甲胎蛋白的酶联免疫吸附分析法

本文介绍用酶联免疫吸附分析法,测定人体血清甲胎蛋白的技术。采用了双抗体夹心法,以聚苯乙烯管为包盖抗体的支持物,用亲和层析提纯的马抗甲胎蛋白抗体,与辣根过氧化物酶交联制得酶标抗体,以邻苯二胺为底物,显色后进行定量分析测定,可获得较高的敏感度(5毫微克/毫升以下)。本文还对影响实验的一些因素及这项技术的发展前景进行了讨论。     

甲胎蛋白的酶联免疫吸附分析法

本文介绍用酶联免疫吸附分析法,测定人体血清甲胎蛋白的技术。采用了双抗体夹心法,以聚苯乙烯管为包盖抗体的支持物,用亲和层析提纯的马抗甲胎蛋白抗体,与辣根过氧化物酶交联制得酶标抗体,以邻苯二胺为底物,显色后进行定量分析测定,可获得较高的敏感度(5毫微克/毫升以下)。本文还对影响实验的一些因素及这项技术的发展前景进行了讨论。     

单克隆抗体酶联免疫吸附测定数据的微机分析

单克隆抗体酶联免疫吸附测定法(McAb-ELISA)是一种具有高特异性、准确性和敏感性的酶免疫测定技术。随着单克隆抗体技术的发展,针对各种抗原,尤其是酶和激素等蛋白抗原的微量McAb-ELISA相继建立并获得越来越广泛的应用。但是,人工处理McAb-ELISA测定数据比较费时费力,还可能掺杂主观因素。所以欧美发达国家在生物研究中已普遍引入计算机技     

异源单克隆和多克隆抗体在检测无病毒唐菖蒲试管苗中的应用

利用异源的单克隆抗体和多克隆抗体通过间接酶联免疫吸附试验,检测了深圳唐菖蒲的叶组织、块茎和试管苗中的病毒。单克隆抗体检测教果优于多克隆抗体,并与电镜观察结果相符。在间接酶联免疫吸附试验中,同源多克隆抗体对烟草花叶病毒(TMV)检测的灵敏度比侵染性试验高30倍。 同时对该方法在大规模检测其它无病毒试管苗中的重要性和可行性进行了讨论。     

SPR生物传感器的特点及其在生物特异性相互作用分析中的应用

利用表面等离子模共振技术（SPR）进行生物特异性相互作用分析（BIA）已成为现代基因工程技术中的一种先进的手段。与传统的研究方法如酶联免疫吸附测定（ELISA）相比,它具有方便快捷、灵敏度高,应用范围广,实时监控等多项特点,利用这种新型研究手段对于生命科学的基础研究。医学诊断以及治疗等方面有着十分重的意义。本粗略概括了近几年来利用SPR生物传感器进行基础研究的基本情况以及对其的改进,并简要分析了此项技术的优点以及发展前景。     

酶联免疫吸附测定中固相化方法概述

酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是一项应用广泛的固相酶免疫测定技术。抗原或抗体等反应物的固相化在ELISA检测系统中有着十分重要的作用,可直接影响检测结果。应用稳定性好、固相化物质变性率低及固定效率高的ELISA操作体系,可显著提高检测分析的灵敏性、特异性和可靠性。现就ELISA技术中不同固相介质和固相化方法作一概述。     

内源性睾酮水平在血样、尿样中的比对分析

[目的]探求在实验动物中内源性睾酮水平是否可以定性或者定量用于非损伤性方法检测.[方法]通过酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)对家兔和大鼠血样与尿样中的内源性睾酮进行测定分析,确定内源性睾酮水平在血样和尿样中的相关性.[结果]内源性睾酮含量在家兔、大鼠血样和...     

应用酶联免疫吸附技术(ELISA)鉴定根瘤菌血清型和测定大田接种回收率

本文采用酶联免疫吸附技术测定了我国根瘤菌株与引进菌株NC92的血清型异同和大田接种花生后的结瘤比率,并比较了限定培养基和YMA培养基培养制备的抗原-抗体反应。结果指出,NC92酶标记抗体与其相对应的NC92菌株抗原起专性反应,不与供试的我国根瘤菌株抗原起反应;NC92菌株大田接种三个花生品种后的结瘸比率与不接种比较,达到极显著水准(P<0.01),不同花生品种间也达到显著水准(P<0.05),证明酶联免疫吸附技术用于根瘤菌血清型鉴定及其大田接种回收率测定是可行的。两种不同制备来源的NC92抗体和酶标记抗体     

北京地区设施草莓8种病毒的酶联免疫吸附测定检测

[背景]病毒可以随同草莓无性繁殖材料传播扩散,导致产量和品质下降.选育无病毒种苗是草莓病毒病防治的主要措施,高效、灵敏的检测技术可为草莓病毒病防治提供技术保障.[目的]为明确8种能够侵染草莓的病毒在北京地区设施草莓上的发生情况,应用酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,E...     

免疫酶技术用于Q热立克次体的检查

免疫酶技术是继免疫荧光和放射免疫之后发展很快的一门新技术,分为酶联免疫吸附试验及酶标抗体染色两类。由于方法敏感、快速、简便,不需要特殊设备,目前已广泛应用于医学基础理论和临床实用的研究。但用于立克次体的报告尚不多。除了酶联免疫吸附试验检测战     

植物病害免疫学诊断技术

植物病害免疫学诊断技术将以抗原和抗体的特异性反应为基础的传统免疫学继承并发展,应用于植物病害的诊断上.最近10几年,植物病害免疫学诊断技术已广泛应用到病原真菌的检测中.免疫学诊断方法分为非标记免疫分析方法和标记免疫分析方法两大类.着重介绍了应用于植物病害免疫学诊断技术中的酶联免疫吸附测定、免疫胶体金快速诊断技术.     

蛇毒检测技术研究进展

介绍了放射免疫测定法,凝集测定法,免疫电泳检测,荧光免疫测定法,酶联免疫吸附测定法和生物传感器检测方法在蛇毒检测中的应用,并比较了各种方法的优点和不足。     

检测HIV的蛋白印迹和ELISA检测方法学比较

为了寻找一种适合大批量标本测定且具有高敏感性、高特异性的艾滋病临床实验室检测方法。比较了艾滋病检测的蛋白印迹实验和酶联免疫吸附实验两种方法,并采用不同厂家生产的不同代酶免试剂和对已确诊为阴性和阳性的标本进行比较测定。结果科华一代、二代、三代和四代酶免试剂盒的功效率分别是83．7、92．13、97．50和85.3;万泰一代、二代、三代和四代功效率分别是83．5、95．88、97．10和84．2;蛋白印迹实验的功效率是99．5。所以酶联免疫吸附实验更适合大批量标本的检测,而第三代酶免试剂具有更高的特异性和敏感性。     

玉米赤霉烯酮单克隆抗体和免疫酶技术研究

采用蛋白质连接技术合成玉米赤霉烯酮抗原,免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术建立六株分泌抗玉米赤霉烯酮的单克隆抗体杂交瘤细胞株。间接酶联免疫吸附试验测定细胞上清抗体效价为１：２０８４（４Ｈ８）、１：２５６（６Ｈ９、４Ｈ３、２Ｈ５、２Ｃ８）１：１６（３Ｆ１０）;腹水抗体效价为１０＾９（４Ｈ３、４Ｈ８）、１０＾８（２Ｈ５）、１０＾７（６Ｈ９）、１０＾５（３Ｈ１０）。竞争间接酶联免疫吸附试验测定六     

用A蛋白夹层酶联免疫吸附法对黄瓜花叶病毒的血清学鉴定

用A蛋白夹层酶联免疫吸附法(PAS-ELISA)对两个来自日本蓉茄和一个来自中国青椒植物上的黄瓜花叶病毒分离物进行了血清学鉴定和比较。该方法利用A蛋白和酶联A蛋白分别作预包被和检测结合于抗体一抗原一抗体夹层中的抗体,并通过底物反应,间接反应出病毒抗原的量。对经过两次差速离心纯化的病毒进行检测的结果表明,这三种黄瓜花叶病毒(CMV)分离物与黄瓜花叶病毒P、Q两株系同属一个血清型,即可能均属于黄瓜花叶病毒中的ToRS组。讨论了这种间接酶联免疫吸附法检测植物病毒的优越性和几个CMV分离物的提纯、保存方法。     

玉米赤霉烯酮单克隆抗体和免疫酶技术研究

采用蛋白质连接技术合成玉米赤霉烯酮抗原,免疫Balb/c鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术建立六株分泌抗玉米赤霉烯酮的单克隆抗体杂交瘤细胞株。间接酶联免疫吸附试验测定细胞上清抗体效价为1:2084(4H8)、1:256(6H9、4H3、2H5、2C8)、1:16(3F10);腹水抗体效价为10~9(4H3、4H8)、10~8(2H5)、10~7(6H9)、10~5(3H10)。竞争间接酶联免疫吸附试验测定六株单克隆抗体对玉米赤霉烯酮的敏感度为0.3—0.8ng/ml。六株抗体与玉米亦霉烯醇的交叉反应率为1.3—9.0％。六株单克隆抗体均属IgG类。细胞体外传代培养和冻存复苏后分泌抗体稳定。纯化抗体在37℃保存12天稳定,-30℃保存90天抗体滴度不变。用该抗体建立竞争间接酶联免疫吸附试验检测掺合玉米赤霉烯酮的玉米、小麦、饲料,平均回收率分别为105％、90％、103％,平均批间变异系数为5.8％、2.8％、6.8％,批内变异系数为3.8％、12.7％、15.7％。样品中玉米赤霉烯酮掺合量与竞争间接酶联免疫吸附试验检出量有良好相关性(r≥0.9996)。     

检测马铃薯S、X和Y病毒的灵敏度及其改进技术

用5.3M的NaOH:乙醇(EtOH)予处理新的聚苯乙烯微皿,以酶联免疫吸附法在病毒的特异吸光率(A405)处测定马铃薯S、X及Y病毒,其平均数增加14.8%,与对照PBS—T相比,在磷酸盐缓冲液中(PBS—T)加入0.01M二乙基二硫代氨基甲酸酯钠则增加了对PVY的特异吸光率37.3%。用0.2M二乙醇胺pH10.5和6～12%亚硫酸钠对PVX进行碱性降解后,比单用PBS—T增加了特异的对PVX的吸光率约2.06%。从logA405和log汁液的稀度之间的相关回归分析得出进一步增强灵敏度的特性。由回归方程来予测病毒的稀释限点,用未稀释的被侵染汁液测定相应增加的病毒特异光吸收值。一个改进的双抗体夹心酶联免疫吸附测定法,提高检测PVS稀释终点约达30～32%,这一数值比曾在其它植物病毒上报道过的要少。血清学测定在植物病理学上的一个主要应用方面,是对马铃薯病毒的大量测定。即检疫证明和抗病育种的鉴定两个方面。酶联免疫吸附测定(ELISA)是测定病毒最灵敏有效的方法之一,它可能对某些植物病毒的检测效率达1μg/ml。本研究的目的是测定和评价改进马铃薯S、X及Y病毒的ELISA灵敏性方法的效果。这些改进方法包括,用於清洗聚苯乙烯微皿以便用作ELISA的洗剂,病毒提取缓冲液的添加剂,以及一个双抗体夹心ELISA(DASELISA)的改进方法。     

晚期糖基化终末产物荧光光谱检测法在糖尿病筛查中的应用研究

主要研究人体皮肤晚期糖基化终末产物(Advanced glycation end products,AGE)荧光光谱的检测方法,并对AGE荧光光谱在糖尿病检测中的应用价值进行评估.利用研制的AGE荧光光谱检测装置,分别对73例受试者前臂内侧皮肤组织中AGE的荧光进行检测.同时,采用酶联免疫吸附法(ELISA)对受试者血...     

ELISA检测RSV感染的研究

呼吸道合胞病毒(RSV)是婴幼儿呼吸道感染的重要病原之一,早期快速诊断RSV感染是防止本病蔓延,及时采取正确治疗措施的关键;所以,急待寻求快速诊断的方法。本试验建立了酶联免疫吸附测定(ELISA)检测RSV感染的方法。对其敏感性、特异性、重复性进行了检验;并在临床应用上与病毒分离和/或补体     

荧光定量PCR诊断结核性脑膜炎的临床价值

目的 探讨荧光定量PCR检测脑脊液（CSF）结核分枝杆菌评估其临床意义。方法 应用荧光定量PCR技术检测45例CSF结核分枝杆菌并与抗酸杆菌染色。结核抗体酶联免疫吸附试验（结核抗体ELISA,简称酶联OT）进行比较。结果 荧光定量检测CSF结核杆菌的阳性率为11．1％,酶联OT为13．3％,抗酸杆菌染色为0％。结论 荧光定量PCR用于检测CSF结核分枝杆菌不具有灵敏度,阳性率低,对临床诊断结核性脑膜炎（简称结脑）无多少价值,不值得在临床上推广应用,必须寻找更有价值的诊断方法。