冻融小鼠卵巢移植后细胞凋亡及血管内皮生长因子表达的变化及意义研究

目的:探讨冻融小鼠卵巢同种异体移植后细胞凋亡及血管内皮生长因子表达的变化及意义。方法:收集C57BL/6j雌鼠和BALB/c雄鼠杂交后F1代4周龄小鼠卵巢,慢冻速融后移植至杂交后F1代8～12周雄鼠的肾被膜下,分别于移植后1d(24h)、2d(48h)和7d回收移植物,将冻融以及移植后不同时间段的卵巢组织进行HE染色、全卵巢卵泡计数、电镜观察、免疫组织化学分析细胞凋亡及RT-PCR检测VEGF基因表达。结果:冻融小鼠卵巢移植后随着时间的推移、各级卵泡数和卵泡存活率逐渐下降;移植后48h内细胞凋亡指数最高;电镜观察发现小鼠卵巢组织移植后损伤主要发生在移植后48h内;移植后VEGF的表达有上升的趋势,至第7d仍维持较高水平;移植后48hVEGF120mRNA和VEGF188mRNA水平明显升高(P0.05),至7d下降恢复至移植前水平,而VEGF164mRNA水平移植后无明显变化(P0.05)。结论:小鼠卵巢组织移植后48h内细胞凋亡最为严重,移植后引起大量卵泡的丢失;在移植后血管化的过程中VEGFmRNA表达量增加,VEGF120mRNA和VEGF188mRNA可能参与卵巢移植后早期血管化过程。     

Ang2-siRNA慢病毒干预裸鼠移植性恶性黑色素瘤的研究

目的研究血管生成素2小干扰RNA（Ang2-siRNA）对裸鼠移植性恶性黑色素瘤血管形成及其生长的影响。方法建立人恶性黑色素肿瘤裸鼠异种移植瘤模型。在体内使用pNL-EGFP—Ang2-siRNA慢病毒干扰裸鼠移植性恶性黑色素瘤Ang2基因的表达,观察统计各组肿瘤（空白组、空载组、实验组）生长情况。应用实时荧光定量RT—PCR检测肿瘤组织中Ang2基因的mRNA表达水平;CD34单克隆抗体作为血管内皮标志物,免疫组织化学法检测其表达,以评价肿瘤微血管密度。结果成功建立了恶性黑色素瘤裸鼠异种移植瘤模型,实验组肿瘤Ang2基因mRNA水平、微血管密度、肿瘤体积显著小于空白组和空载组（P〈0．01）,空白组和空载组之间无统计学意义（P〉0．05）。结论pNL—EGFP—Ang2-siRNA慢病毒能沉默Ang2的表达,显著抑制恶性黑色素瘤血管的形成和肿瘤的生长,可能为临床恶性黑色素肿瘤的基因治疗开辟新的途径。     

绿色荧光蛋白标记人脐带间充质干细胞大鼠卵巢移植的实验观察

目的观察人脐带间充质干细胞(MSCs)移植于大鼠卵巢后存活的情况,为MSCs参与动物实验提供实验依据。方法以腺病毒介导绿色荧光蛋白(GFP)基因体外转染MSCs 48 h,于大鼠腹腔卵巢注射移植,于注射移植后1h及移植后3、7、21 d取材并在荧光显微镜下观察MSCs的存活情况。取材石蜡切片行苏木精-伊红(HE)染色观察移植细胞部位组织病理图像。结果 MSCs注射移植后3 d、7 d时GFP荧光表达较强,细胞轮廓清晰,与注射后1h平均吸光度值比较,移植后3、7 d检测荧光吸光度值差异均无统计学意义(P0.05);移植后21 d时GFP荧光表达较弱,吸光度值差异有统计学意义(P0.05)。术后大鼠组织切片光镜下移植的MSCs细胞清晰可见,无急性排斥反应特征出现。结论 MSCs在大鼠腹腔卵巢移植,其与异种个体组织相容性较好。     

敲减血管内皮生长因子受体-2表达抑制人乳腺癌裸鼠移植瘤的生长

应用化学修饰的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)抑制裸鼠乳腺癌移植瘤血管内皮生长因子受体-2基因（VEGFR2,又称kinase insert domain-containing receptor, KDR)的表达, 探讨抑制肿瘤血管生成对人乳腺癌(MCF-7)裸鼠移植瘤生长的影响．雌裸鼠皮下种植MCF 7 细胞,肿瘤长至一定大小时, 随机分为对照组（A）、转染试剂对照组（B）、小剂量治疗组（C）及大剂量治疗组（D）．肿瘤局部分别注射葡萄糖溶液、In vivo jetPEI^TM转染试剂和In vivo jetPEI^TM转染试剂包裹的KDRsiRNA．22 d后处死全部动物, 取肿瘤, 测其大小及重量, HE 及免疫组化染色,微血管密度计数,同时用RT-PCR检测KDR基因的表达水平．结果显示,siRNA治疗组瘤组织的增长受到明显抑制;HE染色显示,治疗组肿瘤中心区出现大面积细胞坏死;免疫组化结果显示,染色阳性血管数明显低于对照组;同时RT-PCR结果表明,治疗组KDR表达下调．对照组各指标无显著变化．因此,化学修饰的siRNA介导的RNAi可以降低人乳腺癌裸鼠移植瘤血管中KDR 表达, 抑制血管生成进而抑制肿瘤的生长,是潜在的肿瘤治疗新方法．     

小鼠异位气管移植模型中核转录因子NF—κB激活MCP-1诱导闭塞性细支气管炎的研究

目的利用同种异体小鼠异位气管移植模型,研究NF—κB是否激活MCP-1基因参与闭塞性细支气管炎（OB）,探讨OB的发病机制。方法将小鼠异位气管移植模型分成同基因组（BALB／C→BALB／C）和异基因组（BALB／C→C57BL／6）,在术后7、14、21d观察气管移植物是否发生OB;免疫组化染色检测气管移植物MCP-1蛋白表达;EMSA测定各组气管移植物NF—κB的转录活性改变;RT—PCR检测MCP-1的mRNA水平;ELASA检测外周血MCP-1蛋白水平。结果异基因移植实验组气管移植物管腔闭塞率在术后7d仅（6±3）％,14d为（28±）8％,21d达到（74±12）％,而同基因移植对照组管腔闭塞率在术后7～21d均小于3％;与对照组比较,实验组气管移植物NF—κB的转录活性在术后7、14、21d均明显升高;气管移植物MCP-1mRNA及血清中MCP-1蛋白水平术后7、14d升高,术后21d与对照组比较无显著差异。结论同种异体小鼠异位气管移植中,NF—κB转录活性增强,在移植后早期激活其下游靶基因MCP-1募集单核细胞和淋巴细胞攻击移植物,促进闭塞性细支气管炎的发生发展。     

小檗碱对缺血性脑梗死大鼠氧化应激/炎症反应、血管生成的作用研究

摘要 目的：探讨小檗碱对缺血性脑梗死大鼠氧化应激/炎症反应、血管生成的作用。方法：选取60只SPF级SD大鼠,随机分为对照组、模型组和小檗碱组各20只。建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。术后及给药后7d采用Longa标准评分评估大鼠神经功能。检测各组大鼠脑组织的抗氧化活性和炎症因子水平。采用免疫组化检测脑缺血再灌注皮质微血管密度（MVD）。采用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测低氧诱导生长因子- 1 （HIF-1 ）和血管内皮生长因子（VEGF） mRNA表达水平。采用蛋白免疫印迹试验检测VEGF和HIF-1 蛋白表达水平。结果：模型组和小檗碱组大鼠术后具有神经功能缺损症状表现,Longa评分均高于对照组。给药7 d后,模型组和小檗碱组大鼠Longa评分均高于对照组（P＜0.05）,且小檗碱组大鼠Longa评分低于模型组（P＜0.05）。与对照组比较,模型组丙二醛（MDA）水平显著升高,而谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物岐化酶（SOD）活性显著降低（P＜0.05）。与模型组比较,小檗碱组MDA水平显著降低,而GSH-Px和SOD活性显著升高（P＜0.05）。与对照组比较,模型组白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平显著升高（P＜0.05）。与模型组比较,小檗碱组IL-1β、TNF-α水平显著降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。给药7 d后,模型组和小檗碱组MVD、VEGF mRNA和HIF-1 mRNA表达水平均高于对照组（P＜0.05）,而小檗碱组MVD、VEGF mRNA和HIF-1 mRNA表达水平高于模型组（P＜0.05）。给药7 d后,小檗碱组和模型组VEGF和HIF-1 蛋白表达水平均高于对照组（P＜0.05）,而小檗碱组VEGF和HIF-1 蛋白表达水平高于模型组（P＜0.05）。结论：小檗碱通过抑制氧化应激/炎症反应、促进血管生成从而达到脑保护作用,其机制可能与激活HIF-1 /VEGF信号通路有关。     

生物血管异种移植的初步研究

目的为了寻求一种新的小口径血管代用品,建立异种移植的动物实验模型,以观察异种移植物的安全性、可靠性、通畅性及组织学改变。方法共采用17只杂种雌性犬,实验组10只,植入经环氧化物处理的猪血管移植物;对照组7只,植入人造血管。手术方法为右侧股动静脉瘘。术后通过超声和血管造影方法来观察移植血管的通畅性,并在术后3月将移植物取出,进行病理学检查,观察移植前后移植物的组织学改变。结果术后第一周、二周行Doppler超声检查结果,两组动静脉瘘均通畅,2周内血管通畅率为100%。术后3个月动脉造影检查后,生物血管组(PG)通畅5只,通畅率62.5%,e-PTFE组通畅4只,通畅率66.7%。两组数据统计学处理,差异无显著性(P>0.05)。术后3月对移植物取材,进行光镜及扫描电镜病理学检查,通畅的生物血管吻合口无狭窄,吻合部位有新的内膜覆盖,周围组织无钙化,有新生的内皮细胞覆盖。结论经环氧化物处理的猪的血管移植物(PG)生物血管作为异种移植物,生物相容性好,具有一定的可行性。     

人胎儿卵巢异种移植的组织学研究

目的探讨人胎儿卵巢组织异体移植的最佳条件。方法观察胎儿卵巢进行异种移植后的组织学变化,并计算各组移植卵巢内各期卵泡的发育情况及卵泡构成比。结果新鲜的卵巢组织、体外培养的卵巢组织以及冷冻复苏后经体外培养的卵巢组织移植后,其内有原始卵泡发育,而且可见丰富的血管网;未见明显的淋巴细胞浸润现象。结论人胎儿卵巢组织(包括新鲜的卵巢组织、体外培养的卵巢组织以及冷冻复苏后经体外培养的卵巢组织)异种移植后原始卵泡在受体体内能进一步发育,生长卵泡分泌的雌激素有调节子宫内膜周期性变化的作用。     

中国版纳小型猪近交系动脉异种移植靶抗原研究

目的　研究中国版纳小型猪近交系动脉的异种靶抗原α -Gal的分布和半定量分析 ,为研究异种移植超急性排斥反应和异种生物材料提供资料。方法　通过亲和免疫组织化学法和图象分析对 10头版纳小型猪的四级动脉进行α Gal的分布和半定量研究。结果　 (1)各级血管组织中血管内皮细胞阳性表达明显 ,弹性纤维、胶原纤维和平滑肌细胞未见表达 ,外膜有微弱表达 ;(2 )图象分析显示 ,管径越细 ,其内皮细胞的表达越高 (P <0 .0 1) ,各级动脉内皮细胞阳性表达的面积密度比的组间差异显著 (P <0 .0 1) ,t检验发现每两组间的动脉内皮细胞阳性表达面积密度比相差显著 (P <0 .0 1)。结论　 (1)版纳小型猪动脉内皮细胞均有异种抗原α Gal分布 ,但是分布不均匀 ;(2 )微血管血栓是异种移植超急性排斥反应中的重要环节 ,小型猪的异种器官移植、彻底解决异种移植超急性排斥反应的关键是防治微血管栓塞     

骨髓基质干细胞移植对扩张型心肌病心衰大鼠心功能改善作用机制的研究

通过对心肌胶原纤维、微血管生成、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体表达的研究,探讨骨髓基质干细胞(BMSSCs)心肌内移植对扩张型心肌病心衰大鼠心功能的保护机制．应用阿霉素注射法建立扩张型心肌病心衰大鼠模型,成功建模后移植4', 6-二乙酰基-2-苯基吲哚(DAPI)标记的BMSSCs．分别于术后1、2、3、4周进行血流动力学检测,利用免疫组化、RT-PCR技术分析心肌胶原纤维、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1、Flk-1表达的改变,以及微血管密度．结果显示,移植细胞于术后4周通过免疫荧光可检测到存活．于术后2周开始,移植组心功能较对照组改善,表现为移植组收缩压(LVSP)、左心室内压最大上升或下降速率(?dp/dt)较对照组显著升高,舒张压(LVDP)显著下降,P < 0.05．移植组心肌胶原纤维沉积减少,光密度值比较P < 0.05．移植组VEGF、Flt-1、Flk-1表达较同期对照组增加,并张且与其受体达峰时间不同步．4周时移植组微血管密度明显高于对照组．上述结果表明,BMSSCs移植后可通过上调受体内VEGF、Flt-1、Flk-1的表达,促进血管新生,减少胶原纤维沉积,从而改善受体心脏的功能．     

高压氧对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究

目的:观察高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制.方法:56只SD大鼠被随机分为三组,假手术组(n=8);I/R组(n=24),夹闭双肾动脉45分钟后恢复血流灌注;I/R+HBO组(n=24),夹闭双肾动脉45分钟并在恢复血流后1h、24 h、48 h行HBO治疗,每次HBO后采血并取双肾,比色法测定血浆尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)值,原位末端标记(TUNEL)法检测肾小管上皮细胞凋亡情况,实时定量PCR法检测促凋亡基因Bax的mRNA含量.结果:与sham组(BUN值为9.563± 1.384 mmol/L;Cr值为45.912±2.685 mmo1/L,TUNEL值为2.088％)比较,I/R组大鼠再灌注1小时尿素氮(12.5±1.487 mmol/L)和血肌酐水平(51.388±3.092 mmol/L)升高,但差异无统计学意义,而TUNEL阳性细胞数(9.775％)和Bax的mR-NA(3.219± 0.427)表达水平均显著升高(P＜0.05),再灌注24小时及48小时后尿素氮(28.087± 2.012 mmol/L、41.225± 1.397mmol/L)和血肌酐(241.75± 11.853 mmol/L、278.75± 12.578 mmol/L)水平、TUNEL阳性细胞数(12.512％、14.413％)和Bax的mRNA(5.541±0.227、6.407± 0.291)表达水平均显著升高(P＜0.05);而HBO治疗可显著降低再灌注24小时及48小时的大鼠尿素氮(14.15±1.397 mmol/L、25.962± 2.497 mmol/L)和血肌酐(146.375± 8.782 mmolL、210.125± 11.519 mmol/L)水平(P＜0.05),但仍显著高于假手术组(P＜0.05).结论:HBO治疗可以改善I/R后肾功能,其作用机制可能与在早期明显降低Bax的mRNA表达,减轻肾小管上皮细胞凋亡有关.     

PACAP mRNA在大鼠妊娠黄体及离体细胞的表达与调节

目的:观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)mRNA在大鼠妊娠黄体中的表达及调节。方法:①于妊娠不同时期收集大鼠卵巢。用RT-PCR和原位杂交方法,观察妊娠过程卵巢PACAP mRNA表达的动态变化;②未成年雌性大鼠颈部皮下注射50IU孕马血清促性腺激素,48h后注射25IU人绒毛膜促性腺激素,第6天收集培养黄体细胞。用放免法测定给予不同处理后,培养液中孕酮的含量;用RT-PCR方法检测各组PACAP mRNA表达水平。结果:从妊娠11d起,PACAP mRNA表达逐渐增强,在妊娠19d达高峰;与对照组相比,血小板活化因子(PAF)、福司考林(forskolin)、佛波酯(PMA)均使培养黄体细胞孕酮分泌量及PACAP mRNA表达显著增高(P0.05)。结论:PACAP与中、晚期妊娠的维持密切相关;PAF可促进培养黄体细胞PACAP mRNA的表达,蛋白激酶C(PKC)和蛋白激酶A(PKA)途径都有可能参与了此过程。     

缺氧环境下MSCs促进血管内皮细胞增殖和血管形成

目的 探讨成人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells BMSCs)在体外缺氧环境下对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和血管形成能力的影响及其可能机制.方法密度梯度离心法收集分离成人骨髓血MSCs并进行体外培养扩增,传代至4代进行实验,流式细胞仪鉴定MSCs表面标志.BMSCs缺氧培养0h(对照组)、12h、24h和48h后,RT-PCR检测SDF-1和VEGF基因表达,ELISA法检测细胞上清液中SDF-1和VEGF蛋白含量.HUVECs传代培养后分成三组进行实验:对照组、BMSCsCMN-HUVECs组,BMSCsCMH-HUVECs组,MTT检测三组细胞增殖能力,体外血管形成实验分析三组细胞在Matrigel上管腔样结构形成情况.结果 (1) BMSCs呈旋涡状长梭形即纤维母细胞样生长;(2) 人BMSCs阳性表达CD29、CD44和CD90,而CD34、CD45和CD106为阴性;(3) BMSCs缺氧培养后SDF-1和VEGF在mRNA和蛋白水平表达均较常氧培养显著增高(P均<0.05);(4) BMSCsCMH明显提高HUVECs增殖能力(P<0.05),显著增加HUVECs在Matrigel上形成管腔样结构的能力(P<0.05).结论 人BMSCs在缺氧环境下通过旁分泌SDF-1和VEGF提高血管内皮细胞增殖和管腔样结构形成能力,促进血管新生.     

负压创面治疗技术对皮肤移植成活的临床观察及实验研究

目的：采用负压固定移植皮片方法,观察负压创面治疗技术（negative-pressure wound therapy,NPWT）对游离皮片成活的影响,初步探讨微血管形成与皮肤成活之间的关系。方法：采用回顾性研究的方法,对65例皮肤缺损的患者,根据皮肤移植术后皮片固定方法的不同,分为两组,其中Ⅰ组为NPWT治疗组,有35例患者,刃厚游离皮片移植术后行创面负压吸引治疗;Ⅱ组为常规治疗组。有30例患者,刃厚游离皮片移植术后用打包或加压包扎的方式固定。Balb／c小鼠20只,按皮片移植后不同固定加压方式,分为实验组：负压创面治疗技术使用组（10只）,对照组：打包加压组（10只）,于皮片移植术后第5天,大体观察移植皮片颜色、有无水疱、有无皮下积液及质地,计算并比较皮片成活率,以免疫组化染色标记毛细血管内皮,检测皮片中微血管情况。结果：临床观察表明：Ⅰ组术后皮片成活时间平均较Ⅱ组缩短,有统计学差异（P〈0．01）,Ⅰ组术后住院治疗时间平均较Ⅱ组缩短5天,有统计学差异（P〈0．01）,Ⅰ组术后抗生素费用、换药次数及换药费用较Ⅱ组减少,有统计学差异（P〈0．01）。动物实验结果表明：术后第5天,实验组小鼠移植皮片中微血管增生较对照组明显增多（P〈0．05）。结论：与常规打包或加压包扎固定皮片的方式相比,负压创面治疗技术的应用可以缩短皮片成活时间,缩短患者住院治疗时间,减少抗生素的使用及换药次数,促进移植皮片中毛细血管增生,提高皮片成活率。     

脑水肿时紧密连接蛋白occludin及AQP4的表达变化

目的:采用枕大池内注入脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)的方法建立大鼠脑水肿模型,观察脑组织病理形态学变化,脑组织含水量(brain water content,BWC),血脑屏障(blood brain barrier,BBB)的紧密连接蛋白Occludin和水通道蛋白-4(aquaporin 4,AQP4)表达水平的动态变化,研究AQP4及Occludin与脑水肿形成的关系,及其可能的作用机制,为临床脑水肿的治疗提供理论依据。方法:选用Wistar健康成年大鼠,随机分为正常对照组,生理盐水组和脂多糖组,后两组的观察时间点选定于造模后3 h、6h、12 h、24 h、72 h。采用经皮穿刺枕大池内注入脂多糖的方法制备脑水肿动物模型,正常对照组、生理盐水组及脂多糖组分别于各时间点进行开颅取脑,测定脑组织含水量,通过HE染色法观察脑组织的病理形态学变化,应用Western blot方法检测occludin的表达变化。应用RT-PCR技术测定脑组织内AQP4mRNA的表达变化。结果:生理盐水组各时间点中有少量AQP4mRNA及occludin蛋白的表达,与正常对照组之间无显著性差异;脂多糖组在造模后3 hAQP4的mRNA表达开始增加,6-12 h达高峰,此后明显下降,随后表达开始减弱,24-72 h表达显著低于生理盐水组;occludin蛋白表达下降出现于造模后3 h,12-24 h下降更明显,72 h表达开始升高。结论:枕大池内注入脂多糖(LPS)所建立脑水肿模型中,脑组织含水量及血脑屏障通透性增加,病理学特点是血管源性脑水肿出现早且持久,后期伴有细胞毒性脑水肿的改变。AQP4早期表达增强是胶质细胞的适应性反应,与血脑屏障的破坏有关,促进了血管源性脑水肿的发生。后期AQP4表达减弱是机体内在防御机制的表现,同时又促进细胞毒性脑水肿的形成。occludin在脑组织中表达量随脑水肿的加重而降低,即与脑水肿的程度呈负相关,目前认为这与脑水肿时内皮细胞通透性增加,血脑屏障的通透性改变,导致occludin的表达下调有关,促进了血管源性脑水肿的发生。针对以上特点,我们可以进一步研究调控AQP4及occludin表达的药物,从而减轻脑损伤后脑水肿的程度,为脑水肿的治疗提供新的临床策略。     

美满霉素对癫痫大鼠海马神经元凋亡的影响

目的探讨美满霉素(minocycline,MC)对癫痫模型大鼠海马神经元的抗凋亡保护作用。方法将大鼠随机分为3组:生理盐水对照组(NS组),海人酸致痫组(KA组)和美满霉素预处理+海人酸组(MC+KA组)。以免疫组化法检测各组大鼠造模后2h、8h和24h海马部位Cytochrome C(CytC)免疫反应性。采用半定量RT-PCR和免疫组化法检测24h、48h caspase-3 mRNA和caspase-3表达情况。结果在KA致痫后2hCytC即开始有表达,8h达到高峰,24h表达减少,而MC预处理明显减弱此效应。caspase-3 mRNA的含量及caspase-3免疫反应性在24h时间点三组之间无明显差异,在48h时间点,KA组明显高于对照组(P0.05),MC预处理则明显拮抗KA诱导的caspase-3高表达。结论 KA致痫能诱导大鼠海马神经元凋亡,而MC能通过抑制凋亡途径对海马神经元发挥神经保护作用。     

有氧运动对原发性高血压大鼠的降压作用及对骨骼肌VEGF、eNOS表达的影响

目的：了解运动训练对原发性高血压大鼠骨骼肌血管调节因子的影响,探讨运动降压的机制。方法：原发性高血压大鼠随机分为对照组（SHR-C）和训练组（SHR-T）,配对正常血压大鼠对照组（WKY-C）（n=7）。SHR-T进行10周游泳训练,每周训练5 d,每天运动1次,第1周每次运动40 min,第2周50 min,第3周增加到60 min后保持不变,直至训练完毕。SHR-T训练结束24 h后大鼠全部处死并提取比目鱼肌,RT-PCR和免疫印迹法测定血管内皮生长因子（VEGF）等指标。结果：与WKY-C比较,SHR-C骨骼肌VEGF、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）蛋白明显低于对照组（P〈0.05）,训练前SHR-C、SHR-T两组血压显著性高于WKY-C（P〈0.01）;训练结束后,与SHR-C比较,SHR-T血压显著性降低（P〈0.05）,心率降低更加显著（P〈0.01）,VEGF mRNA及蛋白、VEGFR2、eNOS均显著性升高（P〈0.05）。结论：氧运动训练能明显降低高血压大鼠血压,促进骨骼肌VEGF mRNA和蛋白水平的表达,同步提高VEGFR2、eNOS蛋白含量,血管生长因子水平增加有利于血管生成并产生降压效应。     

骨髓问充质干细胞移植对VCD所致卵巢损伤的修复研究

目的：探讨小鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对去氧乙烯基环己烯（VCD）所致卵巢早衰治疗的可行性。方法：采用VCD（160mgkg^-l,day^-1）连续腹腔注射来诱导小鼠卵巢早衰。每侧卵巢注射转染了绿色荧光基因小鼠骨髓来源的MSCs,于移植后14、28天及45天,取各组血液标本及卵巢组织,同时观察小鼠动情周期的变化;酶联免疫法检测血清FSH、LH水平,显微镜下观察MSC在卵巢的分布。结果：MSCs移植后各组均可见绿色荧光,并且主要分布于卵巢间质区,卵巢泡膜细胞区也可见绿色荧光细胞。MSCs组动情周期较实验对照组缩短,FSH与LH水平较实验对照组低,差异具有显著性。结论：骨髓间充质干细胞可改善卵巢早衰小鼠的卵巢内分泌功能,并且长时间存在于卵巢组织。骨髓间充质干细胞可能成为卵巢早衰治疗的新方法。     

大鼠酒精躯体依赖及动机行为研究

目的：诱导大鼠产生酒精依赖,观察大鼠产生的躯体依赖及行为学改变。方法：20只雄性SD大鼠,其中饮酒组和对照组各10只。通过6％（v／v）酒精溶液作为饮酒组大鼠唯一饮水来源共28d,测量血酒精浓度。根据旷场行为、戒断症状和强迫游泳等方法来判断是否成功诱导大鼠产生酒精躯体依赖及动机行为改变。结果：整个实验过程饮酒组大鼠血酒精浓度没有发生明显变化。饮酒组大鼠旷场测试中水平活动量在饮酒第7d比对照组显著降低（P〈0．05）;垂直活动量在饮酒第7、14d比对照组显著降低（P〈0．05）;饮酒组大鼠戒断2-48h酒精戒断评分均显著高于对照组（P〈0．01）且评分在戒断第6h最高;戒断24、48h的大鼠在强迫游泳中绝对不动时间比对照组显著延长（P〈0．05）。结论：大鼠持续饮用6％（v／v）浓度酒精溶液可以诱导出大鼠对酒精的严重躯体依赖和抑郁状态,并抑制大鼠在新奇环境中的活动能力和动机行为。