肾上腺髓质素对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的调制

应用全细胞膜片钳技术研究了肾上腺髓质素 (ADM )对豚鼠心室肌细胞L 型钙电流 (ICa ,L)的影响及其信号传导机制。结果发现 :ADM ( 1～ 10 0nmol/L)浓度依赖性抑制ICa,L(P <0 0 5 ) ,并可被ADM特异受体阻断剂ADM2 2 52 ( 10 0nmol/L)完全阻断。用蛋白激酶A特异拮抗剂H 89( 10 μmol/L)预处理 ,对ADM抑制ICa ,L的作用无影响。但用蛋白激酶C (PKC)特异性拮抗剂PKC19 36 预处理 ,可完全阻断ADM的抑制效应 ;而PKC特异性激动剂PMA则可以模仿ADM的抑制效应 (P <0 0 5 )。上述结果提示 :ADM作用于特异性ADM受体可浓度依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞ICa ,L,而此作用可能是PKC介导的。     

沉默AEG-1基因逆转乳腺癌MCF-7/ADM细胞耐药性

本研究旨在分析星形细胞上调基因1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)对乳腺癌MCF-7/ADM细胞化疗药物耐药性的影响,并探讨其作用机制。将MCF-7/ADM细胞在含1.0 mg/L阿霉素(adriamycin,ADM)的培养液中培养以维持细胞的耐药性;应用shRNA技术沉默乳腺癌MCF-7/ADM细胞中AEG-1基因表达;采用MTT比色法检测ADM对MCF-7/ADM的细胞耐毒作用,据以计算ADM的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot方法检测AEG-1、p53和多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)蛋白的表达水平以及Akt、MDM2和Bad的磷酸化水平。结果显示,乳腺癌MCF-7/ADM细胞的AEG-1蛋白水平显著高于MCF-7细胞(P0.05),经shRNA干扰后AEG-1蛋白水平显著降低(P0.05);沉默AEG-1基因能显著降低ADM对MCF-7/ADM细胞的IC50(P0.05),促进MCF-7/ADM细胞凋亡(P0.05),并增强ADM对MCF-7/ADM细胞的促凋亡作用,抑制Akt、MDM2和Bad的磷酸化(P0.05),促进p53蛋白表达(P0.05),降低MDR1蛋白表达水平(P0.05)。结果表明,沉默AEG-1基因可通过促进MCF-7/ADM细胞凋亡和下调MDR1蛋白表达,以逆转MCF-7/ADM细胞对ADM的耐药性。     

新发现的哺乳动物心血管肾脏调节因子--肾上腺髓质素2

肾上腺髓质素(adrenomedullin ,ADM)是一种多功能的心血管活性肽,具有强大的舒张血管、降低血压、利钠利尿和抑制血管平滑肌细胞增殖等广泛的生物学效应,在心血管疾病中具有重要的保护作用。最近,YoshioTakei等从河豚的cDNA文库中分离出5种编码ADM样多肽的基因,将其命名为ADM1～5 ,并进一步将ADM1/ 4 / 5分为一组,ADM2 / 3分为另一组。并且发现河豚ADM1与哺乳动物的ADM是直向同源物(ortholog ,即指如把一个基因比作一个个体,那些起源于同一祖先,在不同生物体中行使同一功能的基因)。他们利用河豚肽的序列信息分析鉴定哺乳动物的A…     

日本从美国引进生产维生素B_(12)的工程微生物技术

日本石油公司从美国 Genex 公司引进利用基因操作生产维生素 B_(12)的生产技术。日本石油公司决定将本公司生产维生素 B_(12)的技术搁置不用,正式应用从美国 Genex 公司引进的生产维实际生素 B_(12)的生产技术。 1986年秋,Genex 公司从巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)中克隆化与生物合成维生素 B_(12)有关的酶的基因(见 Journal of Bacteriology,167卷623～630页)。先制作很多不能生物合成维生素 B_(12)的巨大芽孢杆菌突变株;然后,将用散弹法形成的维生素 B_(12)生     

肾上腺髓质素2的降压作用及其机制

目的:研究肾上腺髓质素2(ADM2)拮抗血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)发挥舒张血管的作用及机制。方法:将18只180~200 g雄性SD大鼠随机分为3组(n=6):对照组、AngⅡ(150 ng/(kg·min))组和AngⅡ(150 ng/(kg·min))+ADM2(500 ng/(kg·h))组,采用皮下埋植微量渗透泵的方法给药。2周后颈动脉插管法测量大鼠血压,测定血浆一氧化氮(NO)含量和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性。DHE染色法检测大鼠动脉壁活性氧产生。制备大鼠离体血管环,观察ADM2的舒血管作用。培养人脐静脉内皮细胞系EA.hy 926,用DCFH-DA荧光探针检测AngⅡ和ADM2对血管内皮细胞活性氧释放的影响。结果:与AngⅡ组相比,ADM2显著降低了大鼠血压,血浆中eNOS活性提高、NO含量增加,血管壁活性氧产生减少。ADM2呈浓度依赖性和内皮依赖性舒张血管环,并明显抑制了AngⅡ引起的血管内皮细胞活性氧产生。结论:ADM2可能通过拮抗AngⅡ诱导的血管内皮氧化应激效应,改善内皮功能,发挥舒张血管、降低血压的作用。     

资讯动态

正美国ADM公司和杜邦公司联合推出乙醇生产用酶美国ADM公司和杜邦工业生物科学公司于2018年6月22日宣布,合作开发、生产和销售谷物基乙醇装置操作所用的纤维素酶。纤维素酶有助于玉米粒纤维水解,玉米粒纤维主要由纤维素和半纤维素碳水化合物组成。一旦纤维分解,更多的糖就可以释放,可经发酵制备乙醇。由于玉米粒纤维是低价值副产品物流的一     

DNX宣布微注射专利权引起不满

转基因动物行业正在兴起。然而,最近一家小型私营公司却给这一行业的诸公司带来震动。DNX公司(Princeton,NJ)宣布对有关微注射的一项新专利的独家应用权。该公司采用这项技术将外源基因插人到哺乳动物胚胎中。该公司宣称,别的公司在应用微注射技术制造转基因动物时,需提前获得允许。到目前为止,Du Pont公司(Wilmingto,DE)拥有唯一打入市场的转基因动物,即所谓“哈佛鼠”,这一转基因鼠被应用于癌症的研究。然而,至少有八家生物技术公司——更不用说那些牲畜培育公司和毒理学团体——也在发展微注射技术,以便生产畜病模型、生物     

Hybridon对反义技术的开发

反义产品是热门领域,Hybridon Inc.(Worcester.MA)则为该领域的最新一员.公司由Paul Zamecnik组建,拥有抗艾滋病反义技术专利,一种抗艾滋病化合物(已证实离体活性)的专利以及这些新药的开发技术的专利, 总裁Nigel Webb认为,在就该技术的开发而言,公司的明显优势在于拥有生产一组10～30单位长的寡聚反义因子的专有技术.产物半衰期达数日,其成本之低,即使用于     

睾酮、氧化低密度脂蛋白对内皮细胞分泌肾上腺髓质素的影响

目的: 探讨睾酮、氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)对内皮细胞株ECV-304合成分泌肾上腺髓质素(ADM)的影响.方法: 在细胞培养液中分别加入不同浓度的睾酮、OX-LDL及睾酮和OX-LDL培养24 h,放射免疫法检测培养液上清及细胞内ADM的含量.结果: OX-LDL能明显刺激内皮细胞合成、分泌ADM;睾酮呈剂量依赖方式刺激内皮细胞合成、分泌ADM,但睾酮与OX-LDL合用对内皮细胞合成、分泌ADM的影响减弱.结论: 睾酮可能对OX-LDL损伤内皮细胞具有保护作用.     

外源性Apelin-13 对心力衰竭大鼠血浆血管紧张素Ⅱ 和肾上腺髓质素的影响

目的:研究给予外源性Apelin-13治疗对血流动力学、血浆血管紧张素Ⅱ(Angiotensin-Ⅱ,AngⅡ)和肾上腺髓质素(Adrenomedulin,ADM)水平的影响。方法:将50只大鼠随机分为3组:心衰组(n=20)、治疗组(n=20)和正常对照组(n=10),阿霉素(ADR)腹腔注射建立大鼠心衰模型,治疗组给药外源性Apelin-13治疗,检测大鼠血浆AngⅡ和ADM水平(ELISA法)以及血流动力学的水平。结果:心衰组和治疗组血浆AngⅡ和ADM水平比正常对照组增高,但治疗组血浆AngⅡ和ADM水平比心衰组明显降低,治疗组左心室内压最大升降速度(LV±dp/dtmax)、左室最大收缩压(LVESP)比心衰组增高,左室舒张末期压(LVEDP)比心衰组低(P均<0.05)。结论:外源性apelin-13抑制体内的AngⅡ和ADM水平可能对ADR诱导的大鼠心衰有保护作用。     

侧脑室注射肾上腺髓质素增加大鼠心血管相关核团中c-fos的表达并激活脑内一氧化氮神经元

本研究利用Fos蛋白和一氧化氮合酶(nNOS)双重免疫组化方法,观察侧腑脑室注射肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)对大鼠心血管相关核中c-fos表达及一氧化氮神经元的影响,以探讨ADM在中枢的作用部位并研究其在中枢的作用是否有NO神经元参与。侧脑室注射ADM(1nmol／kg,3nmol／kg)诱发脑干的孤束核、最后区、蓝斑核、臂旁核和外侧巨细胞旁核,下丘脑的室旁核、视上核才腹内侧核以及前脑的中央杏仁核和外侧缰核等多个部位的心血管中枢出现大量Fos样免疫反应神经元。侧脑室注射ADM(3nmol／kg),引起脑干的孤束核、外侧巨细胞旁核,下丘脑的室旁核、视上核内的Fos-nNOS双标神经元增加;ADM(1nmol／kg)亦可引起室旁核、视上核内的Fos-nNOS双标神经元增加,而对孤束核、外侧巨细胞旁核内的Fos-nNOS双标神经元无影响。降钙素基因相关肽(calcitonin gene—related peptide,CGRP)受体拈抗剂CGRP8-37(30nmol／kg)可明显减弱此效应。以上结果表明,ADM可兴奋脑内多个心血管相关核闭的神经元并激活室旁核、视上核、孤束核及外侧巨细胞核内一氧化氮神经元,此效应可能部分山CGRP受体介导。     

血管活性物质与高血压的相关性研究

目的:研究尾加压素Ⅱ(Urotensin-Ⅱ,U-Ⅱ)、内皮素(Endocilin,ET)、肾上腺素质素(Adrenomedullin,ADM)在高血压患者血浆中含量的变化并探讨其临床意义。方法:采用放射免疫法测定40例正常人和120例原发性高血压(所有患者既往未服用过降压药物)患者血浆中尾加压素、内皮素、肾上腺素质素的血浆含量。结果:高血压患者血浆中U-Ⅱ、ET及ADM含量明显高于正常对照组(3.275±1.257 pmol/L vs 1.802±0.639 pmol/L,P0.01),(65.884±10.882 vs 51.831±6.488 pmol/L),(38.467±10.496 vs21.319±5.646 pmol/L)。患者血浆中U-Ⅱ水平与收缩压(r=0.371,P0.01)及舒张压(r=0.262,P0.01)水平呈正相关。血浆中U-Ⅱ水平与ET水平无显著相关性(rET=0.08,P0.05),血浆中U-Ⅱ水平与ADM水平正相关(rADM=0.253,P0.05)。结论:多种血管活性物质共同参与高血压的病理生理过程。U-Ⅱ、ET及ADM的含量变化可能作为高血压严重程度的指标。     

肾上腺髓质素降低培养海马神经元胞内游离钙离子浓度

经荧光探针Fluo 3-AM标记细胞内游离钙后,用激光共聚焦显微镜检测肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)对原代培养大鼠海马神经元内游离钙浓度([Ca^2 ]1)的影响。实验结果如下：(1)ADM(0．01-1．0μmol／L)浓度依赖性地降低细胞内钙浓度。(2)降钙素基因相关肽受体阻断剂(calcitonin gene-related peptide,CGRP8-37)预处理可部分抑制ADM的效应。(3)ADM可显著抑制高钾引起的[Ca^2 ]1增加。(4)ADM可显著抑制三磷酸肌醇(inositol 1,4,5-trisphosphate,IP3)引起的内钙释放,而对兰尼定(ryanodine)引起的内钙释放无显著影响。以上结果提示,ADM降低培养海马神经元内游离钙浓度,此作用与其抑制IP,引起的内钙释放有关,ADM对静息状态下的Ca^2 内流无影响,但可显著抑制高钾引起的Ca^2 内流,CGRP受体介导了ADM的上述效应。     

川芎嗪与β-榄香烯联合应用对K562/ADM细胞的生长抑制作用

目的：探讨川芎嗪与β－榄香烯联合应用对K562/ADM的生长抑制作用。方法：以耐阿霉素细胞株K562／ADM为实验模型。结果：1．两者对K562／ADM及K562细胞的IC50接近,即耐药细胞K562／ADM对两种中药制剂不具有耐药性。2．非细胞毒性剂量的川芎嗪（TMP350μg/ml)及β－榄香精（β－elemene 4.0μg/ml)可显著降低ADM对K562／ADM细胞的IC50（P＜0．01）,提高细胞对ADM的敏感性,抗药性逆转分别为2．03倍及2．18倍。3．进一步将上述两种药物联合应用,发现其对ADM的抗药性逆转为4．65倍,明显高于二者单独应用,而且也高于两者单独应用之和,并且其对升高该细胞内ADM的浓度也具有协同作用。结论：川芭嗪与β－榄香烯联合应用能够抑制K562／ADM的的生长,并且具有协同性。     

简讯

△柯达公司(Eastman Kodak)和引警公司(Engenics)将联合研究营养生物化学。 △DNA技术公司(DNA Plant Technology)和Nutra-sweet公司、孟山都公司将开发新的植物种类以生产更多的天然甜味物质。     

PIC-BE对K_(562)/ADM多药耐药细胞mdr-1和bcl-2基因表达的影响

本文以多药耐药(MDR)细胞株K_(562)/ADM作为实验模型,研究了β-榄香烯吗素(PIC-BE)对该细胞中mdr-1、bcl-2和bax基因及其编码蛋白(P-gp、Bcl-2和Bax)表达的影响。结果显示,PIC-BE可显著抑制K_(562)/ADM细胞中mdr-1、bcl-2及P-gp和Bcl-2的表达,并在一定的范围内呈现对浓度和时间的依赖性。相同条件下,PIC-BE对该细胞中Bax的表达虽有所促进,但统计学上无显著差异,提示PIC-BE对K_(562)/ADM细胞MDR的逆转作用可能是通过其直接或间接地影响到该细胞mdr-1、bcl-2及P-gp和Bcl-2的表达或功能而实现。     

帝斯曼公司与罗盖特公司共同建设生物琥珀酸中试装置

2008年1月,荷兰帝斯曼(DSM)公司和法国罗盖特(Roquette)公司宣布共同开发发酵法可再生琥珀酸生产技术并实现商业化生产.     

美国Mycogen公司在日本寻求开发微生物农药的合伙人

美国 Mycogen 公司(加利福尼亚州圣迭戈)正在日本寻找开发微生物除草剂和重组微生物杀虫剂的合伙人并开始销售。计划是提供该公司的所有技术的独占权,并开发适应包括日本在内的亚洲地区的微生物农药。介绍日本企业和 Mycogen 公司合作的是三菱商事公司。Mycogen 公司是一个风险企业,它探索有用微生物和来自微生物的生理活性物质,设法将它们用于农业。它拥有100多株杀虫谱不同的微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌(Bacillus th-uringiensis,Bt),并从60株中克隆化了毒素基因。它发现了对马铃薯甲虫有效的苏云金芽     

阿霉素抗4T1乳腺癌荷瘤小鼠的免疫调控机制

为了探讨阿霉素 (Adriamycin,ADM) 对4T1乳腺癌荷瘤鼠BALB/c的免疫调节作用,采用定量蛋白质组学串联质量标签 (TMT) 标记技术检测ADM对4T1乳腺癌差异蛋白的影响,利用多重数据库对差异蛋白进行生物信息学分析。根据蛋白质组学结果,寻找差异蛋白中与免疫调节功能相关的靶点,通过酶联免疫吸附测定 (Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) 观察ADM对乳腺癌组织中Th1细胞 (Helper T cells 1,Th1) 和Th2细胞 (Helper T cells 2,Th2) 的影响;通过流式细胞术分析ADM对CD4+ T细胞、CD8+ T细胞和调节性T细胞 (Regulatory T cells,Tregs) 的影响;HE染色观察ADM对4T1乳腺癌荷瘤鼠胸腺的改变。ADM上调170种差异蛋白,下调58种差异蛋白。有73种差异蛋白与免疫调控过程相关,KEGG (Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG) 富集于细胞因子及受体相关的重要蛋白通路、白介素17 (Interleukin 17,IL-17) 通路和癌症的转录调控通路。与免疫功能相关的差异蛋白与CD4+ T细胞、CD8+ T细胞和Tregs细胞的功能有关,而这些细胞的分型影响乳腺癌的预后。ADM极显著升高白介素2 (Interleukin 2,IL-2),CD4+ T细胞、CD8+ T淋巴细胞含量 (P<0.01),显著降低Tregs细胞含量 (P<0.05)。ADM抗乳腺癌的免疫调节蛋白有Ighm、Igkc、S100A8、S100A9和Tmsb4x。     

Syntro公司分出新的生物高聚物公司

作为始于今年六月的重建计划的一部分,Syntro决定分出一新公司,新公司将致力于为特殊药品和高性能材料市场研制独特的生物高聚物。Syntro将向新公司发放开发其特有的蛋白质遗传工程技术的许可,并为新公司(即蛋白质聚合物技术公司PPT)提供资助。起初,PPT将与主要药品公司签定合同,但最后,打算生产并市场销售自己的系列产品。目前,新公司暂时从Syntro租借实验室设备。