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1.
神经节苷脂GM3诱导人单核样白血病J6-2细胞沿单核/巨噬细胞途径分化.在GM3诱导分化同时,J6-2细胞磷脂代谢发生了显著变化.采用((32)P)Pi、[GH3-3H]胆碱和[CH3-3H]SAM参入实验对GM3影响J6-2细胞PC代谢的机制进行了初步的探讨.GM3促进[(32)P]Pi参入J6-2细胞PC;抑制[CH3-3H]胆碱参入PC及PC合成的前体磷酸胆碱及CDP-胆碱;GM3促进[CH3-3H]SAM参入PC,但抑制[CH3-3H]SAM参入PC合成的前体胆碱、磷酸胆碱和CDP-胆碱.上述结果提示,GM3抑制J6-2细胞PC合成的CDP-胆碱途径,促进PC合成的PE甲基化途径. 相似文献
2.
c-fos基因在内皮素-1促肺泡Ⅱ型细胞表面活性物质合成中的作用 总被引:17,自引:0,他引:17
应用反义技术探讨c-fos基因ET-1调控肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)表面活性物质(PS)合成的胞内信号转导中的作用,结果显示:(1)内皮素-1(ET-1)可提高ATⅡ细胞的^3H-胆碱掺入。(2)蛋白激酶C(PKC)激活剂PMA可使ATⅡ细胞的^3H-胆碱掺入量增加,PKC抑制剂H7可抑制ET-1的促PS合成效应。(3)ET-1和PMA可显著提高Fos蛋白表达量,H7和c-fos反义寡核苷酸(ODN) 相似文献
3.
体外研究汉滩病毒(HTNV)S基因及其5'端表达的意义,为核蛋 白T细胞表位的研究奠定基础。设计2套引物,用PCR方法从PBV220-S22原核质粒中扩增出S 基因全读码框(37-1326bp)及S基因5'端(37-501bp),用TA克隆将其克隆入pcDNA3.1/V5-His-TOPO载体中,成功构建pcDNA3.1-S及pcDNA3.1-S-N真核表达载体,并通过脂质体转 染至Vero细胞中,进行了瞬时表达。间接免疫荧光成功检测到pcDNA3.1-S及pcDNA3.1-S-N在Vero细胞中的表达。pcDNA3.1-S及pcDNA3.1-S-N真核表达载体有较高的转染效率,目 的基因能在宿主细胞中表达,有利于研究HTNV-S基因在T细胞表位研究中的意义。 相似文献
4.
木文研究了多种氨基酸、乙醇胺和甲基乙醇胺对细胞摄取胆碱和合成磷脂酰胆碱(PC)的影响,发现多种氨基酸非竞争性地抑制细胞摄取胆碱。含胆碱代谢物的分析显示胆碱转变成CDP-胆碱,随之形成PC均不受氨基酸影响。乙醇胺竞争性地抑制胆碱摄取,且存在剂量依赖关系。乙醇胺能明显抑制胆碱激酶活性,但细胞内胆碱和磷酸胆碱的代谢池并不改变,提示乙醇胺不影响胆碱转变成磷酸胆碱。根据CDP-胆碱和PC的比放射性分布,乙醇胺也不影响PC的生物合成。甲基乙醇胺抑制胆碱摄入的程度强于乙醇胺,并抑制胆碱激酶和CTP:磷酸胆碱胞苷转移酶活性,含胆碱代谢物以CDP-胆碱下降最显著;提示甲基乙醇胺不仅抑制胆碱摄入而且还干扰了CDP-胆碱通路。 相似文献
5.
RAB5A基因表达改变对人肺腺癌细胞系GLC-82和SPC-a1的分化和侵袭特性影响 总被引:8,自引:0,他引:8
为探讨RAB5A基因对两种人肺腺癌细胞系GLC-82和SPC-al分化及侵袭特性的影响。利用细胞转染技术将构建的RAB5A反义RNA重组质粒(pcDNA3-AntiRAB5A)和RAB5A正义真核表达载体分别转染入低分化人肺腺癌细胞系GLC-82和低转移人肺腺癌细胞系SPC-al中,在稳定筛选后,通过裸鼠体内实验和体外人工基底膜侵袭和细胞趋化运动实验,观察观察转染后细胞分化和转移特性的改变,观察转染前后细胞,发现转染后GLC-82细胞体外侵袭重组基底膜能力及趋化运动能力降低(t检验P<0.02);裸鼠体内成瘤实验,瘤块切片病理观察转染后GLC-82细胞出现腺腔样及基底模样结构,分化程度增高,转染后SPC-al细胞体外趋化运动能力,侵袭重组基底膜能力均增强(t检验P<0.02)。RAB5A基因通过影响细胞的体外趋化运动能力,侵袭重组基底膜能力等对GLC-82和SPC-al细胞的侵袭表型形成及GLC-82细胞的分性发挥重要作用。 相似文献
6.
本文研究了多种氨基酸、乙醇胺和甲基醇胺对细胞摄取胆碱和合成磷脂酰胆碱的影响,发现多种氨基酸非竞争性抑制细胞摄取胆碱。含胆碱代谢物的分析显示胆碱转变成CDP-胆碱,随之形成PC均不受氨基酸影响。乙醇胺竞争性的抑制胆碱摄取,且存在剂量依赖关系。乙醇胺能明显抑制胆碱激酶活,但细胞内胆碱和磷酸胆碱的代谢池并不改变,提示乙醇胺不影响胆碱转变成磷酸胆碱,根据CDP-胆碱和PC的比放射性分布,乙醇胺也不影响PC 相似文献
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神经节苷脂GM3诱导人单核样白血病J6-2细胞沿单核/巨噬细胞途径分化。在GM3诱导分化同时,J6-2细胞磷脂代谢发生了显著变化。采用(^32P)Pi、[GH3-^3H]胆碱和[CH3-^3H]SAM参入实验对GM3影响J6-2细胞PC代谢的机制进行了初步的探讨。GM3促进[^32P]Pi参入J6-2细胞PC;抑制[CH3-^3H]胆碱参入PC及PC合成的前体磷酸胆碱及CDP-胆碱;GM3促进[C 相似文献
8.
抑瘤基因NGX6对人结肠癌细胞凋亡的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
NGX6基因是中南大学肿瘤研究所分子遗传室在对鼻咽癌研究中筛选克隆出的一个新基因.以稳定转染并表达NGX6基因的HT-29细胞为实验组,转染空白质粒的HT-29细胞以及HT-29细胞为对照组,利用PI/Annexin—V双染流式细胞仪检测结肠癌细胞的凋亡情况,通过EMSA分析体外培养的结肠癌细胞及种植瘤细胞内核转录因子-κB(NF-κB)的激活情况.研究结果表明:在裸鼠结肠癌种植瘤中,转染了NGX6基因的与未转染及空白载体组比较,结肠癌细胞凋亡率明显增高;EMSA(electrophoretic mobility shif tassay)分析体外培养的结肠癌细胞及种植瘤细胞内核转录因子-κB(NF—κB)的激活情况,发现转染了NGX6基因的细胞NF—κB的激活均明显受到抑制.此研究说明,NGX6基因只有诱导结肠癌细胞凋亡的能力,其可能的机制是抑制了结肠癌细胞NF—κB的激活. 相似文献
9.
用佛波酯(佛波醇-12-豆蔻酸-13-乙酸酯,PMA)作用大鼠咒9细胞,发现PMA能促进CRHB7919细胞中磷脂酰胆碱(PC)水解,此效应出现在PMA作用细胞15分钟后,且具有PMA浓度依赖性。分析PC水解产物,发现PC主要水生成胆碱而不是磷酸胆是一步测定膜结合磷脂酰胆碱专一性的磷脂酶D(PC-PLD)活性,结果显示100nmol/LPMA作用细胞10分钟即激活PC-PLD,至30分钟PC-PL 相似文献
10.
11.
大鼠基底前脑NGF-R及CHAT免疫反应阳性神经元的分布:免疫双标法 总被引:2,自引:0,他引:2
本文用免疫组化双标法观察了神经生长因子受体(NGF-R)及胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫反应阳性神经元在成鼠基底前脑内的分布,结果发现嗅结节、隔内侧核、斜角带核、腹侧苍白球及基底大细胞核均有NGF-R及ChAT免疫反应阳性神经元.免疫组化双标染色发现,大部分免疫反应阳性神经元的NGF-R与ChAT共存,部分神经元呈单纯NGF-R或ChAT阳性,但这种NGF-R和ChAT的共存情况在不同区域不完全相同.在隔内侧核和斜角带核,大多数的NGF-R阳性神经元和ChAT阳性神经元共存,但在腹侧仓白球和基底大细胞核,两者共存的神经元较前两区为少.此外ChAT阳性神经元在尾壳核中分布较均匀,而NGF-R阳性神经元较少见.研究结果表明,大多数胆碱能神经元有NGF-R,提示NGF对胆碱能神经元的保护和激活作用,部分可能是通过直接与NGF受体的结合而发生作用. 相似文献
12.
目的 胆碱能系统损伤是阿尔兹海默病(Alzheimer's disease,AD)的重要发病机制,但单纯应用拟胆碱药物治疗AD效果不理想,这可能与其复杂的网络通路有关.本研究旨在建立一种基底前脑Meynert基底核(nucleus basalis of Meynert,NBM)催产素受体(oxytocin recept... 相似文献
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核因子—kB的研究进展 总被引:7,自引:0,他引:7
机体对损伤及微生物和侵进入防御反应时,活化的核因子-kB(NF-kB)可诱导细胞合成各种生物大分子。细胞处于静息状态时,NF-kB与kB抑制蛋白(IkBs)结合形成三聚体存在于细胞质内。当细胞受到外界因素刺激时,NF-kB与IkBs分离,NF-kB进入细胞核内,其亚基形成环状结构与DNA接触,启动基因转录。随后,新合成的IkBs又与NF-kB结合返回细胞质,不同IkBs亚型发挥不同的生理功能,同时 相似文献
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用选择性抽提方法和整装细胞电镜技术观察苜蓿丫纹夜蛾多粒包埋核型多角体病毒(AcMNPV)感染的Tn5B1细胞的核骨架结构体系,发现感染早期病毒的复制过程未对宿主细胞核骨架的形态结构产生明显影响,而感染晚期多角体的装配在核骨架网络中进行。ie-1基因和多角体蛋白基因为探针,点杂交分析基因转录活性与宿主细胞核骨架的关系,结果表明在病毒感染早期,无论是正具转录活性的ie-1基因还是不具转录活性的多角体蛋 相似文献
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人组织型纤溶酶原激活剂(t—PA)组合突变体FrGGl在CHO细胞中的… 总被引:3,自引:0,他引:3
为了得到t-PA组合突体FrGGl在CHO细胞中的高效表达,将表达质粒筛选基因启动子上游的增强子(enhancer)去除,构建了FrGGl真核表达质粒pZLFrGGI。酶切线化后,采用大剂量DNA电击介导法,转染dhfr基因缺陷型中仓鼠卵巢细胞系(CHO-dhfr)。氨甲喋呤(MTX)筛选转染细胞,混合加压,挑选克隆,在1×10^-7mol/LMTX压力下,获得表达水平达1500~2500IU/1 相似文献
16.
八肋游仆虫γ—微管蛋白及其基因的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
γ-微管蛋白是一种新发现的与微管形成有关的蛋白质。利用PCR技术从一种下毛类纤毛虫-八肋游仆虫大核DNA中扩增出γ-微管蛋白基因并对其核苷酸序列进行了分析。另外,在有些分裂间期及有丝分裂期的小核内以及部分大核内也发现有γ-微管蛋白存在。 相似文献
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为研究八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)相关基因的功能,构建了八肋游仆虫大核人工染色体(macronuclear artificial chromosome of E. octocarinatus,EoMAC-G),其两端为克隆自八肋游仆虫大核β2-微管蛋白基因的5′和3′非编码区和两侧的端粒序列,中间为多克隆位点和密码子优化后的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein, EGFP-Eo) 报道基因. 用脂质体转染方法将携带有EoMAC-G的pBTub-Tel载体转入八肋游仆虫大核,分析EGFP-Eo基因在八肋游仆虫细胞中的表达. 荧光显微镜观察发现,EGFP-Eo产生的荧光均匀分布于八肋游仆虫细胞质中. 在细胞进行有丝分裂的情况下,荧 光可持续20 d以上. 相比pEGFP-N1质粒转化的游仆虫,人工染色体中的EGFP-Eo基因表达的荧光亮度强、稳定且持续时间长. Western 杂交分析进一步证实,外源EGFP-Eo基因在细胞中过量表达. 通过细菌喂食法进行纤毛虫RNA干扰实验,抑制了外源EGFP-Eo基因在八肋游仆虫细胞中的表达. 利用构建的人工染色体不仅可以在八肋游仆虫细胞内表达外源基因,对目的蛋白质进行活细胞实时动态的定位分析,还可通过RNA干扰的方法调控外源基因在纤毛虫细胞中的表达,便于进一步分析目的蛋白质的功能. 相似文献
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视黄酸诱导细胞分化分子机制的研究进展 总被引:7,自引:0,他引:7
本文从视黄酸(RA)对早期即刻反应基因表达,多种蛋白激酶活性变化及核转录因子AP-1和Qct-3/4基因转录产物功能、白血病细胞对RA出现抗生的可能原因以及PR蛋白在RA诱导造血干/祖细胞,白血病细胞分化成熟中的调节作用,PRB与其它核转空蛋白的相互关系等方面分析,综述了近年来有关RA诱导细胞分化可能的分子机制。 相似文献
20.
核因子-κB的研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
机体对损伤及微生物入侵进行防御反应时,活化的核因子-κB(NF-κΒ)可诱导细胞合成各种生物大分子。细胞处于静息状态时,NF-κB与κB抑制蛋白(IκBs)结合形成三聚体存在于细胞质内。当细胞受到外界因素刺激时,NF-κB与IκBs分离,NF-κB进入细胞核内,其亚基形成环状结构与DNA接触,启动基因转录。随后,新合成的IκBs又与NF-κB结合返回细胞质。不同的IκBs亚型发挥不同的生理功能。同时,对NF-κB的生理功能也作了介绍。 相似文献