蛋白质定点PEG化研究：97Cys－IFH－γ的巯基专—PEG修饰

蛋白质定点ＰＥＧ化研究：９７Ｃｙｓ－ＩＦＨ－γ的巯基专—ＰＥＧ修饰唐微,常远,徐　飞,郑仲承,刘新垣（中国科学院上海生物化学研究所,２０００３１）关键词人干扰素－γ;定点修饰;半胱氨酸目前进行的ＰＥＧ化反应,多是针对蛋白质肽链上自由末端氨基进行的,由...     

白细胞介素—2的PEG化

用自制的氨基ＰＥＧ化试剂ｒＩＬ－２进行化学修饰,研究了试剂浓度,溶液ｐＨ,反应时间间等与ＰＥＧ－ｒＩＬ－２产率及ＩＬ－２活性保持之间的关系,建立了一套获得稳定修饰度的ＰＥＧ－ｒＩＬ－２的方法,研究发现,反应时间跟修饰度关系不大;溶液ｐＨ对修饰度有一定的影响,中性ｐＨ以上反应都可进行;而试剂浓度直接决定修饰度的高低,过量越多,修饰度越高,而生物活性保留也越低;但低度修饰,对活性几乎没有影响,可保留活     

人淋巴细胞中发现2′—5′—三腺苷酸受体

通过合成的^3H-PPPA2′P5′A2′P5′A（2′－5′P3A3）与人淋巴细胞进行结合反应,结果表明：人淋巴细胞质膜存在着2′－5′P3A3受体。又通过用ATP、UTP与^3H-2′-5′P3A3竞争抑制实验表明,^3H－2′－5′P3A3与淋巴细胞膜受体的结合为特异性结构,结合率受^3H－2′－5′P3A3浓度、pH等因素影响。     

干扰素—α和—γ对灌流假孕大鼠卵巢黄体的作用

利用假孕大鼠卵巢体外灌流方法研究了干扰素－α和－γ对黄体分泌孕酮和前列腺素Ｆ－２α作用,并测定灌流后卵巢中３β－羟甾脱氢酶和２０α－羟甾脱氢酶的活性。观察灌汉假孕第８天大鼠卵巢结果表明,三种不同剂量的干扰素α－和－γ均能抑制孕酮的分泌,但干扰素－α的抑制作用仅在短时间内发生,干扰素－α和－γ均有抑制ｈＣＧ诱导孕酮分泌的作用,但剂量和作用时间差异。     

长链非编码RNA——抗病毒天然免疫应答的新兴调控因子

长链非编码RNA(long non-coding RNAs, lncRNAs)是长度超过200nt的非编码RNA分子的总称。作为一类重要的基因调控因子,lncRNAs在表观遗传学、转录及转录后等多个水平调控靶基因的表达。近年来的研究表明,许多lncRNAs可被病毒或干扰素(interferon, IFN)诱导表达,并作为调控因子在IFN介导的抗病毒天然免疫应答中调节抗病毒相关基因的表达。本文重点阐述了lncRNAs在IFN介导的抗病毒天然免疫应答中的调控作用,尤其是对干扰素刺激基因(interferon-stimulated genes, ISGs)转录的调控作用,并归纳了lncRNAs、IFN和ISGs形成的调控网络,以期为从事lncRNAs调控IFN介导的抗病毒天然免疫应答机制研究的相关科研人员提供参考。     

干扰素治疗丙型肝炎—病例对照研究

应用兰州生物制品研究所生产之精制人白细胞干扰素治疗丙型肝炎的病例对照研究结果表明,治疗组５５．６％（１５／２７例）呈完全反应,４４．４％（１２／２７例）呈部分反应,对照组２２．２％（６／２７例）完全反应,７４．１％（２０／２７例）部分反应,１例无反应。治疗组ＨＣＶＲＮＡ转阴率（５５．６％）明显高于对照组（２２．２％）,Ｐ＜０．０５。     

人β干扰素重组质粒导入CHO—dhfr^—细胞

采用磷酸钙共沉淀技术,将人β干扰素编码区基因片段与pSV_2-dhfr载体质粒SV40早期启动子下游60碱基对(bp)处重组的pSVEHβ_1质粒导入中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷型株,简称CHO-dhfr~-细胞。共转化后,于选择培养基中长出的265个细胞克隆中随机挑出13株细胞克隆进行表达水平检测,其中7株细胞有表达,表达阳性细胞克隆株占54％,共转化率为1.33×10~(-4)。     

a——干扰素治疗慢性病毒性肝炎的现状和展望

长期以来ａ－干扰素治疗慢性乙型和丙型病毒型肝炎是有效的，临床治疗中已得到承认。但大剂量发现副作用明显，口含天然人ａ－干扰素无副作用，如果能替代ａ－干扰素并联合其它药物治疗，对病毒性疾病和恶性肿瘤将提供新的治疗方法。     

α—干扰素对中枢神经系统的作用

本文综述了免疫调节因子α－干扰素对中枢神经系统（ＣＮＳ）的作用。ＩＦＮα的中枢作用不仅改变了神经系统是免疫特免性的认识,而且打破了对ＩＦＮα功能的传统认识,同时提出了ＩＦＮα作用新的机制。     

重组人干扰素—β的中试研究

从大肠杆菌中大规模纯化新型干扰素β(IFN-βser17).首先建立IFN-βser17发酵和纯化工艺,连续大量纯化三批,并对纯化终产品进行全面鉴定.建立了稳定的发酵和纯化工艺流程,中试三批菌产量平均为4.33g/L,IFNβser17的表达量平均为20%,经破碎、粗提、精制后IFN-βser17的比活达2×107IU/mg以上,纯度超过96%,其他检定项目也均符合规程要求.     

中国人r——干扰素cDNA在大肠杆菌中的高效表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术从中国人淋巴细胞ｍＲＮＡ反转录产物中克隆了ＩＦＮ－ｒ－ｃＤＮＡ,序列分析证实了分子进化规律对ＩＦＮ－ｒｃＤＮＡ序列存在多态性的推论。在此基础上应用ＤＮＡ重组技术,将去信号肽中国人ＩＦＮ－ｒ ｃＤＮＡ克隆到原核表达质粒ｐＢＶ２２０ ＰＲＰＬ启动子下游,转化大肠杆菌ＤＨ５ａ,通过温度诱导表达,成功地在大肠杆菌中稳定、高效地表达了中国人ＩＦＮ－ｒ ｃＤＮＡ,其表达水平占全菌可溶性总     

γ—干扰素对内皮素促平滑肌细胞增殖效应的影响

血管内皮细胞分泌的内皮素(ET)不仅是强烈的血管收缩剂,而且具有强烈的促血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的效应。近年来发现许多细胞因子除参与免疫调节外,还参与心血管功能的调节。γ-干扰素(IFN-γ)具有抑制VSMC增殖,调节细胞分化、增生的作用。本工作在培养的自发性高血庄大鼠(SHR)和对照WKY大鼠的VSMC上,观察了IFN-γ和ET对VSMC增殖和钙含量的影响,以探讨IFN-γ和ET对VSMC增殖的相互调控关系。     

γ—干扰素对人大肠癌细胞系的生长抑制作用和对细胞周期的影响

用人基因重组γ干扰素与三株人大肠癌细胞系LoVo、HR 8348、和HCI培养后,细胞呈现抑制性生长,细胞在细胞周期中的分布也同时发生改变,表现为G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高。细胞生长的抑制和细胞周期的改变随γ干扰素剂量增大(10—10~5U/ml)及作用时间延长(24—96小时)而增强。细胞在S期的堆积是细胞生长抑制的原因之一。