豚鼠球囊毛细胞的分离及钾离子流的研究

目的：研究前庭毛细胞的细胞活性及膜上钾通道的类型。方法：用酶深化后机械法分离豚鼠球囊毛细胞,并用全细胞膜片钳观察豚鼠球囊Ⅱ型毛细胞侧膜上的钾通道电流。结果：①胶原酶Ⅳ浓度为０．３５ｍｇ／ｍｌ时,分离的毛细胞数量最多,存活时间最长;②当钳制电位为－１００ｍＶ,以１０ｍＶ的步距,从－７０ｍＶ至＋２０ｍＶ阶跃,随着膜 电位的去极化,可记录到一系列快速、瞬时的以Ａ型钾通道为主的外向电流,４－Ａｐ对其有特异     

豚鼠耳蜗外毛细胞外向钾电流的研究

哺乳动物耳蜗具有超常的敏感性和频率分析能力 ,这依赖于感觉细胞基底膜的微机械反应。豚鼠耳蜗外毛细胞底侧膜存在电压依赖性Ｋ 通道、Ｃａ2 激活Ｋ 通道和内向钙通道等。文献报道牛蛙壶腹嵴毛细胞有瞬息Ｋ 电流 (ＩＡ) ,然而豚鼠耳蜗外毛细胞是否存在ＩＡ,迄今未见报道。来自脑干的内侧橄榄耳蜗束传出神经纤维大量分布于外毛细胞 ,调控着外毛细胞的功能 ,一般认为乙酰胆碱是耳蜗传出神经递质 ,此外三磷酸腺苷 (ＡＴＰ)对外毛细胞具有神经递质和神经调质双重作用 ,那么是否还有其他的递质发挥作用呢 ?我们应用全细胞膜片钳技术观察了豚鼠…     

基于原子力显微镜测量内耳螺旋器的弹性特征

应用原子力显微镜分析内耳螺旋器(Corti器)不同部位的弹性特征。采用豚鼠内耳基底膜底回新鲜标本,用原子力显微镜在液相接触式测量,获得不同部位力曲线。经计算,对应Corti器相当于Hensen细胞、外毛细胞、柱细胞、内毛细胞、内指细胞、盖膜的部位及基底膜底面局部,其杨氏模量均值分别为46±1.7、59±0.9、250±31、140±2.8、430±29.9、210±7.2和230±8.8 kPa。结果表明,基底膜径向排列的组织结构不同,杨氏模量存在明显差异,在整块基底膜标本上测量Corti器各结构的杨氏模量能更准确地反映它们在生理状态下的弹性特征。     

酸性磷酸酶在豚鼠耳蜗中的显示

采用组织化学方法,与耳蜗膜迷路铺片技术和耳蜗冰冻切片技术相结合。对豚鼠耳蜗进行了观察。正常耳蜗中的酸性磷酸酶主要集中分布在内、外毛细胞的表皮板下,血管纹细胞和Boettcher氏细胞。并对酸性磷酸酶与溶酶体的关系以及毛细胞富含酸性磷酸酶的生理学意义进行了讨论。     

MicroRNA调控耳蜗毛细胞发育的分子机制

耳聋是严重影响人类生活质量的全球重大健康问题之一。目前,因耳蜗毛细胞损伤而导致的耳聋疾病尚未有成功的治疗方法。MicroRNA (miRNA)作为一类高度保守的内源性非编码小RNA,在耳蜗以及毛细胞发育过程中发挥着重要作用。本文介绍了miRNA在耳蜗毛细胞产生过程中的时空表达,揭示了其不可或缺的重要作用;同时阐述了miRNA参与调控耳蜗毛细胞发育中相关转录因子的分子机制,为耳聋的毛细胞移植治疗和毛细胞再生研究提供理论参考。     

扬子鳄内耳的组织结构及其早期胚胎发育

扬子鳄内耳的椭圆囊与球囊间以有前、后半规管形成的总脚处均存在瓣膜,半规管、壶腹嵴及囊斑的组织结构与其他爬行类动物相似。扬子鳄耳蜗伸长且弯曲,由典型的三个腔即前庭阶、鼓足干劲阶的中阶（膜蜗管）构成;基膜中间厚、两侧薄,在耳蜗腹端较宽,向背端逐渐变窄;柯蒂氏器由支持细胞和两型毛细胞（高毛细胞和矮毛细胞）组成;前庭膜厚且高度血管化。在平均约２８℃孵化温度下,孵化后第２天胚胎耳板凹陷呈浅杯状;第６天凹陷口     

盖膜期间沙糖橘果实品质变化规律的研究

在果实成熟的1~3月,采样分析盖膜和不盖膜沙糖橘果实品质。结果表明:树冠盖膜后沙糖橘果皮色泽一直保持橘红色,而不盖膜的果皮色泽由前期的橘红色转为后期的橘黄色,且色泽暗淡;盖膜处理果实的酸含量在开始的20d内呈上升趋势,1月28日出现最高值0.31%,此后的10d内迅速下降至低于对照的水平,2月7日出现最低值,此后的20d内上升高于对照,之后又下降至3月15日的0.19%;对照果实的酸含量呈现明显的下降趋势,1月7日出现最高值为0.26%,3月15日出现最低值为0.08%,盖膜处理果实的酸含量在大多数时间内高于对照;盖膜处理果实的可溶性固形物含量从1月17日的12.33%提高到3月15日的13.40%,提高了1.07个百分点,总体呈上升趋势,而对照的从1月17日的10.70%下降至3月15日的9.90%,下降了0.80个百分点,总体呈下降趋势。     

基因疗法使内耳生长出新的毛细胞

无论是低声的耳语 ,还是高声的呼唤 ,其对听觉过程的作用是相同的 .声波曲折地冲击内耳细胞 ,即所谓毛细胞 ,该细胞发生应答 ,将电脉冲传递到大脑 .通常保持听觉过程的环节一旦遭受破坏 ,人与其他哺乳动物的毛细胞是不能再生的 .但是科学家用病毒将一个基因送递到成年豚鼠的内耳中去 ,便能使内耳生长出新的毛细胞 .这是首次使成年的哺乳动物耳中生长出新的毛细胞 .尽管该项研究尚未能决定新的毛细胞是能察觉声音还是其与大脑有适当的关联 .但是别的研究者都为此项研究工作而欢呼 ,并提示该研究工作有朝一日会导致产生对许多类型的听觉丧失的…     

罗非鱼内耳形态结构研究

罗非鱼内耳器官结构与典型硬骨鱼的内耳结构一致。球状囊呈椭圆体状,其耳五充满整个囊体,耳石上有明显的中央沟,中央沟在形态上与球状囊听斑一致;听囊呈圆形,听囊耳五约占整个听囊一半,耳石较薄且较透明,有明显外缘区和中央区之分;椭圆囊呈不规则椭球体状,其耳石占椭圆囊的较小部分,耳石表面粗糙。罗非鱼耳石膜为一层胶质膜,位于耳石和听斑之间,并触及所有毛细胞,膜有大量小孔,小孔处恰为毛细胞的纤毛束伸入,纤毛束透过小孔触及到耳石。扫描电镜观察表明,罗非鱼内耳听斑也由毛细胞和支持细胞组成,听斑表面有大量具一定分布规律的纤毛束。罗非鱼内耳听觉器官主要有三种纤毛束类型：Ｆ＿１、Ｆ＿２和Ｆ＿３型。按照纤毛束的取向一致性,球状囊听斑划分三个区;听囊听斑和椭圆囊听斑均划分两个区。     

中国的骨碎补科

本文讨论了骨碎补科属的划分问题,承认了骨碎补属、钻毛蕨属、雨蕨属和大膜盖蕨属。小膜盖蕨属和阴石蕨属的种类被并入到了骨碎补属。中国计有骨碎补科植物3属14种,其中骨碎补属12种,雨蕨属1种,大膜盖蕨属1种。     

内耳整块染色石蜡包埋制片法

内耳制片常用的是火棉胶——石蜡双重包埋H-E片染法。此法制片步骤较多,不易掌握。我采用Bouin氏固定液固定,H-E整块染色、石蜡包埋法制片,操作简便,易于成功,内耳的基本结构(前庭膜、盖膜、毛细胞都完好无损,如取材适当,可在同一切片同时显示壶腹嵴。染色液的配制: 1.苏木精染液的配制: 苏木精 25毫克硫酸铝钾 1.25克碘酸钠5毫克蒸馏水 75毫升由于以上药品称量很小,故需称的较准确。配出来的液体若呈现混浊,则是因为以上药品(主要是碘酸钠)称得不准造成的,这种混浊染色液不能用。 2.复制伊红染色液的配制: 将伊红(Y或B均可)0.5克溶于3毫升蒸馏水中,溶解后将冰醋酸—滴—滴加于其中,边滴边搅动,     

“鱼纲”的几个教学问题

在现行初中动物学课本中,有些教材内容,由于不是重点及照顾初中学生的接受能力,叙述较简单,如果教师忽视对教材深入细致的钻研和运用直观教学,必将影响学生对概念的正确理解。现提出几个容易发生的问题,供教师进行教学时参考: 鲫鱼的呼吸动作在鲫鱼的呼吸中,口、鳃盖、鳃孔如何配合活动?水在什么情况下由口流入?在什么情况下由鳃孔流出? 鲫鱼的呼吸动作主要靠口、鳃盖和下颌的的活动来完成。当鲫鱼的口张开时,鳃盖向外移动,略往前缩,鳃盖膜紧贴头部两侧,鳃孔关闭,同时下颌降低,口腔内容积增加,产生负压,水由外界进入口腔(图1,A)。口闭,鳃盖内收,略往后伸,下颌升高,口腔容积减少,产生正     

西伯利亚鲟侧线神经丘发育过程的观察

研究对西伯利亚鲟(Acipenser baerii)的胚后幼鱼进行石蜡切片HE染色,同时利用荧光染料DiA4-(4-Diethylaminostyryl)-1-methylpyridinium iodide对侧线管中侧线神经丘毛细胞特异性标记的特点,示踪了西伯利亚鲟胚后仔鱼各个时期侧线神经丘分化发育的过程。结果显示,西伯利亚鲟侧线管内侧线神经丘毛细胞如纤毛状,呈竖立紧密排列。出膜3d仔鱼眼眶后神经基板发育分化活动剧烈,出膜10d的仔鱼眼眶后方的神经基板分化出眼眶上下侧线神经丘的两个分支,同时眼眶后神经基板进一步向后分化发育在眼眶后部形成躯干侧线神经丘,但整个侧线神经丘还未完全发育完成,待出膜15d时,眼眶上下和躯干侧线神经丘已基本发育完全,出膜22d的仔鱼侧线神经丘发育基本完成。研究为今后深入研究西伯利亚鲟侧线发育过程中的神经分化发育、细胞迁移奠定了初步形态学基础。       

听毛细胞钙信号转导及其与细胞能动性的关系

应用激光扫描共聚焦显微镜和ｆｌｕｏ－３／ｆｕｒａ－ｒｅｄ双重荧光标记法,研究豚鼠耳蜗分离外毛细胞钙信号转导及其与细胞能动性的关系。外毛细胞（ｏｕｔｅｒｈａｉｒｃｅｌ,ＯＨＣ）受药物或机械刺激后,其钙信号起源于一侧质膜,可形成钙波传向全细胞,对其中１个ＯＨＣ测得传播速度为０．０２５－０．０４７μｍ／ｓ。钙信号转导过程中各亚细胞区域游离钙浓度增加幅度不同。胞内游离钙增高时伴有细胞长度变化,缩短者占６／１０,伸长者占４／１０。对照组（不予刺激且胞内游离钙无变化者）３个外毛细胞中,缩短者２个,长度无变化者１个。实验表明,听毛细胞受刺激后可产生钙波,钙信号具有不均匀性,外毛细胞的钙依赖慢运动表现为细胞伸长,细胞缩短则在胞内游离钙浓度升高或保持于静态基准浓度时均可发生。     

声损伤后鸡听觉上皮的修复和毛细胞再生──扫描电镜与图像分析研究

应用扫描电镜和图像分析方法对宽带噪声损伤后鸡基底乳头病变以及听觉毛细胞再生反应进行定量研究。观察了存活０、２、７、１５和３０天时平均毛细胞表面积,平均毛细胞密度,毛细胞／支持细胞面积比及基底乳头损伤范围等参数。结果显示,基底乳头病变范围为近端１０％至中段６０％。早期反应包括支持细胞扩张和毛细胞静纤毛变性及皮板表面积缩小。损伤后２天可见新生毛细胞,形态与胚胎期幼稚毛细胞相似。７～１５天毛细胞数目与表面积逐渐增加,基底乳头ｍｏｓａｉｃ构型基本恢复。静纤毛排列与极性至３０天时尚未完全恢复。损伤区仍有散在的残存毛细胞及分化早期的幼稚毛细胞。上述结果提示,再生毛细胞的前体存在于受损区局部并与支持细胞的活动有关。前体细胞的增殖至再生毛细胞出现的时间约为４８ｈ,但亦存在一定程度的非同步现象,损伤后７～１５天为细胞修复的主要时期。     

干细胞治疗感音神经性耳聋

治疗内耳疾病的主要困难之一是找到耳蜗毛细胞或者螺旋神经元丢失所导致的听力损失的治疗方法。本文讨论使用干细胞替代感觉细胞丢失为目的的几个治疗策略。作者最近在成年内耳中发现了可以分化为毛细胞的干细胞,发现了胚胎干细胞可在体外转化为毛细胞并表达毛细胞标记物。在动物模型中,成年内耳干细胞、神经干细胞和胚胎干细胞来源的前体细胞可分化成为毛细胞和神经细胞。本文将讨论使用干细胞再生损伤毛细胞的不同方法,介绍几种可行的动物模型,并讨论发展基于干细胞的细胞替代疗法治疗内耳损伤中存在的困难。     

10个蕨类植物名称的后选模式指定

在整理保存于中国科学院植物研究所标本馆(PE)的模式标本时,根据《国际植物命名法规》(墨尔本法规)规则9.5,发现陕西铁线蕨(铁线蕨科)、长盖铁线蕨(铁线蕨科)、宿蹄盖蕨(蹄盖蕨科)、无柄短肠蕨(蹄盖蕨科)、济州岛双盖蕨(蹄盖蕨科)、长羽狗脊蕨(乌毛蕨科)、台湾鳞毛蕨(鳞毛蕨科)、长圆膜蕨(膜蕨科)、峨眉红腺蕨(球盖蕨科)、鹿角石韦(水龙骨科)名称的模式为合模式。遵照规则8.1、9.11和9.12,以及辅则9A.2和9A.3的精神,对这10个名称做出后选模式指定,以规范这些名称的模式。     

豚鼠耳蜗内毛细胞、外毛细胞及外指细胞钙成像

用ｆｌｕｏ－３／ｆｕｒａ－ｒｅｄ荧光比值作细胞内游离钙指标,用激光扫描共聚焦显微镜测定豚鼠耳蜗分离的内、外毛细胞及外指细胞的游离钙,并利用钙成像技术进行细胞形态计量。单个外毛细胞呈试管状。内毛细胞呈烧瓶状,有明显的颈部。外指细胞分为体部及指状突部。毛细胞的胞内游离钙浓度明显高于外指细胞。毛细胞的胞质、胞核及表皮板的游离钙浓度不同。外指细胞的细胞体与指状突的游离钙浓度也不同。本研究认为,有无颈部为区别分离的内、外毛细胞的重要标准,外指细胞可凭借其特异的指状突结构以资识别。内耳毛细胞及外指细胞胞内游离钙分布的不均一性可能与各部位生理功能不同有关。     

脑细胞生长肽对GM耳毒性的预防作用

目的：观察脑细胞生长肽（cerebral cell growth peptide,CCGP)对庆大霉素（gentamicin,GM)引起的豚鼠耳中毒的预防作用）。方法：用脑干听觉诱发电位（brainstem auditory evoked potential,BAEP)和组织化学方法分别检测动物听阀的变化和耳蜗毛细胞线粒体内琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase,SDH)及溶酶体内的酸性磷酸酶（acid phosphatase,ACP)活性变化,并在三组动物进行耳蜗受损毛细胞计数。结果：CCGP能降低GM引起的BAEP反应阈的上升幅度,保护耳蜗毛细胞SDH和维持溶酶体的完整性,减轻毛细胞的损伤。结论：CCGP能降低GM的中毒性;保护耳蜗毛细胞SDH,维持毛细胞的能量代谢,减少溶酶体损伤,降低溶酶体内水解酶逸出引起的毛细胞自溶性损伤,可能是CCGP预防GM耳毒性的机制之一。     

中国一新记录种——丝膜环柄菇

担子果小型至中等。菌盖直径4．5～9cm,初略呈钟形或近半球形,后扁平至近平展,污白色,具锈褐色至深褐色鳞片,中部具较明显的脐突,鳞片浓密,菌盖边缘常略延生。菌褶离生,白色,较密,不等长。菌柄长6～10cm,直径0．5～1cm,近圆柱形;内部变空;基部膨大;菌柄上部与菌盖边缘之间具蛛网状的丝膜,幼时尤其明显,成熟后易脱落。丝膜以下常被稀疏的深褐色小鳞片。