柞蚕蛹血淋巴中凝集素的分离鉴定

在柞蚕蛹血淋巴中可以测得血凝活力,但在大肠杆菌诱导后血淋巴中血凝滴度有很大的升高.本文报道了分离正常柞蚕蛹血淋巴中凝集素的提取步骤.所得的凝集素在SDS垂直板电泳中表现单一条带,免疫扩散呈现单一的沉淀带,分子量为40,000道尔顿.制剂能凝集兔、鸭、豚鼠、羊、马及人的A、B、O和AB型的红细胞.其凝集活力可被半乳糖,乳糖,及N-乙酰半乳糖胺所抑制. 诱导后的柞蚕蛹血淋巴的凝集素成分比较复杂,经亲和层析后的制剂在免疫琼脂双扩散盘中呈现二条沉淀带,在垂直电泳中至少有二条带.     

滞育和非滞育棉铃虫血淋巴中蛋白质含量及图谱的比较

昆虫在滞育期间和非滞育期间,由于某些器官的生理功能产生差异,致使血淋巴中的化学成份发生了量或质的变化,特别是蛋白质的变化,如在浦育的马铃薯叶甲Leptinotarsadecemlineata[1,2]及西南玉米杆草螟Diatraeagrandiosella[3,4]的血淋巴中,均发现了特殊蛋白质,即滞育蛋白。为了弄清滞育棉铃虫Helicoverpaarmigera的血淋巴中是否也出现滞育蛋白或与滞有相关联的蛋白,及注定滞育和非滞育棉铃虫在不同发育阶段中蛋白质含量的变化和谱带特征,以进一步探索棉铃虫滞育的生理生化机制,我们通过电泳等手段对不同时期的滞育和非滞育棉铃虫…     

柞蚕蛹解除滞育过程中海藻糖合成酶基因的表达变化

【目的】克隆柞蚕Antheraea pernyi海藻糖合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)基因,并对其进行组织表达分析,探讨该基因在柞蚕滞育蛹解除滞育过程中的表达规律,为阐明柞蚕滞育期间碳水化合物代谢规律与蛹滞育解除的关系提供数据支持。【方法】利用PCR及3'RACE技术从柞蚕幼虫脂肪体组织中克隆得到TPS基因,并进行生物信息学分析;RT-PCR检测该基因在柞蚕幼虫各组织中的表达分布,进一步采用Real-time PCR分析柞蚕滞育蛹解除滞育过程中该基因在脂肪体组织和血淋巴中的表达量变化。【结果】克隆获得柞蚕海藻糖合成酶基因并命名为ApTPS。其开放阅读框长2 487 bp,编码828个氨基酸,蛋白预测分子量为93.19 k D,等电点(p I)4.61;无信号肽,无跨膜区。蛋白质亚细胞定位预测该蛋白定位于细胞质中;蛋白质结构域分析表明,ApTPS有两个保守功能区:TPS(第22-497位氨基酸)和TPP(第532-772位氨基酸)。组织特异性分析表明,ApTPS基因在柞蚕幼虫脂肪体中表达量最高;柞蚕解除滞育过程中,ApTPS在脂肪体和血淋巴中的表达量均有所升高,且显著高于对照组(P0.05),但血淋巴中表达量的升高滞后于脂肪体。【结论】结果提示ApTPS参与了柞蚕蛹滞育中碳水化合物代谢调控并在其中发挥重要作用,与柞蚕蛹滞育解除关系密切。     

东方粘虫飞行初期糖类的动用和消耗

本文研究了静态和飞翔开始阶段东方粘虫Mythimna separta(Walker)飞翔肌、脂肪体及肠道内糖元和海藻糖以及血淋巴内海藻糖含量的动态变化。飞行1h后脂肪体内消耗糖元最多,约占总消耗糖类的80%-90%;其次是肠道组织的糖元消耗,飞翔肌内糖类含量是有限的,仅够飞翔最初时期(3min)使用。在此时期,飞翔肌海藻糖含量上升然后下降,脂肪体和肠道海藻糖经历下降和继而上升的变化。然而,血淋巴内海藻糖含量一直下降到流入和流出量持平。雄蛾飞翔肌糖类代谢水平高于雌娥飞翔肌。     

贡嘎蝠蛾幼虫血淋巴中游离氨基酸,海藻糖的初步研究

本文报道了冬虫夏草寄主——贡嘎蝠蛾幼虫血淋巴中游离氨基酸种类、含量及海藻糖含量,并与感虫草菌和人工饲养的贡嘎蝠蛾幼虫进行了比较。     

家蝇滞育幼虫血淋巴中抗病毒肽甲醇萃取方法的优化

为了优化甲醇萃取滞育家蝇Musca domestica幼虫血淋巴中抗病毒肽的方法, 本实验分别比较甲醇及乙腈萃取血淋巴中抗病毒组分效果及最佳使用梯度、上样蛋白浓度、洗脱次数、洗脱流速及操作环境温度, 用Tricine-SDS-PAGE分析甲醇及乙腈的洗脱组分的构成。结果表明：甲醇萃取的活性组分多于乙腈萃取的; 用连续梯度（10％～100％）甲醇萃取的抗病毒活性组分, 比分别用10％, 30％, 50％, 70％, 90％和20％, 40％, 60％, 80％, 100％间断梯度洗脱的回收率高, 同时获得活性组分的重现性好。在0～4℃冰浴的环境下, 于250 mg/6 mL C18萃取柱内加入1.5±0.4 mg/mL蛋白浓度的血淋巴粗提液, 用1 mL/min流速4次洗脱, 抗病毒活性组分可以得到较好的分离效果。     

感染布氏白僵菌后油松毛虫血淋巴中海藻糖酶活性、海藻糖和葡萄糖含量的变化

为了揭示病原真菌白僵菌Beauveria侵染昆虫过程中如何利用虫体内糖类物质作为自身营养, 本研究测定了布氏白僵菌Beauveria brongniartii (Sacc.) Petch （2382菌株）感染油松毛虫Dendrolimus tabulaeformis Tsai et Liu幼虫后, 虫体血淋巴中酸性海藻糖降解酶活性及海藻糖和葡萄糖含量的变化。油松毛虫4龄幼虫感染菌株孢子悬浮液后, 血淋巴中酸性海藻糖降解酶的活性明显高于对照组, 感染后第3天酶活性达到最大值（0.2786 U/mg）, 此后第4-6 天酶活性逐渐降低; 染菌后的6 d中, 血淋巴中海藻糖含量显著低于对照组, 同样在感染后第4天其含量逐渐降低, 第6天时降到最低值。相比之下, 处理组血淋巴中的葡萄糖含量显著高于对照组; 处理组其含量在第1-3天内呈现快速升高趋势, 在第3天达到最大值（7.7615 mmol/L）, 然后逐渐降低。结果说明, 白僵菌侵入昆虫血淋巴后, 菌株代谢产生酸性海藻糖降解酶, 将血淋巴中的海藻糖水解成为葡萄糖, 然后为真菌利用, 破坏了虫体内的血糖平衡, 这是一个相互连接的生理代谢和生化反应过程。     

亚洲玉米螟血淋巴中酚氧化酶的研究

酚氧化酶(Phenoloxidase,简称PO)大量存在于亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)幼虫的血浆中,血细胞中甚少.该酶的活力与幼虫的发育期相关,在蜕皮和化蛹前后活力达高峰.PO可以粘附在酵母菌细胞表面,但未发现具有调理作用.以Sephadex G-200层析,对PO进行了部分纯化,比活力可提高56倍.试虫感染酵母菌后,活体内血浆PO活力即刻下降;体外证明,感染血浆可抑制正常血浆PO活力,以胰蛋白酶和昆布多糖测试以及行耐温实验,表明该抑制物为蛋白质性质.对PO的防卫作用进行了简要的讨论.     

大斑芫菁滞育幼虫在滞育不同阶段体内糖类和醇类含量的变化

在以卵滞育的昆虫中昆虫滞育时的生理代谢特点已经得到了大量研究。本文对以末龄幼虫（5龄）滞育的大斑芫菁Mylabris phalerate（Pallas）在不同滞育阶段体内糖类和醇类代谢的特征进行了研究。结果表明： 滞育个体血淋巴中的海藻糖含量高于非滞育个体,且随滞育时间的加大逐渐升高,滞育5个月时达到最大值,为5.61 μmol/mL。糖原的含量随滞育的进程逐渐减少,滞育初期（0.5个月）为0.72 mg/mL,到滞育末期（5个月）时仅为0.1 mg/mL。滞育个体脂肪体中的海藻糖含量都高于非滞育个体,滞育1个月时为非滞育个体的3倍,至滞育末期时达非滞育个体的5倍,为2.5 μmol/g脂肪体。糖原含量总体变化趋势是随滞育时间的加大逐渐减少,滞育早期和中期都高于非滞育个体。在滞育过程中血淋巴积累的小分子多元醇主要为甘油,其次是山梨醇;而在脂肪体中主要为甘油,其次是甘露醇,少量积累山梨醇：表明大斑芫菁滞育幼虫主要积累的是海藻糖和一些小分子多元醇。滞育幼虫在准备滞育时储备了大量糖原,这些糖原可能为滞育期间海藻糖、山梨醇和甘油的代谢提供了原料。     

棉铃虫被中华卵索线虫感染后血淋巴中还原糖、海藻糖和游离脂肪酸的变化

用3, 5 -二硝基水杨酸法和气相色谱法, 分别对棉铃虫(Helicoverpa armigera) 感染中华卵索线虫(Ovomermis sinensis) 后不同时期血淋巴中还原糖、海藻糖和游离脂肪酸含量变化进行了分析。感染的1-3 d,棉铃虫血淋巴还原糖含量(mg/ ml) (分别为0. 551 ±0 .035、0 .505 ±0. 025、0. 852 ±0. 051) 显著低于对照组(分别为0. 655 ±0 .041、0 .878 ±0. 032、0 .964 ±0 .034); 4-5 d还原糖含量(分别为1. 016 ±0. 051、1. 016 ±0 .042) 显著高于对照组(分别为0. 767 ±0 .041、0. 853±0 .038), 第6 d 还原糖含量(0 .608 ±0. 031) 显著低于对照组(0. 698 ±0 .024)。感染组棉铃虫血淋巴中海藻糖的含量情况与还原糖的不同, 在感染的1-3 d, 棉铃虫血淋巴海藻糖的含量(分别为0 .349 ±0. 029、0.374 ±0. 027、0 .479 ±0. 046) 与对照组(分别为0. 383 ±0 .026、0 .374 ±0 .023、0 .483 ±0. 034) 的基本相同, 没有明显的变化; 4-6 d海藻糖含量(分别为0 .529 ±0. 045、0. 584 ±0 .041、0. 428 ±0. 041) 低于对照组(分别为0. 698 ±0 .042、0. 652 ±0 .032、0 .469 ±0 .038)。无论是感染组还是对照组, 棉铃虫血淋巴中软脂酸(16∶0)、棕榈油酸(16∶1)、硬脂酸(18∶0)、油酸(18∶1)、亚油酸(18∶2     

柞蚕卵巢中核酸和蛋白质的分布与含量的变化

本文报道柞蚕卵巢亚细胞组分中核酸和蛋白质的分布与含量变化。首先以差速离心盼方法从卵巢匀浆中分离出细胞核、重线粒体、轻线粒体、重微粒体、轻微粒体和105,000g上清六个组分,然后分别测定了各种组分中的DNA、RNA和蛋白质的含量。 结果表明,卵巢DNA主要分布在细胞核组分中(约占75%以上);RNA在佩粒体中含量较离(约占20—51%);蛋白质则主要分布于105,000g上清组分中(约占56—83%)。卵巢中核酸和蛋白质含量(毫克/头)在滞育蛹期很低,随着卵巢的发育迅速增长。DNA在发育蛹4期最高,比滞育蛹期增长61倍;RNA在发育蛹5期最高,比滞育蛹期增长144倍;蛋自质在成虫期达到高峰,约比滞育蛹期增长490倍。并讨论了核酸和蛋白质的含量变化与卵巢细胞分裂分化之间的关系。 为了获得进一步的生化资料,对不同时期的柞蚕卵巢105,000g上清组分中的蛋白质进行了聚丙烯酰胺凝获也泳和SDS-电泳的分析。初步推测柞蚕卵巢中卵黄蛋白亚基之一的分子量大约为200,000道尔顿。     

高温对天蚕卵黄发生的影响(英文)

３２℃高温对天蚕（Ａｎｔｈｅｒａｅａ ｙａｍａｍａｉ）卵黄发生影响明显,其中影响程度与开始经受３２℃处理时天蚕发育阶段有关。结茧后第１天开始即受３２℃处理时,脂肪体和血淋巴中卵黄原蛋白（Ｖｇ）与可溶性蛋白含量均低于受２６℃处理的;化蛹后第１天开始即受３２℃处理时,脂肪体中Ｖｇ滴度与２６℃下的基本无明显差异,但血淋巴和卵巢中Ｖｇ或卵黄磷蛋白含量（Ｖｔ）均低于２６℃的;而在化蛹后第６天开始受３２℃处理时,脂肪体和血淋巴中Ｖｇ含量与２６℃的无明显差异,卵巢中Ｖｔ则明显高于２６℃的。此外,曾就化蛹后第１或６天开始受３２℃处理后脂肪体、血淋巴和卵巢中可溶性蛋白含量的变化作了检测。建议在饲育或保护制种用茧蚕时,老熟幼虫和化蛹初期的蚕蛹不宜接触３２℃高温。     

天蚕卵黄原蛋白的合成、运转与沉积

系统测定了天蚕Antheraea yamamai吐丝结茧至成虫期脂肪体、血淋巴和卵巢中卵黄蛋白和可溶性蛋白总含量的动态变化。结果表明,脂肪体是卵黄原蛋白(Vg)合成场所,Vg合成始于吐丝结茧后第4天;脂肪体、血淋巴中Vg滴度在吐丝结茧后第4天开始上升,化蛹后第6天或第8天达高峰,成虫羽化第1天则明显下降。卵巢对Vg摄取始于化蛹第1天,此后随蛹日龄逐渐上升,并渐趋平稳。同一卵巢管中卵黄蛋白(Vt)含量自顶端至基端随卵室增大而逐渐升高,不同日龄蛹中相应序号卵室的Vt含量以日龄大者为高;卵室中Vt含量与卵室体积大小呈正线性关系。电镜观察表明,Vg被卵母细胞摄入后以卵黄体形式存在,不同发育阶段卵巢中卵母细胞内卵黄体大小不同,以早期者为小;同一卵巢管中不同卵母细胞内卵黄体以顶端为小,基端明显增大,且卵黄体呈网状。     

EFFECT OF A HIGH TEMPERATURE ON VITELLOGE-NESIS IN THE JAPANESE OAK SILKWORM,ANTHERAEA YAMAMAI (LEPIDOPTERA: SATURNIIDAE)*

Abstract The effect of a high temperature, i. e. 32°C. on vitellogenesis of the Japanese oak silkworm, Antheraea yamamai (Lepidoptera: Saturniidae) was markedly significant. Its extent was dependent on the development stage of the silkworm exposed to 32°C. When exposed to 32 °C since the 1st day after cocooning, titres of both vitellogenin (Vg) and soluble proteins in the fat body and hemolymph of mature larvae were evidently lower than those at 26°C. When pupae were maintained at 32°C since the 1st day after pupation. the titres of Vg in the fat body showed no significant difference from those at 26°C, but those in the hemolymph and the titres of vitellin (Vt) in the ovary mostly were obviously lower in contrast to those at 26°C. While exposed to 32°C since the 6th day after pupation, at most instance the tires of Vg both in the fat body and hemolymph were not markedly different from those at 26°C, and those of Vt in the ovary were significantly higher than those at 26°C, In addition, the changes in the titres of soluble proteins in the fat body and hemolymph as well as the ovary were monitored when pupae were maintained at 32°C since the 1st or 6th day after pupation. It is recommended that both mature larvae and pupae at cocooning stage and earlier pupal stage should not be exposed to 32°C when the silkworm is reared for egg raising.     

两种饲料植物对天蚕饲育的效果(英文)

通过五个处理的一系列比较,白栎Quercus fabri叶片作为珍贵绢丝昆虫——天蚕Antheraea yamamai的饲料,无论幼虫存活率、化蛹率、二至四眠蚕体重、五龄幼虫体重增长曲线及理论极限体重K值、取食量、相对摄食速率、消化量、结茧率、全茧量、蛹重、茧层量等均明显高于过去普遍采用并认为理想的麻栎Q. acutissima的饲育结果,从而证实白栎是饲育天蚕的最佳饲料植物。     

柞蚕滞育蛹的体液防卫反应

本文对柞蚕Antheraea pernyi滞育蛹体液防卫的某些特性做了报道。结果表明：(1)经注射大肠杆菌诱导6h后,体液中出现了抗菌活性物质。诱导7d后,抗菌活力达到峰值,15d后活力消失。用生理盐水诱导的反应较快,4d后达到峰值,10d后活力消失。(2)经大肠杆菌诱导后的体液对苏芸金杆菌、大肠杆菌、枯草杆菌及金黄葡萄球菌均有杀菌效应。在最初5min内杀菌效率较高。注射生理盐水诱导的体液较大肠杆菌诱导的杀菌效果低。(3)用昆虫病原菌苏芸金杆菌及非病原菌大肠杆菌作不同的诱导源,诱导1d后的体液对大肠杆菌的抗菌活力差别不显著,但对柞蚕蛹的生活力及发育有明显影响;用苏芸金杆菌诱导的柞蚕滞育蛹3d后死亡,用大肠杆菌诱导的蛹能正常羽化。(4)在一定范围内用不同剂量的大肠杆菌进行诱导,其抗菌活力不受影响,但超过一定限度,既使是非病原菌也可以突破昆虫的防卫功能。     

THE EFFECT OF TWO FODDER PLANTS ON THE PERFORMANCE OF THE JAPANESE OAK SILKWORM, ANTHERAEA YAMAMAI

Abstract  The Japanese oak silkworm, Antheraea yamami , is a precious wild silkworm. Through comparing survival rate, stadium, bodyweight, nutritional indexes, coconing rate and cocoon quality of the larvae reared on Quercus fabri fresh leaves with those on Q. acutissima , it was concluded that Q . fabri is a better fodder plant for this silkworm than Q. acutissima in East China.     

大肠杆菌及聚肌胞核苷酸对柞蚕、家蚕蛹诱导产生溶菌酶、抗菌肽及凝集素的动力学

大肠杆菌D₃₁诱导柞蚕蛹产生抗菌多肽。同时,溶菌酶和凝集素活性都比诱导前有明显增高.其活力高峰、抗菌多肽在第7天左右、溶菌酶在第5天,而凝集素在第3天即达最高水平。不同品种的柞蚕蛹,经诱导产生的三种活性物质其活力差异不明显,但741、河四和小混品种中的抗菌多肽P_9A及P_9B组成比例较高。上述三种活性物质的诱导变化与性别有关,雄性高于雌性。比较了柞蚕蛹和家蚕经细菌诱导后上述三种活性物质的变化,家蚕凝集素活力很低,诱导后活力增高不明显。抗菌活力及溶菌酶活力的提高程度柞蚕也高于家蚕。聚肌胞核苷酸(Poly I:C)也能诱导两种蚕产生抗菌多肽及溶菌酶,但活力提高的显著程度都不及大肠杆菌诱导,凝集素活力变化也不显著。     

HORMONAL CONTROL OF THE VITELLOGENESIS IN THE JAPANESE OAK SILKWORM, ANTHERAEA YAMAMAZ (LEPIDOPTERA: SATURNIIDAE)

Abstract Effects of ecdysteroid and juvenile hormone (JH) on vitellogenesis of the Japanese oak silkworm, Antheraea yamami are reported in this article. After topical treatment with 20-hydroxyecdysone alone or JH analog (i.e. methoprene) alone and combined treatment with these two chemicals, vitellogenin (Vg) titers in the fat body and haemolymph at the pupal stage were mostly higher than those of the control, indicating that both ecdysteroid and JH exerted a promoting effect on the synthesis of Vg. In contrast, the Vg uptake was markedly inhibited by JH while stimulating effect of the ecdysteroid could be shown that vitellin (Vt) titer in the ovary was lower after methoprene treatments, but higher after 20-hydroxyecdyson treatments. Meanwhile, effects of these two hormones on Vg synthesis in the fat body were also tested with the incubation in vitro with Grace medium containing H-leucine and the hormones. The results demonstrated that Vg synthesis was stimulated after treating with methoprene alone or 20-hydroxyecdysone alone and combined treating with these two chemicals, and particularly ecdysteroid had more marked positive effect. To comprehensively concluded our results, it could be regarded that ecdysteroid play the main role in the regulation of vitellogenesis for the Japanese oak silkworm.