可作为免疫检测、荧光显微技术和流式细胞荧光测定法技术方面的荧光探针。特别是本工作研究的层理鞭枝藻(简称M.laminosu…     

丹皮和芍药根皮的生药学研究

采用性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别等方法时丹皮和芍药根皮进行鉴别比较.两者有很大的差别,芍药根皮不能混作丹皮入药.本试验方法可准确鉴别出芍药根皮与丹皮,为二者鉴别提供理论基础.     

橙色荧光蛋白的研究进展及其应用

荧光蛋白(Fluorescent protein,FPs)可作为探针用以探究细胞内分子间相互作用,追踪特定代谢物的代谢途径,对活细胞内的各种代谢过程和细胞通路进行详细、准确的描述。目前已有的FPs几乎已经覆盖了从紫外光到远红外光的所有光谱波段,这些FPs借助高分辨率显微技术应用于生命科学的诸多领域,为生物学的发展作出巨大贡献。橙色FPs通常指光谱区间在540–570nm的FPs,近几年来关于橙色FPs的研究进展较快,并且其作为标记蛋白以及荧光共振能量转移技术(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)中的荧光受体在生物学及医学领域得到较多的应用。文中综述了近15年橙色FPs领域的相关研究,重点聚焦橙色FPs的发展和应用,为今后橙色FPs的研究提供依据。     

三七的药理作用与真伪鉴别探析

目的对三七的药理学作用、真伪药材的鉴别进行研究。方法对中药三七的药理作用进行总结分析,依据三七性状,对其展开真伪鉴别。结果三七的主要的功效是止血、抗血栓、补血、抗炎等,在对其实施鉴别的过程中,可对其性状进行观察,并选择显微观察等方式进行鉴别。结论三七的药理作用广泛,因此,对其进行真伪鉴别意义重大。     

螺旋藻别藻蓝蛋白的纯化、理化特性与结晶

硫酸铵分级沉淀结合多种层析技术,从螺旋藻（SP—Dz）中纯化到电泳纯别藻蓝蛋白（Allophycocyanin,APC）,纯度（A650／A280）达4．83。APC在30min内的荧光扫描曲线为直线;30min连续光照其相对荧光强度仍为原来的98％以上,其抗荧光淬灭能力强于同样条件下的藻蓝蛋白（PC）及荧光素TRITC。用悬滴气相扩散法培养获得了APC晶体。     

菠菜和水稻细胞色素b—559的分离纯化及其光谱性质研究

采用一种快速简捷的方法从菠菜（Ｓｐｉｎａｃｉａ ｏｌｅｒａｃｅａ Ｌ．）和水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）中分离纯化了光系统Ⅱ反应中心内的细胞色素ｂ－５５９,并且研究了其低温可见光区荧光光谱、室温紫外区荧光光谱、吸收光谱以及电泳特性。该方法的主要特点：１．以放氧核心复合物为起始材料以避免其他细胞色素的干扰;２．选用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｃｅｌ为层析介质,用等度洗脱除去杂蛋白和叶绿素;３．用同一     

荧光显微技术在酿酒酵母细胞研究中的应用

为了探讨荧光显微技术在酿酒酵母细胞不同研究方面的作用,通过GFP标记目标蛋白的同源重组的方法和免疫荧光技术标记两种蛋白,最后利用荧光显微镜观察酵母细胞中某种蛋白定位及两种蛋白共定位情况;分别用荧光染液DAPI、FM4-64、BODIPY、Filipin、DHE和Annexin V试剂处理酵母细胞之后,利用荧光显微镜观察细胞中的细胞核、液泡、脂滴、麦角固醇、ROS和细胞凋亡的情况。结果显示,荧光显微技术在酵母细胞蛋白定位、细胞器观察及细胞中ROS和细胞凋亡等研究方面具有重要作用。