成人血流感染病原菌的分布及耐药性分析

目的了解成人血流感染病原菌的分布及耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据。方法采用Bact/Alert 3D血培养仪和VITEK-2 Compact鉴定仪,进行病原菌分离培养、鉴定和药敏试验。结果3 595份血培养送检标本中分离出230株病原菌,其中革兰阴性菌147株占63.91%,革兰阳性菌78株占33.91%,真菌5株占2.17%。革兰阴性菌以大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌为主,对阿米卡星、碳青霉烯类药物敏感率高。革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌为主,对万古霉素、利奈唑胺保持高敏感率。结论本院血培养病原菌以革兰阴性菌为主,菌种复杂多样,不同菌种耐药性差异较大,应该定期对病原菌分布和耐药情况进行监测。     

深圳地区新生儿血培养病原菌分布及耐药性分析

目的了解深圳地区新生儿败血症病原菌分布及其常见病原菌的耐药情况,为临床合理选择抗生素提供依据.方法用Bact/Alert全自动血培养系统进行血培养,VITEK-32全自动微生物鉴定仪对2003～2005年深圳市儿童医院794例新生儿血培养阳性标本进行细菌鉴定和药敏试验.结果794例新生儿血培养标本共检出细菌177株,总阳性率为22.29%,其中革兰阳性菌134株,占75.71%,革兰阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌为主,占阳性菌的85.07%,占总分离率的64.41%.革兰阴性菌43株,占24.92%,革兰阴性菌以肺炎克雷伯菌居多,占阴性菌的41.03%,占总分离率的9.04%.革兰阳性菌对抗生素耐药率最高的为青霉素,其次为头孢唑啉、苯唑西林、红霉素和氨苄西林/舒巴坦.在常见的革兰阴性菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的产ESBLs均在50%左右,这些菌株对亚胺培南、头孢替坦、环丙沙星、左旋氧氟沙星表现了较低的耐药率.结论凝固酶阴性葡萄球菌是该地区新生儿败血症最常见的病原菌,其次为肺炎克雷伯菌.对常用抗菌药物有不同程度的耐药.了解该地区病原菌的流行分布和抗生素的耐药情况对临床合理选用抗生素具有重要意义.     

外科血培养标本中病原菌分布及耐药性分析

目的了解中山大学附属第一医院外科血标本中病原菌的菌种分布及常见菌株的耐药性。方法血标本用Bact/A lert-120全自动血培养仪进行血培养,阳性血培养转种后用VITEK-60 AMS细菌鉴定仪鉴定,用K-B法进行药敏试验。结果2002年1月至2005年12月血培养标本中共分离出病原菌256株,阳性率为10.6%。122株(47.7%)为革兰阴性杆菌,其中肠杆菌科细菌占72.1%(88/122),非发酵菌占27.9%(34/122);113株(44.1%)为革兰阳性球菌,其中葡萄球菌属占51.3%(58/113),肠球菌占38.1%(43/113);真菌21株(8.2%)。血培养中的革兰阴性杆菌对亚胺培南、美洛培南治疗敏感;革兰阳性球菌对万古霉素和替考拉宁敏感。结论肠杆菌科细菌和葡萄球菌是外科血培养中的主要病原菌,其耐药现象严重,宜根据药敏结果选用敏感抗菌药物治疗。     

血液或无菌体液培养阳性标本中病原菌检测结果分析

目的：了解血培养（包括血液、无菌体液培养,下同）阳性标本中病原菌的分布及阳性报警时间,为临床及时明确病原菌和正确用药提供参考依据。方法：无菌条件下采集血培养标本注人相应的培养瓶,经仪器扫描后放入血培养仪进行检测,报警后及时进行菌种鉴定和药敏试验。结果：364例阳性报警标本中真阳性标本为176例,其中革兰阳性菌占61．7％,革兰阴性菌占35．0％,真菌占3．3％;188例为假阳性标本,其中革兰阳性菌占54％,革兰阴性菌占41．9％,真菌占4．0％;新生儿科的感染阳性率最高;不同种类病原菌的阳性报警时间多重叠;临床医生经验用药正确或根据药敏结果更换用药的百分比为78．2％。结论：本院引起血液、无菌体液感染的病原菌以革兰阳性细菌为主,病原菌种类较多,存在一定的污染;当新生儿有局部感染时要警惕脓毒血症;单独靠血培养仪报警时间来鉴定区分病原菌与污染菌不一定可靠,及时了解血培养结果及标准药敏结果可以辅助找出感染性疾病的病因,尽早正确合理的使用抗菌药物,从而优化抗菌治疗。     

VITEK-2 Compact仪器法检测革兰阴性杆菌临床分离株的耐药性

目的 调查住院患者临床分离株中革兰阴性杆菌的分布及耐药状况,为革兰阴性菌的治疗提供参考.方法 收集浙江中医药大学附属第一医院2011年全年送检的标本,采用VITEK-2 compact全自动微生物鉴定仪,采用GNI鉴定卡、AST-GN13药敏卡进行菌株的鉴定和药敏,根据临床实验室标准化协会(CLSI 2011)制定的指导原则,判断细菌的耐药率.结果 共分离到革兰阴性菌972株.ICU分离到革兰阴性菌254株,其中非发酵菌占73.6％(187/254).非ICU分离到革兰阴性菌718株,其中非发酵菌246株占34.3％(246/718).亚胺培南对ICU分离菌的MIC50是非ICU的8倍,MIC90值相当.结论 ICU患者分离的革兰阴性菌以非发酵菌占大多数.非ICU患者分离的革兰阴性菌以肠杆菌科细菌为多.VITEK-2 Compact仪器药敏法是适合于临床常规使用的方法.     

血培养中病原菌的分布及其耐药状况分析

目的:了解血培养中病原菌的菌群分布及其耐药状况.方法:血培养标本用Bact/Alert-120自动血液分析系统和Vitek60鉴定仪进行血培养及鉴定,药敏用K-B法,用Whonet 5软件进行分析.结果:在3 680份血培养标本中分离出细菌348株,阳性检出率为9.4%,病原菌中以革兰阴性杆菌为主共分离出189株,占54.3%,其中主要为大肠埃希菌占15.5%,肺炎克雷伯菌占12.4%;革兰阳性菌138株,占39.7%,主要为凝固酶阴性葡萄球菌占14.9%,金黄色葡萄球菌占12.1%;链球菌占6.6%.血培养中的革兰阴性杆菌对亚胺培南、阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦治疗较为敏感:革兰阳性球菌对万古霉素和替考拉宁较为敏感.结论:肠杆菌科细菌和葡萄球菌是血培养中的主要病原菌,而产ESBLs菌株、MRSA、MRCNS耐药严重,提示应高度重视合理使用抗生素,减少细菌耐药性产生,以提高临床治疗效果.     

一种联合MALDI-TOF MS直接鉴定阳性血培养瓶方法改进及与Sepsityper Kit试剂盒法、SELTERS法和血清分离胶法的比较

目的评价直接使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联合Sepsityper Kit试剂盒法(简称试剂盒法)、SELTERS法和血清分离胶法(简称分离胶法)鉴定阳性血培养瓶血中细菌的符合率,并对SELTERS方法进行改进,以缩短样本处理时间。方法对656例临床血培养阳性标本,应用试剂盒法、SELTERS方法或分离胶法处理后,直接使用质谱仪快速鉴定菌株,同时进行传统培养,比较分析二者之间的差异。结果656例血培养阳性标本共分离出626株单种菌感染和30株多种菌感染标本。MALDI-TOF MS联合试剂盒法、SELTERS法或分离胶法可在1 h内快速鉴定血培养阳性标本。在单种细菌感染中,MALDI-TOF MS联合试剂盒法直接鉴定革兰阳性菌的种、属符合率分别是66.8%(141/211)、21.3%(45/211),革兰阴性菌的种、属符合率分别是97.1%(367/378)、0.8%(3/378),真菌的种、属符合率分别是32.4%(12/37)、0.0%(0/37);MALDI-TOF MS联合SELTERS法直接鉴定革兰阳性菌的种、属符合率分别是66.8%(141/211)、21.3%(45/211),革兰阴性菌的种、属符合率分别是96.3%(364/378)、2.4%(9/378),真菌的种、属符合率分别是32.4%(12/37)、2.7%(1/37);MALDI-TOF MS联合分离胶法直接鉴定革兰阳性菌的种、属符合率分别是51.2%(108/211)、20.9%(44/211),革兰阴性菌的种、属符合率分别是93.4%(353/378)、1.6%(6/378),真菌的种、属符合率分别是13.5%(5/37)、2.7%(1/37);MALDI-TOF MS联合改良SELTERS法直接鉴定革兰阳性菌的种、属符合率分别是59.1%(13/22)、18.2%(4/22),革兰阴性菌的种、属符合率分别是88.5%(23/26)、3.8%(1/26),真菌的种、属符合率分别是0.0%(0/2)、50.0%(1/2)。而对于多种菌感染的血培养瓶,3种方法鉴定率均较低。结论MALDI-TOF MS联合试剂盒法、SELTERS法或分离胶直接鉴定阳性血标本中的病原菌,其结果可在1 h内获得,并与传统培养结果相比具有较高的符合率。但是这些方法检测更快速、操作更简便,同时改良SELTERS法样本处理时间缩短,成本降低,且符合率与前3种方法没有区别。这4种方法均能满足临床快速诊断和及时有效抗菌治疗的需求,临床可根据自身情况选择。     

血培养三级报告的临床应用价值

目的探讨血培养三级报告对临床诊疗菌血症的指导和应用价值。方法对我院2015年1月至9月237份阳性血液标本进行三级报告,分析一级报告时间和准确性,比较直接药敏(二级报告)与仪器法(三级报告)药敏结果的二者符合率。结果 237份血培养阳性标本,共检出革兰阳性菌105例,革兰阴性菌126列,真菌6例。一级报告时间平均为29.5h,准确率为97.89%(232/237)。革兰阳性葡萄球菌直接药敏与仪器法药敏的平均符合率为93.45%,严重错误率为0.11%,重大错误率为1.48%,一般错误率为4.97%,革兰阴性菌直接药敏与仪器法药敏的平均符合率为90.87%,严重错误率为0.32%,重大错误率为2.38%,一般错误率为6.43%,总体符合率为91.92%。结论血培养阳性标本三级报告的建立,为临床诊疗提供了准确和快速的结果,具有较大的临床应用价值。     

双向瓶1589份血培养结果分析

目的:了解双向瓶血培养细菌的分类情况.方法:用法国生物梅里埃公司生产的双向血培养瓶(Hemoline),对临床1 589份血液标本进行检测,阳性者用法国生物梅里埃公司生产的API系统进行鉴定.结果:分离出265株细菌共42种,阳性率为16.68%,较传统培养方法高.菌种涉及范围广,其中革兰阳性菌占56.98%,革兰阴性菌占31.70%,真菌占11.32%.结论:用Hemoline双向血培养瓶进行血培养提高了细菌检出的阳性率,增加了检出细菌的种类.     

934株自血培养分离致病菌的病原学分析

目的了解中山大学附属第一医院2002年到2005年自血培养标本中分离的致病细菌的耐药状况和菌群分布特征。方法采用全自动血培养仪进行培养,血培养报阳后转种血平板,用VITEK-60鉴定所分离致病菌,药敏试验用K-B法。结果4年间血培养共分离出934株病原细菌,其中大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌,是该院引起血液感染的主要致病细菌。药物敏感试验显示革兰阴性杆菌对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的敏感性最高,而革兰阳性球菌对万古霉素及替考拉宁的敏感性最高。结论血液感染患者的死亡率较高,应重视导致血液感染致病菌的病原学研究,以利于疾病的治疗。     

中山地区小儿血培养病原菌分布及耐药性分析

目的了解中山地区小儿血培养病原菌分布及其常见病原菌对抗生素的耐药情况。方法对2008年至2009年南方医科大学附属中山市博爱医院新生儿科、儿科住院患儿进行血培养,应用BacT/ALERT 3D全自动血培养仪进行检测,阳性菌株用VITEK-32全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验。结果 4 647例小儿血培养共检出病原菌316株,总阳性率为6.8%;革兰阳性菌258株(81.6%),其中凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)209株(66.1%);革兰阴性菌55株(17.4%),以大肠埃希菌14株(4.4%)和肺炎克雷伯菌12株(3.8%)为主。革兰阳性菌对青霉素G耐药率高达93.4%,其次为氨苄西林/舒巴坦(82.9%)、苯唑西林(82.3%),耐药率均在80%以上。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占25%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)占82.3%。未检出对万古霉素、利奈唑胺和呋喃妥因耐药的菌株。革兰阴性菌中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs的检出率分别为50%和33%,这些菌株对头孢哌酮/舒巴坦、丁胺卡那霉素、左旋氧氟沙星和亚胺培南的敏感率分别为91.7%、100%、92.9%、100%,表现了较低耐药率。结论本地区小儿血培养病原菌以革兰阳性菌为主,且表现为多重耐药。     

4 689例血培养病原菌的临床分布与种类分析

目的：了解本院血培养病原菌的检出种类及在临床各科的分布。方法：应用Bact/Alert-120全自动血培养仅对4689例血标本进行培养,标本检出病原菌按常规鉴定并分类统计。结果：检出有临床意义病原菌355株,其中肠杆菌科和葡萄球菌属的细菌为主要病原菌（35.5%和27.3%)。以2000年全年标本统计,阳性率12.5%,假阳性率0.4%。以内科,外科,儿科,传染科,血液科,新生儿科等为病区统计,病原菌种类分布有明显不同,此外,病原菌种类不同,其阳性报告时间不同。结论：应用全自动血培养仪可以缩短阳性检出时间,了解病原菌在临床各科的分布特点,有利于医师对败血症诊治,及时准确地选择药物。     

呼吸道与非呼吸道标本主要非发酵菌分离株的耐药性比较

目的对2 229份住院患者标本进行分离培养,并对非发酵菌分离株进行药敏试验,了解呼吸道与非呼吸道主要分离株的耐药率差异,以便指导临床合理使用抗菌药物。方法收集2008年8月至2010年10月分离自患者呼吸道、非呼吸道标本的革兰阴性非发酵菌,采用VITEK-32全自动微生物鉴定药敏仪进行细菌鉴定,药敏测定采用K-B法,并比较呼吸道与非呼吸道标本所检出的主要革兰阴性非发酵菌对抗菌药物的耐药率差异。结果共检出非发酵菌556株,其中呼吸道标本366株,非呼吸道标本190株,前3位非发酵菌分离株分别为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌。非发酵菌菌株ESBLs、AmpC、MBL、同产ESBLs+AmpC和同产ESBLs+MBL检出率分别为17.62%、13.67%、14.39、12.23%和6.12%,其中呼吸道标本分离株铜绿假单胞菌的ESBLs、AmpC检出率明显高于非呼吸道标本(均P<0.05),鲍曼不动杆菌的ESBLs、AmpC检出率明显低于非呼吸道标本(均P<0.05);呼吸道、非呼吸道标本的铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌分离株对多种抗生素的耐药率不同,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论呼吸道与非呼吸道标本分离的主要非发酵菌分离株对同一抗菌药物耐药率不同,治疗不同部位非发酵菌引起的感染,要考虑由于感染部位不同而产生的耐药性以及药物有效浓度的差异,根据药敏结果合理使用抗菌药物。     

血培养中病原菌分布及药敏调查分析

目的了解血培养中病原菌的分布及药敏情况,供临床借鉴。方法对中山大学附属第三医院血培养标本中所分离到的细菌及药敏结果进行统计分析。结果从血培养标本中分离到细菌239株,其中其中革兰阴性杆菌(G-b)131株,占52.6%,革兰阳性球菌(G+c)99株,占39.8%(99/236),真菌占6.8%,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs菌检出率分别是54.2%和48.6%,只对亚胺培南、特治星和阿米卡星敏感,敏感率超过85%,G+c中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别是42.9%和89.2%,只对万古霉素敏感(100%),检出的肠球菌已出现对万古霉素耐药。结论血培养分离的病原菌分布复杂,产ESBLs菌和MRS菌株检出率高,临床应重视血培养检测结果.合理用药。     

A real-time PCR antibiogram for drug-resistant sepsis

Current molecular diagnostic techniques for susceptibility testing of septicemia rely on genotyping for the presence of known resistance cassettes. This technique is intrinsically vulnerable due to the inability to detect newly emergent resistance genes. Traditional phenotypic susceptibility testing has always been a superior method to assay for resistance; however, relying on the multi-day growth period to determine which antimicrobial to administer jeopardizes patient survival. These factors have resulted in the widespread and deleterious use of broad-spectrum antimicrobials. The real-time PCR antibiogram, described herein, combines universal phenotypic susceptibility testing with the rapid diagnostic capabilities of PCR. We have developed a procedure that determines susceptibility by monitoring pathogenic load with the highly conserved 16S rRNA gene in blood samples exposed to different antimicrobial drugs. The optimized protocol removes heme and human background DNA from blood, which allows standard real-time PCR detection systems to be employed with high sensitivity (<100 CFU/mL). Three strains of E. coli, two of which were antimicrobial resistant, were spiked into whole blood and exposed to three different antibiotics. After real-time PCR-based determination of pathogenic load, a ΔC(t)<3.0 between untreated and treated samples was found to indicate antimicrobial resistance (P<0.01). Minimum inhibitory concentration was determined for susceptible bacteria and pan-bacterial detection was demonstrated with 3 gram-negative and 2 gram-positive bacteria. Species identification was performed via analysis of the hypervariable amplicons. In summary, we have developed a universal diagnostic phenotyping technique that assays for the susceptibility of drug-resistant septicemia with the speed of PCR. The real-time PCR antibiogram achieves detection, susceptibility testing, minimum inhibitory concentration determination, and identification in less than 24 hours.     

不同病区血培养病原菌分布及耐药性分析

目的 了解各病区血培养分离病原菌的分布特点及其耐药性,指导临床医生合理有效地使用抗生素.方法 对宁波市泌尿肾病医院·鄞州第二医院2008年8月至2011年7月临床送检的8409例血液标本经Bact/A-lert3D全自动血培养仪培养,分离所得菌用美国德灵公司Walkaway 40系统进行鉴定和药敏.对检测结果进行统计学分析.结果 共检出病原菌853株,其中革兰阴性杆菌422株,革兰阳性球菌396株,真菌35株.血浆凝固酶阴性葡萄球菌占首位,其次分别为大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌.检出菌数量居前三位的病区是重症监护病房、消化内科及肾内科.各病区的病原菌分布不尽相同.丁胺卡那、亚胺培南对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌显示出较高的敏感性,未发现耐利奈唑胺及万古霉素菌株.结论 该院血流感染病原菌以革兰阴性杆菌为主,各主要病区病原菌分布不尽相同,临床医生应跟据药敏结果合理有效地使用抗生素.     

28 179例血培养病原菌分布及耐药性分析

了解2009年至2012年中国医科大学附属第一医院血培养标本常见病原菌的分布和耐药性。采用美国BD公司BACTEC9240型全自动血培养仪及其配套血培养瓶,所有分离病原菌采用法国生物梅里埃公司Vitek-2或BD Phonenix 100进行细菌鉴定和药敏试验,应用WHONET5．6软件进行细菌菌谱和耐药性分析。28179例血培养标本共分离出3295株病原菌,阳性率为11．69％,其中革兰阳性球菌1649株,占50．05％;革兰阴性杆菌1331株,占40．39％;真菌112株,占3．4％。分离率最高的细菌是凝固酶阴性葡萄球菌（34．26％）,其次是大肠埃希菌（10．44％）、肺炎克雷伯菌（8．22％）、鲍氏不动杆菌（5．13％）、金黄色葡萄球菌（4．8％）、铜绿假单胞菌（3．28％）、屎肠球菌（3．28％）;葡萄球菌属对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁高度敏感,金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林菌株占46．20％,凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林菌株占85．74％;革兰阴性杆菌（除鲍氏不动杆菌）对碳青霉烯类药物敏感性较好,对头孢菌素类和喹诺酮类耐药率较高;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶株分别占57．56％、36．9％。引起菌血症的病原菌种类复杂,多种菌株耐药率较高,临床应根据病原菌变化及耐药性及时调整抗菌药物用药。     

Identification of bacteria in blood culture broths using matrix-assisted laser desorption-ionization Sepsityper™ and time of flight mass spectrometry

Matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) is a novel method for the direct identification of bacteria from blood culture broths. We evaluate for the first time, the performance of the MALDI Sepsityper? Kit and MS for the identification of bacteria compared to standard phenotypic methods using the manufacturer's specified bacterial identification criteria (spectral scores ≥1.700-1.999 and ≥2.000 indicated identification to genus and species level, respectively). Five hundred and seven positive blood culture broths were prospectively examined, of which 379 (74.8%; 358 monomicrobial, 21 polymicrobial) were identified by MALDI-TOF MS; 195 (100%) and 132 (67.7%) of 195 gram-positive; and 163 (100%) and 149 (91.4%) of 163 gram-negative organisms from monomicrobial blood cultures were correctly identified to genus and species level, respectively. Spectral scores <1.700 (no identification) were obtained in 128/507 (25.2%) positive blood culture broths, including 31.6% and 32.3% of gram-positive and polymicrobial blood cultures, respectively. Significantly more gram-negative organisms were identified compared to gram-positive organisms at species level (p<0.0001). Five blood cultures were misidentified, but at species level only; including four monomicrobial blood cultures with Streptococcus oralis/mitis that were misidentified as Streptococcus pneumoniae. Positive predictive values for the direct identification of both gram-positive and gram-negative bacteria from monomicrobial blood culture broths to genus level were 100%. A diagnostic algorithm for positive blood culture broths that incorporates gram staining and MALDI-TOF MS should identify the majority of pathogens, particularly to genus level.