“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验替代材料筛选

通过实验证明,方便易得、便于保存的马铃薯块茎中含有大量的过氧化氢酶,替代动物肝脏进行"比较过氧化氢在不同条件下的分解"实验,可以减轻教师准备实验的工作量,提高实验课效率。     

肝脏研磨液的制备和保存

高中《生物》新版实验5“比较过氧化氢酶和Fe~(3 )的催化效率”采用新鲜猪肝研磨液中的过氧化氢酶。肝脏如果不新鲜,肝细胞内的过氧化氢酶等有机物,就会在腐生细菌的作用下分解,使过氧化氢酶失活,过氧化氢就不能分解成水和氧,致使实验失败。在常温下由于过氧化氢酶的寿命较短．实验时肝脏研磨液需     

探究温度对酶活性影响的实验设计与实施

"新陈代谢与酶"是高中生物学"新陈代谢"一章的一个课题.早在1986年,我校就组织学生通过实验探究酶及其作用特性.1996年7月,周湘老师曾在<生物学通报>发表一篇文章--"酶与代谢"一节的实验探究法教学,文章中提到对酶活性的影响因素的实验探究,本组教师曾先后尝试用唾液淀粉酶催化淀粉水解、过氧化氢酶催化H2O2分解来研究温度和pH对酶活性的影响,但实验效果均不是很理想.     

用鱼的肝胰脏做酶的实验

用鱼的肝胰脏做酶的实验刘建华（河北藁城市教育局教研室０５２１６０）本实验用鲫（鲤）鱼的肝胰脏提取的过氧化氢酶活性高,催化速度快,可大大缩短实验时间,实验现象对比鲜明。通过实验能充分证明酶是生物催化剂,具有高效性和专一性,酶是蛋白质,需在一定条件（如适...     

“比较过氧化氢在不同条件下的分解”探究实验的改进

现行人教版生物学必修1中的"比较过氧化氢在不同条件下的分解"实验存在以下缺陷:1在滴入新鲜的肝脏研磨液时,瞬时产生的大量泡沫容易伤到实验者并使燃烧的卫生香熄灭;2由于整个实验过程及装置都处于全敞开模式,气体漏泄、反应时间延迟等都易导致实验现象不明显。通过改进实验装置,解决了以上缺陷。     

利用自制简易分光光度计定量探究影响蛋白酶活性的元素

描述了一种定量研究酶活性的实验装置和方案。用蛋白酶分解乳蛋白的反应代替原教材中的肝脏研磨液分解过氧化氢的反应，结合自制简易分光光度计，使定量研究酶促反应变得更简单可靠。在比色皿中测量酶与底物混合物的透光度随反应时间的变化曲线，实现蛋白酶活性的定量实时观察；定量研究相同时间、不同温度下酶与底物混合物的透光度变化，描述和交流温度对蛋白酶活性的影响。此外，探讨了进一步降低实验仪器成本的方案，以利于更多的学校进行操作和实施。     

“探究pH对过氧化氢酶的活性影响”实验的改进和优化

采用肝脏、马铃薯、胡萝卜、香蕉等材料,利用U型气压计对"探究pH对过氧化氢酶活性影响"的实验设计进行部分改进和优化,比较几种材料中过氧化氢酶的活性,并探究不同材料中过氧化氢酶的最适pH值,实现了对课本实验的定量改进,对学生的创新性思维和探究能力的培养具有积极的意义。     

乙基纤维素微胶囊对过氧化氢酶固定化的研究

以乙基纤维素作膜材,用液中干燥法使过氧化氢酶微胶囊化。研究了微胶囊化操作条件对酶活性的影响。通过测定微胶囊化酶的释放曲线,证明微胶囊膜对过氧化氢酶具有较好的固定性能力。固定化酶用于催化底物过氧化氢分解,测定米氏常数为０．５５ｍｏｌ／Ｌ。     

乙基纤维素微胶囊对过氧化氢酶固定化的研究

以乙基纤维素作模材,用液中干燥法使过氧化氢酶微胶囊化,研究了微胶囊化操作条件对酶活性影响。通过测定微胶囊化酶的释放曲线,证明微胶囊膜对过氧化氢酶具有较好的固定性能力,固定化酶用于催化底物过氧化氢分解,测定米氏常数为０．５５ｍｏｌ／Ｌ。     

有关酶的高效性与专一性实验的探讨

高中生物学新教材 (第 1册 )通过“[实验五 ]比较过氧化氢酶和 Fe3 +的催化效率、[实验六 ]探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用”这两个实验来探讨酶的高效性和专一性。这两个实验需要的材料用具较多 ,而且都是对照实验 ,要求操作快速而准确。对于高中学生而言 ,有一定难度。根据教学过程中学生存在的一些问题 ,我把实验过程进行归纳和总结 ,以表格的形式反映出来 ,让学生根据表格当中的步骤来操作 ,表格如下 :[实验五 ]比较过氧化氢酶和 Fe3 +的催化效率1试管编号 122滴加 3%过氧化氢溶液 2 m L 2 m L3滴加催化剂 2 0 %新鲜肝脏磨液 2滴 3…     

pH对香菇多糖含量及合成关键酶基因转录水平的影响

香菇是一种药食两用真菌,其主要代谢产物香菇多糖具有较高药用价值,研究香菇多糖代谢途径对提高香菇多糖含量具有较大参考价值。以香菇新808为材料,苯酚-硫酸法测定不同pH发酵条件下香菇多糖的含量,通过荧光定量PCR及3个软件(GeNorm、NormFinder和BestKeeper)筛选出了不同pH条件香菇稳定表达的内参基因,并以此为基础分析多糖代谢途径中3个关键酶基因的转录表达水平。结果表明,在实验用pH值范围内(5.0-7.0),香菇菌丝体生物量和胞内多糖含量随着pH值的升高而增加,而胞外多糖含量则呈下降趋势;18S和rpl4分别被鉴定为不同pH发酵条件下最稳定和最不稳定表达的内参基因。不同pH发酵条件UDP-葡萄糖焦磷酸化酶基因(UGP)的相对表达量明显高于葡萄糖磷酸变位酶基因(PGM)与葡萄糖磷酸异构酶基因(PGI);PGM相对表达量小且稳定,PGI相对表达量较小,但随pH值的变化波动较大。不同pH对香菇生物量及多糖含量的影响存在差异,3个关键酶基因的转录表达水平与多糖含量之间无明显相关性。     

猪肝过氧化氢酶提取条件的研究

过氧化氢酶又称触酶,专一分解过氧化氢,溶于水,几乎不溶于乙醇、氯仿、乙醚。传统方法是从牛、马或人的红细胞、肝、肾中通过选择性沉淀法、缓冲液提取法、层析法等提取过氧化氢酶。本研究以猪肝为原料对过氧化氢酶的提取条件进行了试验。根据猪肝过氧化氢酶在pH5．3—8．0有活性、最适pH为7．0、溶于水的特性,采用水浸提法提取猪肝过氧化氢酶。先选择影响提取的主要因素(浸提时间、温度、料水比)分别作为单因素进行梯度实验,确定其合适范围;再通过进一步的正交实验得到猪肝过氧化氢酶提取条件的优化组合,并综合后处理中固液分离的要求,确定最佳提取条件,即料水比15、浸提温度25℃、浸提时间8h。     

咪唑磷钼矾酸盐的制备及其催化玉米淀粉氧化

为了解决淀粉氧化过程中产生无机废料和有毒气体而造成的环境污染问题,以过氧化氢为氧化剂,咪唑磷钼钒酸盐为催化剂,在温和条件下对玉米淀粉进行氧化研究。咪唑磷钼钒酸盐以磷钼钒多阴离子[PMo_10V_2O_40]~5-与1-十八烷基-3-甲基咪唑阳离子为原料通过离子交换反应被制备。淀粉氧化实验均在25 mL烧瓶中,油浴条件下进行,实验中分别考察淀粉与水的固液比、氧化剂和催化剂用量、反应温度和时间对淀粉氧化程度的影响。氧化程度以产物中羧基含量确定,结果显示最优的氧化条件是:2.5 g淀粉,6 mL水,2.5 mL过氧化氢(30%),4 mg催化剂,60℃,反应8 h。羧基含量为:0.217 5 mol CO_2H/100 g产品。咪唑磷钼钒酸盐不仅可以使过氧化氢的分解反应速率从每小时0.095 mol/L增加到0.154 mol/L,而且实验结束后易于回收,可重复使用。基于以上研究认为,以咪唑磷钼钒酸盐为催化剂,过氧化氢为氧化剂在淀粉氧化方面具有潜在应用价值。     

过氧化氢酶催化梭曼水解机理的FTIR研究

利用傅里叶交换红外光谱法（ＦＴＩＲ）分析了过氧化氢酶在溶液中的二级结构和过氧化氢酶与过氧化氢、叠氮化钠以及梭曼作用后酶结构的不同改变,并比较了梭曼与细胞色素Ｃ和糜蛋白酶作用的结果。说明过氧化氢酶作为一种氧伦还原酶使过氧化氢分解或与叠氮化钠结合时,不导致酶空间结构的明显改变;但作为一种水解酶与梭曼反应后则出现酶分子的正常β－折叠结构降低和分子间聚合,而其构象变化与梭曼抑制糜蛋白酶的反应相似,揭示了过氧化酶催化梭曼水解机理的重要信息。     

"比较过氧化氢在不同条件下的分解"实验的注意事项及改进措施

笔者针对高中新教材实验的特点,在从事“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验时,为确保实验的成功,经多次尝试颇有心得。从材料试剂的准备到实验操作步骤的把握,很多环节需要特别注意,若在此基础上对本实验作适当地改进,实验效果会更好。     

畜禽粪便堆肥过程中酶活性及微生物数量的变化研究

实验选取鸡粪和猪粪进行好氧堆肥发酵,研究畜禽粪便腐熟过程中酶活性和微生物的变化趋势以及相互联系。结果表明:过氧化氢酶活性和纤维素酶活性在堆肥初期较高,随后迅速降低,最终过氧化氢酶维持在9~12ml/g之间,纤维素酶维持在12.37~15.07mg/(kg·h)之间,而脲酶活性变化趋势为"升高-降低-升高"。细菌数量变化趋势为"低-高-低";放线菌为"高-低";真菌为"高-低-高"。通过相关分析发现,放线菌可能是影响堆肥中过氧化氢酶和纤维素酶的关键因素。鸡粪中放线菌与过氧化氢酶呈极显著正相关;猪粪中放线菌与过氧化氢酶和纤维素酶呈显著正相关;鸡粪+猪粪中放线菌与过氧化氢酶和纤维素酶呈极显著正相关。     

利用手持技术开展中学生物科学探究——探究过氧化氢酶的最适pH

以"探究过氧化氢酶的最适pH"为例,将数字化传感技术与生物科学探究有机结合,进行定量实验探究。通过改进实验并结合传感技术开展探究得到过氧化氢酶的最适pH为9.5,为中学生物科学教学提供参考。     

0．23T稳恒磁场对不同温度离体过氧化氢酶的磁效应研究

研究了 0 .2 3T稳恒磁场对不同温度下的离体牛肝过氧化氢酶 (CAT)构象及活力的影响 ,并从分子水平讨论了磁场对不同温度的过氧化氢酶产生不同生物学效应的可能机制。将不同温度的天然酶液置于磁感应强度为0 .2 3T的磁场中分别处理一定的时间 ,处理过程中保持环境温度与酶液温度一致 ,撤离磁场后立即在相同实验条件下对其进行光谱分析及量热分析 ,并用Beers&Sizers法 (改良型 )测定酶活力。结果表明 ,磁场使 2 5℃过氧化氢酶的构象发生明显变化 ,表现为荧光偏振度增加、出现明显的差示扫描量热曲线、产生λ2 10nm～ 310nm的紫外差光谱以及λ330nm荧光发射峰的荧光强度改变 (荧光发射峰的峰位未移动 ) ,构象变化的同时酶活力增加 ;15℃过氧化氢酶的构象及活力变化规律与 2 5℃过氧化氢酶类似 ,但强度均弱于 2 5℃酶 ;而 4℃过氧化氢酶的构象及活力没有发生变化 ,表现出未受磁场处理的影响。相同实验条件下 ,磁场对不同温度的酶分子影响不同 ,随温度的增加 ,影响效应趋于显著。由于不同温度的酶分子之间的差异在于构象状态的不同 ,这表明酶分子自身的构象状态对磁场处理效果有极其重要的影响。不同温度的过氧化氢酶磁效应差异显著可能是由磁致酶构象变化的特殊机制所引起。磁场对酶分子构象的影响可能是通     

6-苄基腺嘌呤对平菇和香菇菌丝体4种胞外酶活性的影响

在马铃薯液体培养基中,通过活加不同剂量的6－苄基腺嘌呤（6－BA）,测定了平菇和香菇菌丝体4种胞外酶活性的变化。结果表明,低浓度的外源6－BA对平菇、香菇菌丝体4种胞外酶活性都有促进作用,高浓度时则逐渐抑制酶活性。其中,培养液浓度为1．5mg/100mL时,它们扔包外粉酶（Amy）、羧甲基纤维素酶（CMC）、过氧化氢酶（CAT）的活性最高;而它们的胞外蛋白酶的最适浓度为0．5mg/100mL。     

香菇漆酶高产菌株筛选及漆酶基因的表达研究

漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,其作用底物范围广,在食品、能源和环保等领域具有重要的应用价值,因此筛选高产漆酶菌株对于其工业应用具有重要意义。本实验以78株香菇菌株为实验材料,利用愈创木酚平板法初筛,液体发酵复筛的方法筛选高产漆酶香菇菌株,并通过实时定量PCR分析香菇漆酶同工酶在不同菌株之间转录表达的差异性和特异性。结果表明,不同香菇菌株的生长速度、变色圈大小存在差异,以菌丝圈和变色圈大小及其比例为依据,从78株香菇菌株中筛选出19株潜在的漆酶高产菌株;液体发酵从这19株菌株中复筛出3株高产漆酶的菌株:香240、15和冕宁浅灰,其中香240在培养第3天酶活达到最高(3.583U/m L),香15和冕宁浅灰则在培养第7天酶活达到最高(分别为3.842U/m L和2.806U/m L);实时荧光定量PCR结果显示,10个漆酶同工酶基因在两株香菇菌株中的表达存在差异性和特异性,其中Lelac5和Lelac9只在菌株香240中检测到转录本;Lelac1–4在菌株15中表达量较高,而Lelac8、Lelac10和Lelac11在香240中的表达量较高。研究结果将为香菇漆酶的进一步研究提供基础。