首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到10条相似文献,搜索用时 15 毫秒
1.
DNA模板序列的转录调控是基因表达多级调节过程的关键 ,细胞周期中基因转录水平的改变应激细胞发育、分化及正常生理功能的多种信号转导。疾病或其它因素也应激转录水平变化 ,从而改变各种mRNAs的稳定性。因此基因的mR NA水平分析 ,在基因调控研究领域是必不可少的。mRNA的常规分析方法是Northernblots、RNAdot/slotblot、核酸酶保护法(nucleaseprotection)和原位杂交 (insituhybridization)。而PCR技术的应用开创了mRNA分析新方法[1 -3] :RN…  相似文献   

2.
有序差异显示:一种基因表达谱系统比较法   总被引:2,自引:0,他引:2  
系统研究具有同一基因组的各种细胞群之间基因的差异表达谱十分重要。目前,研究基因差异表达的技术大致有mRNA差异显示[1]、RDA[3]、SSH[4、5]和cDNA阵列[6]等。近几年,还发展了一些研究基因差异表达谱系统的技术,如RLCS(restrictionland-markcDNAscanning)[8]、GEF(geneexpres-sionfingerprinting)[2]和RNA指纹法[9]等。然而,这些技术或较为复杂,或灵敏度偏低。本文拟介绍一种有效的基因表达谱系统比较法——有序差…  相似文献   

3.
以基因表达谱芯片对人正常肝及肝癌组织基因表达的差异性进行了研究比较。奖4096条人cDNA用点样仪点在特制玻片上制备成表达谱芯片;利用肝和肝癌组织的mRNA通过逆转录方法,将Cy3和Cy52种荧光分别标记到两种组织的cDNA上,制备成cDNA探针,并与表达谱芯片进行杂交及扫描,重复4次实验,通过计算机数据处理判定基因是否在上述2种组织中有表达差异,筛选出差异表达的基因共903条。基因芯片技术可同时  相似文献   

4.
洪靖君 《生命的化学》2001,21(5):397-398
表达谱芯片 ,是指将几千个基因特异的探针或其cDNA片段固定在一块基因芯片上 ,对来源于不同个体 (正常人与患者 )、不同组织、不同细胞周期、不同发育阶段、不同病变、不同刺激 (包括不同诱导、不同治疗手段 )下的细胞内的mRNA或逆转录产物cDNA进行检测从而大规模对这些基因表达的个体特异性、组织特异性、发育特异性、分化阶段特异性、病变特异性、刺激特异性进行综合的分析和判断。基因表达谱芯片研究基因在不同组织或细胞、不同发育阶段中基因表达的改变 ,通过基因表达的改变进而阐明基因的功能。1 .杂交信号检测原理用不同…  相似文献   

5.
采用免疫酶组织化学与地高辛标记的单链cDNA探针原位杂交技术,研究了抗凋亡基因bcl-2在人胎儿胸腺组织中的表达与分布。结果bcl-2mRNA及其蛋白均优势定位于髓质区。提示胸腺中bcl-2基因表达调控发生在转录水平;bcl-2基因介导的细胞凋亡状态可能参与T淋巴细胞的成熟过程。  相似文献   

6.
研究高等生物基因表达与调控的一个重要方面是分离基因的编码区及其上游的调控序列(DeVeer等1997),这需要获得一个基因的cDNA全长及从植物基因组获取全基因。在前文(周建明等1999)中曾经分离了稻瘟病菌侵染诱导的水稻早期反应基因ER1的cDNA片段,但是运用mRNA差异显示技术分离的cDNA片段往往只有近mRNA3’端的一部分,难以反映基因的结构及功能特点,因此,必须进一步分离其5’端的部分才有可能比较全面地了解此基因的特点。RACE(rapidamplificationofcDNAen…  相似文献   

7.
鳄梨冷藏过程中体外转译和基因表达的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
鳄梨果实经低温贮藏一定时期,从中提取RNA,进行体外转译和同源探针杂交分析,以研究冷藏过程中特写基因的表达时期和水平。并用纯化出的冷藏果实的mRNAs,构建其cNDA文库。对文库作了初步筛选,24个含cDNA插入片段的菌落能差示地与贮藏前和7℃贮藏的mRNA合成的探针杂交。3个纤维素酶cDNA能很好杂交,2个与鳄梨乙烯形成酶cDNA有同源性。  相似文献   

8.
cDNA3′端代表差异显示分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
根据真核mRNA3′端一般含Poly(A)的原理,可使用共同引物将不同的mRNA反转录成cDNA,然后设计特殊引物进行反转录PCR,或者将限制性酶切与反转录PCR偶联使用,均可获得对应于mRNA3′端的cDNA3′端代表扩增子。比较不同条件下的cD-NA3′端代表扩增子,可以获得两种或多种细胞中mRNA的表达差异谱,并分离、克隆差异表达的基因序列  相似文献   

9.
动物从卵裂开始的早期胚胎发育始终伴随着mRNA不断的合成与降解。最初受着受精卵内母体mRNA的控制。当这些mRNA在发育过程中逐渐被降解时,有些动物(如小鼠)在比较早的时期已有新基因的转录;而有些动物(如鱼类、两栖类)迟到囊胚中期以后,合子核的基因才开始转录新的mRNA。mRNA这种有规律的代谢活动控制着细胞的分化、胚层的形成以及模式形成(paternformation)。所有这些mRNA水平上的变化都可以用mRNA差异显示法(mRNAdiferentialdisplay)检测出来并进而获得与早期胚胎发育有关的基因。mRNA差异显示法是由Liang和Pardee于1992年建立起来的,用于显示两种不同组织之间mRNA差异的方法。基于绝大多数mRNA有一个poly(A)尾巴,选用一个较特殊的3’端引物─5’T11MN3’,其中M可以是dATP,dCTP,dGTP之一,而N可以是dATP,dTTP,dCTP,dGTP之一,进行逆转录时,1/12的mRNA可被逆转录为cDNA。这种cDNA第一链被用来PCR扩增,所使用的3’端引物与逆转录引物相同,而5’端引物为10个碱基的一段寡核苷酸,这类任意(arbitrar  相似文献   

10.
根据真核mRNA3′端一般含Poly(A)的原理,可使用共同引物将不同的mRNA反转录成cDNA,然后设计特殊引物进行反转录PCR,或者将限制性酶切与反转录PCR偶联使用,均可获得对应于mRNA3′端的cDNA3′端代表扩增子。比较不同条件下的cD-NA3′端代表扩增子,可以获得两种或多种细胞中mRNA的表达差异谱,并分离、克隆差异表达的基因序列 。  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号