多发性骨髓瘤患者硼替佐米治疗相关带状疱疹发病机理及预防策略研究进展

含硼替佐米的化疗方案目前是多发性骨髓瘤的一线治疗方案,研究表明,该方案同时会使患者带状疱疹的发生率增加。硼替佐米治疗致带状疱疹激活的机理以及如何进行合理的预防是临床医师需要解决的问题。阿昔洛韦是第一代无环鸟苷类药物,伐昔洛韦是阿昔洛韦的前体药物,目前阿昔洛韦和伐昔洛韦可用于接受含硼替佐米化疗方案的MM患者带状疱疹的预防。本文对近年来多发性骨髓瘤患者应用硼替佐米后带状疱疹发生的相关机理及预防策略作一综述。     

硼替佐米在急性白血病中的应用研究

硼替佐米(bortezomib)是首个进入临床的蛋白酶体靶向药物,作为一线用药治疗多发性骨髓瘤和套细胞淋巴瘤时具有显著疗效,近年来针对硼替佐米相关机制的不断深入研究,使得硼替佐米可作为治疗急性白血病的潜在药物。前瞻性的研究表明,硼替佐米在与其他药物联用时能取得积极疗效,临床应用主要聚焦于初诊、复发难治急性髓系白血病与急性淋巴细胞白血病中的治疗,该文就硼替佐米在急性白血病中的应用研究进行综述。     

不同剂量硼替佐米联合地塞米松对多发性骨髓瘤T细胞亚群及血清C反应蛋白、β2-微球蛋白的影响

目的:探讨不同剂量硼替佐米联合地塞米松对多发性骨髓瘤(MM)T细胞亚群及血清C反应蛋白(CRP)、β_2-微球蛋白(β_2-MG)的影响。方法:选取2010年1月～2019年8月期间皖南医学院附属马鞍山中心医院收治的52例MM患者以及南京中医药大学附属泰州医院收治的28例MM患者,共计纳入患者例数80例。根据随机数字表法分为A组(n=40,给予1.3 mg/m~2硼替佐米联合地塞米松治疗)和B组(n=40,给予1.6 mg/m2硼替佐米联合地塞米松治疗),比较两组患者的疗效、T细胞亚群、血清CRP、β_2-MG水平,记录两组治疗期间不良反应情况。结果:两组临床总有效率比较差异无统计学意义(P0.05)。两组治疗5个疗程后CD3~+CD4~+、CD3~+CD4~+/CD3~+CD8~+均升高,且B组高于A组(P0.05);CD3~+CD8~+下降,且B组低于A组(P0.05)。两组不良反应发生率比较无差异(P0.05)。两组治疗5个疗程后β_2-MG、CRP均下降,且B组低于A组(P0.05)。结论:MM患者采用1.6 mg/m2硼替佐米或者1.3 mg/m2硼替佐米联合地塞米松治疗,可获得相当的疗效及安全性,但1.6 mg/m2硼替佐米联合地塞米松治疗可更好地改善患者T细胞亚群及血清CRP、β_2-MG水平。     

硼替佐米增强P16蛋白表达诱导骨髓瘤细胞衰老

目的：研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米诱导骨髓瘤RPMI8226、MMH929细胞衰老作用,并进一步探讨其作用机制。方法：硼替佐米0.1-100nmol/L处理骨髓瘤RPMI8226、MMH929细胞48、72h,MTT法检测细胞存活率、药物IC50值。选择药物IC50值1/10剂量处理骨髓瘤RPMI8226、MMH929细胞0、24、48H后检测衰老相关β-半乳糖苷酶染色率。流式细胞术检测细胞周期情况及凋亡率。Western-blot检测相关蛋白表达。结果：硼替佐米处理骨髓瘤细胞RPMI8226、MMH929后48小时IC50值：RPMI8226：19.05 nmol/L,MMH929：18.45nmol/L。以硼替佐米2 nmol/L处理骨髓瘤RPMI8226、MMH929细胞0、24、48H后发现β-半乳糖苷酶染色率、细胞G0/G1期比例明显上升与药物作用时间呈正相关,Western-blot检测细胞周期调控蛋白发现P53、PTEN蛋白无变化,P16蛋白与药物作用时间正相关。结论：硼替佐米通过增强P16蛋白表达诱导骨髓瘤细胞RPMI8226、H929衰老。     

蛋白酶体抑制剂硼替佐米抑制PI3K/Akt通路致结肠癌SW480细胞凋亡

目的:研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米对结肠癌SW480细胞凋亡作用,并进一步探讨其作用机制.方法:硼替佐米1-500nmol/L处理结肠癌SW480细胞24-48小时,MTT法检测细胞存活率、药物IC50值.流式细胞术检测细胞凋亡率.Western blot技术检测caspase-3,p-Akt和PTEN蛋白表达水平变化.结果:硼替佐米以时间-剂量依赖方式抑制结肠癌SW480细胞增殖,48小时IC50值:87.36 nmol/L.细胞凋亡实验显示药物作用24小时细胞开始出现凋亡,48小时凋亡明显.硼替佐米作用24小时后细胞周期明显阻滞在G0/G1期.Westemblot实验显示,80 nmol/L硼替佐米处理结肠癌SW480细胞后PTEN蛋白表达水平随时间明显增加,而p-Akt蛋白随时间表达下降.结论:硼替佐米可以抑制结肠癌SW480细胞增殖.其机制可能与抑制PTEN蛋白降解,抑制p-Akt途径有关.为结肠癌治疗药物的发展和更新提供了新的候选分子.     

丙戊酸钠协同硼替佐米对RPMI8226细胞的促凋亡作用

目的:以骨髓瘤细胞株RPMI8226为实验对象,观察丙戊酸钠(valproic acid,VPA)和硼替佐米(bortezomib,BZ)对此细胞株的增殖及凋亡的诱导情况。方法:实验分组如下:对照组,VPA单药组(1.0 mmol/L),BZ单药A组(10.0 nmol/L),BZ单药B组(20.0 nmol/L),BZ单药C组(35.0 nmol/L),联合用药A组(VPA1.0 mmol/L+BZ10.0 nmol/L),联合用药B组(VPA 1.0 mmol/L+BZ20.0 nmol/L),联合用药C组(VPA 1.0 mmol/L+BZ 35.0 nmol/L)。用MTT技术检测细胞增殖抑制情况;流式细胞仪检测凋亡比例。结果:丙戊酸钠与硼替佐米单用对RPMI8226细胞株细胞增殖有抑制作用,有细胞凋亡,但丙戊酸钠与硼替佐米协同用药A组、B组、C组增殖抑制可达75.1%及凋亡情况可达68.9%(P0.01)。结论:丙戊酸钠与硼替佐米协同用药后对RPMI8226细胞增殖抑制及诱导凋亡作用更显著,丙戊酸钠对硼替佐米有增敏作用。     

用于多发性骨髓瘤的首个口服蛋白酶体抑制剂 Ixazomib

自武田（Takeda）公司产品硼替佐米（bortezomib,Velcade）于 2003 年获准上市以来,蛋白酶体抑制剂已成为多发性骨髓瘤 治疗的主要用药。武田公司日前又在美国和欧洲递交了同类新药 ixazomib 的上市申请,使其上市进程更近一步,而该药物可能成为此类药 物中的首个口服治疗药物。虽然武田公司非常希望能在 2017 年 5 月 Velcade 专利到期前大力推动 ixazomib 替代 Velcade 的进程,以维 护其在多发性骨髓瘤治疗市场的地位,但要让医生接受这一新型口服药物,还需要更多临床数据,尤其是一线治疗数据的支持。主要介绍 ixazomib 用于治疗复发性多发性骨髓瘤以及作为多发性骨髓瘤一线治疗药物的若干临床研究,解析并展望多发性骨髓瘤治疗市场。     

PCD方案与VAD方案治疗多发性骨髓瘤的疗效及对血清VEGF、β2-MG水平的影响

目的:研究表阿霉素+长春新碱+地塞米松(VAD方案)和环磷酰胺+硼替佐米+地塞米松(PCD方案)对多发性骨髓瘤的疗效及对血清β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)水平的影响.方法:选择2017年...     

8种天然药物与硼替佐米对HBsAg抑制作用及蛋白质组学分析

目的:比较硼替佐米和几种天然药物体外对HBV的抑制作用,并探索硼替佐米抑制HBV的分子机制。方法:采用MTT法观察不同浓度药物对HBV-Tg小鼠原代肝细胞的毒性,确定最大无毒浓度,用ELISA方法检测培养24h后细胞上清中HBsAg的变化,比较不同药物对HBsAg的抑制率。经1μmol/L硼替佐米处理原代肝细胞24h后,提取蛋白质,采用双向凝胶电泳分离总蛋白,得到差异表达的蛋白质点进行分析比对。以RT-PCR及West blot验证选定的差异蛋白,分析其与HBV抑制作用的关系。结果:在8种天然药物中以扁蒴藤素对HBV作用最强,IC50为0.43μmol/L,EGCG的IC50是24.9μmol/L,且安全性较好。硼替佐米作用原代肝细胞蛋白质组分析发现了21个差异斑点,其中包括HSP60异构体(gi/26353954)。RT-PCR检测发现经硼替佐米作用后HSP60、HSP90表达下调,HSP70表达上调,而West blot鉴定HSP60变化不大。但是经EGCG作用后HSP90表达的下调与对HBsAg的抑制是一致的。结论:调节宿主细胞的蛋白质降解与折叠将有利于寻找新型抗HBV药物。     

STAT3信号通路在多发性骨髓瘤中的调控机制及作用

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种肿瘤性浆细胞疾病,其特征在于骨髓微环境中恶性浆细胞的克隆性增殖,分泌单克隆免疫球蛋白以及相关的器官功能障碍.近年来,由于自体干细胞移植的引入,以及来那度胺和硼替佐米等药物的应用改变了骨髓瘤的传统治疗方法,延长了总生存期.尽管取得了显著的治疗进展但目前仍无法治愈...     

抑制c-Met信号通路可增加白血病细胞株对硼替佐米的化疗敏感性

本研究通过下调c-Met来观察白血病细胞株K562对抗肿瘤药物硼替佐米的敏感性,以此探索c-Met信号对白血病细胞株的增殖、凋亡等的影响,为临床上寻求治疗白血病新方案提供理论依据。本研究首先采用MTT实验初步判断硼替佐米对K562细胞的增殖能力的影响;再构建c-Met干扰载体转染K562细胞,并采用Real-time PCR检测干扰效果,筛选最适干扰质粒。然后采用筛选的c-Met干扰质粒转染细胞,分别使用MTT法检测细胞增殖能力、软琼脂克隆形成实验检测细胞克隆能力、流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果显示硼替佐米对K562细胞的增殖具有显著抑制作用(p0.05),且这种抑制作用具有浓度依赖性。c-Met干扰质粒构建及干扰效果检测实验中发现,随着转染时间的延长,绿色荧光信号越来越强,表明转染效率越来越高。但Real-time检测结果发现,3个干扰质粒中仅c-Met-Homo-1和c-Met-Homo-3干扰质粒对c-Met的表达具有明显抑制效果(p0.05),且c-Met-Homo-3干扰质粒干扰效果较好。使用c-Met-Homo-3干扰质粒转染细胞后发现,c-Met下调能够显著增强硼替佐米对K562细胞增殖的抑制作用(p0.05),且增强硼替佐米对K562细胞克隆形成的抑制能力,同时增强了硼替佐米诱导的K562细胞的凋亡。本研究结论为,下调c-Met能够增加白血病细胞株K562对硼替佐米的化疗敏感性。     

血清IL-17、IL-32、IL-33、IL-37联合检测对初治多发性骨髓瘤患者早期治疗反应性的预测价值

摘要 目的：探讨血清白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-32（IL-32）、白细胞介素-33（IL-33）、白细胞介素-37（IL-37）联合检测对接受硼替佐米为基础一线治疗方案的初治多发性骨髓瘤（MM）患者早期治疗反应性的预测价值。方法：选择2018年7月至2021年3月期间陕西省人民医院收治的初治MM患者176例为研究对象,所有患者均接受以硼替佐米为基础一线的治疗方案,根据早期治疗反应性分为敏感组（142例）和非敏感组（34例）;采用酶联免疫吸附法检测并比较两组血清IL-17、IL-32、IL-33、IL-37水平,并分析其联合检测对早期治疗反应性的预测价值。结果：敏感组治疗前血清IL-17、IL-32水平低于非敏感组,IL-33、IL-37水平高于非敏感组（P＜0.05）。多因素logistic回归分析显示,年龄≥65岁、血清IL-17≥29.70 pg/mL、IL-32≥63.02 ng/L、肿瘤分期III期是早期治疗反应性的危险因素（P＜0.05）,IL-33＞141.97 pg/mL、IL-37＞69.17 ng/L是保护因素（P＜0.05）。血清IL-17、IL-32、IL-33、IL-37联合检测预测早期治疗反应性的曲线下面积（AUC）为0.866（95%CI：0.801~0.972）。结论：年龄、肿瘤分期、血清IL-17、IL-32、IL-33、IL-37是MM患者早期治疗反应性的影响因素,联合检测血清IL-17、IL-32、IL-33、IL-37水平对接受硼替佐米为基础一线治疗方案的初治MM患者早期治疗反应性预测价值较高。     

精氨酸缺乏对硼替佐米治疗多发性骨髓瘤的作用研究

摘要 目的：探讨精氨酸缺乏对硼替佐米(Bortezomib,BTZ) 治疗多发性骨髓瘤细胞的影响。方法：通过CCK8筛选BTZ对骨髓瘤细胞株(H929和RPMI 8226)治疗的最适药物浓度,比较在缺乏和富含精氨酸的两种培养基中的细胞增殖情况;通过使用PI染料标记细胞检测不同试验组细胞周期的分布,以及使用Annexin V/7AAD凋亡试剂盒检测BTZ对不同试验组细胞凋亡的影响。结果：BTZ降低了骨髓瘤细胞的存活率,并通过将细胞周期阻滞于G2/M、S期,抑制骨髓瘤细胞的增殖。缺乏精氨酸使细胞周期阻滞于S期,也抑制了骨髓瘤细胞的增殖。BTZ作用于缺乏精氨酸组的骨髓瘤细胞后,细胞凋亡百分比明显低于富含精氨酸组（H929细胞由约40%降至13.6%,RPMI8226凋亡百分比分别7.13%和19.27%）。结论：缺乏精氨酸和给予BTZ均阻滞细胞周期,抑制骨髓瘤细胞增殖;同时缺乏精氨酸降低了BTZ诱导骨髓瘤细胞的凋亡作用。     

祛瘀散结汤联合BRD治疗多发性骨髓瘤患者的疗效及机制探究

目的:探究祛瘀散结汤联合硼替佐米-来那度胺-地塞米松(BRD)治疗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者的疗效及对患者血清M蛋白(monoclonal protein),N末端B型利钠肽原(N-terminal pro-B-type natriuretic peptide,NT-proBNP)、肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponinⅠ,cTnI)水平的影响。方法:选择我院2017年1月~2020年1月收治的90例多发性骨髓瘤患者,根据其治疗方法分为研究组与对照组,每组各45例。对照组患者给予BRD化疗方案进行治疗,研究组在对照组基础上给予祛瘀散结汤,对比两组治疗后疗效,治疗前后骨痛症状、M蛋白、NT-proBNP、cTnI水平的变化及不良反应的发生情况。结果:治疗后,研究组的治疗有效率为91.11%,显著高于对照组(68.89%,P<0.05);两组的血清M蛋白和NT-proBNP水平较治疗前显著降低,且研究显著低于对照组(P<0.05),血清cTnI水平较治疗前显著升高,且研究组显著高于对照组(P<0.05);观察组治疗后骨痛评分显著低于对照组(P<0.05)。研究组治疗期间不良反应发生率11.11%,显著低于对照组发生率(28.89%,P<0.05)。结论:祛瘀散结汤联合BRD治疗MM患者可以显著提高患者的治疗效果,改善骨痛症状,安全性较高,可能与其降低M蛋白和NT-proBNP水平及升高cTnI水平有关。     

TCD方案治疗MM疗效观察

目的观察TCD方案治疗初发多发性骨髓瘤的效果及其毒副作用。方法反应停400mg/d口服6个月,环磷酰胺每次0.2g,隔日静滴(至血WBC<3.0×109/L时停),地塞米松40mg/d于第1~4、9~12、17~20天静滴。1个月为1疗程,休息1个月后再行下1疗程治疗,共3~4个疗程。结果疗程结束时,完全缓解6例,部分缓解5例,轻微反应1例;总缓解率78.6%,总反应率85.7%。毒副反应较轻,未发生治疗相关性死亡。结论TCD方案治疗初发多发性骨髓瘤疗效较好,毒副反应轻。     

RACK1对硼替佐米诱导的多发性骨髓瘤细胞凋亡及MAPK/ERK通路的影响

目的:探讨蛋白激酶C受体(Receptor for activated C kinase1,RACK1)对硼替佐米(Bortezomi,Bor)诱导的多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)细胞凋亡及MAPK/ERK通路的影响。方法:选取6例岳阳市第一人民医院收治的MM患者及6名正常体检者,用实时荧光定量PCR检测血浆及人MM细胞系中RACK1 m RNA的表达。将MM细胞分为3组:对照组(不干预)、Bor组(75n M的Bor干预12 h)和Bor+siRACK1组(RACK1 si RNA转染24 h后再行Bor干预)。CCK-8法检测各组细胞中的细胞存活率,Hoechest 33342染色检测细胞凋亡,Western Blot检测MAPK/ERK通路相关蛋白表达。结果:与正常体检者相比,MM患者血浆及MM细胞系中RACK1 m RNA表达显著增加(P0.05)。Bor作用12 h、24 h和48 h可显著降低MM细胞的存活率(P0.05)。与对照组相比,Bor组和Bor+siRACK1组细胞存活率显著降低,Bor+siRACK1组细胞存活率明显高于Bor组(P0.05)。Hoechest 33342染色显示对照组细胞核染色均一,未见凋亡小体,Bor组见少量凋亡小体,而Bor+siRACK1组细胞见大量凋亡小体,表现为核固缩或碎块状;与对照组相比,Bor组和Bor+siRACK1组细胞中多发性骨髓瘤细胞凋亡率显著增加(P0.05),Bor+siRACK1组多发性骨髓瘤细胞凋亡率明显高于Bor组(P0.05)。三组间多发性骨髓瘤细胞凋亡率对比差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,Bor组和Bor+siRACK1组细胞中p-P38和p-ERK的表达显著降低,而Bor+siRACK1组p-P38和p-ERK的表达低于Bor组(P0.05),3组间P38和ERK的表达对比差异无统计学意义(P0.05)。结论:RACK1沉默可增强Bor诱导的MM细胞凋亡及生长抑制,其机制可能与MAPK/ERK途径抑制有关。     

一次性静脉注射高剂量链脲佐菌素建立1型糖尿病小型猪模型

目的：探讨通过一次性注射高剂量链脲佐菌素（ streptozotocin,STZ）方法建立1型糖尿病小型猪模型的可行性。方法中华实验小型猪耳缘静脉一次性注射链脲佐菌素溶液150 mg/kg,分别在给药前和给药后10 min、30 min、90 min、第1天、第2天、第3天和第7天空腹采集静脉血,动态监测空腹血糖,并利用静脉糖耐量实验和C肽释放实验对模型进行鉴定。结果给药后第1天开始,模型组空腹血糖明显升高并始终维持在16.7～20.6 mmol/L的浓度范围,达到糖尿病标准;静脉葡萄糖耐量试验和C肽释放实验结果表明,静脉注射体积分数50％的葡萄糖1 h后模型猪血糖浓度高于11.1 mmol/L,2 h后未能恢复至空腹血糖水平;而胰岛素和C肽在注入葡萄糖后基本未发生任何反应,始终保持痕量水平。结论一次性静脉注射大剂量链脲佐菌素的方法能够成功建立1型糖尿病小型猪模型。     

CD56、CD117表达水平与来那度胺治疗多发性骨髓瘤疗效的相关性分析

目的:探讨CD56、CD117的表达水平与来那度胺治疗多发性骨髓瘤疗效的相关性,为预测来那度胺治疗多发性骨髓瘤的疗效提供参考依据。方法:将我院2016年12月至2019年3月收治的多发性骨髓瘤患者64例,均给予来那度胺联合小剂量地塞米松治疗,所有患者根据疗效分为完全缓解(CR)、非常好的部分缓解(VGPR)、部分缓解(PR)、疾病稳定(SD)、疾病进展(PD),并且采用门诊、电话、住院等随访方式定期随访。采用流式细胞仪测定所有患者入院治疗前一天的CD56、CD117的表达水平,分析CD56、CD117表达与患者病理特征以及来那度胺疗效的相关性。结果:CD56、CD117的表达水平与多发性骨髓瘤患者的轻链分型、M蛋白分型、临床分型显著相关,与性别无关。来那度胺治疗多发性骨髓瘤的64例患者中,有效例数53例,总有效率为83%;其有效组患者中,CD56、CD117的阳性率分别为56.6%、35.8%,显著高于无效组患者(18.2%、9.1%)(P<0.05)。结论:多发性骨髓瘤患者CD56、CD117均呈现高表达的状态,其表达与患者的临床分期、M蛋白类型、轻链重链类型及来那度胺治疗的疗效有显著相关性。     

巨噬细胞移动抑制因子在多发性骨髓瘤中表达意义

目的:观察巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration Inhibitory Factor,MIF)在多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma,MM)患者血浆中的表达及与肿瘤负荷指标包括血β2-微球蛋白(serumβ2 microglobulin,β2-MG)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、乳酸脱氢酶(lactic acid dehydrogenase,LDH)、血清白蛋白(serum albumin,ALB)的相关性。方法:随机选择多发性骨髓瘤患者30例作为观察组,28例健康人为对照组。以ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测两组人群静脉血浆MIF浓度,并检测观察组肿瘤负荷相关指标,分析与MIF相关性。结果:1与对照组MIF检测浓度值比较(2386.76±679.66pg/m L),观察组血浆MIF浓度明显高表达(8153.18.16±2043.73 pg/ml),两组比较,具有统计学意义,P0.05。2MIF与β2-MG、CRP呈正相关(p=0.031、0.021;r=0.712、0.46);与ALB呈负相关(p=0.047;-0.215);与LDH无明显相关性(P=0.679)。结论:MIF检测在多发性骨髓瘤的临床诊断、分期和判断预后有重要参考价值。     

唑来膦酸注射液联合经皮椎体成形术治疗脊柱多发性骨髓瘤的临床疗效

目的:观察脊柱多发性骨髓瘤行唑来膦酸注射液与经皮椎体成形术联合治疗的临床疗效。方法:2010年8月至2017年3月,16例行多发性骨髓瘤患者接受经皮椎体成形术与唑来膦酸注射液联合治疗,评定疗效、疼痛缓解及治疗前后血碱性磷酸酶、血清钙、生活质量,记录不良反应。结果:(1)疗效:完全缓解1例,部分缓解12例,微小缓解1例,疾病进展1例,无变化1例,总有效率为87.5%(14/16)。(2)疼痛缓解:显效9例,有效6例,无效1例。总有效率93.75%(15/16)。(3)血碱性磷酸酶、血清钙、生活质量:治疗后优于治疗前(P0.05)。(4)研究期间不良反应轻微。结论:脊柱多发性骨髓瘤行唑来膦酸注射液与经皮椎体成形术联合治疗有助于缓解疼痛和改善生活质量。