SFRP4抑表达对HT-29细胞侵袭能力的影响

目的：观察SFRP4对HT29细胞侵袭转移能力的影响。方法：以HT29细胞为研究对象,SFRP4siRNA通过脂质体转染HT29细胞,westernblot检测HT29细胞中wnt、细胞核β—Catenin蛋白的表达、elisa法检测细胞培养上清MMP-2、MMP．9的含量,Transwell小室观察成的转移侵袭能力。结果：干扰SFRP4后能显著降低HT29细胞中Wnt、细胞核中B—Catenin蛋白的表达、细胞培养上清MMP-2、MMP-9的含量,（P〈0．01）,降低HT29细胞的转移侵袭能力（P〈0．01）。结论：抑制SFRP4表达能抑制HT29细胞的转移侵袭,其机制可能与抑制HT29细胞wnt信号通路有关。     

ID1对大鼠C6细胞侵袭转移能力的影响

目的:观察ID1对大鼠胶质瘤细胞(C6细胞)侵袭转移能力的影响。方法:以C6细胞为研究对象,ID1siRNA通过脂质体转染C6细胞,westernblot检测C6细胞中ID1、P-NF-КBp65蛋白的表达、Elisa法检测细胞培养上清MMP-9的含量,Transwell小室观察成的转移侵袭能力。结果:干扰ID1后能显著降低C6细胞中P-NF-КBp65蛋白、细胞培养上清中MMP-9的含量(P<0.01),降低C6细胞的转移侵袭能力(P<0.01)。结论:干扰ID1能抑制C6细胞的转移侵袭,其机制可能与抑制C6细胞中P-NF-КBp65蛋白、MMP-9的表达有关。     

ID1对大鼠C6细胞侵袭转移能力的影响

目的：观察IDl对大鼠胶质瘤细胞（c6细胞）侵袭转移能力的影响。方法：以C6细胞为研究对象,ID1 siRNA通过脂质体转染c6细胞,western blot检测C6细胞中ID1、P-NF—KBp65蛋白的表达、Elisa法检测细胞培养上清MMP．9的含量,Transwell小室观察成的转移侵袭能力。结果：干扰ID1后能显著降低C6细胞中P-NF-KBp65蛋白、细胞培养上清中MMP-9的含量（P〈0．01）,降低C6细胞的转移侵袭能力（P〈0．01）。结论：干扰ID1能抑制C6细胞的转移侵袭,其机制可能与抑制C6细胞中P-NF-K Bp65蛋白、MMP-9的表达有关。     

Fra-1对大鼠C6胶质瘤细胞侵袭转移能力的影响

目的:观察Fra-1对C6胶质瘤侵袭转移能力的影响。方法:以大鼠C6胶质瘤细胞为研究对象,Fra-1 siRNA通过脂质体转染C6,realtime RT-PCR和western blot法检测C6细胞中Fra-1的表达、Elisa法检测细胞培养上清中MMP-9的含量,Transwell小室观察C6细胞的转移侵袭能力。结果:干扰Fra-l后能降低C6细胞中Fra-1的表达,显著降低C6细胞中MMP-9的含量,降低C6细胞的转移侵袭能力。结论:干扰Fra-1能抑制C6细胞的转移侵袭。     

Fra-1对大鼠C6胶质瘤细胞侵袭转移能力的影响

目的：观察Fra-1对C6胶质瘤侵袭转移能力的影响。方法：以大鼠C6胶质瘤细胞为研究对象,Fra-1siRNA通过脂质体转染C6,realtimeRT-PCR和westernblot法检测C6细胞中Fra-1的表达、Elisa法检测细胞培养上清中MMP一9的含量,Transwell小室观察C6细胞的转移侵袭能力。结果：干扰Fra-1后能降低C6细胞中Fra-1的表达,显著降低C6细胞中MMP-9的含量,降低C6细胞的转移侵袭能力。结论：干扰Fra-1能抑制C6细胞的转移侵袭。     

EBP50通过Wnt3a/β-catenin信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移

EBP50通过抑制LIMK/cofilin信号通路和PI3K/Akt/m TOR/MMP信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移。然而,EBP50是否可以通过其他机制抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移尚未可知。本研究发现,EBP50能通过Wnt3a/β-catenin信号通路影响乳腺癌细胞的侵袭和转移。Western印迹结果显示,EBP50在低转移细胞株MCF-7和正常乳腺细胞株MCF-10A中高表达,而在高转移细胞株MDA-MB-231低表达。采用RNAi技术将小RNA质粒瞬时转染乳腺癌细胞株MCF-7,同时将质粒pc DNA3.1-EBP50转入乳腺癌细胞株MDA-MB-231。Western印迹结果显示,Si EBP50/MCF-7细胞组的EBP50表达水平明显下调,MDA231/EBP50细胞组的EBP50表达水平明显上调。Transwell侵袭实验和划痕实验结果显示,用Wnt3a刺激后,Si EBP50/MCF-7细胞组体外迁移和侵袭能力明显增强,MDA231/EBP50细胞组体外迁移和侵袭能力明显减弱。Western印迹结果显示,与未用Wnt3a或同时用Wnt3a和抑制剂Dkk1刺激的相比,Si EBP50/MCF-7细胞组上皮-钙粘蛋白(Ecadherin)下调,波形蛋白(vimentin)上调,细胞核中β-联蛋白(β-catenin)的表达水平升高,而MDA231/EBP50细胞组上皮-钙粘蛋白上调,波形蛋白下调,细胞核中β-联蛋白表达下降。上述结果表明,EBP50通过Wnt3a/β-catenin信号通路影响β-联蛋白的转核,抑制EMT的发生,进而抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移。     

Aurora-A高表达对食管癌细胞侵袭和 MMP-9表达的影响

目的:建立Aurora-A高表达的稳定细胞系,并探讨Aurora-A高表达对食管癌细胞侵袭和MMP-9蛋白表达与活性的影响。方法:利用脂质体法稳定转染Aurora-A表达质粒,通过Westernblot和RT-PCR鉴定Aurora-A高表达的稳定细胞系。利用细胞体外侵袭实验观察细胞的侵袭能力,并通过Western blot、ELISA和明胶酶谱的方法观察MMP-9的蛋白表达水平和活性。结果:建立了Aurora-A高表达的稳定细胞系,且Aurora-A高表达能增加食管癌细胞的体外侵袭能力,并提高了MMP-9的蛋白表达水平和活性。结论:初步阐明了Aurora-A促进食管癌细胞侵袭的作用以及分子机制,为Aurora-A可能成为治疗食管癌的有效靶点提供了依据。     

Sfrp2通过下调Wnt/β-catenin通路抑制胶质瘤细胞系U251的迁移能力

摘要 目的：探讨使用Wnt3a蛋白受体竞争性抑制剂Sfrp2下调Wnt通路的关键蛋白β-catenin的表达对胶质瘤细胞U251线粒体功能以及细胞侵袭能力的影响。方法：使用外源性Sfrp2蛋白处理U251细胞,使用Western Blot技术,Mitotracker线粒体形态学染色,划痕实验观测Sfrp2蛋白对U251细胞Wnt通路的表达,线粒体功能以及细胞迁移能力的影响,并使用GSK-3β抑制剂LiCl上调Wnt通路进一步明确Sfrp2蛋白的作用机制。结果：Sfrp2蛋白可引起Wnt通路的抑制（P<0.05）,线粒体分裂（P<0.01）以及细胞迁移能力的下降（P<0.01）,而使用LiCl处理后,Wnt通路重现上调（P<0.05）,线粒体分裂受到抑制（P<0.05）,细胞的迁移能力也再次恢复（P<0.05）。结论：Sfrp2可通过下调Wnt通路引起线粒体分裂进而抑制U251细胞的迁移能力。     

二氢杨梅素对人胃癌MKN45细胞迁移和侵袭的影响及其机制*

目的:探讨二氢杨梅素(DHM )对人胃癌MKN45细胞迁移和侵袭的作用及其分子机制。方法:培养人低分化胃癌MKN45细胞,用不同浓度的DHM(0,10,20,30,40,50 μmol/L)分别处理细胞24及48 h,每组实验重复3次,采用CCK8实验检测癌细胞增殖活力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell小室检测细胞侵袭能力;免疫印迹分析细胞迁移和侵袭相关蛋白表达情况。结果:不同浓度DHM干预可降低MKN45细胞活力。20,30及40 μmol/L的DHM处理48 h可明显抑制细胞的迁移能力(P＜0.01)和侵袭能力(P＜0.05及0.01)。20及30 μmol/L的DHM处理48 h可增加E-cadherin蛋白表达(P＜0.01)、降低Vimentin表达(P＜0.01),从而逆转EMT过程;10,20及30 μmol/L的DHM处理48 h可明显降低pJNK的活性表达水平(P＜0.05及0.01),及MMP-2蛋白表达(P＜ 0.01);JNK通路特异性抑制剂SP600125预处理可明显促进DHM对癌细胞侵袭能力的抑制作用(P＜0.01)及降低MMP-2表达(P＜0.01)。结论:DHM具有抑制人胃癌MKN45细胞的迁移及侵袭的作用,其机制可能与通过JNK通路下调MMP-2蛋白表达水平、逆转上皮间质转化有关。     

HepaCAM联合藏红花素抑制前列腺癌细胞PC3迁移活性的研究

为研究肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepa CAM)联合藏红花素(crocin)对前列腺癌(prostate cancer,PCa)细胞PC3上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及侵袭转移的影响,采用细胞免疫荧光观察迁移相关蛋白的表达情况;划痕实验检测细胞侵袭转移能力;Transwell实验检测细胞体外迁移能力;实时荧光定量PCR、Western blotting检测EMT相关分子及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)和MMP-9的表达变化。实验显示,hepaCAM过表达腺病毒与藏红花素均可有效抑制PC3细胞的侵袭转移(p0.01),两者联用比单独应用效果更加明显(p0.01)。Q-PCR显示,过表达hepaCAM联合藏红花素组与单独处理组相比,MMP-2、MMP-9及波形蛋白(vimentin,VIM)mRNA表达水平下调更显著(p0.01);E-钙粘蛋白(E-cadherin,E-CA)m RNA水平上调更加明显(p0.01)。Western blotting显示,与过表达hepa CAM组或藏红花素组相比,两者联用组MMP-2、MMP-9、VIM蛋白表达量明显降低(p0.01),同时E-CA蛋白水平上调更加明显(p0.01)。因此得出以下结论,hepaCAM过表达腺病毒联合藏红花素可显著抑制PC3细胞的侵袭转移,作用机制或与EMT和MMPs的表达有关。     

Investigation of the mechanism of temperature sensitivity of the electroreceptors of ampullae of lorenzini

In experiments on Black Sea skates (Raja clavata), the potential of the receptor epithelium of the ampullae of Lorenzini and spike activity of single nerve fibers connected to them were investigated during electrical and temperature stimulation. Usually the potential within the canal was between 0 and –2 mV, and the input resistance of the ampulla 250–400 k. Heating of the region of the receptor epithelium was accompanied by a negative wave of potential, an increase in input resistance, and inhibition of spike activity. With worsening of the animal's condition the transepithelial potential became positive (up to +10 mV) but the input resistance of the ampulla during stimulation with a positive current was nonlinear in some cases: a regenerative spike of positive polarity appeared in the channel. During heating, the spike response was sometimes reversed in sign. It is suggested that fluctuations of the transepithelial potential and spike responses to temperature stimulation reflect changes in the potential difference on the basal membrane of the receptor cells, which is described by a relationship of the Nernst's or Goldman's equation type.I. P. Pavlov Institute of Physiology, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. I. M. Sechenov, Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. Pacific Institute of Oceanology, Far Eastern Scientific Center, Academy of Sciences of the USSR, Vladivostok. Translated from Neirofiziologiya, Vol. 12, No. 1, pp. 67–74, January–February, 1980.     

Principles of organization and evolution of systems of regulation of functions

Evolution of living organisms is closely connected with evolution of structure of the system of regulations and its mechanisms. The functional ground of regulations is chemical signalization. As early as in unicellular organisms there is a set of signal mechanisms providing their life activity and orientation in space and time. Subsequent evolution of ways of chemical signalization followed the way of development of delivery pathways of chemical signal and development of mechanisms of its regulation. The mechanism of chemical regulation of the signal interaction is discussed by the example of the specialized system of transduction of signal from neuron to neuron, of effect of hormone on the epithelial cell and modulation of this effect. These mechanisms are considered as the most important ways of the fine and precise adaptation of chemical signalization underlying functioning of physiological systems and organs of the living organism