PEMF对废用性骨质疏松大鼠骨形态及骨代谢作用的观察

目的:观察脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fields,PEMF)对于废用性骨质疏松(disuse osteoporosis,DOP)大鼠骨形态学及血清学指标的影响,探讨PEMF治疗废用性骨质疏松的作用及其可能的机制。方法:选择雌性SD大鼠,体重250~280 g,随机分为4组,即正常对照组(INT组)、废用模型组(DOP组)、药物治疗组(ALN组)、脉冲电磁场组(PEMF组),每组20只,除正常对照组外,其余大鼠通过改良胫骨-尾部固定法制动建立模型废用性骨质疏松模型,ALN组大鼠灌胃予以阿仑膦酸钠(1 mg·kg-1·d-1)治疗,PEMF组大鼠予以PEMF照射40 min·d-1治疗,治疗后2、4、8、12周时检测各组大鼠的血清学指标并观察其骨组织形态学。结果:治疗2周后,与INT组比较,其余各组血清钙无明显差异,血磷明显降低(P0.05或P0.01),骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(ALT)、抗酒石酸磷酸酶(TRAP)则显著升高(P0.01)。治疗4周后,与ALN组比较,PEMF组BGP、ALT显著升高(P0.01);ALN组骨小梁排列比较DOP组紧密,整齐,骨小梁间隔较大,网状结构断裂程度较轻。治疗8周后,与DOP组比较,余组ALP、TRAP降低(P0.01),与ALN组相较,PEMF组BGP、ALT显著升高(P0.01)。治疗12周后,与DOP组比较,余组BGP、ALP、TRAP降低(P0.05或P0.01),与药物治疗组相较,PEMF组BGP、ALT、TRAP显著升高(P0.05或P0.01)。PEMF组比较ALN组,骨小梁排列整齐有序,骨小梁数目增多,网状结构完整,骨小梁体积增大,厚度增厚。结论:PEMF通过增强成骨细胞功能促进骨形成,同时降低破骨细胞抑制骨吸收,可达到治疗废用性骨质疏松疾病的作用。     

熊果酸对酒精性骨质疏松大鼠骨形成、骨矿化的影响

目的：探讨熊果酸对酒精所致骨质疏松大鼠骨形成、骨矿化的影响。方法：雄性Wistar大鼠60只,按体重随机分为空白对照 组、熊果酸对照组、模型组、熊果酸低、中、高剂量组,同时分别给予生理盐水、150 mg/kg 熊果酸、50%酒精,50 mg/kg 熊果酸,100 mg/kg 熊果酸,150 mg/kg 熊果酸灌胃。熊果酸对照组生理盐水剂量同空白组,熊果酸低、中、高剂量组酒精剂量同模型组。灌胃共 持续8 周。磷钼酸法检测血清磷(P)含量,比色法检测血清钙(Ca)含量,酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清骨钙素(BGP)、骨形成蛋 白-2(BMP-2)浓度;HE 染色法观察股骨结构的病理学变化。结果：与空白对照组相比较,模型组血清BGP、BMP-2 和Ca、P 均明显 降低,且有统计学差异(P < 0.05),但熊果酸对照与空白对照组各项指标结果相近。熊果酸中、高剂量组大鼠血清BGP、Ca 和P 水 平均较模型组有显著升高,差异具有统计学意义(P < 0.05),但仅熊果酸高剂量组血清BMP-2 显著升高(P < 0.05)。股骨组织HE 染色结果显示,空白对照组骨小梁致密、规则且较粗,粗细均匀;模型组骨小梁稀松、不规则、粗细不均匀,甚至可见骨小梁断裂; 熊果酸中、高剂量组骨小梁致密、规则、较厚、粗细均匀,未见骨小梁断裂。结论：熊果酸能够促进酒精性骨质疏松大鼠的骨形成, 抑制骨矿物质的流失,在改善酒精致骨质疏松方面有一定的保护作用。     

中等强度跑台运动预防去卵巢大鼠骨质疏松

目的观察中等强度跑台运动对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用。方法将30只3月龄未经产雌性SD大鼠随机分为假手术、去卵巢静止和去卵巢运动三个组。去卵巢运动组每周进行4次时间45min、速度18m/min、坡度5°的跑台训练。实验结束时,检测血清雌二醇（E2）、碱性磷酸酶（ALP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）和骨钙素（BGP）水平以及右侧游离股骨和胫骨的骨密度（BMD）和骨矿物含量（BMC）;同时观察左侧股骨远端和胫骨近端组织形态学变化。结果与假手术组比较,去卵巢静止组大鼠血清ALP活性和BGP含量显著升高,血清TRAP活性和E2含量显著下降,股骨近段和远端以及胫骨近端BMD和BMC显著下降,股骨远端和胫骨近端骨小梁断裂增加、数目减少;与去卵巢静止组比较,去卵巢运动组大鼠血清E2和BGP含量显著上升,股骨三个部位以及胫骨近端BMD和BMC显著增加,股骨远端和胫骨近端骨小梁断裂减少、数目增加。结论中等强度跑台运动能增加去卵巢大鼠血清E2和BGP含量,改善去卵巢大鼠骨组织学结构。     

电针不同穴位对慢性炎症痛模型大鼠心理行为改变的实验观察

目的：观察电针不同穴位对慢性炎症痛模型大鼠行为学改变的影响,进一步探讨电针对慢性痛所致心理行为改变的调节规律：方法：将40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、电针百会组、电针关元组、电针足三里组,每组各8只。除正常组外,其余各组均采用弗氏完全佐剂（CFA）制备佐剂性关节炎（AA,即慢性炎症痛）大鼠模型,于造模第2天各治疗组捆绑固定后给予电针20min,正常组及模型组捆绑束缚20min,隔日一次,共10次。于造模前、造模后、治疗5次、10次分别采用高架十字迷宫检测各组大鼠开放臂进入次数比例（OE％）及开放臂停留时间比例（OT％）的变化。结果：与造模前比较,电针百会穴组大鼠造模后0E％和0T％明显减少（P〈0．05,P〈0．05）,且治疗5次后OT％、治疗10次后0E％与0T％均降低明显（P〈0．01,P〈0．01,P〈0．05）,而电针关元组大鼠治疗10次后OE％和OT％则明显升高（P〈0．05,P〈0．05）,电针足三里组大鼠造模后0T％、治疗5次后大鼠OE％与OT％、治疗10次后OT％均明显降低（P〈O．01,P〈0．05,P〈0．01,P〈0．05）;与造模刚结束比较,电针百会组大鼠在治疗5次、10次后0E％由升高逐步降低,而OT％由低逐渐升高（P〉0．05）,电针关元组模型大鼠治疗10次后模型大鼠0E％和0T％均明显升高（P〈0．05,P〈0．05）,电针足三里组模型大鼠治疗10次后OT％升高明显（P〈0．05）;与治疗5次后比较,电针百会组大鼠在治疗10次后OE％降低、OT％升高（P〉O．05）,电针关元组与电针足三里组大鼠治疗10次后OE％和OT％均明显升高（P〈0．05,P〈0．05;P〈0．01,P〈0．01）。与电针百会组比较,电针关元组与电针足三里组大鼠在治疗10次时OE％均明显升高（P〈0．01,P〈0．01）结论：电针不同穴位具有一定抗抑郁和抗焦虑作用,可改善慢性炎症痛所致大鼠焦虑、情绪行为的变化;不同穴位效应不同,关元穴与足三里穴具有综合调节、抗焦虑效应,且具有相对特异性。     

Nrf2及其相关因子在非酒精性脂肪肝炎形成过程中的作用

目的：通过观察大鼠非酒精性脂肪肝炎（NASH）形成过程中脂质代谢、肝组织病理学改变、核因子E2相关因子2（Nrf2）及相关键因子的转录和蛋白水平的变化,探讨Nrf2及其相关因子在NASH形成过程中的作用。方法：sD大鼠分为正常组和模型组,以饲喂高脂饲料建立非酒精性脂肪肝炎模型,分别于4、12周末处死,检测血清和肝组织中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量;油红O染色法检测肝组织内脂肪沉积变化,常规HE染色观察肝组织病理学改变,计算NAFLD活动度积分（NAS）,免疫组化检测肝组织Nrf2表达;Real-time PCR和Westernblot技术检测肝组织Nrf2及其相关因子mRNA和蛋白表达水平。结果：①4周模型组大鼠血清ALT、AST、TC和肝组织TC、TG、LDL-C等指标较同期正常组均显著增高（P〈0．01,P〈0．05）,12周模型组大鼠血清、肝组织脂质含量持续增高（P〈0．01,P〈0．05）,肝组织HDL-C较正常组显著降低（P〈0．05）,比4周变化明显。②4周和12周模型组大鼠肝细胞内沉积大量脂肪滴,肝细胞脂肪变严重,伴有肝细胞气球样变;且随着高脂饮食喂养时间的延长,肝组织内脂肪沉积以及肝细胞脂肪变程度明显加重,NAFLD评分、Nrf2表达强度均显著增高（P〈0．01）。③4周、12周模型组大鼠Nrf2、H01、NQOt、rGCS、GST的mRNA和蛋白表达均有不同程度的上调或抑制,且12周比4周变化明显（P〈0．01,P〈0．05）。结论：Nrf2及相关因子可能参与了非酒精性脂肪性肝病的发生发展过程,在NASH形成过程中起着重要的作用。     

SD大鼠酒精性脂肪肝模型的监测分析

目的：通过血清生化指标和病理学的监测分析来建立标准的SD大鼠酒精性脂肪肝动物模型。方法：选取40只SD大鼠,随机分为两组,模型组采用直接饮酒法,于第8、12和20周时检测大鼠血清生化指标：丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、甘油三酯（TG）,并于第8、12周时随机采集5只大鼠肝组织,20周时采集剩余所有大鼠肝组织并进行病理学分析。结果：模型组于第8、12和20周时体重增长量均低于对照组（P〈0．01）,血清ALT、AST均高于对照组（P〈0．01）,第8周和12周时TG高于对照组（P〈0．01）。病理学结果显示肝组织从8周至20周呈现出酒精性脂肪肝、重度酒精性脂肪肝伴肝炎和酒精性肝纤维化等演变过程。结论：直接饮酒法可成功地复制出酒精性脂肪肝动物模型,通过监测分析可了解酒精性脂肪肝病变的整个过程,为今后建立酒精性脂肪肝和肝纤维化动物模型提供了理论参考。     

滋肾骨康丸治疗骨质疏松症的临床研究

目的：观察滋肾骨康丸治疗骨质疏松症的临床疗效,并对该药的作用机理进行探讨。方法：将60例病人随机分为治疗组（滋肾骨康丸组）及对照组（西药组）,根据2组骨密度、骨痛、中医证候结果及临床总体疗效为指标进行比较。结果：治疗组治疗后总有效率为95．8％,对照组治疗后总有效率为75．3％,差异有统计学意义（P〈0．01）;2组治疗前后骨密度无显著性差异（P〉0．05）;治疗组治疗后骨痛有效率为92．5％。优于对照组的7313％（P〈0．05）;治疗后治疗组中医证候有效率为100％,明显优于对照组的53.3％（P〈0．01）。结论：滋肾骨康丸能显著改善骨痛、肾虚证候,总体改善临床症状,具有较好的治疗作用,值得进一步推广。     

肝郁脾虚证模型大鼠下丘脑- 垂体- 肾上腺皮质的变化

目的：探讨复合造模法复制肝郁脾虚证大鼠模型的HPA轴变化及特点。方法：大鼠采用慢性束缚＋过度疲劳＋饮食失节法,连续三周,自然恢复一周。观察造模期间各不同时间点大鼠肾上腺重量及指数、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）及皮质酮（CORT）的变化。结果：与正常组比较,模型大鼠肾上腺重量第一周显著增加（P〈0．001）,第三、四周显著减低（P〈0．001和P〈0．01）,其肾上腺指数在实验各周均显著高于正常组（P〈0．05和P〈0．01）;下丘脑CRH第三周显著低于正常组（P〈0．05）,第四周回升并显著高于正常组（P〈0．05）;血浆ACTH在第一、三、四周均显著降低（P〈0．05）;血浆CORT第一周显著降低（P〈0．05）,第二周有所回复,第三、四周仍显著降低（P〈0．05和P〈0．001）。结论：该肝郁脾虚证大鼠模型存在HPA轴的功能减低,垂体对上位激素调节的反应能力减低可能是该模型的一个重要的生物学特征。     

茶多酚对酒精性肝病大鼠核因子κB及环氧合酶2表达的影响

目的观察茶多酚对大鼠酒精性肝病的干预作用及其对核因子kB（NF-kB）和环氧合酶2（COX-2）表达的影响。方法32只Wistar大鼠,随机分为3组,对照组（6只）用玉米油;模型组（13只）用白酒＋玉米油;茶多酚组（13只）在模型组基础上给予茶多酚。7周后处死大鼠,检测血清中天门冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）和丙二醛（MDA）含量。光镜和电镜观察肝组织细胞及亚细胞结构的改变;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测肝组织中NF-kB及COX-2的mRNA表达;免疫组织化学法检测肝组织中NF-kB和COX-2蛋白的表达。结果模型组肝细胞损伤明显,茶多酚组较轻。模型组大鼠血清ALT较对照组明显升高（P〈0．01）;与模型组相比,茶多酚组大鼠血清ALT、AST、MDA明显降低（P〈0．01）。RT-PCR及免疫组化均显示,肝组织中NF-kB及COX-2表达模型组较对照组明显升高（P〈0．01）,茶多酚组较模型组明显降低（P〈0．01）。结论茶多酚对大鼠酒精性肝损伤有保护作用,可能是通过抑制NF-kB的活化和COX-2的表达来实现的。     

恩替卡韦治疗HBeAg阳性乙型肝炎临床观察

目的：探讨恩替卡韦治疗HBeAg阳性乙型肝炎的疗效与安全性。方法：140例慢性乙肝患者随机分为2组：观察组予恩替卡韦0．5mg／d,对照组予拉米夫定100mg／d,疗程均为48周。观察两组HBVDNA阴转率、ALT复常率、HbeAg血清转换率以及不良反应发生情况。结果：在治疗12周后,观察组与对照组HBVDNA阴转率分别为47．1％、22．9％（P〈0．01）,ALT复常率分别为51．4％、31．4％（P〈0．05）,在治疗48周后,观察组与对照组HBVDNA阴转率分别为88．6％、48．6％（P〈0．01）,ALT复常率分别为90．0％、72．9％（P〈0．01）。HbeAg血清转换率无统计学差异,两组患者未见严重不良反应。结论：恩替卡韦治疗HBeAg阳性乙肝患者,较拉米夫定起效快、作用强,且安全性好。     

Pulsed electromagnetic fields stimulation affects BMD and local factor production of rats with disuse osteoporosis

Pulsed electromagnetic fields (PEMF) have been used widely to treat nonunion fractures and related problems in bone healing, as a biological and physical method. With the use of Helmholtz coils and PEMF stimulators to generate uniform time‐varying electromagnetic fields, the effects of extremely low frequency electromagnetic fields on bone mineral density (BMD) and local factor production in disuse osteoporosis (DOP) rats were investigated. Eighty 4‐month‐old female Sprague Dawley (SD) rats were randomly divided into intact (INT) group, DOP group, calcitonin‐treated (CT) group, and PEMF stimulation group. The right hindlimbs of all the rats were immobilized by tibia‐tail fixation except for those rats in the INT group. Rats in the CT group were injected with calcitonin (2 IU/kg, i.p., once a day) and rats in the PEMF group were irradiated with PEMF immediately postoperative. The BMD, serum transforming growth factor‐beta 1 (TGF‐β1), and interleukin‐6 (IL‐6) concentration of the proximal femur were measured 1, 2, 4, and 8 weeks after treatment. Compared with the CT and DOP groups, the BMD and serum TGF‐β1 concentration in the PEMF group increased significantly after 8 weeks. The IL‐6 concentration in the DOP group was elevated significantly after operation. The PEMF group showed significantly lower IL‐6 level than the DOP group. The results found demonstrate that PEMF stimulation can efficiently suppress bone mass loss. We, therefore, conclude that PEMF may affect bone remodeling process through promoting TGF‐β1 secretion and inhibiting IL‐6 expression. Bioelectromagnetics 31:113–119, 2010. © 2009 Wiley‐Liss, Inc.     

羊骨酶解发酵液钙鳌合物对骨质疏松大鼠骨密度和骨代谢生化指标的影响

目的探讨羊骨酶解发酵液钙螯合物（SBEF-Ca）对雌激素缺乏造成的骨质疏松的防治作用。方法 40只3.5月龄的Sprague-Dawley大鼠,按体重随机分为正常组（假手术＋蒸馏水）、模型对照组（去卵巢＋蒸馏水）和高、中、低3个剂量组（去卵巢＋SBEF-Ca）。术后12 d,持续灌胃11周后,测定股骨密度、长度以及血清中反映骨代谢的主要生化指标。结果模型对照组大鼠股骨密度和长度显著减小,各剂量组均可扭转这种减小趋势并使股骨密度和长度维持在正常组水平,其中高剂量组的股骨密度显著大于中、低剂量组;各剂量组的股骨长度差异不显著;所有大鼠的血Ca、血P水平差异无显著性;模型对照组的血清碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（BGP）水平明显升高,而各剂量组的ALP、BGP水平与正常组差异不显著,且高剂量组ALP水平显著低于中、低剂量组,中、高剂量组的BGP水平（P〉0.05）显著低于低剂量组。结论低、中、高剂量的SBEF-Ca对绝经后骨质疏松症有预防作用。     

TLR4在四氯化碳诱导的肝硬化大鼠骨髓血窦内皮细胞的表达

目的：检测Toll样受体4（TLR4）在四氯化碳诱导的肝硬化大鼠骨髓血窦内皮细胞的表达,为进一步研究肝硬化时骨髓损伤的发生机制提供实验依据。方法：选择Wistar大鼠给予腹腔注射CCl4,一周两次,建立肝硬化大鼠模型。分别于建模8周和12周检测大鼠血浆内毒素的水平,免疫组化检测大鼠骨髓血窦内皮细胞上TLR4的表达情况,RT-PCR测定骨髓组织中TLR4mRNA的表达,分析TLR4的表达与内毒素血症间的关系。结果：给予CCl4 8周和12周时,对照组大鼠血浆内毒素水平分别为（0．216±0．024）Eu／ml和（0．133±0．022）Eu／ml,模型组大鼠血浆内毒素水平分别为（0．626±0．021）Eu／ml和（0．725±0．031）Eu／ml,分别较对照组显著升高,差异均有统计学意义（P〈0．001）;骨髓血窦内皮细胞TLR4蛋白表达及骨髓组织中TLR4mRNA的表达均显著高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。大鼠骨髓TLR4蛋白和mRNA表达与血浆内毒素水平均呈显著正相关（r=0．841,0．803,P均〈0．001）。结论：CCl4诱导的肝硬化大鼠骨髓血窦内皮细胞TLR4表达升高,并伴随大鼠内毒素血症的发生,提示肝硬化时肠源性内毒素血症可能参与了骨髓的造血功能的损害和病变。     

泼尼松灌胃与肌内注射对大鼠骨密度、骨生物力学性能及骨代谢的影响

目的观察泼尼松灌胃与肌内注射两种不同给药方法对大鼠骨密度、骨生物力学及骨代谢的影响。方法将45只SPF级雄性SD大鼠随机分为3组（正常组15只、灌胃组15只、肌内注射组15只）,其中正常组大鼠作为阴性对照,予0.9%生理盐水灌胃2 m L/d;灌胃组大鼠给予泼尼松0.5 mg/（kg·d）灌胃;肌内注射组大鼠给予泼尼松0.5 mg/（kg·d）;12周后测定离体的大鼠椎体骨密度及血清β-CTX、PINP水平变化,采用三点弯曲试验测量股骨皮质骨最大载荷、弹性载荷、断裂载荷等生物力学指标。结果与正常组相比,灌胃组及肌内注射组大鼠椎骨骨密度值均显著性降低（P〈0.05）;与灌胃组相比,肌内注射组大鼠椎骨骨密度显著下降（P〈0.05）;与正常组相比,灌胃组及肌内注射组大鼠股骨的弹性载荷、最大载荷、断裂载荷均显著降低（P〈0.05）,肌内注射组与灌胃组大鼠的弹性载荷、最大载荷、断裂载荷相比差异无显著性（P〉0.05）。与正常组相比,灌胃组及肌内注射组大鼠中血清β-CTX水平均显著升高（P〈0.05）而PINP水平均显著降低（P〈0.05）,与灌胃组相比,肌内注射组大鼠血清β-CTX水平显著升高（P〈0.05）而PINP水平显著降低（P〈0.05）。骨组织切片HE染色显示：肌内注射组大鼠的骨小梁明显纤细疏松,造血组织明显减少,脂肪组织明显增多。结论泼尼松对大鼠的骨密度、骨生物力学及骨代谢指标都有影响,而肌内注射泼尼松比口服对骨密度、骨强度、骨代谢的影响更大,更易造成骨质疏松症。因此,建议临床使用泼尼松时选择口服作为给药方式更安全。     

葛根素预防雌激素缺乏性骨质疏松的机制探讨

目的观察葛根素对去卵巢大鼠股骨骨密度、颌骨骨密度和血清中肿瘤坏死因子（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）及雌二醇（E2）水平的影响。方法 3月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组（sham group）、单纯去势组（OVX group）、去势＋雌二醇治疗组（OVX-estrogen group）和去势＋葛根素治疗组（OVX-puerarin group）。给药3个月后测量各组大鼠股骨和颌骨骨密度,血清中TNF-α和CRP及雌二醇（E2）水平。结果 OVX-puerarin组较sham组体重明显增加（P〈0.01）;较OVX-estrogen组的TNF-α（P〈0.01）、CRP（P〈0.05）及E2（P〈0.01）水平显著下降;其下颌骨和股骨远端骨密度与OVX组、sham组之间无显著性差异,但其股骨近端骨密度较OVX-estrogen组明显增加（P〈0.05）。结论葛根素作为抗炎因子,能够显著降低TNF-α和CRP的水平,但并不会提高雌激素的水平;葛根素对卵巢切除所致的骨质疏松症有一定的治疗作用,但会明显提高机体体重。     

藏红花提取液对去卵巢大鼠骨密度及骨代谢生化指标的影响

目的：研究中药藏红花提取液对去卵巢大鼠股骨骨密度及血清骨代谢生化指标的影响。方法：选用48只4月龄SD雌性大鼠,随机分为6组：假手术组、模型组、戊酸雌二醇组、藏红花低、中、高剂量组。术后4周各组分别给予相应制剂灌胃,术后12周处死,分别测定股骨骨密度、子宫指数、雌二醇、血钙、血磷、碱性磷酸酶。结果：与模型组相比,藏红花各剂量组股骨骨密度明显升高（p〈0.01）,雌二醇测定值升高（p〈0.01）,碱性磷酸酶显著降低（p〈0.01）,血钙及血磷无统计学差异（p〉0.05）;与戊酸雌二醇组比较,藏红花各剂量组子宫指数显著降低（p〈0.01）。结论：藏红花提取液有助于抑制去卵巢大鼠骨量的丢失,改善骨代谢,对骨质疏松症具有防治作用。