大鼠膈肌去神经后终板形态结构及胆硷酯酶活力在体与在器官培养下的变化的比较

在体骨骼肌去神经后,终板形态结构退变, 胆硷酯酶活力迅速下降。而Miledi (1962)用器官培养法培养大鼠膈肌5、6天,在测试到肌纤维终板外乙酰胆硷敏感性增加的同时,观察到终板上仍有胆硷酯酶活力。Peterson和Crain(1972)培养啮齿类动物的成年骨骼肌肌纤维残段2、3月后,也观察到终板上有明显的胆硷酯酶活力。可是这些资料均未有意识地与在体正常终板酶活力或去神     

大鼠快、慢肌终板乙酰胆碱受体的比较及去神经后的变化

经化学方法合成的辣根过氧化酶-α-银环蛇毒复合物(HRP-α-BuTx)能专一地结合乙酰胆碱受体,从而显示肌纤维终板区,可作组织化学观察,DAB 棕色沉淀的深度反映了 ACh受体的密度。实验结果表明,大白鼠趾伸长肌的终板 ACh 受体密度无例外的比比目鱼肌的板终 ACh 受体密度高;正常终板具有很多分枝的沟糟结构,DAB 沉淀分布于沟糟内壁。切断神经后终板结构变得不甚清晰。与正常相比,去神经 SOL 的终板 ACh 受体密度显著升高,去神经 EDL 的终板 ACh 受体密度虽也有升高,但由于 EDL 的终板 ACh 受体密度本来较高,差别没有 SOL 的显著。     

秋水仙素对大鼠神经肌肉接头传递的作用

在不均匀牵拉法固定的离体大鼠膈神经膈肌标本上,用秋水仙素探讨了突触后膜的微管在神经肌肉接头乙酰胆碱受体兴奋中的作用。秋水仙素使小终板电位的幅度下降;使串刺激(10Hz,50Hz)诱发的平均终板电位幅度和平均量子含量减少;并使有神经支配的膈肌终板区乙酰胆碱电位幅度降低;但不影响膜电位、小终板电位的频率及终板电位和乙酰胆碱电位的时程。结果表明该药对神经肌肉接头乙酰胆碱受体的兴奋有抑制作用。而其同分异构体光化秋水仙素则无此作用。据此本文提出突触后膜下的微管可能参与神经肌肉接头乙酰胆碱受体的反应过程。     

蝮蛇毒的神经毒成分的研究 Ⅲ.蝮蛇毒阻遏神经肌肉传递的作用部位

据报道凡含有神经毒的蛇毒都具有与终板区乙酰胆碱受体结合,从而阻断神经肌肉传递的突触后阻遏作用,其中只有银环蛇毒和澳大利亚虎蛇毒等兼有突触前阻遏作用。本工作对蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)毒阻遏神经肌肉传递的作用点进行了分析。当小鸡颈二腹肌标本在蝮蛇毒作用下出现传递完全阻遏之后,其肌肉对乙酰胆碱还保持着约50%的敏感性,同时由离子电泳注射法测知,蝮蛇毒能降低大白鼠膈肌终板区的乙酰胆碱敏感性。蝮蛇毒对神经肌肉传递除具有突触后作用外,尚应具有突触前作用。在较低浓度(40～100微克/毫升)蝮蛇毒作用下,小终板电位频率和终板电位的量子含量都有一短暂的增加,然后逐渐下降,但在高浓度下(200微克/毫升),两者在逐渐下降之前均无暂时增加现象。增加溶液中的镁离子浓度或降低钙离子浓度均能使蝮蛇毒引起的神经肌肉完全阻遏的出现时间延长。这些又进一步证实了蝮蛇毒中除含有作用于突触后的成分外,尚含有作用于突触前的成分。从蝮蛇毒中分离神经毒成分的方法已初步建立,根据本工作的启示,再进一步分离突触前毒素的工作已初获成功,有关资料将另行发表。     

去神经后小鼠骨胳肌胞纳的增加和卫星细胞增殖

用生物化学和体外培养法研究了小鼠骨胳肌的胞纳增加和卫星细胞增殖的关系。结果表明：（１）去神经４ｄ或６ｄ的肌肉可引起胞纳的增和卫星细胞的增殖;（２）放线菌素Ｄ抑制正常肌肉的卫星细胞激活和胞纳作用;（３）在去神经的肌肉中,放线菌素Ｄ抑制了卫星细胞增殖的同时还抑制了胞纳的增加,但不能去神经肌肉的萎缩。上述结果：肌肉的卫星细胞增殖和胞纳增加可能发生于去神经后某些因素的出现,或者胞纳的增加即是卫星细胞增殖的     

保存原来神经支配的快肌和慢肌在长期刺激影响下的精细结构变化

本文以模拟慢肌神经发放模式的刺激(简称慢型刺激)连续刺激大白鼠伸趾长肌(EDL)28—30天和以模拟快肌神经发放模式的刺激(简称快型刺激)连续刺激比目鱼肌(SOL)23—26天,然后对其肌纤维的终板区进行电镜观察。发现受长期慢型刺激的 EDL 肌纤维,除 Z-带宽度接近正常 SOL 肌纤维的 Z-带宽度和线粒体(尤其是肌膜下)明显增多外,神经末梢的形态,特别是突触后褶的稀、密程度也变得和正常 SOL 肌纤维的相似,并在约40%的终板区内看到卫星细胞。就是说,肌纤维的精细结构发生了由原来的快肌型向慢肌型的根本转变。与此相反,在长期受快型刺激的 SOL 肌纤维,则看不到上述超微结构特征由原来的慢肌型向快肌型的转变。上述结果与我们在双神经支配的肌纤维上所作的观察可以互相佐证,即比目鱼肌纤维在接受外加 EDL 神经支配后组织化学和精细结构类型不变,而 EDL 纤维在接受外加的 SOL 神经支配后则组织化学和精细结构类型发生彻底的改造。     

肌肉不均匀牵张对神经肌肉接头传递电生理学影响的研究

大自鼠膈肌经不均匀牵张处理后,在牵张适度的肌纤维终板区,以细胞内微电极技术可同时记录到正常的迷质量子式自发释放产生的微终板电位(MEPP),较高幅度的递质量子式诱发释放引起的终板电位(EPP)和接近正常水平的静息膜电位(RMP)。此标本被认为是处于接近正常生理状态的神经肌肉接头标本。本研究观察不均匀牵张处理对突触前递质释放对Ca~(2 )浓度的依赖性和突触后肌纤维电生理学性质的影响。     

兼受快肌和慢肌两种神经支配的大白鼠肌纤维的精细结构类型

本文报告我们对兼受快肌和慢肌两种神经支配(简称双神经支配)的大白鼠比目鱼肌(SOL)和伸趾长肌(EDL)的肌纤维所作的电镜观察。结果表明,在双神经支配下,SOL 的慢肌纤维和 EDL 的快肌纤维表现截然不同,形成鲜明的对比:双神经支配的 SOL 肌纤维的超微结构(Z-带宽度以及线粒体密度、接头褶间隔、终板周围卫星细胞出现频率等)保持原来类型不变,而双神经支配的 EDL 肌纤维则发生向 SOL 的完全转变。但是,不论曾否发生变化,在同一根纤维上,在由 SOL 神经建立的终板附近和由 EDL 神经建立的终板附近,肌纤维的超微结构特征没有区别,表明这种特征在整根纤维上是均匀的。本文的电镜观察与前文的组织化学观察所得的结果完全一致。用这样两种完全不同的方法得出相同的结果,大大地加强了这结果的可靠性,给神经通过活动模式来决定肌纤维类型的假说以有力的支持。     

一种作用于突触前的神经肌肉接头传递阻断剂—川棟素

本文利用大鼠膈神经膈肌标本观察了川楝素对神经肌肉接头的作用,主要结果如下:1.川棟素不可逆地阻遏间接刺激引起的肌肉收缩,但不影响兴奋在神经的传导,也不降低肌肉对直接刺激的反应。2.在经川楝素作用下接近麻痹的标本,于终板区做细胞内记录可观察到肌肉动作电位的消失,终板电位下降、脱落和完全消失的过程。3.川楝素对肌细胞膜的静息电位无明显作用。用小鸡颈二腹肌标本检查,川棟素引起接头传递阻遏后,肌肉的乙酰胆碱敏感性不受影响。4.川棟素对在新斯的明存在下由单个间接刺激诱起的神经末梢的重复发放的作用是先加强然后减弱,在川楝素引起接头传递阻遏前重复发放完全消失。这些结果表明,川棟素是一个选择性地作用于突触前的神经肌肉传递阻遏剂。     

乌头碱对神经肌肉接头电活动和神经干复合电位作用的观察

利用大白鼠离体膈神经膈肌标本和猫在体腓肠神经与腓肠内侧肌神经观察了乌头碱对神经肌肉接头电活动和神经千复合电位的作用,结果如下:1.大白鼠神经肌肉标本在乌头碱(1.7×10~5)作用下,20分钟阻遏间接刺激引起的肌肉收缩,此时肌纤维静息膜电位无显著变化,在神经干上通常仍可记到复合电位。这种阻遏的可逆性很差。标本对乌头碱的最早反应是增大收缩幅度,出现自发活动,这种作用是通过接头的。2.新斯的明对乌头碱阻遏接头传递无解除作用,但高钙(8mM)却能有效地恢复标本对间接刺激的反应。用小鸡颈二腹肌测定乙酰胆碱的敏感性表明,在乌头碱阻遏神经肌肉间传递后,肌肉乙酰胆碱敏感性有所降低,但并不消失。3.乌头碱在使终板电位消失前不显著改变其时程与振幅。小终板电位在乌头碱作用下先是增加发放频率,最后完全消失。终板电位量子含量的变化是在显著下降前可以看到短时稍有上升。4.1×10~(-4)浓度乌头碱可完全取消猫在体腓肠神经与腓肠内侧肌神经复合电位各成份,冲洗以除去药物后只有少部 A 类纤维可重新传导冲动。1×10~(-5)乌头碱的作用是使复合电位各成份的振幅下降,传导时间延长。乌头碱对复合电位各成份的持续时间无影响。本文结果说明,乌头碱对神经肌肉系统的作用首先是阻遏兴奋在神经末梢的传导,高浓     

兼受快肌和慢肌神经支配的大鼠慢肌或快肌纤维的肌-腱接头都没有乙酰胆碱敏感性

在大鼠慢肌比目鱼肌(SOL)肌纤维的肌-腱接头(MTJ)上有较高的乙酰胆碱(ACh)敏感牲,而快肌伸趾长肌(EDL)的 MTJ却没有。SOL 肌纤维受 EDL神经交叉支配后,其 MTJ的 ACh敏感性消失,此点 Miledi等已有报道。本文首先验证了与此相对称的结果,即EDL 肌纤维受 SOL神经交叉支配后,其 MTJ获得与正常 SOL肌纤维 MTJ相似的 ACh敏感性,从而进一步肯定了MTJ 的ACh 敏感性的出现是由特殊神经支配决定的。本文的主要结果是:兼受 SOL神经和 EDL神经支配的EDL和SOL的纤维,其MTJ都没有AGh 敏感性。这一结果的兴趣,不但在于它显示当两种神经支配同时存在时,快肌神经的影响压倒慢肌神经,而且还在于此结果与以往用其他指标进行的双神经支配肌纤维实验的结果形成鲜明的对照:用 M-ATPase 组织化学染色和Z带宽度等变化为指标,在双神经支配肌纤维中,慢肌神经的影响总压倒快肌神经。我们也观察了长期电刺激对MTJ ACh敏感性的影响。SOL经“慢”型刺激2—3周后,其 MTJ的 ACh敏感性虽有降低,但不及“快”型刺激显著。综合各种有关的观察,本文对双神经支配肌纤维的 MTJ没有 ACh敏感性这一主要结果的解释进行了讨论。     

5种选择性去窦弓神经方法对清醒大鼠动脉压力感受反射敏感性的影响

目的：测定左、右单侧去窦弓神经、双侧去窦弓神经、双侧去主动脉神经和双侧去窦神经后清醒大鼠动脉压力感受反射敏感性改变。方法：用改良的Smyth方法测定动脉压力感受反射敏感性;急慢性实验分别在手术后1d、21d进行,以比较其代偿功能。结果：去窦弓神经后大鼠动脉压力感受反射敏感性显著下降;左右单侧间有显著性差异,并有明显的相互代偿;去主动脉神经后的动脉压力感受反射敏感性的下降比去窦神经明显,且前者无明显代偿而后者有明显代偿。结论：对动脉压力感受反射敏感性来说,右侧窦弓神经的作用比左侧重要,但代偿能力相当;且主动神经的作用比窦神经重要,其代偿能力也显著优于窦神经。     

鸡前、后背阔肌去神经后对辣根过氧化物酶(HRP)的胞纳作用

本文报道了用辣根过氧化物酶(HRP)作为大分子标记物,以组织化学和生物化学方法观察了鸡前后背阔肌在去神经后的胞纳现象。结果表明,在去神经后发生肥大的前背阔肌和去神经后发生萎缩的后背阔肌同样都出现胞纳的明显增加。组织化学所观察的结果表明,浸泡在含 HRP 的任氏液中的有完整神经支配的前、后背阔肌只有极少数的肌纤维摄取 HRP,而在去神经的前、后背阔肌中则有不少的肌纤维内部出现 HRP 染色反应。这种反应在有的纤维表现为弥散性染色,有的表现为浓的 HRP 反应颗粒。生物化学的结果显示,去神经后的前、后背阔肌中 HRP 的相对含量分别比有神经支配的对照肌肉明显地增多54%和87%,我们在鸡前背阔肌用组织化学和生物化学所得的实验结果与 Thesleff 等人提出的关于肌肉萎缩机制的假设显然不符。本工作证实了肌肉的胞纳作用的增加并不一定最终导致肌纤维的变性和萎缩。     

鸡前、后背阔肌的代谢特征及其在去神经后变化的比较研究

1.比较了鸡的前和后背阔肌(简称前肌和后肌)正常和去神经后的氧消耗率和脂肪、糖元、乳酸、磷化合物含量及其有关的酶活力的变化。2.正常前肌的氧消耗率和细胞色素氧化酶活力及脂肪含量和脂肪酶活力都比正常后肌高,特别是脂肪含量和脂肪酶活力在前肌比在后肌高3—4倍。正常后肌的乳酸、糖 元、无机磷、CP、ATP 含量皆高于前肌,后肌的 CP 和 ATP 含量比前肌的约高一倍,特别是糖元在后肌比在前肌高6—7倍。正常前肌和后肌的磷脂含量和腺三磷酶活力相近。这些特点指出前肌与一般红肌纤维相似,后肌与一般白肌纤维相似。3.去神经后前肌和后肌的氧消耗率、细胞色素氧化酶活力及糖元含量的变化方向相反,氧消耗率和细胞色素氧化酶在前肌降低(20—30%),在后肌升高(40—50%),而糖元在前肌升高(20—90%),在后肌降低(30—40%)。脂肪含量在前肌去神经后四星期时稍降低(17%),在后肌去神经四、八星期时则显著升高(40—90%);去神经后前肌的脂肪酶活力基本不变,而后肌在去神经一星期肌肉还没萎缩时脂肪酶活力即已显著升高,达至正常值的5倍,并维持此高水平至去神经后八星期。前肌在去神经后一、四星期时 CP 含量降低(20—30%),ATP 不变化;后肌在去神经后一星期肌肉尚未萎缩时CP 和 ATP 含量即显著降低(40—50%),至四、八星     

鸡慢肌纤维的去神经后肥大为特殊的去神经效应的进一步证明

关于鸡的慢肌纤维在去神经后的异乎寻常的营养性变化,即去神经后不但不萎缩,而且发生显著的持久的肥大,冯等在其首次报告中已注意了这个肥大现象与去神经的关系的特殊性问题。他们所做的各种对照实验集中于排除外来的拉长因素的影响。这个特殊性问题需要做进一步的检查。就骨胳肌来说,肌肉去神经后处于不活动状态,因此就出现了把去神经的特殊效应与不活动的一般效应区别开来的问题。一种使肌肉不活动     

因交叉神经支配或长期刺激而处于改造中的肌纤维的组织化学观察

本文报告以碱(pH10.4)和酸(pH4.1)预处理的 M-ATP_(ase)组织化学方法,观察大白鼠伸趾长肌(EDL)神经交叉支配的比目鱼肌(SOL)纤维和长期低频(10Hz)间接刺激的 EDL 肌纤维的改造过程。结果表明,纤维从典型慢型至典型快型或相反的改造过程中,按组织化学染色深度至少能分辨出三个过渡等级,在处于过渡之中的同一肌纤维内同时具有耐酸性和耐碱性 M-ATP_(ase)活性。此外,在受交叉神经支配不同阶段的 SOL 平切片上,整根肌纤维的组织化学染色都是均一的,不存在终板区和终板外区域有什么差异。     

睫状神经营养因子对大鼠去神经骨骼肌的营养作用

目的：了解睫状神经营养因子（CNTF）对去神经引起的肌肉萎缩的治疗作用。方法：离断SD大鼠一侧坐骨神经,连续给予CNTF20d,观察肌肉湿重、蛋白含量、肌纤维横截面积、收缩性能和残肢程度。结果：①给予0.2mg/kg的CNTF,可使损务侧肌纤维横截面积增加35％,肌肉湿重增加38％,胫前肌总蛋白含量增加24％,腓长肌强直收缩强度提高40％,显著改善肢残程度;②0.2mg/kg的CNTF作用明显强于0.05mg/kg的CNTF;③此目鱼肌（慢肌）比伸趾长肌（快肌）对CNTF更敏感。结论：CNTF能显著改善成年大鼠坐骨神经离断后骨骼肌的萎缩和功能丧失,该效应的强弱与用药剂量和肌肉类型有关。     

新鲜冰冻肌肉的纵切方法与同时显示肌原纤维三磷酸腺苷酶-乙酰胆碱酯酶的细胞化学技术

我们介绍一种用冷刀纵切新鲜冰冻肌肉的方法。此种冷刀由半导体致冷器致冷,并附有冷却的防卷板。为了得到满意的切片,必须在冷刀面上立即再次冻结由载玻片或盖玻片粘贴的切片,并且在作组织化学处理以前经冰冻干燥。然后,我们又介绍了在上述的纵切片上同时显示肌原纤维三磷酸腺甙酶和乙酰胆碱酯酶的细胞化学技术。在经过肌原纤维三磷酸腺甙酶-乙酰胆碱酯酶反应的切片上,所见运动终板的数目和形态,与仅有乙酰胆碱酯酶反应的连续切片相比较似乎没有明显差异。这一技术将使某一特定肌纤维有可能同时显示出其组织化学类型和运动终板。     

在梭曼处理的神经肌接头上微电泳乙酰胆碱诱发的终板区再生性去极化

我们曾发现在中毒剂量梭曼处理的神经肌接头上,间接强直刺激诱发出以终板电位(EPP)消失为特征的终板区再生性去极化(RD),产生RD的机理尚未阐明,本文报道在同样条件下,微电泳外源性乙酰胆碱(ACh)诱发出类似RD的终板区再生性去极化。 结果表明,在正常条件下,于终板区微电泳外源性ACh(10ms×180nA,滞留电流为20nA),可记录到乙酰胆碱电位(AChP),0.5～2Hz串微电泳,相对应每次微电泳有一个AChP,高于5～10Hz(持续1～5s)的串     

兔孤束核腹外侧区微量注射谷氨酸钠及甘氨酸对膈神经放电的影响

实验在４０只麻醉、制动、断双侧颈迷走神经和人工通气的家兔上进行。在孤束核腹外侧区微量注射神经元胞体兴奋剂谷氨酸钠和抑制剂甘氨酸,探讨膈神经放电的变化。结果：微量注射谷氨酸钠,可使膈神经放电脉冲数明显增加,吸气时程延长,呼气时程缩短,呼吸频率变化不明显;微量注射甘氨酸,则膈神经放电脉冲数显著减少,甚至停止,吸气时程缩短,呼气时程不规则延长,呼吸频率降低。上述结果提示：孤束核腹外侧区对呼吸节律的形成具