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1.
在真菌的反硝化作用中,一种独特的细胞色素P-450起着一氧化氮还原酶(P-450nor)的作用。用gtll构建了柱孢菌(Cylindrocarpontonleinense)cDNA文库。纯化的柱孢菌C。P-450nor2免疫兔,制备抗体。并用抗体筛选出阳性克隆。回收插入片段(P-450nor2cDNA)克隆到表达载体pYES2中,并在酵母系统中表达。经Westem-blot分析验证,表达产物能与抗体反应产生特异性杂交带。酶分析结果表明:表达产物具有一氧化氮还原酶细胞包素P-450nor2的活性,能以NADH或NADPH为供体,使NO还原先成N2O。 相似文献
2.
用DE-52纤维素柱色谱法和FPLC法分离纯化了大肠杆菌表达的重组缣孢菌色素P-450nor,经梯度洗脱MonoQ纯化后的fR.P-450nor为单一色谱峰,比活达55.20U/mg、纯化倍数约为1100倍,SDS-PAGE检测为单一谱带。 相似文献
3.
白色念珠菌羊毛甾醇14α-去甲基化酶三维结构分子模型研究 总被引:5,自引:0,他引:5
基于四种原核细胞色素P450晶体蛋白P450BM3、P450cam、P450terp、P450eryF模建白色念珠菌羊毛甾醇14α-去甲基化酶三维结构。序列匹配采用四种晶体结构比较结果基础之上提出的细胞色素P450超家族蛋白基于结构知识的序列匹配方法。以P450BM3晶体结构坐标模建目标蛋白结构保守区主链结构,结构保守区侧链构象来源于四种晶体蛋白与模建蛋白对应残基同源性得分最高残基构象。模建结果用分子力学和分子动力学进行结构优化,模建结果蛋白采用Profile-3D图、Ramachandran图和疏水图分析确证结构的合理性。并根据模型推测与血红素辅基相互作用的残基、与氧化还原偶联蛋白作用和参与电子传递的残基、底物进出通道和活性位点的残基。这些研究结果为定点突变研究、抗多肽抗体结合实验等提供理论依据,为高效低毒抗真菌药物合理设计提供靶标。 相似文献
4.
小鼠每天腹腔注射4-氨基-2’,4’-二氯二苯醚(2’,4’-diCl)及4-氨基-4’-甲基二苯醚(4’-CH3)4天,于末次给药24h后实验,发现:(1)以小鼠戊巴比妥睡眠时间作为体内P450活性指标,4’-CH3组P450活性高于生理盐水组,而2’,4’-diCl组小鼠体内P450活性低于生理盐水组。(2)两处理组小鼠体外测得肝微粒体P450含量均显著高于生理盐小组(P<0.05),低于苯巴 相似文献
5.
细胞色素P-450单加氧酶系在昆虫抗药性中起重要作用。本文研究了棉铃虫抗性品系与敏感品系间细胞色素P450含量、对-硝基茴香醚O-脱甲基酶和艾氏剂环氧化酶的差异。结果表明:抗性品系中细胞色素P-450含量、对-硝基茴香醚O-脱甲基酶活性分别是敏感品系的1.71倍和2.21倍,而艾氏剂环氧化酶活性仅为1.35倍。因此细胞色素P-450含量和对-硝基茴香醚O-脱甲基酶在棉铃虫抗菊酯品系中起重要作用。进一步讨论了不同抗性品系间抗性机制不同的原因。 相似文献
6.
白色念珠菌羊毛甾醇14α—去甲基化酶三维结构分子?… 总被引:3,自引:0,他引:3
基于四种原核细胞色素P450晶体蛋白P450BM3、P450cam、P450terp、450eryF模建白色念珠菌羊毛甾醇14α-去甲基化酶三维结构。序列匹配采用四种晶体结构比较结果基础之上提出的细胞色素P450超家族蛋白基于结构知识的序列匹配方法。以P450BM3晶体结构坐标模建目标蛋白结构保守区主链结构,结构保守区侧链构象来源于四种晶体蛋白与模建蛋白对应残基同源性得分最高残基构象。建模结果用分 相似文献
7.
5种尾孢菌和2种假尾孢菌,其中有3个新种:杜若尾孢Cercospora polliae-japonicaeY.L.Guo&Y.Jiang,sp.nov.,日本锦带花尾孢C.weigelae-japonicaeY.L.Guo&Y.Jiang,sp.nov.和旋覆花假尾孢Pseudocercospora inulaeY.L.Guo&Y.Jiang,sp.nov.,1个新组合:紫菀假尾孢Pseudoce 相似文献
8.
糖单孢菌16S rDNA的PCR-RFLP分析 总被引:5,自引:0,他引:5
PCR-RFLP分析适用于种和种间水平的多相分类研究。文章对PCR-RFLP方法应用于糖单孢菌属分类有具体方法进行了探讨;报道了一组适于糖单孢菌属PCR-PFLP分析的限制性内切酶,并用这组酶对6株糖单孢菌属分离株进行了研究,进一步探讨了实验菌株在该属的分类地位。同时指出了PCR-RFLP方法应用中应注意的问题。 相似文献
9.
小鼠每天腹腔注射4-氨公-2’,4’-二氯二苯醚(2’,4’-dicl)及4-氨基-4’-甲基二苯醚(4’-CH3)4天,于末次给药24h后实验,发现:(1)以小鼠戊巴比妥睡眠时间作为体内P450活性指标,4’-CH3组P450活性高于生理盐水组,而2’,4’-diCl组小鼠体内P450活性低于生理盐水组。(2)两处理组小鼠体外测得肝微粒体P450含量均显著高于生理盐水组(P<0.05),低于苯巴比妥组。(3)2’,4’-diCl组小鼠由zoxazolamine引起的瘫痪时间显著高于生理盐水组(P<0.01),提示该化合物对体内P448活性亦有抑制作用。体外实验也发现,两者对BNF诱导的大鼠肝微粒体P448的活性均有不同程度的抑制。 相似文献
10.
人群中存在着S-美芬妥英羟化代谢多态性,从人肝微粒体已分离出S-美芬妥英化酶,在基因克隆研究中已分离同与该羟化酶活性有关的P450CDNA,属P4502C19。最近报道,人肝中P450 2C19的含量和催活S-美芬妥英羟化活性密切相关,其弱是主要由于CYP2C19的外显子5单碱基对(G→A)的变异,使核苷酸序列错位而产生无功能的P450蛋白的结果。 相似文献
11.
玉米培养物中弯角镰孢菌代谢产物的分析与鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
从致牛烂蹄病的稻草中分离的弯角镰孢菌菌株于1988年和1991年分两批接种玉米中,培养物用乙腈:水(3:1,v/v)提取,正已烷脱脂,Florisil色谱柱净化,经净化的提取液经电子捕获气相色谱(GC-ECD)、薄层色谱(TLC)分析和气相色谱-质谱联用(GC-MS)鉴定,证实了弯角镰孢菌可同时产生多种单端孢霉烯族化合物。弯角镰孢菌能同时产生这些代谢物,在国内外未见报道。 相似文献
12.
从志贺氏1型痢疾村菌LPS中分离纯化出料捩的,以ADH为连接剂将其与TT结合形成O-SP-TT结合疫苗,并用此结合疫苗免疫NIH小鼠,结果显示使用O-SP免疫后,小鼠血清中没有抗LPS抗体产生,而用L-SP-TT免疫后鼠血清中生了抗LPSIgG和IgM抗体,且IgG抗体水平高于IgM抗体;O-SP-TT免疫组等二次和第三次免疫后IgG我有显著的升高(P〈0.01),但第二次和第三次免疫后血清IgM 相似文献
13.
细胞色素P450(P450,Ec,1.14.14.1)是一种十分重要的催化氧化反应的酶,本文测定了12个对氨基苯甲酸酯用系物与P450相互作用而形成P450代谢中间体络合物的活性,用半经验分子轨道法MNDO-PM3计算得到了这些同系物的分子轨道指数,并用逐步多元回归分析法导出了活性与分子轨道指数及正辛醇/水分配系数的对数值之间的定量结构与活性关系。结果表明,对苯氨基苯甲酸脂同系物形成P450代谢中 相似文献
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本文报道柱隔孢菌属二新种和菌绒孢属一个中国新记录种。新种是天门冬柱隔孢Ramulariaasparagi,寄生在百合科Liliaceae文竹Aspargisplumosus上;香茶菜柱隔孢Ramulariarabdosiae,寄生在唇形科Labiatae香茶菜Rabdosiaamethystoides上。新记录种是甜苦菌绒孢Mycovellosielladulcamarae。文中为新种提供了拉丁文描述和附图。研究标本保存于云南农业大学真菌标本室(MHYAU)。 相似文献
16.
本文介绍了用微结晶纤维素薄板层析对小单孢菌细胞壁中二氨基庚二酸(DAP)异构体及其3-羟基衍生物(3-OH DAP)进行快速分析的方法。在甲醇:水:冰乙酸:吡啶(10:5:0.25:1)的溶剂系统中测得RLL-DAP:meso-DAP为0.88,DD-DAP为0.78,3-OH DAP为0.72。 相似文献
17.
对来自不同地方的7个弯孢节丛孢(Arthrobotrys musiformis Drechsler)的9个厚皮单顶孢(Monacrosporium eudermatum(Drechsler)Subram)标准菌株用4个随机引物(OVW-18,OPW-16,OPM-1,OPK-19)进行了随机扩增多态性DNA(RAPD)分析。扩增谱带聚类分析结果不能将弯孢节丛孢和厚皮单顶孢的菌株分开,具有附属丝的菌 相似文献
18.
真菌的反硝化作用与细胞色素P-450刘德立(华中师范大学生物系,武汉430070)关键词反硝化作用,细胞色素P-450反硝化作用是将硝酸盐或亚硝酸盐还原成N2或N2O的过程,是大气氮循环中的一部分。多种细菌具有反硝化能力。但近年来的研究证明:有些真菌... 相似文献
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细胞色素P450超家族蛋白质基于结构知识的序列联配 总被引:4,自引:0,他引:4
应用计算机程序对细胞色素P450蛋白20个家族的代表序列进行初步多序列联配后,利用结构知识对匹配结果加以调整,调整的依据是P450蛋白二级结构特征和某些超二级结构特征的保守性,三维结构空间配置的保守性,在结构与功能重要残基的保守性,亲水和疏水片段的保守性。大量定点突变实验、选择性化学修饰实验、抗多肽抗体结合实验等能很好地确证该联配结果的正确性。联配结果对真核P450蛋白膜结合方式、活性位点残基分布、与氧化还原偶联蛋白有相互作用的残基的分布等作出了合理的推断。细胞色素P450超家族蛋白基于结构知识的序列联配的尝试对P450蛋白结构与功能关系研究提供了参考 相似文献
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本文报道柱隔孢菌属二新种和菌绒孢属一个中国新记录种。新种是天门冬柱隔孢Ramularia asparagi,寄生在百合科Liliaceae文竹Aspargis plumosus上;香茶菜柱隔孢Ramularia rabdosiae,寄生在唇形科Labiatae香茶菜Rabdosia amethystoides上。新记录种是甜苦菌绒孢Mycovellosiella dulcamarae。文中为新种提供了拉丁文描述和附图。研究标本保存于云南农业大学真菌标本室(MHYAU)。 相似文献