大鼠睾丸间质组织内的生殖细胞

在本实验中,光镜和电镜观察发现,在一例正常大鼠的局部睾丸的间质组织中,存在着不同发育时期的生殖细胞,同时还见支持细胞。上述各类细胞的超微结构同精细管内的无明显差别;但在位置上,它们却是分散于间质组织内,或者同间质细胞紧密相靠排列,或者分布于血管周围。本事实表明,在大鼠睾丸的间质组织中,可能也存在着生殖细胞赖以生存、发育和分化的环境条件。本文对这一现象的意义作了讨论。     

褐翅鸦鹃繁殖期雄性生殖系统的组织解剖观察

于2008年4月对4只成体褐翅鸦鹃雄性生殖系统进行组织解剖观察.其左侧睾丸重0.77 g±0.05 g,是右侧的3倍,达体重的0.36%,曲精细管充盈整个睾丸,没有睾丸纵隔和睾丸小叶,生精上皮厚56.88 μm±11.52 μm,睾丸间质较少.附睾1对,小而不明显.输精管长49.16 mm±1.56 mm,黏膜层形成许多纵形的皱壁,单层高柱状上皮细胞含大量糖原颗粒,固有膜无腺体,肌层发达.     

小剂量16O8+离子预辐射减轻大剂量辐射所致小鼠睾丸组织损伤

为了了解小剂量重离子辐射诱导小鼠睾丸结构的适应性反应,采用小剂量(0.05Gy)~(16)O~(8 )离子照射B6C3F_1雄性小鼠睾丸。4h后,再给予2Gy~(16)O~(8 )离子照射。照射后第35天取材在光镜下观察睾丸结构。结果显示,大剂量(2Gy)照射明显损伤睾丸组织,主要表现为曲精细管直径几乎减小一半,精管内各发育阶段的生殖细胞减少或消失,特别是精原细胞几乎完全消失。而Leydig细胞和Sertoli细胞仅有轻度核固缩及胞浆减少。提示睾丸生殖细胞的辐射敏感性明显高于其间质组织细胞。预先给予小剂量(0.05Gy)照射可明显减轻随后大剂量(2Gy)辐射对睾丸组织的损伤。提示小剂量重离子辐射可诱导小鼠睾丸结构明显的适应性反应。     

小鼠睾丸注射不同转染试剂和注射方法对外源基因表达的影响

为探讨不同转染试剂(LipofectamineTM LTXPLUSTM、Lipofectamine2000和纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D))和睾丸注射方法 (睾丸网注射、曲精细管注射和间质注射)对转基因小鼠生产效率的影响,将pEGFP-C1质粒分别与不同转染试剂混合后,按照不同的注射方法注入小鼠睾丸内,30 d后检测小鼠精子密度、活力、精子阳性率以及配种后仔鼠转基因阳性率。结果 3种转染试剂对小鼠繁殖性能影响由小到大依次为LipofectamineTM LTXPLUSTM、Lipofectamine 2000和PAMAM-D。转染后LipofectamineTM LTXPLUSTM、Lipofectamine 2000和PAMAM-D组精子的GFP阳性率分别为35.65%±0.69%、12.86%±0.35%和10.04%±0.20%。配种后仔鼠的PCR阳性率分别为29.17%、13.70%和5.88%。3种不同注射方法对小鼠睾丸都造成损伤,由小到大依次为睾丸网注射、曲精细管注射和睾丸间质注射,三者的阳性精子比例分别为35.13%±1.727%、15.13%±1.457%和0%,配种后仔鼠的PCR阳性率分别为33.3%、12.5%和0%。结果表明,LipofectamineTM LTXPLUSTM和睾丸网注射对小鼠睾丸的损伤最小,并能获得较高的转染效率。     

水牛睾丸曲精细管蛋白质组双向电泳方法的建立及优化

建立并优化了沼泽型水牛睾丸曲精细管蛋白质分离的双向电泳体系,为后续水牛睾丸曲精细管蛋白质表达谱的鉴定和研究奠定基础。比较不同IPG胶条(线性与非线性)、胶条pH范围和蛋白质上样量这三个参数对双向电泳结果的影响。结果显示,采用上样量350μg的曲精细管总蛋白、24 cm且pH值4～7的线性IPG胶条能够更好地分离水牛睾丸曲精细管蛋白质,获得质量较好且分辨率较高的双向电泳图谱,得到大约486个蛋白点。双向凝胶电泳技术能够对水牛睾丸曲精细管蛋白质进行有效分离,并通过对双向电泳体系的优化可获得蛋白质点清晰且分辨率更高的双向电泳图谱。     

棉酚抗生育作用的研究——Ⅳ.大白鼠长期服棉酚睾丸退化的观察

选用出生1月龄大白鼠按20毫克/公斤体重/日灌服棉酚,每周5次,连续1个月和2个月取材;性成熟大白鼠每天服棉酚5毫克/只,每周6次,给药3、4、6个月和停药1、2、3个月分别取材,睾丸称重后固定、制片作比较观察。实验结果表明,棉酚对幼龄大白鼠睾丸的发育没有影响,但使发育到变态后期的精子细胞受损伤,附睾中出现断头坏死的精子。长期服抗生育有效剂量棉酚的大白鼠中,有相当一部分出现不同程度的睾丸退化。退化通常在睾网附近最先出现,并和死精子在曲精细管中积聚相关连。第Ⅶ—Ⅷ期生精上皮退化的过程是自上皮游离缘18—19期精子细胞开始渐进地向基膜方向推进,直至上皮完全剥落或仅留以个别精原细胞和较多的媬育细胞。停服棉酚后恢复1—3个月的结果指出,已开始退化的睾丸在停药后有继续退化的趋势。严重退化的睾丸经停药3个月,虽然曲精细管排列较整齐,部分留有精原细胞的曲精细管中精原细胞显示增加数目并有B 型精原细胞,但尚未见进一步发展。对于睾丸退化可能与死精子在曲精细管内积聚有关,而不是由于棉酚对整个生精上皮的损伤问题进行了讨论。     

双峰驼睾丸和隐睾细胞外基质相关蛋白的组织化学特征及超微结构比较

为探索细胞外基质相关蛋白在隐睾双峰驼的分布情况及其组织化学特征,应用电镜技术和多种组织化学方法比较了隐睾和正常睾丸的超微结构,组织化学特点及层粘连蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）和硫酸乙酰肝素糖蛋白（HSPG）的分布特征。结果显示：(1)与正常睾丸间质结构相比,光镜下隐睾生精小管发育不全,间质内胶原纤维稀疏,网状纤维分布明显,间质血管及生精小管固有膜PAS及AB-PAS阳性反应较弱。电镜下,隐睾生精上皮基膜明显增生,外围I型胶原纤维较少,管周肌样细胞不典型;间质毛细血管及Leydig细胞周围纤维细胞多见,而正常睾丸在间质毛细血管及Leydig细胞周围多分布有成纤维细胞。(2) 免疫组织化学染色显示,正常睾丸组织的Col Ⅳ、LN及HSPG在Leydig细胞内均为强阳性表达,Col Ⅳ和LN在毛细血管内皮细胞强阳性表达,后者在Sertoli细胞的表达尤为明显,HSPG在精原细胞无表达;隐睾时Col Ⅳ、LN及HSPG在Leydig细胞内阳性表达均明显减弱,Col Ⅳ、LN在管周肌样细胞及毛细血管内皮细胞阳性表达也减弱明显,HSPG在精原细胞较强阳性表达,且在精子细胞呈强阳性表达。免疫组织化学图像分析结果显示,双峰驼正常睾丸组织中Col Ⅳ和LN的分布显著高于隐睾组织（P<0.05）,HSPG检测结果在正常睾丸与隐睾之间无统计学差异（P>0.01）。该研究表明,双峰驼隐睾生精小管发育异常,间质组织中合成胶原纤维的能力下降,睾丸细胞外基质的重要成分Col Ⅳ,LN与正常组差异显著与生精小管及Leydig细胞异常发育有关,而HSPG在隐睾生精上皮的强阳性表达与精原细胞发育不成熟密切相关。     

抑素

抑素(inhibin)是睾丸曲精细管及卵巢颗粒细胞分泌的一种肽类激素,可选择性地抑制垂体前叶卵泡刺激素的分泌,调节卵巢滤泡的发育。抑素提纯的成功及生理作用的阐明,终于发现卵泡刺激素分泌调节的一个闭环式反馈调节通路。     

狗施行附睾尾化学注射绝育后寒九附睾内的免疫复合物观察

５只性成熟成年雄性比格犬被施行附睾尾逆向注射１０％精氨酸锌０．５毫升。一般饲料饲养两月后处死作病理检查,发现精子在睾丸曲细精管内的生成及在附睾管内的成熟均受到影响,附睾尾管腔内精子降到了极少程度且多已变性。免疫组织化学反应发现睾丸间质及附睾管上皮间隙内,附睾间质中均有大量免疫复合物的沉积,而其它主要生命器官均未发现异常。结果表明,精氨酸锌附睾尾注射的绝育作用是肯定的,其伴随出现的抗精子抗体及免疫复合物仅对睾丸、附睾及生育功能产生影响,对机体主要生命器官并无损害。     

芳香化酶抑制剂处理鸡胚对性分化和性激素分泌的影响

目的：研究雌激素对鸡性分化的作用。方法：本实验在受精蛋孵化的第3天,分别给对照组和实验组注入100ul生理盐水和芳香化酶抑制剂,石蜡封口,出雏后常规饲养到八月龄,然后检测性腺结构和血清性激素水平。结果：（1）反转完全母鸡的右侧性腺发育成为睾丸,而左侧性腺出现不同程度的反转,即：完全反转成睾丸,反转成卵睾体,未得到明显反转的卵巢,完全反转成为睾丸的母鸡仍保留输卵管残迹,并存在发育不良的输精管;反转成卵睾体的母鸡保留排卵功能;未能得到明显反转的母鸡排卵正常;（2）反转不完全母鸡的右侧 性腺退化,左侧性腺为完整卵巢,表现出雄性交配行为,组织学发现：正常母鸡卵巢存在许多卵泡;正常公鸡睾丸有很多精细管分布,精细管内部能看到各级精母细胞以及成熟精子;反转不完全母鸡性腺的生殖上皮增生,但结构和对照组均不同,反转完全母鸡的两侧性腺均出现类似睾丸的结构,但左侧生殖上皮比较发达,精细管较正常窄,未发现精子。RIA检测发现雌二醇含量为：反转不完全母鸡＞正常母鸡＞反转完全母鸡＞正常公鸡;睾酮含量为：反转完全母鸡＞反转不完全母鸡＞正常公鸡＞正常母鸡,结论：在胚胎期阻断雌激素的合成可以引起雌性性腺在形态结构上朝着雄性的方向变化,血清性激素水平也出现变化。     

睾丸间质干细胞的研究进展

睾丸间质干细胞(stem leydig cells,SLCs)是位于睾丸组织生精小管外侧壁的一类成体干细胞,具有维持自我更新和分化的特征.其分化形成的成熟间质细胞(adult leydig cells,ALCs)可以大量合成和分泌睾酮,是雄性动物机体睾酮产生的主要来源,广泛参与雄性动物的生殖和生理调控.由于SLCs发现...     

睾丸间质细胞瘤3例报告及文献复习

目的：探讨睾丸间质细胞瘤的临床病理特点及诊疗方法。方法：分析并总结3例睾丸间质细胞瘤患者的,J盏床病理资料并文献复习。结果：1例术中冰冻切片诊断为睾丸间质细胞瘤,2例术前细针穿刺病理诊断为睾丸间质细胞瘤,病理组织学表现为瘤细胞呈团、条索或弥漫分布,体积较大,呈多角形胞质丰富嗜酸性,边界清楚。2例患者行单侧睾丸切除,1例行睾丸肿瘤剜除术,术后分别随访24、15、10个月未见复发。结论：睾丸间质细胞瘤发病率低,临床表现缺乏特异性,易误诊,确诊需依赖病理组织学检查,细针穿刺病理可明确诊断并有助于手术的选择及手术范围的确定。     

睾丸间质细胞瘤3例报告及文献复习

目的:探讨睾丸间质细胞瘤的临床病理特点及诊疗方法。方法:分析并总结3例睾丸间质细胞瘤患者的临床病理资料并文献复习。结果:1例术中冰冻切片诊断为睾丸间质细胞瘤,2例术前细针穿刺病理诊断为睾丸间质细胞瘤,病理组织学表现为瘤细胞呈团、条索或弥漫分布,体积较大,呈多角形胞质丰富嗜酸性,边界清楚。2例患者行单侧睾丸切除,1例行睾丸肿瘤剜除术,术后分别随访24、15、10个月未见复发。结论:睾丸间质细胞瘤发病率低,临床表现缺乏特异性,易误诊,确诊需依赖病理组织学检查,细针穿刺病理可明确诊断并有助于手术的选择及手术范围的确定。     

猕猴精巢发育的研究

本文用54只正常猕猴按齿序分组研究了精巢的发育状况,结果如下: 1.个体发育年龄在第Ⅰ组和第Ⅱ组的所有动物,毫无例外地都没有表现出性细胞的发育——精细管内只有大量的生殖上皮细胞和少量的性原细胞。 2.第Ⅲ组有两种情况:其一,本组初期的6只动物,其精细管内细胞成分仍然和第Ⅰ、Ⅱ组的相似;其二,本组中后期的6只动物其精细管的直径增大,精细管内的生殖上皮细胞已分化,精原细胞数量剧增,有了支持细胞和初级精母细胞(其中仅1只动物还没有精母细胞),支持细胞核基位;甚至其中1只动物的个别精细管内已有了少数精子,这说明精子发生的首要特征在本组后期的1只动物上已开始出现。 3.第Ⅳ组的11只动物中,除了1只动物的精细管内尚未出现精子外,其余10只动物都有了精子发生的各级成分,有了数量不等的精子。 因此,若以齿序为标准来划分雄性猕猴的性成熟阶段,则结果表明,第Ⅳ组初期(即第三臼齿刚出齐后的时期)的绝大多数个体都达到了性成熟的时期,精细管内有了精子。     

不同移植部位对成年大鼠睾丸间质细胞雄激素分泌功能的影响

目的:探索不同移植部位对移植的成年SD大鼠睾丸中睾丸间质细胞存活及雄激素分泌功能的影响。方法:将健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组、假手术组、皮下组和肾包膜组。对照组大鼠不去势,其余大鼠于睾丸移植前1周行去势手术。对照组和假手术组去势后仅行背部皮肤切开,不进行睾丸移植;皮下组背部两侧各移植1/3个成年SD大鼠睾丸组织;肾包膜组每侧肾包膜下移植1/3个成年SD大鼠睾丸组织。4周后取材行HE和免疫组化染色,分析移植睾丸组织中睾丸间质细胞存活情况,ELISA法检测受体大鼠血清睾酮水平。结果:皮下组和肾包膜组移植物中难于见到完整的睾丸间质组织,但免疫组化染色发现大量HSD-17β1阳性细胞,对照组、皮下组和肾包膜组的HSD-17β1阳性细胞数分别为(24.33±4.30)、(9.83±4.05)和(12.67±2.81)个,对照组与皮下组相比差异具有统计学意义(p0.05);ELISA分析发现对照组、假手术组、皮下组和肾包膜组的血清睾酮浓度分别为(3.81±1.32)、(0.28±0.08)、(0.44±0.13)和(0.90±0.31)ng/m L,肾包膜组血清睾酮浓度高于假手术组(p0.01)和皮下组(p0.05),而皮下组血清睾酮水平高于假手术组,但两者差异无统计学意义(p0.05)。结论:移植的成年大鼠睾丸组织中的睾丸间质细胞可在受体肾包膜下或皮下存活,但肾包膜下移植可能更加有利于睾丸间质细胞存活和雄激素分泌。     

StARmRNA在仔猪睾丸组织中的表达研究

类固醇合成快速调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,StAR )在调节类固醇合成中发挥了重要作用,为了认识StAR蛋白在仔猪性腺发育早期中的表达,本研究以7、14、23、37日龄的仔猪睾丸为研究对象,采用组织原位杂交方法研究了StAR mRNA在仔猪睾丸中的表达水平。结果表明：在7、14、23、37日龄的仔猪睾丸中,StARmRNA在睾丸的间质细胞中表达,其中在7日龄StARmRNA表达很弱,14、23、37日龄StARmRNA表达较强,StAR蛋白在这一时期的睾丸间质表达与其合成睾酮的能力一致。     

成年牦牛与双性牦牛睾丸蛋白质双向电泳的比较研究

为了比较牦牛和双性牦牛睾丸组织中蛋白质的差异表达,以探索双性牦牛生殖障碍的机理。提取牦牛睾丸(n=4)和1头双性牦牛睾丸总蛋白质,采用双向电泳分离后,对差异表达蛋白质点进行质谱鉴定。实验获得了分辨率高、重复性好的牦牛与双性牦牛睾丸组织蛋白质的双向电泳图谱,2倍及以上差异表达的蛋白质24个,其中22个蛋白质经质谱分析和数据库搜索后得到鉴定。有6种蛋白质属于分子伴侣,在双性牦牛睾丸组织中表达量显著下降,推测与双性牦牛精子发生障碍有关。     

小鼠谷胱甘肽过氧化物酶分布的免疫组化研究

本文应用免疫组化PAP法对GSH-Px在小鼠各组织的分布进行观察,发现GSH-Px广泛存在于肝、肾、肺、胰、结肠、心肌、骨骼肌、脑、肾上腺、甲状腺以及睾丸等组织中,在肝脏小叶周边带肝细胞阳性反应明显强于中央带,肾脏酶阳性反应主要见于肾皮质近曲小管上皮细胞,肾上腺髓质嗜铬细胞、胰岛β细胞、甲状腺间质C细胞以及睾丸Leydig细胞均呈中度至强阳性反应。并就该酶细胞内的定位与其代谢功能的关系进行了讨论。     

用苏木精压片法研究小白鼠精子发生过程中细胞核的变化

1.本文介绍一种研究小白鼠精子发生过程中细胞核形态学变化的苏木精压片法。应用此法将小白鼠精原细胞清楚地区分为A型、中间型及B型三类,并对三类精原细胞核的形态结构进行了详细描述。 2.制定了用压片标本鉴别小白鼠生精上皮周期各期的方法。 3.应用精细管的连续石蜡切片测定了小白鼠生精上皮周期各期在精细管上所占的长度,并观察了它们在精细管上的排列顺序。确定了切取200—300μ长的精细管制作压片标本,有可能得到处于生精上皮周期同一期的材料。     

SPAG4L在人类睾丸中的表达研究

目的:观察人类睾丸新基因SPAG4L在人类不同发育阶段睾丸及隐睾中的表达,为了解该基因在精子发生中的功能奠定基础;方法:收集流产胎儿、成年人、老年人及隐睾患者的睾丸组织,应用RT-PCR和组织原位杂交技术检测SPAG4L mRNA的表达;结果:RT-PCR和组织原位杂交技术检测结果发现,SPAG4L在胎儿睾丸中几乎检测不到,在成年及老年男性睾丸中均有高表达,主要在精母细胞和圆形精子细胞中表达;在隐睾患者的睾丸中,精母细胞大量凋亡,SPAG4L表达明显下调;结论:SPAG4L主要在精子发生减数分裂阶段表达,受生长发育调控,提示该基因可能在精子发生减数分裂阶段发挥着重要的生理功能.