人肺鳞癌和腺癌组织中c-erbB-2癌基因蛋白表达与细胞增殖及预后的关系

用S－P免疫组织化学方法,用c－erbB－2多克隆抗体及PCNA单克隆抗体对50例肺鳞癌和30例腺癌组织石蜡包埋标本进行检测。结果显示：c－erbB－2染色总阳性率为46．25％,鳞癌阳性率为40％,腺癌阳性率为56．67％,两者之间无显著性差异。伴有淋巴结转移的肺癌组织中c－erbB－2阳性表达率较高（66．67％）,并且与肺癌预后有关。PCNA表达阳性级别与患者的术后生存期呈负相关（P＜0．05）,与c－erbB－2表达阳性级别呈正相关（P＜0．05）。本研究提示,用免疫组织化学方法检查,c－erbB－2蛋白和PCNA共同表达可作为临床判断肺鳞癌和腺癌预后的较好指标之一。     

c-erbB_2对大鼠黄体细胞hCG诱导的孕酮分泌的影响

采用离体细胞体外孵育法 ,研究反义c erbB2 寡脱氧核苷酸 (antisensec erbB2 ODN)对大鼠黄体细胞hCG诱导的孕酮分泌的影响 ,及其与外源性cAMP和Ca2 以及蛋白抑制剂放线菌酮 (CYX)之间的关系。结果表明 ,反义c erbB2 以剂量相关方式抑制黄体细胞hCG诱导的孕酮的产生 ,同时使c erbB2 蛋白染色阳性的黄体细胞百分数下降 ,无义tatODN没有相应的作用。10 -4 mol/L的二丁酰cAMP能明显反转反义c erbB2 ODN对孕酮产生和c erbB2 表达的抑制作用 ,钙离子通道阻断剂维拉帕米和蛋白抑制剂CYX对此抑制作用有协同效应。该实验说明c erbB2 参于hCG诱导黄体细胞生孕酮作用     

伤寒带菌与胆囊癌形成

近年来,世界范围内伤寒发病人数有所上升,每年大约有2100万人感染,近5％感染者会发展成慢性带菌者.慢性带菌状态发展成胆结石的危险性很高,胆结石表面形成的生物膜有助于保持慢性带菌状态,进而可能发展成胆囊癌.胆囊癌比较少见,但在某些国家和地区发病率高,且女性胆结石和胆囊癌的发病率是男性的2倍多.慢性带菌状态不仅是胆囊癌发生的危险因素,也是其他癌症发生的危险因素.本文就伤寒带菌状态与生物膜和胆结石的形成及发展成胆囊癌的相关性研究进行综述.     

抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26转基因小鼠乳腺生物反应器的制备与验证

目的:构建抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26转基因动物乳腺特异性表达载体并制备和验证抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26转基因小鼠乳腺生物反应器模型。方法:利用PCR法扩增出抗人p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26的重链基因H和轻链基因L,然后分别将嵌合抗体重链基因H和嵌合抗体轻链基因L连接到乳腺特异性表达质粒pBC1,从而构建抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26转基因动物乳腺特异性表达载体pBC1-H和pBC1-L。分别将抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26乳腺特异表达载体pBC1-H和pBC1-L线性化,然后使用原核显微共注射法获得8只转基因FVB小鼠,通过鼠尾直接PCR鉴定其转基因阳性。通过RT-PCR、荧光定量PCR鉴定转基因小鼠乳腺组织中抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26的mRNA表达。使用小鼠乳汁采集器收集其乳汁并通过Western blot和夹心ELISA等实验鉴定抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26是否获得表达。结果:经测序验证,抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26的嵌合重链基因H和嵌合轻链基因L分别与乳腺特异表达质粒pBC1正确正向连接。鼠尾直接PCR结果显示所获8只转基因FVB小鼠均为转基因双阳性小鼠,且抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26的重链基因H和轻链基因L在它们的后代中稳定遗传,它们的后代中转基因小鼠双阳性率约为30%; RT-PCR和荧光定量PCR的结果显示,转基因双阳性小鼠及其双阳性后代的乳腺组织中存在抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26的mRNA表达; Western blot和ELISA等实验结果显示,转基因双阳性小鼠乳汁中存在抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26的蛋白质表达,而且抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26与羊抗人κ链抗体和羊抗人Ig G Fc-HRP抗体均能特异性结合。结论:成功构建抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26转基因动物乳腺特异性表达载体pBC1-H和pBC1-L和制备了抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26转基因小鼠乳腺生物反应器模型,为今后抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26转基因牛乳腺生物反应器的研究奠定了理论和技术基础。     

抗人P185~(erbB2)嵌合抗体在CHO细胞中的高效表达及其活性分析

为降低人抗鼠抗体 (HAMA)反应并在CHO细胞中高效表达抗人P185 erbB2 人 /鼠嵌合抗体 ,将抗人P185 erbB2 单抗C2 5的轻、重链可变区基因分别克隆入具有人抗体恒定区基因组序列和弱化启动子驱动的选择标志基因的真核表达载体中 ,共转染CHO dhfr-细胞 ,经G418及氨甲喋呤 (MTX)梯度加压筛选进行了嵌合抗体的高效表达。采用RT PCR、ELISA、细胞ELISA、免疫荧光细胞化学等实验证实了所表达的抗人P185 erbB2 嵌合抗体的人源性及抗原特异性。培养上清中的抗体产量可达 10 0mg/L ,所表达的嵌合抗体具有抑制P185 erbB2 高表达肿瘤细胞增殖的作用     

抗人P185^erbB2的scFv—Fc融合蛋白的表达及免疫功能分析

为提高鼠源单抗用于体内治疗的效应功能及降低人抗鼠抗体反应 ,将编码抗人P185 erbB2 单抗轻、重链可变区 (VL、VH)融合构建的单链抗体 (scFv)基因片段与人IgG1的Fc区基因片段融合构建了scFv Fc融合基因 ,并将其克隆到哺乳动物细胞表达载体pCIDN中。用重组载体转染CHO细胞 ,通过G4 18筛选获得稳定高表达克隆。更换无血清培养基培养 ,经重组蛋白质A亲和层析柱纯化scFv Fc融合蛋白。融合蛋白质在还原SDS PAGE中表现为5 2kD的条带 ;与SK BR 3细胞裂解液共培育可特异性地沉淀出P185 erbB2 蛋白 ;FACS分析表明融合蛋白质识别P185 erbB2 蛋白的胞外段 ;ELISA测定融合蛋白质对细胞表面抗原P185 erbB2 的亲和常数为 7.5× 10 -10 (mol/L) -1。构建scFv Fc融合基因 ,将其克隆到表达载体 ,进一步稳定表达抗P185 erbB2 的scFv Fc融合蛋白 ,为进一步的体外、体内研究鼠源单抗治疗效果创造了条件。     

C—erbB2与乳腺癌三苯氧胺耐药细胞生长关系的研究

目的：探讨获得性三苯氧胺（TAM）抵抗乳腺癌细胞的生长调节途径及三苯氧胺（TAM）获得性抵抗的发生机制。方法：TAM诱导野生型人乳腺癌细胞系MCF-7/WT构建TAM抵抗的细胞系MCF-7／TAMR,RT—PCR、Westem blot及免疫细胞化学方法比较MCF-7／TAMR与MCF-7/WT细胞系中C—erbB2mRNA、蛋白表达及其活化状态的不同,用C—erbB2单克隆抗体herceptin对两种细胞系进行干预。观察细胞生长变化。结果：与MCF-7/WT细胞相比,MCF-7／TAMR细胞中cerbB-2的mRNA增加3倍（P〈0．05）,蛋白增加1．5倍（P〈0．05）。Herceptin处理MCF-7／TAMR细胞,明显抑制了细胞的生长。结论：表皮生长因子受体特异性配体的自分泌释放作用可能通过CerbB-2／MAPK途径引起MCF-7／TAMR细胞的生长。     

乳腺癌肺耐药蛋白表达及其与C-erbB-2和p53表达的关系

目的　探讨LRP在乳腺癌组织中的表达及其与C erbB 2和 p5 3表达的相关性。方法　采用免疫组化LSAB法检测 15 2例乳腺癌组织和 40例正常乳腺组织的LRP、C erbB 2和 p5 3蛋白的表达水平 ,并将结果与临床病理因素和预后资料进行分析。结果　在 15 2例乳腺癌组织中LRP、C erbB 2和 p5 3阳性例数分别为 12 2 ( 80 2 % )、 10 2 ( 67 1% )和 69( 45 4% ) ,乳腺对照组织LRP阳性 2 2例 ( 5 5 0 % ) ;乳腺癌组织LRP的表达明显高于对照组 ( χ2 =10 70 9,P <0 0 1) ,并与C erbB 2 ( χ2 =12 44 0 ,P <0 0 1,γ =0 2 9)和 p5 3 ( χ2 =8 5 0 0 ,P <0 0 1,γ =0 2 5 )表达呈正相关 ;在淋巴结转移组LRP阳性 62例 ( 88 6% ) ,无转移组阳性 60例 ( 73 2 % ) ,LRP的表达与淋巴结转移 ( χ2 =5 65 4,P <0 0 5 ,γ =0 19)呈正相关。单因素预后分析显示LRP阳性组生存期明显低于阴性组 ( χ2 =7 0 92 ,P <0 0 1)。结论　C erbB 2和p5 3可能诱导LRP表达上调 ,LRP表达可能与腋淋巴结转移、缩短常规化疗乳腺癌患者生存期有关     

人HTR1E基因在不同细胞系和多种组织中的表达及其功能

人的HTR1E基因是五羟色胺受体（HTR）家族中的一员．这个家族里面的基因都和精神分裂症、抑郁症以及人的自杀活动有关．但是对于其具体的作用机制目前研究不多．采用实时定量PCR方法分析了HTR1E基因在各个组织和不同细胞系中的表达情况．亚细胞定位发现HTR1E位于细胞膜上,萤光素酶实验分析确定HTR1E可以抑制原癌基因erbB2启动子的转录活性．这些研究结果为进一步研究HTR1E基因在疾病发生中的作用奠定了一定的基础．     

皮肤局部应用维甲酸引致的表皮增殖机制

维甲酸（retinoic acid,学名：视黄酸）在皮肤局部给药时,常刺激皮肤基底层角质细胞的异常增殖。证据表明,位于皮肤表皮基底层上层角质细胞中的维甲酸受体二聚体对维甲酸引起的基底层细胞增殖是必需的。可能的机制是,位于表皮基底层上层的维甲酸受体首先诱导位于同一细胞层中的肝素结合表皮生长因子（HB—EGF）表达上调,该生长因子通过旁分泌途径激活位于基底层的受体（erbB1和erbB2）,刺激基底层细胞增殖。     

转录因子SOX2在胆囊癌的表达及意义

目的:研究转录因子SOX2在胆囊癌中的表达及意义.方法:收集我院自2012年1月至2012年12月间胆囊癌患者的新鲜标本42例,同时选取30例胆囊结石伴慢性胆囊炎患者的新鲜手术标本作为对照,采用用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)方法,对两组患者中SOX2 mRNA的水平进行检测.结果:胆囊癌组SOX2 mRNA水平为2.9±0.5,胆囊结石伴慢性胆囊炎组为2.2±0.6,两组差异有统计学意义(P＜0.05).胆囊癌患者SOX2 mRNA的水平与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P＜0.05);与年龄、性别、合并胆囊结石伴慢性胆囊炎以及肿瘤的部位大小无关,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:转录因子SOX2可能在胆囊癌的发生、演变中发挥作用.     

人膀胱癌中某些癌基因的研究

本实验应用Northern和斑点印渍杂交技术探测了人膀胱癌细胞株中c-myc、c-fos、erbB等癌基因的表达,以及TPA对这些癌基因表达的调控,发现BIU-87细胞有这些癌基因的表达,并能被TPA所增强,同时也发现人膀胱癌组织有c-myc、c-fos、erbB、N-ras基因的高表达。提示蛋白激酶C的激活可以诱导某些癌基因的表达。多种癌基因的表达异常可能在膀胱癌中起重要作用。     

乳腺癌组织中ER、PR、C-erbB-2、CD44V6、Ki67表达的相关分析及临床意义

目的：探讨乳腺癌组织中ER、PR、C-erbB-2、CD44V6和Ki67的表达与年龄、肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移的关系以及它们相互之间的线性关系,同时分析其在乳腺癌的发生、发展中所表现出的临床作用和意义。方法：采用免疫组化S—P法检测103例乳腺癌标本中ER、PR、C-erbB-2、CD44V6和Ki67的表达,并与临床病理因素进行相关性分析。结果：103例患者中ER阳性的有57例（55．34％）,PR阳性的有49例（47．57％）,C-erbB．2阳性的有39例（37．86％）,CD44V6阳性的有68例（66．02％）,Ki67阳性的有例（90．29％）,其中以Ki67的表达率最高,C—erbB．2的表达率最低;不同年龄、淋巴结是否转移对ER、PR、C—erbB-2、CD44V6和Ki67表达量的差异。无统计学意义（P〉0．05）;PR的表达与乳腺癌临床分期相关（P〈0．05）,临床分期越高,PR的表达量越低;C．erbB．2的表达与肿瘤大小相关（P〈0．05）,肿瘤组织越小,C—erbB-2的表达量越低;ER的表达量和CD44V6的表达量的差异,有统计学意义（P〈0．05）。结论：在乳腺癌发病率越来越高的中国以至世界,免疫组化检测ER、PR、C—erbB-2、CD44V6和Ki67的阴阳性表达,可以作为乳腺癌发生、发展的评价指标,联合检测更加有助于早期乳腺癌患者的临床治疗和预后判断,减轻乳腺癌患者的身体和心理的痛苦,为临床医生选择和评估乳腺癌患者的治疗方案提供一些参考,更为下一步的个体化治疗和基因治疗做了一些前序工作。     

破译胆囊癌基因突变图谱

<正>胆囊癌是一种高度恶性的消化道肿瘤,居消化道肿瘤第5位,其发病具有典型的地域性、种族和性别差异性,女性发病率显著高于男性,男女发病的性别比为1:(3~4)[1]。胆囊癌与遗传、饮食习惯、生活方式、营养代谢、激素等多种因素有关[2]。流行病学调查表明,胆结石是胆囊癌最重要的高危诱发因素,尤其是伴发胆囊炎的患者;其他高危因素包括胆囊钙化、胆囊息肉以及致癌物接触。智利是目前全球胆囊癌发病率最     

人脑原发性肿瘤癌基因扩增和重排的研究

作者对52例人脑原发性肿瘤和5例正常人脑DNA中c-myc、L-myc、Nmyc、erbB、c-fos、sis及Ha-ras等七种癌基因的扩增和重排进行了研究,发现多数胶质瘤中有c-myc、L-myc、erbB及c-fos等癌基因的扩增,少数胶质瘤和脑膜瘤中发现myc家族癌基因的限制性酶切区带位置有多态性变化;同时还观察到原发性脑瘤中存在两种或两种以上癌基因的扩增和重排现象。作者对癌基因与人脑原发性肿瘤的关系进行了讨论。     

32例腹腔镜胆囊切除术意外胆囊癌的临床诊治

目的:分析腹腔镜胆囊切除术中或术后发现意外胆囊癌的临床特点,探讨其诊治措施。方法:回顾性分析2008年1月~2012年12月在我院行腹腔镜胆囊切除术治疗发现的意外胆囊癌患者共计32例的临床资料和随访结果。结果:24例患者经术中快速冷冻病理证实,其中12例中转开腹行胆囊癌根治术;8例患者经术后病理证实,6例行二次开腹手术。Nevin I期4例,Nevin II期20例,Nevin III期5例,Nevin IV期2例,Nevin V期1例。32例患者均顺利出院,住院时间6~24d,平均住院时间(13.8±8.1)d。32例中有30例获得随访,2例失访,随访时间2~49个月,平均(24.2±14.6)个月。生存23例,死亡7例,分别死于术后2、3、5、12、14、18和32个月。术后有5例患者出现并发症,2例胆囊积液,2例切口感染和1例胆瘘,经对症治疗后好转。结论:加强对胆囊癌的警惕与认识,腹腔镜胆囊切除术中或术后发现意外胆囊癌后应根据具体情况,选择最佳手术方式治疗,提高根治切除率,延长患者生存期。     

癌症——可防可治的慢性病

美国癌症协会最新公布的一份全球癌症调查报告显示,在2007年,估计有760万人死于癌症,平均每天超过2万人!世界卫生组织专家日前在日内瓦警告说,到2020年全球每年的癌症死亡人数可能增加一倍,未来10年中会有8400万人死于癌症!数十年来,我们只是提高了早期癌症的治疗效果,而癌症的形成机理,也只是显示了冰山一角。     

约120种与癌症有关基因被发现

一个国际研究小组在一项人类基因组研究计划中．又发现了约120种基因的变异与癌症有关。这一发现使已知的与癌症相关的基因从350种增加到约470种。     

基于UPLC-QTOF/MS的胆囊癌血清非靶向代谢组学研究

目的:胆囊癌(Gallbladder carcinoma,GBC)是一种常见的胆道系统恶性肿瘤,五年生存率极低,目前临床上缺少有效的诊断标志物。故本研究探索胆囊癌患者与健康人血清的差异性小分子代谢物,用于胆囊癌的定性诊断。方法:本研究以超高效液相色谱联用四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)技术为平台,以32例胆囊癌患者和32例健康人血清为研究对象,进行非靶向代谢组学研究分析,用SIMCA-P软件进行PCA和OPLS-DA建模分析,结合T检验结果和代谢物在两组中的差异倍数来筛选潜在小分子代谢标志物,并通过二元逻辑回归分析建立联合诊断模型。结果:溶血磷脂酰胆碱(18:1)(LysoPC(18:1))和十八烷胺(Octadecylamine,ODA)两个代谢物在胆囊癌患者和健康对照组血清中具有显著性差异,差异倍数达到2倍以上。经过二元逻辑回归分析建立诊断模型,两者构建联合诊断的诊断模型为Logit[P=GBC]=26.090*[LysoPC(18:1)]-8.877*[ODA]-113.075,据此建立受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)曲线,曲线下面积(Area under the curve,AUC)为0.986,灵敏度为97.1%,特异性为94.6%。结论:LysoPC(18:1)和ODA可作为胆囊癌的潜在诊断标志物,为胆囊癌的诊断提供参考。