大肠杆菌四环素耐药基因表达与耐药水平的相关性

为了探索大肠杆菌耐药基因的表达与耐药水平的关系,本研究通过微量肉汤稀释法检测240株大肠杆菌对土霉素(terramycin, OTC)、金霉素(aureomycin, CTC)、四环素(tetracycline, TC)、多西还素(doxycycline,CAS)和米诺环素(minocycline, MINO) 5种四环素类抗菌药物的敏感性,采用PCR方法检测四环素类耐药基因tet B和tet X的携带情况,通过荧光定量PCR法考察不同四环素浓度对tet B表达的影响。研究结果表明:240株猪源大肠杆菌对土霉素、金霉素、四环素、多西还素和米诺环素的耐药率分别为93.33%、92.92%、92.50%、80.42%和37.08%,兽用四环素类药物的治疗效果难以保证;四环素耐药基因的携带率较高,tet B和tet X检出率分别为22.92%和85.00%;Tet B基因mRNA的表达量随着四环素浓度升高而逐步增强,说明tet B属于诱导表达基因,耐药菌难以通过停止用药来恢复对四环素的敏感性,研究人员建议兽医临床应将四环素类药物作为二线药物使用。     

猪源肠外致病性大肠杆菌耐药性分析及耐药基因和I类整合子检测

【背景】由于抗生素的长期大量且不合理使用,猪源肠外致病性大肠杆菌(extraintestinal pathogenic Escherichia coli,ExPEC)多重耐药性日趋严重。【目的】探究猪源ExPEC的耐药性及其与耐药基因和I类整合子的相关性。【方法】采用微量肉汤稀释法测定54株猪源ExPEC对22种抗生素的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC);依据药敏试验结果确定相关耐药基因,采用PCR方法检测染色体DNA和质粒DNA上的耐药基因及I类整合子分布情况。【结果】54株猪源ExPEC对青霉素、氟苯尼考、氨苄西林、阿莫西林高度耐药,其中52株对甲氧苄氨嘧啶、复方新诺明高度耐药,它们的MIC值均大于256μg/mL,无MBC值;对头孢唑林、四环素、头孢氨苄、大观霉素、链霉素的MIC值在1-256μg/mL之间,MBC值分别为8、16、32、64、128、256μg/mL,均可耐受11种以上抗生素,其中以耐受17种为主,占比为18.52%...     

威海地区幽门螺杆菌耐药谱表型及遗传特征分析

目的研究威海地区的幽门螺杆菌对阿莫西林(AMX)、克拉霉素(CLA)、甲硝唑(MTZ)和四环素(TET)的耐药性表型和基因型。方法对172株分离自消化不良患者的幽门螺杆菌进行药敏试验检测,采用PCR法对甲硝唑耐药菌株进行rdx A和frx A基因的扩增。结果共检出耐4株阿莫西林耐药株(2.3%)、16株克拉霉素耐药株(9.3%),以及90株甲硝唑耐药株(52.3%)和6株四环素耐药株(3.5%)。所有甲硝唑耐药菌株中的rdx A基因发生了改变并直接导致Rdx A蛋白的氨基酸序列发生变化。在52株甲硝唑耐药株中发现frx A基因的错义突变,而在14株甲硝唑耐药株中检出了由于移码突变造成的frx A基因表达的提前终止。结论本地区的幽门螺杆菌对甲硝唑有较高的耐药率,与该类细菌染色体中rdx A和frx A基因的突变有关。     

安徽猪源非伤寒沙门菌耐药及多重耐药性的监测研究

目的了解安徽地区猪源非伤寒沙门菌分离株的多重耐药状况及耐药程度。方法应用标准K-B纸片法对100株沙门菌进行耐药检测,并分析其多重耐药性。结果分属B、E1、E4和F四个血清群的100株非伤寒沙门菌总耐药率为72%,其中B群耐药率为82.35%,E1群为44.44%,E4群为84.62%,F群为100%;72株耐药菌株中有52株为耐3种以上抗生素的多重耐药,其中B群多重耐药率为64.29%,E1群为75%,E4群为45.45%,F群为100%;多重耐药谱是强力霉素—四环素—卡那霉素—氯霉素。结论安徽地区猪源非伤寒沙门菌分离株的多重耐药程度严重,该地区养猪业在使用抗生素方面存在严重问题,应加强对抗生素合理使用的管理以及食品卫生的监督工作。     

大肠杆菌R质粒接合转移到霍乱弧菌

个别类型的大肠杆菌能同霍乱弧菌接合配对,使不耐药的霍乱弧菌同时获得对链霉素、庆大霉素、卡那霉素、土霉素、四环素、红霉素、台霉素、氯霉素、金霉素、新霉素等多种抗生素的耐药性。研究了影响接合率的各种因素。讨论了大肠杆菌肠毒素基因有可能同R质粒一起通过接合转移给霍乱弧菌,从而使无毒霍乱弧菌转变成有毒霍乱弧菌。     

鸡大肠杆菌的质粒及染色体DNA分析

对分离于诊断为大肠杆菌病鸡的心脏、肝脏及健康鸡粪便的56个菌株进行了生化试验、药物敏感试验、质粒图谱分析、质粒酶切图谱分析及染色体DNA酶切图谱分析。生化试验鉴定了分离的菌株为大肠杆菌。对其中32株大肠杆菌做了12种抗生素的药敏试验,结果显示大部分菌株对四环素、红霉素、氨苄青霉素、链霉素有耐药性,耐药比例分别为96.87％、81.25％、75.00％、84.38％。所分析的56株大肠杆菌均含有质粒,适于质粒分析。比较菌株的     

猪致病性大肠杆菌的质粒及染色体DNA指纹图谱分析

从长春、白城等地猪场母猪和发病仔猪肛拭标本中分离的75株大肠杆菌在系统鉴定和药敏试验的基础上进行了质粒指纹图谱和染色体DNA限制性酶切图谱分析,并对质粒谱和耐药谱的关系作了分析比较。 药敏试验结果表明:70株致病性大肠杆菌对12种抗生素的耐药率分别为4.3％～100％,每株菌平均耐药7种,最多耐药11种,最少为3种,分离菌株对多粘菌素B的耐药率最低,因此多粘菌素B可望是治疗仔猪大肠杆     

大熊猫粪源大肠杆菌耐药性及整合子研究

为了解大熊猫粪源大肠杆菌的耐药性、整合子-基因盒的分布特性,分析整合子对细菌耐药性的影响,采用Kirby-Bauer(K-B)纸片法进行了50株大肠杆菌对13种抗菌药物的药物敏感性试验;PCR-测序法检测了1、2、3型整合酶基因,进一步对阳性菌株可变区的基因盒序列鉴定分析。结果显示,菌株对13种抗菌药物表现出不同的耐药性,其中对氨苄西林、头孢唑林、四环素和复方新诺明表现出较高耐药性(耐药率为30%~68%),对其余药物耐药性较低(耐药率低于14%);50株菌中有15株(30%)含有1型整合子,未发现2型和3型整合子;15株1型整合子阳性菌中,有6株(40%)扩增出1200~2000 bp的基因盒,主要介导氨基糖苷类和磺胺-甲氧苄啶耐药的aad A和dfr A基因家族。以dfr A27+aad A2为主(检出率83.33%),1株为aac A4+aad A1+cat B2。以上说明本次检测的大熊猫粪源大肠杆菌对多种抗菌药物呈低水平耐药;1型整合子在大肠杆菌中广泛分布,整合子-基因盒是造成整合子阳性菌株耐氨基糖苷类、磺胺-甲氧苄啶类、氯霉素的主要原因。     

一株污水源多重耐药大肠杆菌的耐药性检测及全基因组测序分析

【背景】水体环境分布广、流动性强,是耐药菌和耐药基因传播的主要媒介。【目的】了解北方污水厂大肠杆菌携带的耐药基因及可移动遗传元件情况。【方法】从北方污水厂筛选出一株多重耐药大肠杆菌,通过药敏试验进行耐药性检验,采用96孔板法测定菌株的最小抑菌浓度,利用酶标仪探究亚抑菌浓度抗生素对菌株生长的影响,并对菌株进行全基因组测序,对其携带的耐药基因及可移动遗传元件进行预测。【结果】大肠杆菌WEC对四环素、环丙沙星、诺氟沙星和红霉素具有耐药性,亚抑菌浓度的四环素、环丙沙星和诺氟沙星能够延缓或抑制菌株的生长。WEC菌株的基因组中包含一条大小为4 782 114 bp的环状染色体和2个大小分别为60 306 bp (pWEC-1)和92 065 bp (pWEC-2)的环状质粒。菌株共携带129个耐药基因,其中128个位于染色体上,在染色体上预测到原噬菌体、基因岛及插入序列的存在,部分可移动遗传元件携带有耐药基因。质粒pWEC-1中无耐药基因,pWEC-2含有1个耐药基因,在质粒基因组中预测到原噬菌体和插入序列。【结论】污水源大肠杆菌WEC是一株多重耐药菌株,其基因组中携带耐药基因和多种可移动遗传元件...     

86株A群链球菌耐药性检测与分析

目的探讨A群链球菌对多种抗生素的耐药性,更好地指导临床用药。方法收集本院2005年度检出的39株和2006年度检出的47株A群链球菌的药物敏感试验结果,使用X^2检验比较A群链球菌耐药率。结果2006年度和上一年度相比A群链球菌对红霉素、克林霉素、阿齐霉素的耐药率增高显著（P〈0．05）,而对氯霉素、四环素的耐药性无明显改变（P〉0．05）,未发现耐万古霉素、青霉素、头孢吡肟、头孢噻肟的菌株。结论加强对A群链球菌耐药性检测及调查分析,对指导临床用药有重要意义。     

泌尿外科住院患者泌尿系感染病原菌分布及其耐药性分析

了解泌尿外科住院患者泌尿系感染病原菌的分布及其对常用抗菌药物的耐药情况。对泌尿外科泌尿系感染住院患者的消毒中段尿培养结果进行回顾性分析,尿培养菌株的鉴定、药敏分析和统计分析采用VITEK2全自动微生物仪。3 a中泌尿外科泌尿系感染住院患者共分离到细菌1 233株,其中革兰阴性杆菌772株,占62.61%,革兰阳性球菌353株,占28.63%,真菌82株,占6.65%。菌株数居前5位的细菌依次为:大肠埃希菌、肠球菌属、洋葱伯克霍尔德菌、假丝酵母菌属和变形杆菌。分离大肠埃希菌产ESBLs率为66.18%,粪肠球菌中未发现VRE菌株,屎肠球菌VRE为0.8%。未发现对美洛培南耐药的大肠埃希菌,对肠埃希菌耐药率在10%以下的有亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦和呋喃妥因。洋葱伯克霍尔德菌和铜绿假单胞菌对所监测的抗菌药物均有不同程度的耐药。未发现对万古霉素、替考拉宁及氨苄西林耐药的粪肠球菌。泌尿系感染的病原菌以大肠埃希菌和肠球菌为主,非发酵革兰阴性杆菌及假丝酵母菌所占比例超过20%,不容忽视,病原菌的耐药率较高,临床医生应根据尿培养和药敏试验结果合理使用抗菌药物。     

肛周脓肿患者病原菌结构和耐药性分析

摘要 目的：分析肛周脓肿患者的病原菌结构和其耐药情况,为临床抗菌药物的选择提供依据。方法：收集医院2019年1月~2020年12月期间收治的324例肛周脓肿患者的脓液标本,在实验室进行菌株的培养、鉴定及药敏试验,记录并分析结果。结果：324例患者均送检标本共分离出病原菌516株,其中革兰阴性菌421株,占81.59%;革兰阳性菌95株,占18.41%。421株革兰阴性菌中,以大肠埃希菌的检出率最高,其次是肺炎克雷伯菌;95株革兰阳性菌中金黄色葡萄球菌检出率最高。在革兰阴性菌中,大肠埃希菌整体耐药率较高,其对氨苄西林、头孢吡肟的耐药率均超过60.00%;肺炎克雷伯菌的耐药率相对较低,仅对头孢曲松、氨苄西林的耐药率超过30.00%。在革兰阳性菌中,金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌对氨苄青霉素、红霉素、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均较高,超过50%,同时三种葡萄球菌均未检出万古霉素和利奈唑胺的耐药菌株。结论：肛周脓肿患者的病原菌以革兰阴性菌为主,大多为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,病原菌对不同抗菌药物的耐药性差异较大,应根据药敏结果合理选用抗菌药物。     

外科手术切口感染大肠埃希菌的耐药性分析

目的分析外科手术切口中大肠埃希菌的感染率及耐药性,为临床合理用药提供科学依据。方法对2009年6月至2010年9月外科患者手术切口标本中分离的大肠埃希菌耐药情况进行分析,并对产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株进行表型确证试验。结果 140株大肠埃希菌中,产ESBLs菌株的检出率为42.14%;产ESBLs菌株对一～四代头孢菌素、广谱青霉素、氟哇诺酮类及氨基糖苷类抗菌药物具有较高的耐药率;非产ESBLs菌株对青霉素类以外的抗菌药物具有较高的敏感率;产ESBLs菌株对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株（P〈0.05）。结论外科手术切口术后大肠埃希菌的感染较严重,且产ESBLs菌株多药耐药明显,临床应加强监测与控制。     

氟喹诺酮类药物体外诱导肺炎克雷伯菌耐药后GyrA和ParC的变异

目的了解3种氟喹诺酮类（FQS）体外诱导肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,Kpn）耐药性的差异,研究肺炎克雷伯菌DNA旋转酶A亚单位（GyrA）和拓扑异构酶ⅣC亚基（ParC）的变异与其耐喹诺酮类药物的关系。方法采用环丙沙星（CW）、左氧氟沙星（LEX）和加替沙星（GAT）对从临床分离8株Kpn进行体外分步诱导,采用琼脂平板二倍稀释法测定CIP、LVF及GAT对Kpn诱导前、后的最低抑菌浓度（MIC）,并对诱导成功的17株Kpn的GyrA的基因（gyrA）和ParC的基因（parC）进行PCR扩增,选取其中8株KpnDNA测序并进行序列分析比较。结果8株耐FQS菌株都存在GyrA变异,同FQS耐药性相关的变异有Ser83（TCC）→Phe（TTC）、Ile（ATC）和Tyr（TAC）,Asp87（GAC）→Ala（GCC）、ma（GCC）和Glu（GAA）,5株Kpn同时存在ParC的变异：丝氨酸Ser80（AGC）→Ile（ATC）。结论本研究体外实验证实了Kpn可在长期低剂量的接触抗菌药物后形成耐药菌株。在高度耐FQS的Kpn中同时存在GyrA和ParC变异。     

临床微生物检验和细菌耐药性监测探析

目的：探讨临床微生物检验和细菌耐药性监测。方法：对临床分离出的致病菌的耐药情况以及敏感性进行回顾分析,检查出各种病菌对各类抗菌药物的敏感率和耐药率,本文以葡萄球菌属、肠杆菌科、非发酵菌的代表菌种的耐药性和敏感性为例。结果：通过选取金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌为例进行回顾分析,它们对抗菌药物的耐药率、敏感率具体情况如文中表格所示。结论：临床病原菌的耐药性问题不容忽视,治疗时要根据药物的敏感性和耐药性选择适当的抗菌药物,合理使用抗菌药物,减轻抗菌药物的耐药寿命。     

常见革兰阴性菌耐药性分析与合理用药研究

目的 分析芜湖市第一人民医院革兰阴性病原菌分布情况及对常见抗菌药物的耐药程度,为临床抗菌药物的选择及其合理使用提供参考。方法 收集2015年1月至2017年12月我院临床科室送检的细菌培养标本,采用法国生物梅里埃公司生产VITEK2 compact全自动微生物分析系统及其配套试剂盒进行细菌鉴定及药敏试验,数据采用WHONET 5.6软件进行统计分析。对年度耐药株数使用R语言3.4.0软件进行分析。结果 2015—2017年我院共检出病原菌3 728株,其中革兰阳性菌1 055株,占28.3%;革兰阴性菌2 673株,占71.7%。革兰阴性菌中主要致病菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞杆菌、鲍曼不动杆菌,对青霉素类和第一代头孢菌素类抗菌药物高水平耐药。2017年这4种细菌对头孢唑林的耐药率均已达100.0%。鲍曼不动杆菌对头孢曲松的耐药率逐年上升,对头孢替坦连续3年耐药率均为100.0%,对氨苄西林/舒巴坦、氟喹诺酮类以及头孢吡肟耐药率未逐年上升,对亚胺培南耐药率变化显著,差异均有统计学意义（P<0.05）。铜绿假单胞杆菌对氨曲南耐药率逐年上升,对氨基糖苷类及头孢他啶耐药率逐年下降,差异均有统计学意义（P<0.05）。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢吡肟耐药率逐年下降,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 我院住院患者病原菌以革兰阴性菌为主,不同病原菌对药物的敏感性各异,临床医生应结合患者情况和药敏结果综合分析,合理选用抗菌药物。     

Isolation and characterization of a reservosome fraction from Trypanosoma cruzi

Resistance to different antibiotics was found in 26 of the 30 strains analyzed, more than 70% of the strains analyzed were resistant to carbenicillin and ampicillin and a significant correlation was found between the resistance to both antibiotics. Plasmids were found in 80% of the strains analyzed, and 11 different plasmid profiles were observed. The most common profile obtained had only a 21.2-kbp plasmid, a significant correlation was found between the presence of this plasmid and resistance to carbenicillin, although some exceptions could be detected. Plasmids were cured from a cephalothin resistant strain and reintroduced into the plasmid-free cell and into Escherichia coli DH5alpha, both strains gained resistance to this antibiotic.     

多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及其耐药基因分析

目的:探讨多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-Ab)的耐药性及其耐药基因,为临床合理选择抗菌药物提供依据。方法:回顾性分析2018年1月至2018年12月鲍曼不动杆菌感染的住院患者信息。使用VITEK-32微生物分析仪/梅里埃药敏卡片GN13鉴定MDR-Ab 95株。采用聚合酶链式反应(多重PCR)检测MDR-Ab携带相关耐药基因。结果:95株MDR-Ab对头孢类抗菌药物耐药率为100%。对氨苄西林-舒巴坦和头孢哌酮-舒巴坦耐药率分别为95.79%和81.05%,对美罗培南和亚胺培南耐药率分别为56.84%和57.89%,对庆大霉素和阿米卡星耐药率均为88.42%,对环丙沙星和左氧氟沙星耐药率分别为100%和88.42%,对四环素、米诺环素、替加环素耐药率分别为87.37%、16.84%和9.47%,对多粘菌素B耐药率为1.05%。95株MDR-Ab中携带β-内酰胺酶中A类酶耐药基因TEM、PER分别95株和25株,D类酶耐药基因OXA-51、carO和adeB各95株,OXA-23基因90株。携带消毒剂耐药基因qacE 60株。携带16S r RNA甲基化酶耐药基因armA 75株。每株MDR-Ab除携带TEM+carO+adeB+OXA-51四种基因外,另同时携带四种基因20株(21.05%),三种基因38株(40.00%)。结论:MDR-Ab对多种抗菌药物的耐药率较高,携带的耐药基因型主要为TEM、carO、adeB及OXA-51。携带多种耐药基因是MDR-Ab耐药重要原因。加强医院感染防控、合理应用抗菌药物对于延缓泛鲍曼不动杆菌耐药性发展具有重要的临床意义。     

用DNA杂交技术检测临床分离株的四种耐四环素基因

采用DNA杂交技术对来自我国几个省的306株革兰氏阴性杆菌携带的耐四环素基因(Tet)的分布进行了研究。所有菌株均用15种生化反应数码分析法判定,绿脓杆菌用双歧法鉴定。用四种Tet探针检测结果如下：TetB占31．4％,TetD占25．2％TetA占1 2.5％,TetC占10．5％。与四种探针均不杂交者占36．6％。含1种基因的菌株占51．3％,含2种的占7．5％,含3种的占2．9％,含4种的占1．6％。不同地区的菌株的Tet种类不完全相同。还发现在严格控制的条件下杂交,TetA和Tetc有交叉反应。     

Acquisition of resistance to extended-spectrum cephalosporins by Salmonella enterica subsp. enterica serovar Newport and Escherichia coli in the turkey poult intestinal tract

Salmonella enterica subsp. enterica serovar Newport resistant to the extended-spectrum cephalosporins (ESCs) and other antimicrobials causes septicemic salmonellosis in humans and animals and is increasingly isolated from humans, animals, foods, and environmental sources. Mechanisms whereby serovar Newport bacteria become resistant to ESCs and other classes of antimicrobials while inhabiting the intestinal tract are not well understood. The present study shows that 25.3% of serovar Newport strains isolated from the turkey poult intestinal tract after the animals were dosed with Escherichia coli harboring a large conjugative plasmid encoding the CMY-2 beta-lactamase and other drug resistance determinants acquired the plasmid and its associated drug resistance genes. The conjugative plasmid containing the cmy-2 gene was transferred not only from the donor E. coli to Salmonella serovar Newport but also to another E. coli serotype present in the intestinal tract. Laboratory studies showed that the plasmid could be readily transferred between serovar Newport and E. coli intestinal isolates. Administration of a single dose of ceftiofur, used to prevent septicemic colibacillosis, to 1-day-old turkeys did not result in the isolation of ceftiofur-resistant E. coli or Salmonella serovar Newport. There was a remarkable association between serotype, drug resistance, and plasmid profile among the E. coli strains isolated from the poults. This study shows that Salmonella serovar Newport can become resistant to ESCs and other antibiotics by acquiring a conjugative drug resistance plasmid from E. coli in the intestines.