HPLC同时测定大叶冬青叶中10种多酚成分的含量及抗氧化活性研究

建立HPLC同时测定大叶冬青叶中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、对羟基肉桂酸、芦丁、异槲皮苷、异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C 10种多酚类化合物的定量分析方法,研究不同产地及不同采收时期大叶冬青叶中10种多酚类化合物的含量差异及其抗氧化活性。采用HPLC测定大叶冬青叶50%甲醇提取液中10种多酚类成分的含量,并选用DPPH法对其抗氧化活性进行初步探索。结果表明,10种多酚类化合物分离效果较好,标准曲线在检测范围内具有良好的线性(r>0.999 5),平均加样回收率在96.58%～112.03%,RSD<4%(n=6)。大叶冬青叶50%甲醇提取液抗氧活性良好。本实验建立的方法快速、准确、重复性好,可用于同时测定大叶冬青叶中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、对羟基肉桂酸、芦丁、异槲皮苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C 10种成分的含量;不同产地、不同采收时期大叶冬青叶中10种多酚类化合物含量存在一定差异;不同来源大叶冬青叶50%甲醇提取液抗氧化能力具有明显差异。     

不同产地烤烟叶中绿原酸和芸香苷的含量分析

为了探索绿原酸和芸香苷的新型植物资源和生物活性,同时为低等级烤烟叶的综合利用开辟有效途径,本文采用高效液相色谱技术,对中国和湖南省不同生态烟区以及不同部位烤烟叶中绿原酸和芸香苷的含量进行了研究。结果表明,东北烟区低等级烤烟叶中的绿原酸和芸香苷含量很高;湖南省湘南烟区烤烟叶中绿原酸和芸香苷含量显著高于湘北和湘中烟区;不同部位烤烟叶中绿原酸含量差异不显著,芸香苷含量差异极显著,并且上部叶>中部叶>下部叶。     

石榴果实及果皮抗氧化成分的测定

目的：比较新鲜石榴皮、干石榴皮、石榴带籽果实和去籽果实中绿原酸、总花青素、总黄酮和维生素C的含量差异。方法：采用紫外分光光度法测定绿原酸、总花青素、总黄酮,2,6-二氯靛酚滴定法测定维生素C。结果：鲜果皮中的绿原酸、总花青素、维生素C含量都高于干果皮。去籽果实中绿原酸、总花青素类成分、维生素C含量均高于带籽果肉,说明可能石榴籽中这3种成分含量很少甚至没有。而总黄酮含量带籽果肉高于去籽果肉2倍,说明石榴籽里含有黄酮,且含量高于果肉。石榴皮中绿原酸和总花青素类成分含量都较高,超过3%。结论：在今后的石榴皮和果肉活性成分提取时,侧重点应该有所不同。     

HPLC法测定新疆贯叶连翘中绿原酸和芦丁的含量

采用液相色谱法测定贯叶连翘中绿原酸和芦丁含量。用Hyperil ODS色谱柱(12.5 cm×6.0 mm i.d.,5μm)进行分离。流动相为甲醇-1%冰醋酸梯度洗脱,流速为0.6 mL/min。检测波长为343 nm。绿原酸线性范围为0.0076~0.3040μg,相关系数R=0.9997。芦丁线性范围为0.312~3.120μg,相关系数R=0.9999。样品的平均回收率分别为101.2%,99.8%。此方法准确、快速,适用于绿原酸和芦丁的定量分析。     

HPLC法测定不同产地鱼腥草中不同部位芦丁的含量

建立测定鱼腥草中芦丁含量的高效液相色谱分析方法。使用Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6×150 mm,5μm),流动相为(A:0.1%磷酸水溶液,B:甲醇),柱温为20℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为358 nm。测得芦丁的线性范围为0.02 mg/mL～0.50 mg/mL(r=0.9999),加标回收率为92.0%(n=3)。不同产地中芦丁含量测定结果表明,贵州产区的含量最高,河南的最低。不同部位中芦丁含量测定结果表明,叶中的含量均高于茎中5～10倍。本方法操作快速、简便、灵敏度高、重现性好,可使用于中草药中芦丁含量的测定。     

新疆戈宝麻花、种子及叶片部位芦丁含量比较

目的:比较新疆戈宝麻花、种子、叶片中芦丁的含量。方法:采用回流提取法提取芦丁,高效液相层析法法测定新疆戈宝麻不同部位中芦丁的含量。色谱柱为Eclipse-C18柱(4.6 mm×150 mm, 5 um);流动相为乙腈-0.25%磷酸溶液(V/V,14.5∶85.5);流速为1.0 mL/min;柱温为30℃;检测波长为360 nm;进样量为20 uL。结果:芦丁含量在0.01～0.1 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.993 6;其中花、种子、叶片中芦丁得率分别为:0.094%、0.014%、0.6%。结论:新疆戈宝麻不同部位芦丁的含量分布为:叶﹥花﹥种子,上述结果可为增加戈宝麻新药源和新的药用部位开发利用提供有力依据。     

RP-HPLC同时测定喙果绞股蓝中芦丁和槲皮素的含量

目的:建立RP-HPLC同时测定喙果绞股蓝中芦丁和槲皮素含量的方法,并揭示其含量动态变化规律。方法:采用大连依利特SinoChromODS-APC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-0.4%磷酸水溶液梯度洗脱,流速:1 mL/min,检测波长:364 nm,柱温:30℃。结果:芦丁在0.1525～3.8120μg范围内线性关系良好,r=0.9998,平均回收率为98.2%(RSD=2.0%);槲皮素在0.0589～1.4720μg范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率为97.7%(RSD=2.3%)。含量测定结果表明芦丁和槲皮素的含量具季节性动态变化,芦丁8月份含量高,平均质量分数达6.31 mg/g,槲皮素9月份含量最高,平均质量分数达0.86 mg/g。结论:该方法简单,准确度高,为喙果绞股蓝的质量控制提供实验依据,芦丁和槲皮素含量动态变化规律为其开发利用提供参考。     

UHPLC法同时测定金银花中6种有效成分的含量

本实验建立了UHPLC同时测定不同产地金银花中绿原酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C含量的分析方法。采用Agilent 1290超高效液相色谱系统,Agilent ZORBAX RH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸水,以0.2 m L/min的流速进行梯度洗脱,柱温30℃,检测波长350nm。结果表明在该色谱条件下,金银花的6种有效成分在8 min内可达到基线分离。方法的加样回收率为96.88%~99.16%,相对标准偏差为0.23%~1.06%。UHPLC法分析速度快,重复性好,结果准确,可用于金银花中绿原酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C的含量测定。     

钩藤叶5种活性成分的测定研究

为建立钩藤Uncaria rhynchophylla(Miq.)Miq.ex Havil叶中5种活性成分含量测定方法,弥补钩藤叶质量控制方法的不足。本文通过对钩藤叶进行了抗氧化活性部位追踪,发现钩藤叶抗氧化活性主要与黄酮和多酚等成分相关;采用HPLC-PDA方法,以乙腈-0.1%磷酸水进行梯度洗脱,测定了钩藤叶中绿原酸、表儿茶素、芦丁、金丝桃苷和喜果苷等5种活性成分的含量。在该方法的条件下,5种成分分离良好,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均3.0%,平均加样回收率为96.73%～103.5%。不同采集地点的12批样品的聚类分析表明5种成分的含量差异与产地地理分布相关。建立的HPLC方法操作简单,准确度好,精密度高,为钩藤叶的综合开发利用提供了基础。     

杜仲不同部位主要有效成分含量比较

以高效液相色谱法,测定杜仲不同部位绿原酸及松脂醇二葡萄糖苷的含量.杜仲各部位绿原酸含量:叶＞内皮＞栓皮＞枝;杜仲各部位松脂醇二葡萄糖苷含量:内皮＞栓皮＞枝＞叶.杜仲各部位绿原酸含量、松脂醇二葡萄糖苷含量均有明显差异.     

HPLC法测定不同品种不同产地菊芋叶片中绿原酸的含量

为建立同时测定大丰地区3个菊芋品种及大庆地区2个菊芋品种叶片绿原酸含量的方法,采用高效液相色谱法对不同品种不同产地菊芋叶片中绿原酸含量进行测定。结果表明:1)在检测条件流动相为1%磷酸溶液、乙腈(87∶13)、流速1 mL/min和检测波长327 nm时,绿原酸在0.01～0.1 mg/mL呈良好的线性关系,精密度良好,平均回收率为98.21%,RSD=0.68%;2)大丰地区南芋1号、青芋2号、南芋10号叶片中绿原酸含量分别为干重的0.431%、0.040%和0.933%;3)大庆地区南芋1号、南芋9号叶片中绿原酸含量分别为干重的1.245%、2.139%。研究结果表明菊芋叶片中绿原酸含量在不同品种不同生态区域间有差异,HPLC方法简便、快速、准确,可用于菊芋叶片中绿原酸含量的测定。     

不同季节新疆圆柏总黄酮含量的变化

目的:确定乌鲁木齐南山地区新疆圆柏总黄酮含量最高的时期及其季节变化。方法:采用溶剂法萃取不同季节新疆圆柏叶、果实与枝干的总黄酮,以芦丁作为标准品,用比色法进行含量测定。结果:新疆圆柏的果实中黄酮含量最高,为0.62%～1.13%,以10月份的含量最高;叶中黄酮含量变化为0.28%～0.83%,4月份最高;枝干中的黄酮含量最少,变化不明显。结论:新疆圆柏黄酮含量的季节变化与其生长习性及乌鲁木齐南山气候有关。     

SPME-GC/MS联合HSDE-HPLC-DAD分析表征金银花新品种中的主要化学成分

本文运用SPME-GC/MS联合HPLC-DAD法分析表征金银花新品种花和叶中的主要化学成分,为开发利用金银花新品种提供数据支持。采用SPME-GC/MS对该品种花及叶片中的挥发油成分进行检测;并采用HSDE-HPLC-DAD对该品种花及叶片中有机酸、黄酮、环烯醚萜苷类成分进行分析测定。最终从该品种金银花中检测出54种挥发油成分,定量测定出四种有机酸(绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C)、两种黄酮(芦丁、木犀草苷)、两种环烯醚萜苷(马钱酸、当药苷)共八个化合物的含量。该方法以金银花中四类主要成分为指标,全面系统的对该金银花新品种花及叶进行分析测定和质量评价,为新品种金银花的推广及应用提供科学依据。     

高效液相色谱法测定蓝莓叶中绿原酸的含量

采用高效液相色谱法测定蓝莓叶中绿原酸的含量。所用色谱柱为Eclipse XDB C18（250 mm×4.6 mm,2.5 μm）,以乙腈-0.1%磷酸（体积比为13:87）为流动相,检测波长327 nm,当绿原酸质量浓度为6～96μg/mL时,以绿原酸对照品溶液的峰面积比为纵坐标（Y）,绿原酸的质量浓度为横坐标（X）,二者呈良好的线性关系,线性方程为：Y=74.15X-432.3,R2=0.999,平均回收率为99.98%,RSD=0.506%（n=6）。按照以上色谱方法检测了三种蓝莓中绿原酸的含量,并与蓝莓果实中绿原酸的含量比较,结果显示三种蓝莓叶中的绿原酸含量远高于果实中的绿原酸含量。     

野生多叶棘豆中芦丁的动态积累规律

目的：为确定野生多叶棘豆的最佳采收期提供实验依据.方法：采用高效液相色谱法对不同采收期野生多叶棘豆中芦丁含量进行测定,考察其指标成分芦丁的含量变化趋势.结果：多叶棘豆中芦丁的动态积累有一定规律.在7月末8月初以前其芦丁含量有上升趋势,8月初以后其芦丁含量逐渐下降.结论：为保证药材的质量,根据多叶棘豆中有效成分的动态积累规律,有必要在其最佳采收期采集药材.     

不同季节灰毡毛忍冬茎叶中绿原酸和木犀草苷含量的分析

目的：比较分析不同季节的灰毡毛忍冬茎叶中绿原酸和木犀草苷的含量,为综合利用茎叶资源提供参考依据.方法：采用蒸制晒干法对灰毡毛忍冬的茎叶进行干燥处理,利用超声波法提取样品中的绿原酸和木犀草苷并通过高效液相色谱法进行含量测定.结果：绿原酸和木犀草苷含量在不同季节的灰毡毛忍冬茎叶中差异明显.绿原酸含量依次为花＞叶＞茎,以秋季（11月份）叶片样品中的绿原酸含量最高（3.031％）,是花蕾中含量的96％;木犀草苷含量总体趋势为叶＞花和茎,以冬季（2月份）叶片样品中的含量最高（0.558％）,是花蕾中含量的4.6倍;二者均高于2010版《中国药典》对山银花和金银花指标物质含量的规定.结论：秋冬季节对灰毡毛忍冬进行休眠期整型修剪,副产物叶片资源丰富,药源成分充足,具有广阔的开发应用前景.     

不同地域牛蒡叶绿原酸的含量比较及其抑菌实验

用80％的酸化乙醇(pH2-3)提取不同地域的牛蒡叶,提取液经减压浓缩和石油醚脱色后,分别用polyamide柱层析法和硅胶薄层层析法分离纯化绿原酸,测定并比较产自不同地域牛蒡叶中的绿原酸含量差异,并对纯化的绿原酸进行抑菌实验。结果表明,采自不同地域牛蒡叶中的绿原酸含量存在着差异,野生牛蒡叶的绿原酸含量最低,种植和盐碱地种植牛蒡叶绿原酸的含量差别不大。纯化的绿原酸对4种实验菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、藤黄微球菌均存在着一定的抑制作用。     

忍冬不同药用部位活性成分的提取及含量分析

以河南封丘忍冬基地所产忍冬整株生药为研究对象,对比不同提取方法对忍冬各部位中活性成分含量大小的影响。用加热回流提取法、索氏提取法和超声波提取法分别对忍冬花蕾、叶、藤和根部中的活性成分进行提取,以绿原酸(CHA)、总黄酮作为指标成分,用薄层色谱法(TLC)、紫外色谱法(UV)和高效液相色谱法(HPLC)测定其含量。结果发现:与其他2种方法相比,用索氏提取法提取的有效成分最高,忍冬花蕾、叶、藤和根部中绿原酸质量分数分别为4.7%、3.0%、3.2%和2.1%,总黄酮的质量分数分别为6.9%、9.2%、3.6%和1.9%。提取效率从低到高分别是乙醇回流提取法、超声提取法和索氏提取法。3种提取方法以忍冬的花蕾、叶、藤、根部的粗提物中都检测到了绿原酸。绿原酸的含量从高到低为花蕾、叶、藤和根部;总黄酮的含量从高到低为叶、花蕾、藤和根部。本研究不仅通过对比得出了最优的提取方法,还为整株忍冬的综合开发利用提供了理论基础。     

湘西产野葛不同部位中总黄酮及葛根素的含量测定

本文采用UV、TLC法对野葛不同部位总黄酮及葛根素的含量进行了测定,结果野葛块根比茎叶中黄酮和葛根素含量都高,其黄酮含量为4.12%,是叶的4.24倍;葛根素含量为2.43%,是叶的243倍。     

梯度洗脱高效液相色谱法测定桑叶中3种活性成分的含量

建立同时测定桑叶中绿原酸、芦丁和槲皮素含量的分析方法。色谱柱为NUCLEODUR C18 RP(250 mm×4.6 mm,5μm),光电二极管检测器,流动相为甲醇-质量分数0.5%磷酸水溶液,梯度洗脱程序为0 min(30:70)-15min(30:70)-25min(50:50)-35min(85:15)-40min(30:70);流速0.8 ml.min-1,检测波长为350 nm。绿原酸、芦丁和槲皮素的线性范围分别为0.1144~1.0296μg(r=0.9996)、0.0436~0.3924μg(r=0.9999)和0.0452~0.4068μg(r=0.9997),平均回收率分别为97.7%(RSD=1.7%)、98.4%(RSD=2.2%)和100.6%(RSD=1.5%)。方法快速简便,专属性强,重复性好,可作为桑叶中绿原酸、芦丁和槲皮素的定量分析方法。