提高微生物脂肪酶产量、活性和稳定性的方法研究

微生物脂肪酶是一类广泛应用于诸多工业领域的生物催化剂。提高微生物脂肪酶的产量、活性和稳定性,增强产品的市场竞争力,一直是微生物脂肪酶研究的重点和热点。本文从产脂肪酶菌株的改造、脂肪酶基因的改良、脂肪酶发酵工程和脂肪酶后期处理等四个方面概述了提高微生物脂肪酶产量、活性和稳定性的方法,以期为微生物脂肪酶的规模化工业生产提供方法性指导。     

31p磁共振波谱物质检测准确性的验证研究

目的:评价1.5T磁场下31PMRS磷化合物检测的准确性.方法:以卵磷脂为参照标准品,对照研究对同一位正常志愿者骨骼肌肉磷谱代谢特征,对其股骨下端先后行两次相同参数、相同条件状态下的31P波谱检测,第二次检测时在感共趣区内体外加入卵磷脂标准品,对比两次检测的结果变化.结果:对同一位正常志愿者先后两次进行渡谱检测,加入卵磷脂后各代谢物波谱变化为β-ATP:-24.46,α-ATP:+82.61,γ-ATP:-32.89,PCr:+64.32,Pi.+110.5,PDE:+462.57,PME:+15.71.加入卵磷脂后,PDE峰改变最明显.结论:1.5T磁场下31P MRS能准确检测体内化合物的存在及其定量分析,研究结果可信.     

研究发现新技术可显著提高基因编辑准确性

<正>近日,研究人员开发了一种新技术可以显著提高科学家们靶向特定错误基因,对其进行"编辑",用健康DNA替换损伤的遗传密码。在这项研究中,研究人员开发了一种方法能够降低基因编辑工具酶的脱靶效应,他们将这种方法命名为DB-PACE(DNA-binding phage-assisted continuous evolution),利用这种方法能够大大提高核酸酶的DNA结合能力和切割特异性。研究人员将这一系统应用于TALEN技术,大大提高了TALEN技术的DNA切割特异性,这表明DB-PACE系统可作为提高基因编辑精准性的多用途方法在基因组工程领域发挥重要功能。     

胃排空检测方法的研究及展望

胃排空是衡量消化道功能的一个重要指标,在探讨消化道疾病病因学、药物动力学以及疾病的诊断和治疗方面有着不可或缺的作用。近年来,一系列成熟的检测方法已经被用来测量人体胃排空,包括插管法、实时超声、放射性显像及呼吸试验等,但这些检测方法在实验动物及动物临床医学的应用还相对较少,正确评估实验动物胃排空能力的技术对于药物药理学、生物利用度和胃肠疾病诊断等的研究非常重要。本文就常用的几个胃排空检测方法做一阐述,希望这些方法能为动物胃排空检测提供新思路。     

提高DNA序列测定的准确性方案

目前 ,ＤＮＡ测序的核心仪器是使用荧光染料标记的、具有ＣＣＤ光学系统的ＤＮＡ测序仪 ,其工作原理主要包括 :用不同的荧光染料确定Ａ、Ｇ、Ｃ和Ｔ这 4种碱基的延伸反应 ,通过激光的激发 ,每种染料可以发射出不同的电信号 ,测序仪收集这些光波信号后 ,通过计算机数据分析 ,可得到相应的碱基序列。利用这种方法 ,所有 4种染料可在同一凝胶泳道中检测和辨别 ,消除了因泳道之间迁移率的差异所引起的误差 ,增加了测序的精确度 ;同时 ,可以增加在同一块凝胶上所能分析的模板ＤＮＡ数量。毛细管电泳技术的应用可使测序样品的加样自动化 ,且无须用…     

论食品检验准确性提高的控制因素

食品质量关系到消费者的健康和生命安全。因此,在食品检验过程中,保证检验结果的准确性是很重要的。一般来说,在分析过程中,由于分析叶所使用的仪器、采用的方法以及分析时的环境条件和分析者的观察能力等多方面的限制,分析所得到的结果往往与客观存在的真实数值有着一定的差异。这种差异有仪器不准、试剂含有杂质、蒸馏水质量不佳,以及采样不能代表平均成分,操作过程中杂质的引入、计算过程中不可避免的误差等系统误差,也有由于环境(气压、温度、湿度)的偶然波动或仪器的性能、分析人员对各份试样处理时不一致所产生的偶然误差。这些误差的大小直接关系到分析结果的准确性,因此,为获得准确的检验结果,应从检验过程中的各个方面加以控制。     

提高大田作物硝酸还原酶活力测定稳定性的方法探讨

测定硝酸还原酶(以下简称NR)活性的方法有体外和体内法两种,我曾探讨过 NR体内分析法,取样于室内控制条件下培养的稻麦幼苗,用改进的NR体内法所测得的数据较为稳定,可作为鉴定作物品种耐肥性的指标。但是,如果田间取样则不稳定因而影响此法的实际应用。本文试图探求取样于田间植株的较为稳定的NR活性体内测定的方法。     

提高大豆根瘤菌质粒稳定性的研究

以发光酶基因luxAB作为报告基因,将广谱稳定性质 粒pTR102的parCBA/DE基因导入含37kb增效片段的pLARF3并去除该质粒的cos序列,构建成重组质粒pHN115和pHN156。同时,构建只带有cos序列和luxAB的参比质粒pHN157和pHN158。将上述4种质粒通过三亲本杂交分别导入费氏中华根瘤菌(Sinorhizobiu m fredii) HN01,将pHN155和pHN158通过两亲本杂交分别导入大豆慢生根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)TA11,在人工继代培养条件下比较测定其质粒保持率。结果表明;经连续转接培养7次后,pHN155、pHN156、pHN157和pHN158在HN01中的质粒保持率分 别为100%、67%、72%和92% 。连续转接培养4次后,pHN155和pHN158在TA11中的质粒保持率分别为98%和92%。说明parCBA/DE基因能显著提高质粒在快、慢生型大豆根瘤菌中的遗传稳定性,cos序列的去除也有一定的作用。     

猴B病毒抗体ELISA检测试剂盒的制备及准确性评价

目的:以金标准试剂盒为参照,对新研制的猴B病毒抗体ELISA检测试剂盒进行准确性评价,以期为我国实验灵长类动物产业提供优质廉价的检测试剂。方法:利用3个批次共表达猴B病毒gD和g B蛋白的细胞上清分别制备ELISA检测试剂盒,与金标准试剂盒(VRL的ELISA试剂盒)同时对667只食蟹猴血清进行检测,考察新研制剂盒的准确性;然后,挑选强阳性、弱阳性、阴性样品,用另外2个批次ELISA试剂盒检测,考察不同批次试剂盒检测结果的稳定性。结果:金标准试剂盒对667只食蟹猴血清抗体检测结果为阳性280份、阴性387份,而新研制的ELISA试剂盒结果为阳性282份、阴性385份;与金标准相比,阳性样品的符合率为98.93%(277/280),阴性样品的符合率为98.97%(383/387),总体符合率为98.95%(660/667)。对100份强阳性样品、70份弱阳性样品、108份阴性样品及7份差异样品的重复检测表明,除1份弱阳性(金标准为阴性)检测为阴性外,其余样品与前期一致。结论:与金标准相比,新研制的试剂盒具有较高的准确性,可用于猴B病毒抗体的检测。     

粪便类固醇激素检测准确性的影响因素

近年来,采用非损伤性取样方法监测野生动物的生理状况越来越受到重视。本文对检测过程中影响动物粪便类固醇激素检测准确性的因素进行了分析总结,包括样品的新鲜程度、样品量和保存方法;激素代谢的日节律和季节性变化;动物的年龄、性别和繁殖状态等,以期为粪便类固醇激素检测技术在野生动物中的准确应用提供借鉴。     

食品检验中如何提高检验数据的准确性

在把关食品质量的各个环节中,食品检测是其中的一个重要环节。为确保检验结果的准确性,本文从样品抽取、样品制备、仪器设备准确性、检验方法的选择、实验环境的要求、对操作人员的要求等几个方面,阐述了在检验检测过程中应该注意的几个问题。     

逆转录病毒及逆转录酶检测方法研究评述

逆转录病毒常被作为载体,用于目的蛋白的表达或目的基因的嵌合。尽管,实验室选用的都是非感染性病毒,但并不能排除这些病毒不会对人类造成伤害。逆转录病毒的监督和检测具有非常重要的意义。逆转录酶活性又是逆转录病毒存在活性的重要标志。因此,本文将有关逆转录病毒及逆转录酶检测的方法做一综述,望对研究者有参考意义。     

布鲁菌抗体检测试剂盒稳定性的研究

目的评估布鲁菌抗体检测试剂盒(试管凝集法)的质量稳定性,在产品注册时提交模拟运输条件相关研究资料,即由2～8℃冷链运输条件变更为常温2～30℃(不超过6 d)运输。方法用连续3批次布鲁菌抗体检测试剂盒(试管凝集法)试剂,对其进行模拟运输条件试验,同时进行热加速稳定性、开瓶稳定性以及实时稳定性试验,通过观察外观、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、最低检出量和均一性,考察其试剂盒的稳定性。结果模拟运输试验结果显示,布鲁菌抗体检测试剂盒(试管凝集法)在模拟运输2～30℃不超过8 d时,其外观、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、最低检出量及均一性均符合《中华人民共和国药典》2015年版(三部)的检定标准,试剂盒质量稳定。热加速稳定性结果显示,在36～38℃放置不超过6 d时质量稳定;开瓶稳定性结果显示,开瓶后12周内质量稳定。连续3批次试剂实时稳定性在试剂盒效期后一个月检测结果仍合格。结论布鲁菌抗体检测试剂盒(试管凝集法)具有良好的稳定性,运输条件由2～8℃冷链运输可变为2～30℃不超过6 d的常温运输;在2～8℃试剂盒可保存12个月,开瓶后在12周内质量稳定,产品于2018年1月份在国家药品监督管理局完成注册,运输条件的变更获得批准。     

提高丙酮丁醇梭菌产溶剂稳定性及防止退化的研究

在丙酮丁醇梭菌连续传代过程中,添加乙酸钠可增强其稳定性,同时在未添加乙酸钠的发酵液中分离获得溶剂产量明显降低的退化菌株DNU83,其丁醇产量为2.33 g·L-1,仅为初始菌株的1/6.培养基中添加乙酸钠、丁酸钠或K2 HPO4等弱酸盐均可恢复退化菌株的产溶剂能力,如同时添加苄基紫精,可显著促进丁醇合成.7％玉米培养基中添加4 g·L -1 K2 HPO4和30 mg·L-1苄基紫精,丁醇产量可达18.01 g·L-1,总溶剂21.59 g·L-1,丁醇比为83.43％,丁醇产量较未退化菌株NU22提高24.09％.     

强化护理质量控制对提高血气分析结果准确性的研究

目的探讨护理质量控制对血气分析结果准确性的影响。方法选择我院EICU病房需行动脉血气分析的患者100例分为对照组和实验组各50例,对照组实施常规方法采集送检,实验组在采集过程中对分析前负性因素加强护理质量控制,评估两组患者血气分析结果的准确率并分析。结果对照组50例,直接穿刺动脉采集标本356次,其中28次标本因为各种原因重新采集,准确率为92.1%;观察组50例,直接穿刺动脉采集标本368次,其中13次标本因为各种原因重新采集,准确率为96.5%,差异有统计学意义(P0.05)。结论血气结果的准确率与采血时患者状态、采血部位及采血的具体操作密切相关,加强对这些因素的护理质量控制,可明显提高血气分析结果的准确性,为临床诊治提供依据。     

丙型肝炎病毒临床检测方法的研究及临床意义

丙型肝炎病毒(HCV)是输血后肝炎的主要病原体,丙型肝炎易复发和慢性化.检测HCV标志物,可有效地筛选献血员,保证输血安全,降低丙型肝炎病毒感染率.本文就丙型肝炎病毒的检测方法以及其临床意义作一简要概述.     

计算机辅助超声诊断提高卵巢癌诊断的准确性

目的:评估应用计算机辅助阴式超声诊断卵巢癌是否优于单独阴式超声诊断。方法:收集2013年9月-2015年3月在我院进行手术切除的卵巢肿块患者的术前阴式超声(TVS)图像资料,共124例(病理诊断良性80例,恶性44例),平均年龄54.2±9.7岁。建立的图像样本库,每名患者取4幅超声图像,共有496幅图像被分析。首先对图片库内的超声图像进行多模式序列超声识别系统的处理,应用灰度共生矩阵法,获得肿块的各种特征,将感兴趣区域分类为正常组织,良性肿块和恶性肿瘤。两名超声医生人工肉眼对卵巢肿块的原始阴式超声图片进行分析诊断,随后两名医师对计算机辅助诊断(CAD)处理后的图片再次分析诊断,以病理诊断为金标准,利用ROC曲线下肿块区域的面积参数评价单独TVS和TVS结合CAD诊断卵巢癌的准确度差异。比较应用CAD前后的特异性、敏感性、阳性预测值,阴性预测值等指标的差异。结果:TVS结合CAD诊断准确度高于单独TVS,单独TVS诊断ROC曲线下面积(Az)为0.791,95%可信区间[0.725-0.857],TVS结合CAD诊断Az为0.927,95%可信区间[0.883-0.970];TVS结合CAD组诊断卵巢癌的精确度(0.774 vs 0.919,P0.05)、特异性(0.738 vs 0.933,P0.05)及阳性预测值(0.650 vs 0.889,P0.05)较单独TVS诊断明显提高。结论:计算机辅助诊断技术可以辅助超声医师提高卵巢癌诊断的准确度。     

浅谈提高工程预结算编制准确性的办法

工程预结算是以施工图为依据,而工程结算是整个工程设计施工实践后的工程价值的经济反映,也是决定工程造价的最后一个环节。往往工程预结算与实际造价存在一定的差距。要提高预编制质量和有效控制,预结算的编制要求做到系统、完整、准确、明了的原则,使我们应该关注的问题。     

淋球菌检测方法的研究

由淋球菌引起的性传播疾病是我国目前最常见的性病之一。其诊断主要依靠实验室检查,由于许多患者在就诊前已不同程度地使用了抗生素,致使传统的诊断方法已不能满足临床的要求,而目前比较先进的检查法如ＰＣＲ等在我国广大基层实验室使用有限。我们根据国情,选择酶免疫...