G蛋白对离子通道的调控

Ｇ蛋白对离子通道的调控鲍国斌濮璐裴钢（中国科学院上海细胞生物学研究所,上海２０００３１关键词Ｇ蛋白Ｇ蛋白偶联受体离子通道Ｇ蛋白（Ｇｐｒｏｔｅｉｎ）由α、β、γ三个亚基组成,位于细胞膜的胞液侧。Ｇα亚基具有ＧＴＰ酶活性,使Ｇ蛋白偶联受体和效应分子发生可...     

G－蛋白异三聚体（G－proteinheterotrimer）的晶体结构

继１９９４年Ｓｉｇｌｅｒ－ｈａｍｍ和Ｓｐｒａｎｇ－Ｇｉｌｍａｎ实验室报道了Ｇｉα１的晶体结构之后,１９９５年１２月和１９９６年１月这两个实验室又相继报道了Ｇ－蛋白异三聚体（ＧαＧＤＰ）βγ和Ｇβγ二聚体的晶体结构．这些研究结果表明Ｇ－蛋白复合物象一台由操纵杆（受体）、开关（Ｇα）和螺旋桨（Ｇβγ）组成的信号转导纳米机器,并揭示了α和β亚基间可能存在两种不同的功能界面,β和γ亚基间、α和γ的相互作用,以及信号传导过程中,ＧＴＰ诱导开关Ⅱ区重排和亚基解高的机制．βγ亚基能稳定α亚基和ＧＤＰ的紧密结合,使Ｇ－蛋白维持在失活状态．β亚基的ＷＤ４０重复序列形成７叶片的螺旋桨（ｓｅｖｅｎｆｏｌｄｐｒｏｐｅｌｌｅｒ）构造,每个叶片的外侧面显露出许多可变的接触位点．β亚基部分地为伸展的γ亚基包围。关键词     

G—蛋白异三聚体（G—protein heterotrimer）的晶体结构

继１９９４年Ｓｉｇｌｅｒ－Ｈａｍｍ和Ｓｐｒａｎｇ－Ｇｉｌｍａｎ实验室报道Ｇｉα１的晶体结构之后,１９９５年１２月和１９９６年１月这两个实验室又相继报道了Ｇ－蛋白异三聚体（ＧαＧＤＰ）βγ和Ｇβγ二聚体的晶体结构,这些研究结果表明Ｇ－蛋白复合物象一台由操纵杆（受体）,开关（Ｇα）和螺旋浆（Ｇβγ）组成的信号转导纳米机器,并揭示了α和β亚基间可能存两种不同的功能界面,β和γ亚基间,α和γ的相互作用,以     

丝瓜的三聚体G蛋白的初步研究

根据拟南芥（ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｈｌｉａｎａ）ＧＰＡ１的保守区段Ａ设计一对特异引物（５′ｃｔｇｇｇｇａａｔｃｔｇｇａａａａｔｃ３′,５′ｃａｃａｇｃｔｇｔａｃａｃｃｔｃａａａｃ３′）通过ＰＣＲ从丝瓜核基因组中扩增植物的三聚体Ｇ蛋白α亚基编码基因,获得了２个片段（ＬＦＧ１,ＬＦＧ２）,并已克隆和测序（已在ＥＭＢＬ数据库中登记,登记号为：ｙ１５２７０,ｙ１５２７１）．序列分析表明ＬＦＧ１和ＬＦＧ２分别由１５１５ｂｐ和７３２ｂｐ构成,都含有三聚体Ｇ蛋白α亚基编码基因的保守区段Ａ,但也都含有内含子．根据片段的大小及ＰＣＲ的特性,ＬＦＧ１可能是丝瓜三聚体Ｇ蛋白α亚基编码基因上的片段．     

高,低蛋白含量的大豆种子贮藏蛋白积累的比较研究

利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及电子显微镜等技术比较分析和观察了两个大豆品种（Ｇｌｙｃｉｎｅ ｍ ａｘ（Ｌ．） Ｍｅｒｒ．）种子贮藏蛋白积累的差异。结果表明,在子叶发育过程中,蛋白含量高（４５％ ）的“公交８０５９－３”比蛋白含量低（３５％ ）的“ＧＤ－１５１５”蛋白含量高,且增长速率较快;蛋白质及７Ｓ和１１Ｓ亚基积累的时期较早,尤其是７Ｓ的β亚基。电镜观察表明“公交８０５９－３”蛋白质在液泡中的积累,前期与“ＧＤ１５１５”相似,中期以后的液泡中,蛋白体占整个细胞的比例均高于“ＧＤ１５１５”。这表明：大豆蛋白含量的差异有其生化及结构上的基础     

嗜热蓝藻优雅粘囊藻藻胆体的特性和别藻蓝蛋白的亚基组成

研究了优雅粘囊藻藻胆体（ＰＢＳ）的特性。从聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）、吸收光谱和二阶导数图谱可证明,它的ＰＢＳ含有一种红色藻胆蛋白,两种Ｃ－藻蓝蛋白和三种别藻蓝蛋白。但是,用ＰＡＧＥ和羟基磷灰石柱层析分离和纯化所得藻胆蛋白,一般仅得到一种Ｃ－ＰＣ和一种亚基组成特殊的别藻蓝蛋白ＡＰＣ。这种ＡＰＣ吸收光谱和荧光发射相同于已报告的ＡＦＣ６６０ｎｍ。但是它的亚基组成是（αα′ββ′）２而不是（α′α２β２β′）Ｌｃ１０或（αβ）３。     

干旱对小麦幼苗诱导蛋白表达与某些生理特性的初步探讨

试验以－１．２ＭＰａＰＥＧ６０００处理动小麦种子（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｌｉｖｕｍＬ．）．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱分析表明,水分胁迫诱导幼芽及整株均产生４８．４ｋＤ、４１．５ｋＤ二个蛋白质亚基。在幼根中未出现以上二个蛋白亚基。胁迫４８ｈ后,根干重／芽干重比呈上升趋势,幼芽细胞膜楔对透性增大和相对含水量降幅度均大于幼根。     

毒蕈碱样乙酰胆碱受体及其信号转导

毒蕈碱样乙酰胆碱受体（MAChRs）是G蛋白偶联受体（GPCRs）超家族中的一员,具有该家族特性的结构和信号转导方式。GTP结合蛋白（Gproteins）是一类具有GTP酶活性的蛋白质,由α、β、γ三个亚基构成。其中α亚基结合GDP或GTP,分别代表G蛋白的非活化和活化状态。M受体与Gi/Go或Gq／11间的作用机制仍在探讨中,但基本过程与Gs介导的信号转导模式相似。激动剂持续作用后,G蛋白偶联受体激酶和阻滞蛋白导受体脱敏和内吞。     

糖皮质激素对大鼠下丘脑组织G蛋白α亚基的调节作用

糖皮质激素影响下丘脑－垂体－肾上腺轴（ＨＰＡＡ）的神经内分泌功能,尤其对下丘脑的影响更为重要,下丘脑神经激素的合成和分泌与Ｇ蛋白偶联的信号传导系统有关。用蛋白印迹技术研究了糖皮质激素对大鼠下丘脑几种Ｇ蛋白α亚基表达的调节作用,结果表明,糖皮质激素对Ｇαｓ１,Ｇαｓ２,Ｇαｉ和Ｇαｑ的影响均为下调作用,但下降的幅度不同,分别为１４．３,１５．６６,１４．６１和１２．３７％糖皮质激素对Ｇαｏ表达无明显     

细胞周期蛋白

Ｐ３４＾ｃｄｃ２激酶在真核生物细胞周期的调节中起着核心作用,它由催化亚基与调节亚基共同组成,催亚基主要有两种亚型,分别在细胞周期的不同时相发挥作用,调节亚基称为细胞周期蛋白,亦不止一种,可相应地分为Ｇ１期细胞周期蛋白与Ｍ期细胞周期蛋白。     

嗜热蓝藻优雅粘囊藻藻胆体的特性和别藻蓝蛋白的亚基组成

研究了优雅粘囊藻藻胆体的特性。从聚丙烯酰胺凝胶电泳、吸收光谱和二阶导数图谱可证明,它的ＰＢＳ含有一种红色藻胆蛋,两种Ｃ－藻蓝蛋白和三种别藻蓝蛋白。但是,用ＰＡＧＥ和羟基磷灰石柱层析分离和纯化所得藻胆蛋白,一般仅得到一种Ｃ－ＰＣ和一种亚基组成特殊的别藻蓝蛋白ＡＰＣ。这种ＡＰＣ吸收光谱和荧光发射相同于已报告的ＡＰＣ６６０ｎｍ。但是它的亚基组成是（αα＇ββ＇）２而不是（α＇α２β２β＇）Ｌｃ＾１０或α     

G蛋白偶联受体的细胞增殖信息传递途径

本文主要综述Ｇ蛋白各α亚基、βγ二聚体,Ｇ蛋白偶联受体和丝裂原激活的蛋白激酶在细胞增殖和肿瘤发生过程中的作用;以及从ＧＰＣＲｓ到ＭＡＰＫ的信号传导途径和途径中的一些癌基因产物;最后说明从ＧＰＣＲｓ至ＪＮＫ的一种新的细胞增殖信号传导途径。     

细胞凋亡与肿瘤

一、细胞凋亡的机制 （一）凋亡过程中关键的生化事件 （二）Bcl-2家族蛋白 （三）凋亡抑制蛋白家族（IAPs） （四）p53 （五）相关证据 （六）基因敲除和转基因鼠体内实验结果 二、抗癌药物能诱导细胞凋亡,也能直接杀伤细胞 （一）直接毒性作用与诱导细胞凋亡的应激反应 （二）治疗指数与正常细胞的凋亡     

含锰固氮酶组分Ⅰ蛋白的纯化和特性

棕色固氮菌（Azotobacter vinelandii Lipmann)突变种UW3能在无Mo的无氨培养基中固氮生长,低浓度的Mn对UW3突变种生长有促进作用,从在Mn中生长的UW3菌体中分离得到的部分纯固氮酶组分Ⅰ蛋白含量有Mn和Fe原子（Fe/Mo/Mn为10．41：0．19：1．00）并有OP MoFe蛋白一半的还原乙炔和质子的活性。这种蛋白的吸收光谱和圆二色谱与MoFe蛋白存在明显的差异,含Mn蛋白的亚基分子量都与MoFe蛋白的α亚基相近。初步结果表明,这种含Mn蛋白可胡是一种固氮酶组分Ⅰ蛋白。     

佛波酯对NIH3T3细胞整合蛋白α_5亚基表达的影响

１００ｎｍｏｌ／Ｌ佛波酯（１２－Ｏ－ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌｐｈｏｂｏｌ１３－ａｃｅｔａｔｅ,ＴＰＡ）作用于ＮＩＨ３Ｔ３细胞２４ｈ,流式细胞仪检测到细胞表面整合蛋白α５亚基含量增加５２．３％．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法测定结果亦表明整合蛋白α５亚基ｍＲＮＡ量增加,于２ｈ时达到高峰,为对照的４．１４倍．蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ,ＰＫＣ）的活性增加趋势与之基本一致．运用ＰＫＣ的抑制剂鞘氨醇（ｓｐｈｉｎｇｏ－ｓｉｎｅ）和酷氨酸激酶（ｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅ,ＴＫ）抑制剂４,５,７－三羟基异黄酮（ｇｅｎｅｓｔｅｉｎ）进一步研究,发现两者均可抑制佛波酯对整合蛋白α５亚基表达的上调作用．提示佛波酯对ＮＩＨ３Ｔ３细胞整合蛋白α５亚基表达的调控与ＰＫＣ和ＴＫ均有关．     

不同品种花生种子蛋白质的电泳分析

对中国花生（ＡｒａｃｈｉｓｈｙｐｏｇａｅａＬ．）５种不同类型的４６个栽培品种的种子蛋白质进行电泳分析。ＳＤＳＰＡＧＥ和ＩＥＦＳＤＳＰＡＧＥ（双向电泳）的结果显示,不同品种的花生种子蛋白多肽组成存在４种类型。与初步纯化的花生球蛋白及伴花生球蛋白的ＳＤＳＰＡＧＥ结果比较,花生种子蛋白组成的主要差异在于花生球蛋白亚基组成的不同,其中类型Ⅰ花生球蛋白主要含有４１ｋＤ、３８５ｋＤ和２个１８ｋＤ亚基,类型Ⅱ主要含４１ｋＤ、３８５ｋＤ、３７５ｋＤ和３个１８ｋＤ亚基,类型Ⅲ主要含４１ｋＤ、３８．５ｋＤ、３６．５ｋＤ和３个１８ｋＤ亚基,类型Ⅳ主要含４１ｋＤ、３８．５ｋＤ、３７５ｋＤ、３６．５ｋＤ和３个１８ｋＤ亚基。不同品种的伴花生球蛋白多肽组成基本一致。对不同类型８个品种种子蛋白的氨基酸组成进行测定,发现类型Ⅰ的含硫氨基酸含量较高。     

G—蛋白及其在植物信号转导中的作用

ＧＴＰ结合蛋白（ＧＴＰ－ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ）在生物体内有数种类型,包括转录因子、微管蛋白和信号转导蛋白,最后一种已成为当今研究的热点。结合ＧＴＰ的调节蛋白（ＧＴＰ－ｂｉｎｄｉｎｇｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｐｒｏｔｅｉｎｓ,简称Ｇ－蛋白）于７０年代...     

Gi和Go的同时纯化及其性质研究

经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｃｅｌ、ＵｌｔｒｏｇｅｌＡｃＡ ３４、Ｈｅｐｔｙｌａｍ ｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ 和Ｂｉｏ Ｓｃａｌｅ Ｑ２等四步层析从牛脑皮层膜中同时纯化出抑制型Ｇ 蛋白（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ, Ｇｉ）和Ｏ型Ｇ蛋白（ｏｔｈｅｒ Ｇ ｐｒｏ－ｔｅｉｎ, Ｇｏ）．对Ｇｏ 的选择性激活使Ｇｉ 和Ｇｏ 的分离大为简化,并使二者的大量制备成为可能．纯化的Ｇ 蛋白的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ银染显示单一蛋白带,其结合［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ的活性分别提高６８倍和１２４倍．用圆二色光谱法（ＣＤ）测量了纯化的Ｇ蛋白的二级结构．     

M受体亚型与G蛋白

５种不同的Ｍ受体亚型的基因已被克隆，用免疫沉淀法观察了它们在体内的分布；Ｇ蛋白调节许多膜受体介导的细胞内功能，在牛的中枢神经系统中发现至少有５种独立的Ｇ蛋白，且每种Ｇ蛋白都由３个亚基构成。实验表明，５种Ｍ受体亚型通过不同的Ｇ蛋白，可同时与ｃＡＭＰ改变和ＰＩ翻转发生偶联作用。     

Rho蛋白

常见的异源三聚体ＧＴＰ结合蛋白 ,是通过其 (亚基在无活性的ＧＤＰ结合状态和有活性的ＧＴＰ结合状态之间的转换来完成对膜相关受体传来的信号反应 ,而与之同样起“分子开关”作用的另一类小分子Ｇ蛋白 (ｓｍａｌｌＧｐｒｏｔｅｉｎ ,又称ＧＴＰａｓｅ ,即ＧＴＰ酶 ) ,它们的激活不是直接通过与激动型的Ｇ蛋白偶联受体 (Ｇｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＧＰＣＲ)相互作用而调节其活性 ,而是通过鸟嘌呤核苷交换因子(ｇｕａｎｉｎｅｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｅｘｃｈａｎｇｅｆａｃｔｏｒ,ＧＥＦ)来控制这类小分子Ｇ蛋白的ＧＴ…