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7-氨基头孢烷酸(7-ACA)是合成头孢菌素类抗生素的重要中间体,工业上通常采用头孢菌素C酰化酶一步水解头孢菌素C制备,但在该反应产物中存在一个主要杂质3-去乙酰基-7-氨基头孢烷酸(D-7-ACA),该杂质的产生是由大肠杆菌中内源基因aes编码的头孢菌素C乙酰酯酶水解头孢菌素C或7-ACA引起的.为了防止D-7-AC... 相似文献
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假单孢菌sp .130头孢菌素酰化酶催化戊二酰 7 氨基头孢烷酸的水解反应 ,生成 7 氨基头孢烷酸。 7 氨基头孢烷酸是医药工业合成大多数头孢菌素衍生物的起始原料。在 6种大肠杆菌表达质粒上构建了表达该酶的不同载体 ,得到了不同表达结果的大肠杆菌转化子。这些质粒有各自的特点 ,适用于不同的场合。 相似文献
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头孢菌素酰化酶 总被引:2,自引:0,他引:2
7-氨基头孢烷酸(7-amino cephalosporanic acid, 7-ACA)是医药工业合成大多数头孢菌素的重要原料.头孢菌素酰化酶(cephalosporin acylase, CA)催化头孢菌素C(CPC)和戊二酰-7-氨基头孢烷酸(GL-7ACA)的水解反应, 生成7-ACA.根据CA催化底物的不同, 可将其划分为两类:CPC酰化酶和GL-7ACA酰化酶.由CA的同源性、分子质量大小和基因结构, 可以把头孢菌素酰化酶划分为五种;讨论了酶的基本性质.通过CA与N端亲核水解酶(Ntn水解酶)的比较, 推测CA属于Ntn水解酶, 并由此可以进一步理解它们的生理功能. 相似文献
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高效液相色谱对酶法合成头孢力新过程的解析 总被引:1,自引:0,他引:1
酶法合成头孢力新反应过程有四种组分(苯甘氨酸、苯甘氨酸甲酯、7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸和头孢力新),应用日立2632阴离子交换柱和0.05M NaCl 溶于6.25×10~(-3)M NH_4Cl作淋洗液,在不到一小时内得到良好的分离。本文报道用高效液相色谱方法对头孢力新反应过程的四种组分进行快速准确的定量。 相似文献
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酶法合成头孢力新反应过程有四种组分(苯甘氨酸、苯甘氨酸甲酯、7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸和头孢力新),应用日立2632阴离子交换柱和0.05M NaCl溶于6.25×10~(-3)M NH_4Cl作淋洗液,在不到一小时内得到良好的分离。本文报道用高效液相色谱方法对头孢力新反应过程的四种组分进行快速准确的定量。 相似文献
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酶法合成头孢环己二烯 总被引:3,自引:0,他引:3
以环己二烯甘氨酸甲酯盐酸盐为酰基供体,7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸为酰基受体,γ-氧化铝为载体的固定化巨大芽孢杆菌胞外青霉素G酰化酶为酰化剂,合成了头孢环己二烯。5%酰基供体,2%酰基受体,每毫升反应物加44IU固定化酶,pH7.5,25℃振荡反应5h,头孢环己二烯产率为81%。苯乙酸、苯氧乙酸和头孢霉素G对酶法合成有不同程度的抑制作用。 相似文献
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头孢菌素C由丝状真菌顶头孢霉产生,属于β-内酰胺类抗生素。其经改造后的7-氨基头孢烷酸是头孢类抗生素的重要中间体。头孢类抗生素在国内外抗生素市场中占有巨大的份额,是临床上的主要抗感染药物。随着分子生物学的发展,头孢菌素C的生物合成途径已基本阐明。为提高头孢菌素C的产量和降低生产成本,越来越多的研究者开始关注其较为精细、复杂的调控机制。本文重点对头孢菌素C生物合成及其调控机制的最新进展进行了简述,希望为今后头孢菌素C生产菌株的菌种改造和传统产业的升级换代提供一定的借鉴。 相似文献
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铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) AS 1.204完整细胞a-氨基酸酯水解酶能催化a-氨基酸酯的水解和转移a-氨基酸酯的酰基到胺亲核试剂上。在水解和转移反应中酶的一般性质相同,最适pH为5.2,最适温度都是40℃。7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(7一ADCA)抑制苯甘氮酸甲酣(PG-Ome)的水解。因此,该酶催化7一ADCA和PG-Ome转化成相应的半合成头孢菌素。 相似文献
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青霉素类药物是一类高效广谱抗生素,自四十年代初青霉素应用于临床来,人们又发现或人工合成其他一些青霉素类药物以及青霉素类抗生素,如青霉素G类、青霉素V类、耐酶青霉素、氨苄西林类、抗假单胞菌青霉素、美西林及其酯匹西林、甲氧西林类等。作为青霉素类药物及抗生素典型代表之一,替卡西林钠和半合成青霉素的原料——6-氨基青霉烷酸(6-APA)的制备工艺将在下文得到详细探究。 相似文献
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头孢类抗生素由于广谱性和低毒性被广泛用于细菌感染的治疗。7-氨基-3-脱乙酰氧基头孢烷酸(7-aminodeacetoxycephalosporanic acid,7-ADCA)作为半合成头孢类抗生素的重要中间体,需求量逐渐增加,而7-ADCA主要由G-7-ADCA(苯乙酰-7ADCA)脱酰基得到。工业上多以化学法合成G-7-ADCA,成本高,污染严重。迫切需要对环境友好且经济高效的合成方法。在前期研究中,构建了一株可以将青霉素G转化为G-7-ADCA的代谢工程菌(E.coli H7/PG15)。本研究通过单因素试验对E.coli H7/PG15的G-7-ADCA合成过程进行优化,包括底物组成及其最适浓度,转化条件(菌体浓度、p H、青霉素浓度、MOPS浓度、葡萄糖浓度,铁离子浓度和时间等)。优化后,建立了全细胞催化法生产G-7-ADCA的工艺流程,使G-7-ADCA的产量稳定在15 mmol/L左右,转化率达到30%,具有操作简便、高效和经济的优势。 相似文献
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GL-7ACA酰化酶基因工程菌(Escherichia coli MMR204/pZC1)批式补糖发酵条件优化 总被引:3,自引:0,他引:3
戊二酰-7-氨基头孢烷酸(GL-7-ACA)酰化酶(3.1.5.11)可有效催化GL-7ACA分子中戊二酰基侧链水解,形成7-氨基头孢烷酸(7-ACA)而成为两步酶法生产7-ACA的重要工业用酶之一。在已构建的GL-7ACA酰化酶基因(acy)重组质粒pZC1基础上,进一步对酰化酶基因工程菌Escherichia coli MMR204/pZC1的产酶发酵条件进行了考察。研究表明,工程菌的最佳发酵温度为33℃,pH7.5~8.5的微碱条件有利于酶的生成。LB培养基补加适量葡萄糖(1~5g/L),可提高发酵生物量和产酶水平,但葡萄糖的过量补加(6g/L以上),则导致发酵液偏酸(低至pH4.0)而完全抑制酰化酶生成,并证明工程菌生长和产酶对乙酸的抑制效应较为敏感。同时通过5L自控发酵罐的批式补糖试验,对恒速流加、pH反馈控制和指数流加等三种补糖模式的发酵产酶进程进行了比较。结果发现,三种方式的补糖条件下,acy基因在tac启动子控制下,呈组成型表达,细胞生长与产酶同步,无需诱导;其中,以指数流加方式得到的生物量和产酶水平最高。而从acy基因的表达效率,即比酶活看,pH反馈的补料方法略高于恒速或指数流加模式。 相似文献
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固定化巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶酶促合成头孢氨苄的研究 总被引:7,自引:2,他引:7
β—内酰胺系列抗菌素抗菌谱广、疗效高、毒副作用小,国际上研究与应用日渐广泛深入。头孢氨苄(Cephalexin)是重要的半合成抗菌素之一,由头孢霉素母核7—氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(简称7-ADCA)和侧链结构物苯甘氨酸或其甲酯(PGME)经酰化而生成。酰化有化学法和酶法两种。采用青霉素G酰化酶或a—氨基酸酯酶或,a—氨酰转移酶的酶法,具有工艺操作简单、无需基团保护、环境污染轻等优点。继日本人于70年代初试验成功酶法之后,80年代初我们开展了这方面研究。制备方面,胞外酶优于胞内酶;使用方面,固定化酶优于固定化细胞。在用具有青霉素G酰化酶活性的固定化大肠杆菌(Escherichia coli)细胞合成头孢氨苄的基础上,又研究了用固定化巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)BP931胞外青霉素G酰化酶酰化合成头孢氨苄的条件。本文报道这一研究结果。 相似文献
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《基因组学与应用生物学》2016,(12)
植物提取物鞣花酸是广泛存在于多种植物中的重要生物活性物质之一,阐述其药理作用、提取分离纯化及制剂研究具有非常重要的现实意义。本研究通过查阅近年来国内外文献,研究表明植物提取物鞣花酸具有抗氧化、抗肿瘤、抗菌等多种药理作用;通过酸解法辅助超声波、表面活性剂、响应曲面法等优化提高提取效率,兼有溶剂法、氧化法、生物酶法提取法;采用碱溶酸沉法、高效逆流色谱、大孔树脂吸附技术进一步分离与纯化得到生产原料;采用纳米技术研制纳米载体制剂,提高其在体内的生物利用度和延长作用时间,并对制剂的处方及工艺进行分析。以期为其扩大临床应用提供依据。 相似文献