家蚕体内维生素B6的存在形态和转换代谢

采用不含桑叶粉末、以去维生素牛乳酪蛋白为蛋白源的准合成饲料饲育家蚕Bombyx mori幼虫,探讨了家蚕体内维生素B（VB₆）化合物的存在形态和转换代谢途经。随饲料中盐酸吡哆醇（PN-HCl）添加量的增加,幼虫体内吡哆醇(PN)含量相应变化,其次是吡哆醛(PL);而辅酶型磷酸吡哆醛(PLP)和磷酸吡哆胺(PMP)含量存在稳定性。饲料中的吡哆醇以单纯扩散的形式进入体液;体液中的吡哆醇被各种组织吸收后,在各自的吡哆醛激酶和PNP/磷酸吡哆胺氧化酶的作用下,转变成辅酶型磷酸吡哆醛。家蚕不同于哺乳动物,没有特定的辅酶型磷酸吡哆醛形成组织和辅酶型磷酸吡哆醛的转送机制。同时家蚕体内缺乏具储存VB₆功能的辅酶型磷酸吡哆醛结合蛋白,推测这是用缺乏VB₆的饲料饲育各龄起蚕,幼虫当龄死亡的主要原因。     

维生素B6对草鱼脂肪代谢的影响

应用配合饲料添加维生素B_6对草鱼进行了慢性饲养试验,研究维生素B_6对草鱼脂肪代谢的影响。应用Beckman 42型生化分析仪测定鱼类血液中生化成份含量的变化,以及用放射性~(35)S-蛋氨酸(~(35)S-Met.)同位素进行示踪试验表明,维生素B_6能够显著降低血清中甘油三酯、白蛋白和葡萄糖水平,增高了高密度脂蛋白胆固醇的含量和淀粉酶活力,促进了鱼类机体组织对蛋氨酸的利用。所有的试验结果表明,在配合饲料中添加一定剂量的维生素B_6能够改善草鱼脂肪代谢,避免鱼类脂肥倾向和脂肪肝的发生     

人体唾液维生素B6的快速荧光测定

人体唾液维生素Ｂ６的快速荧光测定□熊忠（中国科学院西北高原生物所,西宁８１０００１）维生素Ｂ６是水溶性维生素Ｂ族之一,它包括三种：吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺。吡哆醇在体内磷酸化转变为吡哆醛再生成吡哆胺,吡哆醛和吡哆胺在体内是以辅酶形式参与代谢。我们一般地...     

采用高效液相色谱技术分析烟草体内的维生素B6化合物

维生素B6 (VB6)是一类化合物的总称.近年来研究发现VB6在植物体内发挥抗逆作用.烟草作为模式植物其体内VB6的存在形态还未见报道.本研究采用高效液相色谱结合荧光检测技术对烟草体内VB6的存在形态进行了分析.结果表明:土壤栽培烟草叶、茎和根中VB6的含量依次为2.9、1.7、3.0 μg/g鲜重;组培烟草叶片的VB...     

维生素B2和B6补充对大鼠高尿酸血症的影响

目的：观察维生素B2（VitB2）和维生素B6（VitB6）补充对高尿酸血症大鼠血尿酸水平的影响,并探讨可能的机制。方法：雄性SD大鼠72只,随机分为空白对照组（C组）、氧嗪酸钾模型组（HU组）、阳性对照组（AL组,别嘌呤醇20 mg/kg·BW）、维生素B2组（B2组,VitB2 1.18 mg/kg·BW）、维生素B6组（B6组,VitB6 23.73 mg/kg·BW）、维生素B2＋B6组（BB组,1.18 mg/kg·BW VitB2＋23.73 mg/kg·BW VitB6）。C组普通饲料喂养;其他各组大鼠利用酵母饲料＋氧嗪酸钾灌胃建模。干预持续16w,并动态监测SUA。16w后,检测SUA、Urea、SCr,肝脏ADA和XOD活性,观察肾脏病理切片。分析VitB2、VitB6对SUA、XOD、ADA的交互作用。结果：干预16w末,HU组、B2组、B6组、BB组大鼠SUA水平与C组相比均明显升高（P值均＜0.05）。与HU组相比,大鼠SUA、Urea、SCr水平在B2组、B6组、BB组显著降低（P值均＜0.05）;AL组、B2组、B6组、BB组肝脏XOD活性明显降低（P值均＜0.05）;AL组、B2组、B6组肝脏ADA活性显著降低（P值均＜0.05）。析因设计分析显示,VitB2和VitB6无交互作用。肾脏病理结果显示,HU组、B2组、BB组存在不同程度的炎性细胞浸润。结论：维生素B2、B6可在一定程度上降低高尿酸血症大鼠的尿酸水平。     

家蚕磷酸吡哆醛激酶cDNA的克隆和酶活表征

吡哆醛激酶 (EC 2.7.1.35) 在 ATP 和 Zn2 的存在下,催化吡哆醛的磷酸化反应生成磷酸吡哆醛 (PLP)。在生物体内许多酶促反应中,PLP 是一种重要的辅酶因子。家蚕和哺乳动物一样,需依赖食物中的维生素 B6前体来合成 PLP。文章描述了利用家蚕基因组数据库序列信息及使用 PCR 方法,克隆出编码家蚕吡哆醛激酶的 cDNA (GenBank 登录号:DQ452397)。克隆到的 cDNA 含有一个 894 bp 的完整可读框,编码一条分子量为 33.1 kDa,含 298 个氨基酸残基的蛋白质。序列比对显示此蛋白质序列与人类吡哆醛激酶蛋白序列具有 48.6%的同一性,包含吡哆醛激酶家族共有的特征保守序列,但其氨基酸残基数比哺乳动物和植物克隆到的吡哆醛激酶残基数均少 10 多个残基。多序列比对结果显示,吡哆醛激酶中几个有关键功能且在哺乳动物和植物中均保守的氨基酸残基在此蛋白中被替换为其他种类氨基酸残基。采用 T7 启动子和 T7 聚合酶表达系统对克隆到的 cDNA 进行了原核表达并对表达粗提产物进行了酶活检测。实验结果显示表达得到的可溶性蛋白产物占其总蛋白量为 10%,细胞粗提物具有活力为 30 nmol/min/mg 的吡哆醛激酶活性,结果证实了克隆到的 cDNA 编码家蚕中的吡哆醛激酶。     

运用微生物法测定保健食品中的维生素B6

介绍运用微生物法测定保健食品中维生素B6的含量。GB／T5009．154—2003将微生物法规定为测定食品中维生素B6的国家标准方法Ⅲ。其原理为卡尔斯伯酵母菌需在有维生素B6存在的条件下才能生长,在一定条件下维生素B6的量与其生长量成正比关系。用分光光度仪在550nm波长下测定该菌的生长．与标准曲线相比较,从而得出该样品中维生素B6的含量。通过对国标方法作较详细的注解,并对有些地方作适当的修改,以期对需要开展此项工作的实验室及其人员会有较大的帮助。     

维生素A缺乏对缺铁性贫血的影响——体内外实验对比研究

目的：研究维生素A缺乏对缺铁性贫血的影响。方法：体内实验将SD大鼠按体重随机分为4组,分别为Fe＋维生素A-Ⅰ组、Fe＋维生素A-Ⅱ组、Fe+维生素A－Ⅲ组、Fe－维生素A－Ⅳ组。实验动物喂饲8w后处死后取肝脏。体外实验将大鼠原代肝细胞按Seglen法分离后,随机分为严重缺乏组A、边缘性缺乏组B、正常生理组C、治疗剂量组D,分别给予0、0.5、1.0、50μmol/L 的全反式视黄酸培养72h。用逆转录—聚合酶链反应（RT-PCR法）检测肝脏的转铁蛋白受体（TFR）mRNA、铁蛋白（Fn）mRNA的表达。结果：体内外实验大鼠维生素A缺乏时,肝脏TFR mRNA表达增强,而Fn mRNA表达下降,差异具有统计学意义 （P<0.05）。结论：维生素A缺乏可以使大鼠肝脏 TFR mRNA表达增强而Fn mRNA表达下降,而补充维生素A后铁缺乏造成的很多不利影响都显著减轻了。     

家蚕味觉电生理反应的个体差异

为探讨家蚕Bombyx mori人工饲料饲养发育不齐的生理原因,从同一蚕品种中挑选出对人工饲料摄食性不同的个体,用电生理学方法测定了下颚瘤状体味觉感器对4种代表性物质（蔗糖、肌醇、大豆粉提取物和柠檬酸）的电生理反应。结果表明,栓锥感器Ss-Ⅰ对蔗糖等促食物质的反应以及栓锥感器Ss-Ⅱ对大豆粉提取物等阻食物质的反应,均存在明显的个体差异。在临界浓度下,低摄食性个体的放电脉冲频率显著高于高摄食性个体。说明低摄食性蚕的味觉反应比高摄食性蚕敏感。     

抑前胸腺肽在家蚕体内的活性作用

家蚕Bombyx mori抑前胸腺肽是昆虫脑神经肽的一种,体外实验表明它能抑制处于活动时期的家蚕前胸腺合成蜕皮激素,因此抑前胸腺肽可能对昆虫的变态起着重要的作用。将抑前胸腺肽以不同的浓度分单一注射和加强注射导入家蚕体内,不同的时间间隔取样,利用蜕皮激素放射免疫分析方法,观察到了抑前胸腺肽在家蚕体内的活性作用以及引起家蚕体内血淋巴中蜕皮激素浓度的动态变化,首次证明了抑前胸腺肽在体内对家蚕前胸腺合成蜕皮激素有强烈的抑制作用。     

抑前胸腺肽在家蚕体内的活性作用

家蚕Bombyx mori抑前胸腺肽是昆虫脑神经肽的一种,体外实验表明它能抑制处于活动时期的家蚕前胸腺合成蜕皮激素,因此抑前胸腺肽可能对昆虫的变态起着重要的作用。将抑前胸腺肽以不同的浓度分单一注射和加强注射导入家蚕体内,不同的时间间隔取样,利用蜕皮激素放射免疫分析方法,观察到了抑前胸腺肽在家蚕体内的活性作用以及引起家蚕体内血淋巴中蜕皮激素浓度的动态变化,首次证明了抑前胸腺肽在体内对家蚕前胸腺合成蜕皮激素有强烈的抑制作用。     

家蚕耐氟性差异的细胞化学研究

对不同蚕品种的耐氟性、ACPase的氟敏感性、蚕品种耐氟性机理的研究表明,在供试蚕品种中以浙农1号的耐氟性最强,杭 8的耐氟性最弱;家蚕Bombyx mori血淋巴ACPase活性与蚕品种的耐氟性无明显关系;氟对蚕的血淋巴和中肠组织细胞的ACPase活性都有抑制作用,并随着氟添食浓度的增加ACPase活性降低,但超过一定浓度的氟添食,血淋巴ACPase活性反而有一个回升的过程,这个转折点出现可能的浓度及回升的幅度与蚕品种的耐氟性有关;细胞化学研究发现此转折点的出现是由于高浓度氟引起细胞结构的破坏而导致蚕体组织细胞内的ACPase大量向血腔释放的结果;氟敏感性蚕品种杭 8在很低氟量添食即可引起中肠组织细胞的ACPase大量向血腔释放,使血淋巴中的ACPase活性大幅度上升,随后ACPase活性受到完全的抑制;耐氟性较强的蚕品种浙农1号则在较高的氟含量添食时才向血腔释放ACPase,且血淋巴中ACPase增高的幅度小,在很高的氟量添食时全面抑制中肠ACPase活性。氟对不同品种ACPase活性影响的差异被认为是家蚕品种耐氟性差异机理之一。     

家蚕丝素蛋白轻链基因（fib-L）启动子序列的克隆及其活性分析

家蚕Bombyx mori丝素蛋白轻链（fibroin light-chain, fib-L）基因fib-L具有在后部丝腺组织专一性、高效性表达的特点。为了利用其启动子构建能够表达外源基因的丝腺生物工厂,本实验对fib-L启动子活性进行了研究。通过PCR法克隆了fib-L启动子元件,序列分析显示fib-L启动子由位于-33 ～ -25处的TATA盒元件和位于－128～－121处的特征性序列GTCAATTT共同组成。用fib-L启动子控制报告基因DsRed进行家蚕BmN细胞和蚕体内的瞬时表达研究,结果表明fib-L启动子可以驱动DsRed报告基因在BmN细胞和家蚕后部丝腺组织中瞬时表达。     

Role of specific activators of intestinal amino acid transport in Bombyx mori larval growth and nutrition.

Nutrient absorption and its modulation are critical for animal growth. In this paper, we demonstrate that leucine methyl ester (Leu-OMe) can greatly increase the activity of the transport system responsible for the absorption of most essential amino acids in the larval midgut of the silkworm Bombyx mori. We investigated leucine uptake activation by Leu-OMe in brush border membrane vesicles and in the apical membrane of epithelial cells in the midgut incubated in vitro. Moreover, the addition of this strong activator of amino acid absorption to diet significantly affected larval growth. Silkworms fed on artificial diet supplemented with Leu-OMe reached maximum body weight 12-18 h before control larvae, and produced cocoon shells up to 20% heavier than those of controls. The activation of amino acid absorption plays an essential role in larval development so that larval growth and cocoon production similar to controls reared on an artificial diet with 25% of dry mulberry leaf powder were observed in silkworms fed on an artificial diet with only 5% of mulberry powder. Arch.