开发利用土壤杆菌的无标记植物性状转化法

日本烟草产业（ＪＴ）公司成功地开发了可从性状转化植物高效地去除选择性标记的利用土壤杆菌的无标记性状转化法。不仅限于双子叶植物,也能进行单子叶植物水稻的基因导入。ＪＴ公司在川崎市召开的日本育种学会上发表了该项成果。在植物的性状转化中使用了卡那霉素等基因,但是,如果能排除标记,就能反复使用单一标记,所以希望此法能在需要导入代谢系基因群等多种基因时使用。因此,选择标记的去除法是植物重组育种必需的技术。ＪＴ公司开发的载体是在其１９９４年开发的、土壤杆菌（不仅能向双子叶植物中导入基因而且也能向水稻和玉米等…     

基因治疗中外源基因的导入

基因治疗是将遗传物质导入靶细胞以达到治疗疾病的目的,目前基因治疗研究中的主要障碍是如何格外源基因导入靶细胞。本介绍基因治疗的原理和外源基因导入靶细胞时的常用方法,包括显微注射法、电穿孔法、基因枪粒子轰击法等。对基因治疗的现状、存在的问题及未来发展前景作了简要探讨。     

斑马鱼两种转基因方法的比较

对斑马鱼(Danio rerio)的两种转基因方法进行比较,分别采用显微注射和电脉冲导入法将携带有GFP报告基因的表达载体质粒导入斑马鱼受精卵,得出电脉冲最佳导入条件为最适电压125 V/cm,电阻50 Ω,最佳导入时期为1-2细胞期(40-50 min),以及最佳外源基因浓度为300 ng/μL.利用两种方法均得到转GFP基因的斑马鱼,而两种方法对比的结果表明,显微注射法耗时费力,但转基因阳性率高;电脉冲法一次可以处理大批量受精卵,但转基因阳性率远低于显微注射法.     

活体电穿孔法基因导入技术

活体电穿孔法(invivoelectroporation)可将外源基因有效导入靶组织或器官,导入效率较高,并且可在多种组织器官上应用。近年来活体电穿孔法用于转基因研究的报道不断增多,在基因治疗方面的优势也日趋显著,是一种很好的活体基因导入方法 。     

大白菜和黄瓜原生质体电击基因转移的研究

本文以钙黄素、FITC-IgG 和溴乙锭-质粒 DNA 为荧光标记物,研究了电脉冲引起大白菜和黄瓜原生质体质膜通透性的改变及其动力学过程以及脉冲电学参数(脉冲幅值、个数、宽度)对原生质体成活率和外源物质导入率的影响。通过电击法成功地将外源 CAT(氯霉素乙酰转移酶)基因导入黄瓜原生质体并实现瞬间表达。45℃热激预处理原生质体有效地促进了CAT 基因的电击转移。     

植物转基因方法及进展

本文从技术原理和方法进展着手,着重在土壤农杆菌系统、植物病毒系统和DNA直接导入法中阐述了植物转基因载体的选择和构建;以及各种方法的适用范围、应用上的例子和进展,并且比较了相互的优缺点。另外,本文还探讨了转导入植物细胞的外源基因的组织方式及其转录表达效率。     

转基因培育抗除草剂水稻

以ｐＡＨＣ２０（含Ｂａｒ基因）和ｐＷＲＧ１５１５（含ＧＵＳ基因和潮霉素抗性基因）以及含Ｂａｒ基因和雪莲凝集素（ＧＮＡ）基因的ｐＣＡＭＢＩＡ３３００ ＲＧ为供体ＤＮＡ,选用水稻品系８７２０３、上农香糯及鄂宜１０５的成熟胚诱导出的愈伤组织及微不定芽为受体材料,分别采用基因枪和根癌农杆菌（ＬＢＡ４４０４,含ｐＡＬ４４０４）导入法进行基因转化;经抗性筛选、ＧＵＳ检测和ＰＣＲ分析。结果表明,外源基因已通过基     

向烟草导入抗真菌病基因的研究

用花粉管通道法向烟草中导入几丁质酶基因,通过PCR检测的106株植株有4株表现出阳性,经点杂交检测得到3株阳性植株,用花粉管通道法向烟草导入几丁质酶基因具有可行性。     

重组玉米获准田间试验

美国BioTechnica公司由美国农业部获准基因重组玉米的田间试验.试验已在美国衣阿华州Lisbon近郊开始.玉米是被认为是难以进行基因重组的植物,该公司没有发表重组玉米的培育方法.这次进行试验的玉米是只导入标记基因的,目的是获得其在野外生长方面的数据和为今后试验有关的环境数据.研究者正在试验将高产赖氨酸的基因导入玉     

利用基因导入技术(Accell)转化玉米

92年4月28日发表了美国 W.R.Grace 公司100%子公司美国 Agracetus 公司使用基因导入法“Accell”转化主要的纯系品种玉米获得成功。Agracetus 公司研究用“Accell”法向玉米中间母本导入耐虫性基因和农药耐性基因,打算将来用于 F_1杂种的商品作物的育种。“Accell”法是使用 Agracetus 公司开发的基因枪直接向细胞内导入基因的技术。Agracetus 公司没有公开“Accell”法的详细情况。但是已申请专利。因玉米从原生质体再生植物体的效率低,也是用向     

用直接注入法将外源基因导入植物的研究进展

用直接注入①法将外源总体DNA导入受体植物的研究,在植物育种工作中具有重要的意义。赫斯(1980)在矮牵牛方面开始了用直接注射法将外源总体DNA导入受体植物的理论研究。以后,周光宇等(1983)提出了花粉管转基因的理论和技术。目前,许多单位都开展了这一领域的研究,并在棉花、水稻等作物中取得较好的研究结果,已经选育出具有经济价值的棉花、水稻等育种材料。用直接注入法将外源总体DNA导入受体植物的技术具有许多优点。可以预见,用     

争议不断的转基因作物

今天,转基因作物正在逐渐而广泛地进入我们的生活。转基因作物的含义是,将人工分离（克隆）和修饰过的基因（外源性基因）导入到作物的基因组中,使导入的基因得到表达,引起作物的性状产生可遗传的修饰。     

电脉冲法生产转基因鱼

本文以鲤鱼受精卵为实验材料,通过电脉冲方法将全鱼基因（pcMTsGH)导入鱼胚。在处理的1873粒受精卵中（650V/cm,50μs,4次）,孵出鱼苗540尾,孵化率为28．8％;经斑点杂交和Southern印迹杂交,外源基因的整合率为9．1％。因此该方法可以作为转基因鱼研究和生产的方法。     

用基因枪将抗性基因导入落花生

7月中,美国W.R.Grace 公司的子公司、美国Agracetus 公司宣布使用该公司开发的基因枪“Accell”向落花生导入基因获得成功。因此,该公司用落花生、玉米、大豆、棉花、小麦、扁豆6种农作物确立了向生殖细胞导入基因培养新品种的技术。该公司产品开发部长James Timmins 说:“Agracetus 公司寻求开发落花生制品的合作伙伴,正在     

标记辅助导入的原理与应用

标记辅助导入是分子遗传信息应用于动物育种的一个重要方面, 其目的是在标记信息的辅助下将一个品种(供体)中的一个或多个优良基因导入另一个品种(受体), 同时还要尽可能地保持受体群体原有的遗传背景。在标记辅助导入过程中, 标记信息既可用于辅助前景选择, 即对目标基因携带者的选择, 以保证目标基因的正确导入, 也可用于辅助背景选择, 即对受体基因组的选择, 以加快受体遗传背景的恢复。本文介绍了标记辅助导入的原理和基本方法, 综述了目前已提出的不同前景选择和背景选择方法以及消除遗传累赘(与目标基因连锁的不利基因)的方法, 同时列举了标记辅助导入在动物上的一些成功应用。     

争议不断的转基因作物

<正>今天,转基因作物正在逐渐而广泛地进入我们的生活。转基因作物的含义是,将人工分离(克隆)和修饰过的基因(外源性基因)导入到作物的基因组中,使导入的基因得到表达,引起作物的性状产生可遗传的修饰。     

氮气驱动的基因枪

美国DuPont公司研制出用氦气代替火药的新型基因枪.目前的基因枪使用火药作动力,使用火药要得到地方政府的批准,而且还有环境污染问题. 基因枪也称为粒子枪,是新式的基因导入装置,可超音速地推动含DNA的金属粒子,攻击细胞,贯穿细胞壁、细胞膜而将基因导入细胞.美国康奈尔大学下属的Bio1ystic公司不仅销售装置,还有装置出租业务.但现在这个公司被美国的大型化学公司Dupont公司收买.日本从1990年开始引进上述装置,日本企业租借了大约10台基因枪. 氦气基因枪是代替火药作动力的第二代基因枪.     

用新基因导入法转化玉米性状

英国Zeneca公司的美国Zeneca公司(特拉华州Wilington)的研究组开发使用碳化硅结晶的基因导入法,转化玉米性状获得成功。 据Zeneca公司负责广告的Meredith McHone-Pierce说,该公司的ICI Seeds Research Center的研究组将标记基因插入玉米,培育出有完全结实能力的基因重组体。将来打算导入昆虫病原菌Ba-     

用土壤杆菌确立了玉米性状转化技术

日本烟草产业(JT)遗传育种研究所研究员石田祐二等利用植物病原菌根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefacience)确立了玉米性状转化技术,于7月15日在东京召开的组织培养学会发表。 以前利用土壤杆菌的基因导入技术(Agrobacterium法)是适用于向双子叶植物中导入基因的简便的导入法。但是不适用于向单子叶植物中(Agrobacterium不能作为宿主)导入基因。JT公司1994年开发了世界第一个使用土壤杆菌向单子叶植物水稻中稳定地导入基因的技术。这次确认用同样的方法也能向玉米中     

三菱油化学公司用基因电脉冲导入法加速氨基酸生产菌的分子育种

日本三菱油化学公司中央研究所使用电脉冲法,确立了短时间内将基因导入工业上用来生产氨基酸、核酸等的棒型细菌黄色短杆菌(Brevibacterium flavum)的方法,并将于下月上旬在名古屋召开的农艺化学会上发表。使用了电脉冲法,只需2～3天就能获得重组菌,使棒型细菌的分子育种所需时间大幅度缩短,而且非常省事。向棒型细菌导入基因以前使用的方法必须溶解细胞壁,然后用药剂导入基因(原生质体法)。因再生细胞壁比较费时,获